脆弱(ruo)擬桿(gan)菌(jun)PCR檢(jian)測(ce)試劑盒說(shuo)明(ming)書

脆弱(ruo)擬桿(gan)菌(jun)PCR檢(jian)測(ce)試劑盒說(shuo)明(ming)書組成及(ji)試(shi)劑配(pei)制:
1、 酶標板(ban)：壹(yi)塊(kuai)（96孔）
2、 標(biao)準(zhun)品（凍(dong)幹(gan)品）： 2瓶(ping)，請(qing)臨(lin)用(yong)前15分(fen)鐘(zhong)內(nei)配(pei)制。每瓶(ping)以樣(yang)品稀釋(shi)液(ye)稀釋(shi)至0.5ml，蓋(gai)好(hao)後室(shi)溫(wen)靜置大(da)約(yue)10分鐘(zhong)，同(tong)時反(fan)復顛(dian)倒(dao)/搓(cuo)動以助溶(rong)解，其濃度為(wei)200 U/L，然後做(zuo)系(xi)列倍(bei)比(bi)稀釋(shi)（註：不要(yao)直(zhi)接(jie)在板(ban)中(zhong)進行(xing)倍(bei)比(bi)稀釋(shi)），分(fen)別(bie)配(pei)制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣(yang)品稀釋(shi)液(ye)直(zhi)接(jie)作為空(kong)白(bai)孔 0 U/L。如配(pei)制100 U/L標準品：取(qu)0.3ml （不要(yao)少於(yu)0.3ml ）200 U/L的(de)上述(shu)標準(zhun)品加(jia)入含(han)有0.3ml樣(yang)品稀釋(shi)液(ye)的(de)Eppendorf管(guan)中(zhong)，混勻即可，其余(yu)濃度以此(ci)類(lei)推。
脆弱(ruo)擬桿(gan)菌(jun)PCR檢(jian)測(ce)試劑盒說(shuo)明(ming)書3、 樣(yang)品稀釋(shi)液(ye)：1×20ml。
4、 檢(jian)測(ce)稀釋(shi)液(ye)A：1×10ml。
5、 檢(jian)測(ce)稀釋(shi)液(ye)B：1×10ml。

樣(yang)本(ben)采集(ji)、存放(fang)及(ji)運(yun)輸：
1、脆弱(ruo)擬桿(gan)菌(jun)PCR檢(jian)測(ce)試劑盒說(shuo)明(ming)書樣(yang)本(ben)采集(ji)：各(ge)類(lei)型樣(yang)本(ben)按照常(chang)規(gui)方法采(cai)集(ji)；
2、存放(fang)：樣(yang)本(ben)在2~8℃條件(jian)下保(bao)存(cun)應(ying)不超(chao)過72h，-70℃以下可保(bao)存(cun)，但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復凍(dong)融(rong)（zui多(duo)凍(dong)融(rong)3次(ci)）；
3、運(yun)輸：采(cai)用(yong)泡沫箱加(jia)冰密(mi)封(feng)進(jin)行(xing)運(yun)輸。

特點(dian)優(you)勢：
    1.特異性：所(suo)有產(chan)品使(shi)用(yong)的(de)引物均經(jing)過詳(xiang)盡(jin)的(de)生物信(xin)息(xi)學(xue)分(fen)析(xi)，經過GenBank及(ji)自(zi)建(jian)龐大(da)數(shu)據(ju)庫(ku)的(de)比對(dui)，確保(bao)所(suo)用(yong)的(de)每壹條引物均為(wei)種屬或(huo)血清(qing)型特異的(de)基(ji)因(yin)序(xu)列區段(duan)，可實現對(dui)細菌(jun)種屬及(ji)血(xue)清(qing)型的(de)特異檢(jian)測(ce)，特異性均達到100%。
    2.   重(zhong)現性：該(gai)系(xi)列所(suo)有產(chan)品均經(jing)過大(da)量(liang)實驗(yan)菌(jun)株(zhu)的(de)驗(yan)證，重(zhong)現性為(wei)100%。
    3.   靈(ling)敏(min)性(xing)：該(gai)系(xi)列產(chan)品可實現對(dui)檢(jian)測(ce)菌(jun)的(de)高靈(ling)敏(min)檢(jian)測(ce)，當樣(yang)品中(zhong)細(xi)菌(jun)的(de)濃度達到103cfu/ml時(shi)，可實現對(dui)其的(de)直(zhi)接(jie)檢(jian)測(ce)，無(wu)需(xu)繁(fan)瑣的(de)增菌(jun)過程(cheng)。
    4.   實(shi)用(yong)性：檢(jian)測(ce)範(fan)圍(wei)廣，涵蓋(gai)了(le)對(dui)人體危(wei)害(hai)較為嚴(yan)重的(de)17種呼吸道(dao)及(ji)腸道(dao)致病菌(jun)，可實現對(dui)臨(lin)床樣(yang)品及(ji)其(qi)他(ta)環(huan)境取(qu)樣(yang)的(de)快(kuai)速(su)檢(jian)測(ce)，整個檢(jian)測(ce)過程(cheng)為(wei)3-4個(ge)小時(shi)。
    5.   優(you)勢1：序(xu)列資源豐富(fu)，除GenBank公布的(de)序(xu)列外(wai)，公司還(hai)進(jin)行(xing)了(le)大(da)量(liang)菌(jun)株(zhu)的(de)序(xu)列破(po)譯，從理論(lun)上保(bao)證(zheng)所(suo)選引物具(ju)有(you)良(liang)好的(de)保(bao)守(shou)性和特異性。

    6.   優(you)勢2：該(gai)系(xi)列試劑盒均經(jing)過大(da)量(liang)的(de)保(bao)守(shou)性及(ji)特異性實(shi)驗(yan)驗(yan)證，憑(ping)借公司擁有的(de)豐富(fu)的(de)菌(jun)種資源，每壹種檢(jian)測(ce)試劑盒均經(jing)過了(le)20余(yu)種標準菌(jun)株(zhu)和臨(lin)床菌(jun)株(zhu)的(de)保(bao)守(shou)性驗(yan)證及(ji)40余(yu)種近緣標(biao)準(zhun)菌(jun)株(zhu)和臨(lin)床菌(jun)株(zhu)的(de)特異性驗(yan)證，確保(bao)在(zai)使(shi)用(yong)過程(cheng)中(zhong)不會(hui)出(chu)現任何(he)的(de)假陽(yang)性及(ji)假(jia)陰性(xing)報(bao)告(gao)結(jie)果。

反(fan)應(ying)五要(yao)素：
參(can)加PCR反(fan)應(ying)的(de)物質(zhi)主要(yao)有五(wu)種即引物、酶、dNTP、模(mo)板(ban)和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反(fan)應(ying)的(de)關鍵，PCR 產(chan)物的(de)特異性取(qu)決(jue)於引物與(yu)模(mo)板(ban)DNA互(hu)補的(de)程度。理論(lun)上，只要(yao)知道(dao)任何(he)壹段(duan)模(mo)板(ban)DNA序(xu)列， 就(jiu)能(neng)按其(qi)設計互(hu)補的(de)寡核苷(gan)酸鏈(lian)做引物，利用(yong)PCR就(jiu)可將(jiang)模(mo)板(ban)DNA在(zai)體外(wai)大(da)量(liang)擴增。設計引物應(ying)遵循(xun)以下原則(ze)：
①引物長(chang)度： 15-30bp，常(chang)用(yong)為20bp左(zuo)右。
②引物擴(kuo)增跨(kua)度： 以200-500bp為宜(yi)，特定(ding)條件(jian)下可擴增(zeng)長至10kb的(de)片段(duan)。
③引物堿(jian)基(ji)：G+C含(han)量以40-60%為宜(yi)，G+C太少(shao)擴(kuo)增(zeng)效(xiao)果不佳(jia)，G+C過多(duo)易出(chu)現非特異條帶(dai)。ATGC隨(sui)機分布，避(bi)免(mian)5個(ge)以上的(de)嘌(piao)呤(ling)或(huo)嘧啶(ding)核苷(gan)酸的(de)成串排(pai)列。
④避(bi)免(mian)引物內(nei)部(bu)出(chu)現二級(ji)結(jie)構(gou)，避(bi)免(mian)兩(liang)條引物間(jian)互補，特別(bie)是3'端(duan)的(de)互補，否(fou)則會形成引物二(er)聚(ju)體，產(chan)生非特異的(de)擴增(zeng)條帶(dai)。
⑤引物3'端(duan)的(de)堿(jian)基(ji)，特別(bie)是末(mo)及(ji)倒(dao)數(shu)第二個(ge)堿(jian)基(ji)，應(ying)嚴(yan)格要(yao)求配(pei)對(dui)，以避(bi)免(mian)因(yin)末端(duan)堿(jian)基(ji)不配(pei)對(dui)而導(dao)致PCR失敗(bai)。
⑥引物中(zhong)有或(huo)能(neng)加上合適的(de)酶切位(wei)點(dian)， 被(bei)擴增(zeng)的(de)靶(ba)序(xu)列有適宜(yi)的(de)酶切位(wei)點(dian)， 這對(dui)酶切分(fen)析(xi)或(huo)分子克隆(long)很有(you)好(hao)處(chu)。
⑦引物的(de)特異性：引物應(ying)與核酸序(xu)列數(shu)據(ju)庫(ku)的(de)其它序(xu)列無(wu)明(ming)顯(xian)同源性(xing)。
引物量(liang)：每條引物的(de)濃度0.1～1umol或(huo)10～100pmol，以低引物量(liang)產(chan)生所(suo)需(xu)要(yao)的(de)結果為(wei)好，引物濃(nong)度偏(pian)高會(hui)引起(qi)錯配(pei)和非特異性擴(kuo)增(zeng)，且(qie)可增加(jia)引物之(zhi)間形(xing)成二聚(ju)體的(de)機會。

ACAA1 乙酰酰基(ji)轉(zhuan)移酶1抗體

phospho-beta Actin (Tyr53) 磷(lin)酸(suan)化(hua)β-肌動蛋白(bai)抗體

phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser346) 磷(lin)酸(suan)化(hua)腎上腺(xian)素能(neng)受體β2/β2-AR 抗體

phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser355 + Ser356) 磷(lin)酸(suan)化(hua)腎上腺(xian)素能(neng)受體β2/β2-AR抗體

APOD 載脂蛋白(bai)D抗體

ASIC1/BNaC2/ASIC1A 酸敏感(gan)離(li)子通道(dao)1抗體

ADAR1 (C-terminus) 雙鏈RNA腺(xian)苷(gan)酸脫氨基(ji)酶抗體（C端(duan)）

AF10 髓系(xi)、淋巴(ba)、混合(he)系(xi)白血(xue)病易位(wei)基(ji)因(yin)10抗體

ADCY1 腺(xian)苷(gan)酸環(huan)化(hua)酶1抗體

APC 腺(xian)瘤樣(yang)息(xi)肉抗體

AGPAT1 溶血磷(lin)脂(zhi)酰基(ji)轉(zhuan)移酶抗體

ANKS3 錨蛋白重復(fu)及(ji)SAM結(jie)構(gou)域(yu)蛋白(bai)3抗體

phospho-ALK (Tyr1586) 磷(lin)酸(suan)化(hua)間(jian)變(bian)型淋巴(ba)瘤激酶抗體

ACADVL 酰基(ji)脫氫(qing)酶很長(chang)鏈(lian)抗體

AMSH 信(xin)號轉(zhuan)導(dao)銜(xian)接(jie)結合(he)蛋(dan)白抗體

ASB3 錨蛋白重復(fu)序(xu)列-細胞(bao)因(yin)子信(xin)號抑制物盒蛋(dan)白(bai)家族(zu)3抗體

Aurora C 有絲分裂(lie)激酶B抗體

Phospho-Ack1 (Tyr284) 磷(lin)酸(suan)化(hua)Ack1抗體

Phospho-Ack1 (Tyr326) 磷(lin)酸(suan)化(hua)Ack1抗體

Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412) 磷(lin)酸(suan)化(hua)β抑制蛋白1抗體

Phospho-Aurora A (Thr288) 磷(lin)酸(suan)化(hua)有(you)絲分裂(lie)激酶A抗體

phospho-APS(Ser598) 磷(lin)酸(suan)化(hua)APS抗體

Aurora A 有絲分裂(lie)激酶A抗體

AIM2 幹擾素誘(you)導(dao)蛋(dan)白(bai)AIM2抗體

Aquaporine 2 水通道(dao)蛋(dan)白-2抗體

ABI2 腫瘤抑制基(ji)因(yin)ABI2/蛋白(bai)激酶結合(he)蛋(dan)白抗體

脆弱(ruo)擬桿(gan)菌(jun)PCR檢(jian)測(ce)試劑盒說(shuo)明(ming)書ARL11 ADP核糖基(ji)化(hua)因(yin)子樣(yang)11抗體

ARMCX3 ARM重復X連鎖蛋(dan)白(bai)ARMCX3抗體

ARMCX1 ARM重復X連鎖蛋(dan)白(bai)ARMCX1抗體

ARMCX2 ARM重復X連鎖蛋(dan)白(bai)ARMCX2抗體

Apg10 自噬相關蛋(dan)白(bai)10抗體