禽(qin)類(lei)支(zhi)原體(ti)通(tong)用PCR檢(jian)測試劑盒(he)說明(ming)書(shu)

禽(qin)類(lei)支(zhi)原體(ti)通(tong)用PCR檢(jian)測試劑盒(he)說明(ming)書(shu)組(zu)成及(ji)試劑配(pei)制(zhi):
1、 酶標板：壹(yi)塊（96孔(kong)）
2、 標準(zhun)品（凍幹(gan)品）： 2瓶(ping)，請(qing)臨(lin)用(yong)前15分(fen)鐘(zhong)內(nei)配(pei)制(zhi)。每瓶以(yi)樣(yang)品稀(xi)釋液(ye)稀(xi)釋至(zhi)0.5ml，蓋好後(hou)室(shi)溫靜(jing)置大(da)約(yue)10分(fen)鐘(zhong)，同時反(fan)復(fu)顛(dian)倒(dao)/搓動以(yi)助溶(rong)解，其(qi)濃度為(wei)200 U/L，然(ran)後(hou)做系(xi)列倍比稀(xi)釋（註：不(bu)要直接在板中進(jin)行倍(bei)比(bi)稀(xi)釋），分(fen)別(bie)配(pei)制(zhi)成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣(yang)品稀(xi)釋液(ye)直接作(zuo)為(wei)空(kong)白孔(kong) 0 U/L。如配(pei)制(zhi)100 U/L標準(zhun)品：取(qu)0.3ml （不(bu)要少於0.3ml ）200 U/L的(de)上述標準(zhun)品加(jia)入(ru)含有0.3ml樣(yang)品稀(xi)釋液(ye)的(de)Eppendorf管(guan)中，混勻(yun)即可(ke)，其余(yu)濃度以(yi)此(ci)類(lei)推(tui)。
3、 樣(yang)品稀(xi)釋液(ye)：1×20ml。
4、禽(qin)類(lei)支(zhi)原體(ti)通(tong)用PCR檢(jian)測試劑盒(he)說明(ming)書(shu) 檢(jian)測稀(xi)釋液(ye)A：1×10ml。
5、 檢(jian)測稀(xi)釋液(ye)B：1×10ml。

樣(yang)本采(cai)集、存(cun)放(fang)及(ji)運(yun)輸：
禽(qin)類(lei)支(zhi)原體(ti)通(tong)用PCR檢(jian)測試劑盒(he)說明(ming)書(shu)1、樣(yang)本采(cai)集：各類(lei)型(xing)樣(yang)本按(an)照常規方法采集(ji)；
2、存(cun)放(fang)：樣(yang)本在2~8℃條件(jian)下保(bao)存(cun)應不(bu)超過72h，-70℃以下可保(bao)存(cun)，但應避免反(fan)復(fu)凍融(rong)（zui多(duo)凍融(rong)3次(ci)）；
3、運(yun)輸：采(cai)用(yong)泡(pao)沫(mo)箱加冰密封(feng)進(jin)行運(yun)輸。

特(te)點優(you)勢：
    1.特異性(xing)：所(suo)有產品使(shi)用的(de)引物(wu)均經過詳盡(jin)的(de)生(sheng)物(wu)信(xin)息學(xue)分(fen)析(xi)，經過GenBank及自(zi)建龐(pang)大(da)數(shu)據(ju)庫(ku)的(de)比對(dui)，確保(bao)所(suo)用的(de)每壹(yi)條引(yin)物(wu)均為(wei)種屬或血(xue)清(qing)型(xing)特(te)異的(de)基因(yin)序列區(qu)段，可(ke)實(shi)現對(dui)細菌種屬及血(xue)清(qing)型(xing)的(de)特異檢(jian)測，特異性(xing)均達到100%。
    2.   重現性(xing)：該(gai)系(xi)列所(suo)有產品均經過大量(liang)實(shi)驗菌株的(de)驗證(zheng)，重現性(xing)為(wei)100%。
    3.   靈(ling)敏(min)性(xing)：該(gai)系(xi)列產品可(ke)實(shi)現對(dui)檢(jian)測菌的(de)高(gao)靈(ling)敏(min)檢(jian)測，當樣(yang)品中細菌的(de)濃度達(da)到103cfu/ml時，可(ke)實(shi)現對(dui)其的(de)直接檢(jian)測，無(wu)需(xu)繁瑣的(de)增菌過程(cheng)。
    4.   實(shi)用性(xing)：檢(jian)測範圍(wei)廣，涵(han)蓋了(le)對人(ren)體危害較為(wei)嚴重的(de)17種呼吸道(dao)及腸道(dao)致病菌，可實(shi)現對(dui)臨(lin)床(chuang)樣(yang)品及(ji)其(qi)他(ta)環境(jing)取樣(yang)的(de)快(kuai)速(su)檢(jian)測，整個檢(jian)測過程(cheng)為(wei)3-4個(ge)小(xiao)時。
    5.   優(you)勢1：序列資源豐(feng)富(fu)，除(chu)GenBank公(gong)布的(de)序列外(wai)，公司(si)還(hai)進(jin)行了(le)大量(liang)菌株的(de)序列破(po)譯(yi)，從理論(lun)上保(bao)證(zheng)所(suo)選引物(wu)具有(you)良好(hao)的(de)保(bao)守(shou)性(xing)和(he)特異性(xing)。

    6.   優(you)勢2：該(gai)系(xi)列試劑盒(he)均經過大量(liang)的(de)保(bao)守(shou)性(xing)及(ji)特異性(xing)實(shi)驗驗(yan)證(zheng)，憑借公司(si)擁有(you)的(de)豐富(fu)的(de)菌種資源，每(mei)壹(yi)種檢(jian)測試劑盒(he)均經過了(le)20余(yu)種標準(zhun)菌株和(he)臨(lin)床(chuang)菌株的(de)保(bao)守(shou)性(xing)驗(yan)證(zheng)及40余(yu)種近(jin)緣標準(zhun)菌株和(he)臨(lin)床(chuang)菌株的(de)特異性(xing)驗(yan)證(zheng)，確保(bao)在使(shi)用過程(cheng)中不(bu)會出現(xian)任何的(de)假陽(yang)性(xing)及(ji)假陰(yin)性(xing)報(bao)告結果。

反(fan)應五要素：
參(can)加(jia)PCR反(fan)應的(de)物(wu)質(zhi)主(zhu)要有五種即引物(wu)、酶(mei)、dNTP、模板和(he)Mg2+
引物(wu)：引(yin)物(wu)是PCR特(te)異性(xing)反(fan)應的(de)關鍵(jian)，PCR 產物(wu)的(de)特異性(xing)取(qu)決(jue)於引(yin)物(wu)與(yu)模板DNA互(hu)補的(de)程(cheng)度。理(li)論(lun)上，只要知(zhi)道(dao)任何壹(yi)段(duan)模板DNA序列， 就(jiu)能按(an)其設(she)計互(hu)補的(de)寡核苷酸(suan)鏈做(zuo)引物(wu)，利(li)用PCR就(jiu)可(ke)將(jiang)模(mo)板DNA在體外(wai)大量(liang)擴增(zeng)。設(she)計引(yin)物(wu)應遵循(xun)以(yi)下原則(ze)：
①引物(wu)長(chang)度： 15-30bp，常用為(wei)20bp左右(you)。
②引物(wu)擴增(zeng)跨度(du)： 以200-500bp為(wei)宜(yi)，特(te)定(ding)條件(jian)下可擴增(zeng)長(chang)至10kb的(de)片段(duan)。
③引物(wu)堿(jian)基：G+C含(han)量(liang)以40-60%為(wei)宜(yi)，G+C太(tai)少(shao)擴增(zeng)效(xiao)果不(bu)佳，G+C過多(duo)易(yi)出現非特異條帶(dai)。ATGC隨(sui)機(ji)分(fen)布(bu)，避免5個以(yi)上的(de)嘌呤(ling)或嘧啶核苷酸(suan)的(de)成串排列。
④避免引物(wu)內(nei)部出(chu)現二級結構(gou)，避免兩條引(yin)物(wu)間(jian)互補(bu)，特(te)別(bie)是3'端的(de)互補(bu)，否(fou)則(ze)會形(xing)成引(yin)物(wu)二(er)聚體(ti)，產生(sheng)非(fei)特(te)異的(de)擴增(zeng)條帶(dai)。
⑤引(yin)物(wu)3'端的(de)堿基，特(te)別是末(mo)及(ji)倒(dao)數(shu)第(di)二(er)個(ge)堿基，應嚴格(ge)要(yao)求配(pei)對(dui)，以(yi)避免因末(mo)端堿基不(bu)配(pei)對(dui)而(er)導致PCR失(shi)敗(bai)。
⑥引物(wu)中有或能(neng)加上合適的(de)酶切位點， 被(bei)擴增(zeng)的(de)靶序列有(you)適宜的(de)酶切位點， 這(zhe)對酶切分(fen)析(xi)或分(fen)子(zi)克(ke)隆(long)很(hen)有好(hao)處(chu)。
⑦引物(wu)的(de)特異性(xing)：引(yin)物(wu)應與(yu)核酸(suan)序列數(shu)據(ju)庫(ku)的(de)其它(ta)序列無(wu)明(ming)顯(xian)同源性(xing)。
引(yin)物(wu)量(liang)：每條引(yin)物(wu)的(de)濃度0.1～1umol或10～100pmol，以(yi)低引物(wu)量(liang)產生(sheng)所(suo)需(xu)要的(de)結果(guo)為(wei)好(hao)，引(yin)物(wu)濃度偏(pian)高(gao)會引起(qi)錯(cuo)配(pei)和(he)非特異性(xing)擴增(zeng)，且(qie)可增(zeng)加(jia)引物(wu)之間形(xing)成二(er)聚體(ti)的(de)機(ji)會。

CYP2R1 細胞(bao)色素P450 2R1抗(kang)體

COMMD10 銅(tong)代(dai)謝(xie)結(jie)構(gou)域(yu)蛋(dan)白10抗(kang)體

CACYBP 鈣周(zhou)期(qi)素結合蛋(dan)白抗(kang)體

C7orf69 7號(hao)染(ran)色體開放(fang)閱(yue)讀框(kuang)69抗(kang)體

COMMD3 銅(tong)代(dai)謝(xie)結(jie)構(gou)域(yu)蛋(dan)白3抗(kang)體

C19orf71 19號(hao)染(ran)色體開放(fang)閱(yue)讀框(kuang)71抗(kang)體

CBX1 異染色體同源蛋(dan)白1抗(kang)體

COMMD8 銅(tong)代(dai)謝(xie)結(jie)構(gou)域(yu)蛋(dan)白8抗(kang)體

Chloramphenicol 抗(kang)體

C4orf45 4號(hao)染(ran)色體開放(fang)閱(yue)讀款

CARD11 雕(diao)亡加(jia)強(qiang)結(jie)構(gou)域(yu)蛋(dan)白11抗(kang)體

Cytochrome B 細(xi)胞(bao)色素B抗(kang)體

COX1 氧化酶(mei)1抗(kang)體

CNOT4 細(xi)胞(bao)表(biao)面趨(qu)化因(yin)子(zi)受體(ti)4相(xiang)關(guan)蛋(dan)白4抗(kang)體

CNOT6 細(xi)胞(bao)表(biao)面趨(qu)化因(yin)子(zi)受體(ti)4相(xiang)關(guan)蛋(dan)白6抗(kang)體

CNOT8 細(xi)胞(bao)表(biao)面趨(qu)化因(yin)子(zi)受體(ti)4相(xiang)關(guan)蛋(dan)白8抗(kang)體

Chondroitin Sulfate 抗(kang)體

CA50 上皮(pi)類(lei)癌相(xiang)關(guan)抗(kang)原抗(kang)體

phospho-CPI17 alpha (Thr38) 磷酸(suan)化蛋(dan)白磷酸(suan)激酶(mei)PKC/CPI-17抗(kang)體

Centromere protein K 著(zhe)絲(si)粒蛋(dan)白K

CTAG1B 腫瘤(liu)/抗(kang)體抗(kang)原1B

Transferrin receptor 轉鐵蛋(dan)白受體(ti)抗(kang)體

C8orfK29 8號(hao)染(ran)色體開放(fang)閱(yue)讀框(kuang)K29抗(kang)體

CYP3A4 細(xi)胞(bao)色素P450 3A4抗(kang)體

Cytochrome P450 2D1 YP2D1抗(kang)體

CD33 CD33抗(kang)體

CtIP 視(shi)網(wang)膜母(mu)細胞(bao)瘤(liu)結(jie)合蛋(dan)白8抗(kang)體

禽(qin)類(lei)支(zhi)原體(ti)通(tong)用PCR檢(jian)測試劑盒(he)說明(ming)書(shu)C10orf93 10號(hao)染(ran)色體開放(fang)閱(yue)讀框(kuang)93抗(kang)體

C10orf63 10號(hao)染(ran)色體開放(fang)閱(yue)讀框(kuang)63抗(kang)體

C10orf132 10號(hao)染(ran)色體開放(fang)閱(yue)讀框(kuang)132抗(kang)體