雙(shuang)歧桿(gan)菌屬通用PCR檢測試(shi)劑(ji)盒說明書

雙(shuang)歧桿(gan)菌屬通用PCR檢測試(shi)劑(ji)盒說明書組(zu)成(cheng)及試(shi)劑(ji)配(pei)制(zhi):
1、 酶(mei)標(biao)板(ban)：壹(yi)塊(kuai)（96孔(kong)）
2、 標(biao)準(zhun)品（凍(dong)幹品）： 2瓶(ping)，請(qing)臨(lin)用前15分(fen)鐘(zhong)內(nei)配(pei)制(zhi)。每瓶以(yi)樣品稀(xi)釋(shi)液稀(xi)釋(shi)至(zhi)0.5ml，蓋(gai)好後(hou)室(shi)溫靜置大(da)約(yue)10分鐘，同時(shi)反(fan)復(fu)顛倒/搓(cuo)動以(yi)助溶(rong)解(jie)，其(qi)濃度為200 U/L，然(ran)後(hou)做(zuo)系列倍比(bi)稀(xi)釋(shi)（註：不要直(zhi)接在板(ban)中(zhong)進行倍比(bi)稀(xi)釋(shi)），分別配(pei)制(zhi)成(cheng)200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀(xi)釋(shi)液直(zhi)接作為空白(bai)孔 0 U/L。如配(pei)制(zhi)100 U/L標(biao)準(zhun)品：取(qu)0.3ml （不要少(shao)於0.3ml ）200 U/L的(de)上述(shu)標(biao)準(zhun)品加(jia)入含(han)有0.3ml樣品稀(xi)釋(shi)液的Eppendorf管(guan)中(zhong)，混(hun)勻(yun)即可(ke)，其(qi)余濃度以(yi)此類推(tui)。
雙(shuang)歧桿(gan)菌屬通用PCR檢測試(shi)劑(ji)盒說明書3、 樣品稀(xi)釋(shi)液：1×20ml。
4、 檢測稀(xi)釋(shi)液A：1×10ml。
5、 檢測稀(xi)釋(shi)液B：1×10ml。

樣本采(cai)集(ji)、存放及運(yun)輸：
1、雙(shuang)歧桿(gan)菌屬通用PCR檢測試(shi)劑(ji)盒說明書樣本采(cai)集(ji)：各(ge)類(lei)型(xing)樣本按(an)照(zhao)常(chang)規(gui)方(fang)法采(cai)集(ji)；
2、存放：樣本在(zai)2~8℃條件(jian)下保(bao)存應不超過(guo)72h，-70℃以(yi)下可(ke)保(bao)存，但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)（zui多(duo)凍融(rong)3次(ci)）；
3、運輸：采(cai)用泡沫(mo)箱(xiang)加(jia)冰密(mi)封(feng)進行運輸。

特(te)點(dian)優勢(shi)：
    1.特(te)異(yi)性：所(suo)有產(chan)品使用的引物均經(jing)過(guo)詳(xiang)盡(jin)的(de)生物信息(xi)學分(fen)析(xi)，經過GenBank及自(zi)建(jian)龐(pang)大(da)數(shu)據(ju)庫(ku)的(de)比(bi)對(dui)，確(que)保所(suo)用的每壹(yi)條引物均為種(zhong)屬(shu)或(huo)血(xue)清型特(te)異(yi)的基(ji)因序列區段(duan)，可(ke)實現(xian)對(dui)細(xi)菌種屬(shu)及血(xue)清型的(de)特(te)異(yi)檢測，特(te)異(yi)性均達(da)到100%。
    2.   重現(xian)性：該系列所(suo)有產(chan)品均經(jing)過(guo)大(da)量實驗菌株的(de)驗證，重現(xian)性為100%。
    3.   靈(ling)敏性：該系列產(chan)品可(ke)實現(xian)對(dui)檢(jian)測菌的高(gao)靈敏檢測，當(dang)樣品中(zhong)細(xi)菌的濃度達(da)到103cfu/ml時，可實現(xian)對(dui)其(qi)的直(zhi)接檢測，無需繁(fan)瑣(suo)的(de)增菌過程(cheng)。
    4.   實用性：檢測範(fan)圍(wei)廣，涵蓋(gai)了(le)對(dui)人體(ti)危(wei)害(hai)較為嚴(yan)重的(de)17種(zhong)呼吸道及腸(chang)道(dao)致病(bing)菌，可實現(xian)對(dui)臨(lin)床樣品及其(qi)他(ta)環(huan)境(jing)取(qu)樣的快(kuai)速(su)檢測，整個(ge)檢測過(guo)程(cheng)為3-4個(ge)小時(shi)。
    5.   優勢(shi)1：序列資源豐(feng)富，除(chu)GenBank公布(bu)的(de)序列外(wai)，公(gong)司還(hai)進行了(le)大(da)量菌株的(de)序列破譯(yi)，從理論上(shang)保(bao)證所(suo)選(xuan)引物具(ju)有良(liang)好的保(bao)守性和特(te)異(yi)性。

    6.   優勢(shi)2：該系列試劑(ji)盒(he)均經(jing)過(guo)大(da)量的保守性及特(te)異(yi)性實驗驗證，憑(ping)借(jie)公(gong)司擁有的(de)豐(feng)富的(de)菌種資源，每壹(yi)種檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒均經(jing)過(guo)了(le)20余種標(biao)準(zhun)菌株和(he)臨(lin)床菌株的(de)保守(shou)性驗證及40余種近緣標(biao)準(zhun)菌株和(he)臨(lin)床菌株的(de)特(te)異(yi)性驗證，確(que)保(bao)在使用過程(cheng)中(zhong)不(bu)會出現(xian)任(ren)何(he)的假(jia)陽性及假(jia)陰(yin)性報(bao)告結(jie)果(guo)。

反(fan)應(ying)五(wu)要素(su)：
參(can)加(jia)PCR反(fan)應(ying)的物質(zhi)主(zhu)要有五(wu)種(zhong)即引物、酶(mei)、dNTP、模(mo)板(ban)和Mg2+
引物：引物是(shi)PCR特(te)異(yi)性反(fan)應(ying)的關(guan)鍵(jian)，PCR 產(chan)物的(de)特(te)異(yi)性取決(jue)於引物與(yu)模(mo)板(ban)DNA互(hu)補(bu)的(de)程(cheng)度。理論上(shang)，只(zhi)要知(zhi)道(dao)任何(he)壹(yi)段(duan)模(mo)板(ban)DNA序列， 就(jiu)能按(an)其(qi)設計互(hu)補(bu)的(de)寡(gua)核(he)苷酸(suan)鏈(lian)做(zuo)引物，利(li)用PCR就(jiu)可將(jiang)模(mo)板(ban)DNA在體(ti)外(wai)大(da)量擴增。設計(ji)引物應(ying)遵(zun)循(xun)以(yi)下原(yuan)則：
①引物長(chang)度： 15-30bp，常(chang)用為20bp左(zuo)右(you)。
②引物擴(kuo)增跨(kua)度： 以(yi)200-500bp為宜(yi)，特(te)定條件(jian)下可(ke)擴(kuo)增(zeng)長(chang)至(zhi)10kb的(de)片(pian)段(duan)。
③引物堿(jian)基(ji)：G+C含(han)量以(yi)40-60%為宜(yi)，G+C太少(shao)擴(kuo)增(zeng)效(xiao)果(guo)不(bu)佳，G+C過(guo)多(duo)易出現(xian)非(fei)特(te)異(yi)條帶。ATGC隨機分布(bu)，避(bi)免(mian)5個(ge)以(yi)上(shang)的(de)嘌(piao)呤或(huo)嘧啶(ding)核(he)苷酸(suan)的(de)成(cheng)串(chuan)排(pai)列。
④避免(mian)引物內(nei)部(bu)出現(xian)二級結(jie)構(gou)，避免兩條引物間(jian)互(hu)補(bu)，特(te)別(bie)是3'端(duan)的(de)互(hu)補(bu)，否則(ze)會形(xing)成(cheng)引物二聚體(ti)，產(chan)生非特(te)異(yi)的擴增條帶。
⑤引物3'端(duan)的(de)堿基(ji)，特(te)別(bie)是末(mo)及倒(dao)數(shu)第二個(ge)堿基(ji)，應(ying)嚴格要求(qiu)配(pei)對，以(yi)避(bi)免(mian)因末(mo)端(duan)堿(jian)基(ji)不(bu)配(pei)對而(er)導致PCR失(shi)敗(bai)。
⑥引物中(zhong)有或(huo)能加(jia)上合適的(de)酶(mei)切(qie)位點(dian)， 被擴(kuo)增的(de)靶序列有適宜(yi)的酶(mei)切(qie)位點(dian)， 這對酶(mei)切(qie)分(fen)析(xi)或(huo)分子克隆(long)很有好(hao)處。
⑦引物的(de)特(te)異(yi)性：引物應(ying)與核(he)酸序(xu)列數據(ju)庫(ku)的(de)其(qi)它序列無明顯(xian)同源性。
引物量：每條引物的(de)濃度0.1～1umol或(huo)10～100pmol，以(yi)低(di)引物量產(chan)生所(suo)需要的(de)結(jie)果(guo)為好(hao)，引物濃度偏(pian)高會引起(qi)錯(cuo)配(pei)和非特(te)異(yi)性擴增，且(qie)可(ke)增(zeng)加(jia)引物之間(jian)形(xing)成(cheng)二聚體(ti)的機(ji)會。

分(fen)選(xuan)連(lian)接蛋(dan)白(bai)1抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： SNX1

GTP酶(mei)激活因子STARD8抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： STARD8

蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制(zhi)劑(ji)A11抗(kang)體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： SERPIN A11

鱗狀(zhuang)細(xi)胞癌(ai)相(xiang)關(guan)蛋(dan)白(bai)抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： SCRO

S100鈣結(jie)合蛋(dan)白(bai)A6抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： S100A6

S100鈣結(jie)合蛋(dan)白(bai)A11抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： S100A11

S100鈣結(jie)合蛋(dan)白(bai)P抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： S100P

突(tu)觸(chu)樣蛋(dan)白(bai)5亞(ya)型(xing)2抗(kang)體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： SYTL5

合並蛋(dan)白(bai)3抗體(ti)（腫(zhong)瘤差異(yi)表(biao)達蛋(dan)白(bai)） 英文(wen)縮寫(xie)： SERINC3

Smad核(he)轉錄(lu)共抑(yi)制(zhi)因子抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： SnoN

SET易位蛋(dan)白(bai)/髓系白(bai)血(xue)病(bing)相(xiang)關(guan)蛋(dan)白(bai)抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： SET

SET易位蛋(dan)白(bai)/髓系白(bai)血(xue)病(bing)相(xiang)關(guan)蛋(dan)白(bai)抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： SET

//激(ji)酶(mei)STYK1抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： Styk1

鈉(na)通道蛋(dan)白(bai)11α抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： SCN11A

鈉(na)離(li)子通道β1抗(kang)體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： SCN1B

導(dao)向蛋(dan)白(bai)3B抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： Semaphorin 3B

鈉(na)通道蛋(dan)白(bai)8α抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： SCN8A

/蛋(dan)白(bai)激酶(mei)SRPK1抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： SRPK1

蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制(zhi)劑(ji)B12抗(kang)體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： SERPINB12

蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制(zhi)劑(ji)B10抗(kang)體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： SERPINB10

5-羥(qiang)色胺受(shou)體(ti)3C抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： 5HT3C

長(chang)鏈(lian)脂肪酸轉運(yun)蛋(dan)白(bai)4抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： SLC27A4

腫(zhong)瘤壞死(si)因子α誘(you)導蛋(dan)白(bai)9/前列腺(xian)六(liu)跨(kua)膜(mo)上皮抗(kang)原(yuan)4抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： STEAP4

/蛋(dan)白(bai)激酶(mei)31抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： STK31

雙(shuang)歧桿(gan)菌屬通用PCR檢測試(shi)劑(ji)盒說明書5-羥(qiang)色胺受(shou)體(ti)3B抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： 5HT3B receptor

SCYL結(jie)合蛋(dan)白(bai)1抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： SCYL1BP1

5-羥(qiang)色胺受(shou)體(ti)2C抗體(ti) 英文(wen)縮寫(xie)： 5HTR2C