石(shi)菖蒲探針(zhen)法PCR鑒(jian)定試(shi)劑(ji)盒(he)直銷(xiao)

實(shi)驗(yan)流(liu)程(cheng)：
1. 整(zheng)個檢(jian)測(ce)過(guo)程應嚴格(ge)按(an)照本說(shuo)明書(shu)要求(qiu)分(fen)別(bie)在(zai)試(shi)劑準備區(qu)、樣(yang)本處理區和(he)PCR擴增區進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)，各(ge)區實驗(yan)服、儀(yi)器 、耗材應獨(du)立(li)使用，不(bu)能混用；實驗用(yong)吸(xi)頭采用帶(dai)濾芯(xin)吸(xi)頭；樣(yang)本處理區應配(pei)有生物安全櫃，樣(yang)本處理在生(sheng)物安全櫃中(zhong)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)；三(san)個區(qu)應該(gai)配(pei)有紫外線殺菌(jun)裝(zhuang)置。
2. 為(wei)避(bi)免RNA降(jiang)解(jie)，樣(yang)本處理過(guo)程應在0-4℃條(tiao)件下操(cao)作(zuo)，且(qie)完成(cheng)實(shi)驗(yan)後(hou)立即(ji)上機(ji)檢(jian)測；樣(yang)本處理過(guo)程中使用的器具(ju)耗材應經過(guo)無核酶處理。
3. 每(mei)次(ci)實(shi)驗(yan)應該(gai)設(she)置(zhi)陰、陽性(xing)對照。
4. 試(shi)劑(ji)盒(he)所(suo)有試劑在使用前(qian)應該(gai)在(zai)常(chang)溫(wen)下充分(fen)融化(hua)混勻(yun)，並應瞬時(shi)離心。
5. 試(shi)劑(ji)盒(he)內(nei)所(suo)配(pei)陰(yin)性和(he)陽性(xing)對照在壹次(ci)使用前(qian)應全部(bu)轉(zhuan)移(yi)至標本準備(bei)區(qu)，並單(dan)獨(du)存(cun)放。
6. 為(wei)防(fang)止(zhi)熒(ying)光幹擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，並應避免在(zai)PCR反應管上進(jin)行(xing)任何標記。
7. 儀(yi)器 擴增相關參數應按(an)照本說(shuo)明書(shu)相關要求(qiu)進(jin)行(xing)設(she)置(zhi)；不(bu)同(tong)批(pi)號試劑不(bu)能混用。
8. ABI系(xi)列(lie)熒光定量(liang)PCR儀(yi)參(can)數(shu)設(she)置(zhi)中不(bu)選(xuan)ROX校(xiao)正，淬滅(mie)基因選擇None。
9. 實(shi)驗(yan)過(guo)程中產(chan)品(pin)的廢(fei)棄物應該(gai)進(jin)行(xing)無害化處理後(hou)方可(ke)丟棄。

特(te)點(dian)：
1. 即(ji)開(kai)即(ji)用(yong)，用戶只(zhi)需(xu)要提(ti)供(gong)病(bing)毒樣(yang)品。
2. 根(gen)據地(di)黃(huang)保守(shou)序列(lie)設(she)計(ji)的專(zhuan)壹性(xing)引(yin)物，與相(xiang)關病(bing)毒無交叉反應。
3. 靈(ling)敏(min)度可(ke)以達到(dao)幾百(bai)拷(kao)貝(bei)/反應。
4. 壹(yi)管(guan)式(shi)熒(ying)光定量(liang) PCR 檢(jian)測(ce)，避(bi)免後(hou)續汙染。
5. 本試劑(ji)盒(he)足(zu)夠 50 次(ci) 20μL 反應體(ti)系(xi)的熒(ying)光定量(liang) PCR。
6. 本產(chan)品(pin)只(zhi)適(shi)用(yong)於(yu)科(ke)研(yan)，不(bu)能用於(yu)臨床診(zhen)斷。
使用方法(fa)：
壹(yi)、樣(yang)品采(cai)集(ji)：
1、食品樣(yang)品：樣(yang)品的采(cai)集(ji)與預培養按(an)照樣(yang)品的采(cai)集(ji)與預培養按(an)照《食品衛(wei)生(sheng)微(wei)生物學(xue)檢(jian)驗(yan)阪(ban)崎腸桿菌檢驗(yan)要求(qiu)進(jin)行(xing)。
2、血(xue)液(ye)樣(yang)品：用(yong)無菌註射器抽(chou)取(qu)受檢者靜脈(mai)血(xue)2mL，註(zhu)入(ru)無菌EDTA2Na(或(huo)檸檬(meng)酸鈉(na))抗(kang)凝(ning)管(guan)，立(li)即混勻(yun)。
3、糞(fen)便(bian)樣(yang)品：取(qu)糞(fen)便(bian)置於(yu)滅(mie)菌的收(shou)集(ji)管中送檢(jian)。
4、病(bing)竈(zao)部(bu)位(wei)樣(yang)品：取(qu)發病(bing)部(bu)位(wei)新(xin)鮮(xian)滲(shen)出物、粘液(ye)膿(nong)血(xue)送檢(jian)。
壹(yi)、稀(xi)釋(shi) PCR 陽性(xing)對照（以 10E2-10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 這(zhe) 6 個 10 倍稀釋(shi)度為例）
1. 註(zhu)意(yi)：由於(yu)標準品(pin)濃(nong)度非常(chang)高，因此下列(lie)稀釋操(cao)作(zuo)壹(yi)定要在獨(du)立(li)的區(qu)域(yu)進(jin)行(xing)，千萬不(bu)能汙染樣(yang)品或(huo)本試劑(ji)盒(he)的其(qi)他(ta)成(cheng)分(fen)）。為(wei)增加(jia)產(chan)品(pin)穩(wen)定性(xing)和(he)避免擴散(san)傳染性病(bing)原(yuan)，本產(chan)品(pin)不(bu)提(ti)供(gong)活(huo)體(ti)樣(yang)品做(zuo)陽性(xing)對照，只(zhi)提(ti)供(gong)可(ke)以直接使用的 DNA段(duan)作(zuo)為(wei)陽性(xing)對照。
2. 標記 6 個離(li)心(xin)管(guan)，分(fen)別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭分別加(jia)入(ru) 45 μL 熒(ying)光 PCR 模板(ban)稀(xi)釋(shi)液(ye)（用帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭，下同(tong)）。
4. 在(zai) 7 號管中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照，充分震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照。放冰(bing)上待(dai)用(yong)。
5. 換槍(qiang)頭，在 6 號管中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照(上步(bu)稀(xi)釋所(suo)得(de))，充(chong)分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照。放冰(bing)上待(dai)用(yong)。
6. 換槍(qiang)頭，在 5 號管中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照到 5 號管中，充分震蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照。放冰(bing)上待(dai)用(yong)。
7. 重(zhong)復(fu)上面(mian)的操(cao)作(zuo)直(zhi)到得到(dao) 6 個稀(xi)釋(shi)度的陽性(xing)對照。放冰(bing)上待(dai)用(yong)。
註(zhu)：上述樣(yang)品建(jian)議(yi)經過(guo)增菌後(hou)，收(shou)集(ji)培養物用於(yu)檢測(ce)。 
二(er)、DNA提(ti)取(qu)：
可(ke)采用(yong)PCR試(shi)劑(ji)盒(he)配(pei)備(bei)的DNA抽(chou)提(ti)液(ye)，按(an)以下說(shuo)明進(jin)行(xing)DNA核(he)酸的粗(cu)提(ti)。也(ye)可(ke)采購(gou)上海(hai)澤葉生(sheng)物科(ke)技(ji)有限公司(si)生產(chan)的DNA提(ti)取(qu)試劑盒(he)(過(guo)柱(zhu)法(fa)-熒(ying)光配(pei)套(tao))或(huo)其(qi)他(ta)合(he)適的商(shang)業(ye)化(hua)產(chan)品(pin)，並按(an)照相應試劑(ji)盒(he)說(shuo)明進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)。
1、液(ye)體(ti)培(pei)養物：取(qu)液(ye)體(ti)培(pei)養物100μL加(jia)到1.5mL無菌離心管(guan)中(zhong)，8000rpm離(li)心(xin)3min，盡(jin)量(liang)吸棄上清(qing)，加(jia)入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反應。
2、固(gu)體(ti)培(pei)養物：挑取(qu)單克隆菌落(luo)與(yu)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反應。
3、糞(fen)便(bian)樣(yang)品：挑取(qu)米粒大小(xiao)糞(fen)便(bian)於(yu)滅(mie)菌離(li)心管(guan)中(zhong)，加(jia)入(ru)0.5mL生(sheng)理鹽(yan)水，振蕩(dang)混勻(yun)，13000rpm離(li)心(xin)3分(fen)鐘(zhong)，棄上清(qing)，沈(chen)澱中加(jia)入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反應。
4、其(qi)他(ta)液(ye)體(ti)標本：取(qu)標本2-3mL，13000rpm離(li)心(xin)3min，棄上清(qing)，沈(chen)澱中加(jia)入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反應。
註(zhu)：陽性(xing)對照和陰性(xing)對照為已經抽提(ti)好(hao)的核(he)酸(無需提(ti)取(qu))，直(zhi)接取(qu)5μL加(jia)入(ru)到(dao)反應體(ti)系(xi)中(zhong)即(ji)可(ke)。由於(yu)陽性(xing)對照濃(nong)度較(jiao)高，建(jian)議(yi)在(zai)樣(yang)品制(zhi)備區域(yu)加(jia)入(ru)陽性(xing)對照。 
ANGPT2 Others Human 人(ren) ANG2 / Angiopoietin-2 人(ren)細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照) 溴(xiu)鄰(lin)苯(ben)三酚(fen)紅(hong)Bromopyrogallol red質量規格(ge)：IND

星形(xing)膠質細胞(bao)培養基ACM鹽(yan)酸副(fu)品紅(hong)Basic Fuchsin質量規格(ge)：BS,用(yong)於(yu)生物學(xue)染色

CD164 Others Human 人(ren) CD164 / Endolyn 人(ren)細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照) 燦(can)爛黃(huang)Brilliant Yellow質量規格(ge)：IND

GPS5 豚鼠(shu)皮(pi)膚成(cheng)纖(xian)維(wei)樣(yang)細胞(bao)剛果(guo)紅(hong)(AR)Congo red質量規格(ge)：AR

CM-R123大(da)鼠(shu)角(jiao)膜(mo)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao)*培養基100mL鈣(gai)羧酸指示劑(AR)Calconcarboxylic acid質量規格(ge)：AR
人(ren)角膜(mo)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao) (HcorF)( 5×105 ) EPC, 大(da)鼠(shu)血(xue)管(guan)內(nei)皮祖細胞(bao) Rattus銀(yin)杏內(nei)酯B(標準品(pin))Ginkgolide B質量規格(ge)：HPLC≥98%，標準品(pin)

人(ren)低分化肺(fei)腺(xian)癌(ai)細胞(bao);SK-LU-1VLup-20(29)-en-28-oic acid, 3-[β-D-glucopyranosyl(1→4)[a-L-rhamnopyranosyl) (1→2)-a -L-arabinopyranosyl]oxy], (3β,4a)-)質量規格(ge)：HPLC≥98%，標準品(pin)

CANX Others Human 人(ren) CANX / Calnexin 人(ren)細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照) VHederagenin 3-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-(β-D-glucopyranosyl(1→4))-α-L-arabinopyranoside質量規格(ge)：HPLC≥98%，標準品(pin)

人(ren)結腸粘膜(mo)上皮(pi)細胞(bao)*培養基 100mLGDC0994GDC-0994質量規格(ge)：ERK1/2 抑(yi)制(zhi)劑(ji)

RAW 264.7細胞(bao)，小(xiao)鼠單核(he)巨噬細胞(bao)白血(xue)病(bing)細胞(bao) 溶(rong)組(zu)織(zhi)梭(suo)菌Closidium histolyticum 水(shui)牛(niu)皮(pi)膚成(cheng)纖(xian)維(wei)樣(yang)細胞(bao);WB-S3氨(an)三(san)乙(yi)酸Nitrilotriacetic acid質量規格(ge)：AR
人(ren)血(xue)管(guan)內(nei)皮細胞(bao)*培養基 100mL復(fu)壁碳(tan)納(na)米管 40-60nm(直(zhi)徑(jing)),5-15μm(長(chang)度)質量規格(ge)：>97%(TPO Method)Carbon Nanotube Multi-walled 40-60nm(diam.), 5-15µm(length)

D341Med細胞(bao)，人(ren)髓(sui)母細胞(bao)瘤(liu)細胞(bao) 藤黃(huang)微(wei)球菌/騰(teng)黃(huang)八(ba)疊(die)球菌 貓腎細胞(bao);CRFK復(fu)壁碳(tan)納(na)米管 40-60nm(直(zhi)徑(jing)),1-2μm(長(chang)度)質量規格(ge)：>95%(TPO Method)Carbon Nanotube Multi-walled 40-60nm(diam.), 1-2µm(length)

CCL3 Protein Mouse 重(zhong)組(zu)小(xiao)鼠 CCL3 / Mip1a 蛋(dan)白(bai)復(fu)壁碳(tan)納(na)米管 60-100nm(直(zhi)徑(jing)),5-15μm(長(chang)度)質量規格(ge)：>95%(TPO Method)Carbon Nanotube Multi-walled 60-100nm(diam.), 5-15µm(length)

NIH/3T3(小(xiao)鼠胚(pei)胎細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 人(ren) EVI2A 人(ren)細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照) 3,5-二(er)芐(bian)氧基(ji)芐(bian)溴(xiu)(>98.0%(GC)(T))質量規格(ge)：>98.0%(GC)(T)3,5-Dibenzyloxybenzyl Bromide

小(xiao)鼠色素瘤(liu)瘤(liu)株;B16復(fu)壁碳(tan)納(na)米管 10-20nm(直(zhi)徑(jing)),5-15μm(長(chang)度)質量規格(ge)：>97%(TPO Method)Carbon Nanotube Multi-walled 10-20nm(diam.), 5-15µm(length)
石(shi)菖蒲探針(zhen)法PCR鑒(jian)定試(shi)劑(ji)盒(he)直銷(xiao)MN-s, 小(xiao)鼠紋狀(zhuang)體(ti)神(shen)經元(yuan)Cupricsubcaonate鹽(yan)基性碳(tan)酸銅(tong)5克(ke)CP，99%

表達(da)小(xiao)鼠MHCⅠ類分子(zi)Kb的人(ren)胚(pei)腎(shen)細胞(bao);293KB 人(ren)輸尿管(guan)上皮(pi)細胞(bao)*培養基 100mL2-炔基(ji) 2-qTHYNYLPYRIDINq 1942-84-

人(ren)腸平滑(hua)肌(ji)細胞(bao)RNAHISMC miRNA5 μgChromicacidfoginhibitor霧抑(yi)制(zhi)劑(ji)500毫(hao)克(ke)AR

三(san).小(xiao)鼠正常(chang)細胞(bao)L-TYROSINEL-酪酸美(mei)國藥典級(ji)25G60-18-4RT

小(xiao)鼠髖動(dong)脈(mai)內(nei)皮細胞(bao);PIEC3687-31-8LEAD(II) A
儲存(cun)條(tiao)件：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品收(shou)集(ji)、處理及保存(cun)方法(fa)
1. 血(xue)清(qing)：使用不(bu)含熱原(yuan)和內(nei)毒素的試(shi)管，操(cao)作(zuo)過(guo)程中避免任何細胞(bao)刺激，收(shou)集(ji)血(xue)液(ye)後(hou)，3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血(xue)清(qing)和(he)紅(hong)細胞(bao)迅速(su)小(xiao)心地分(fen)離。
2. 血(xue)漿：EDTA、檸檬(meng)酸鹽(yan)或肝素抗(kang)凝(ning)。3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)30 分(fen)鐘(zhong)取(qu)上清(qing)。
3. 細胞(bao)上清(qing)液(ye)：3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)去(qu)除顆(ke)粒和聚(ju)合(he)物。
4. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿：將(jiang)組(zu)織(zhi)加(jia)入(ru)適(shi)量生理鹽(yan)水搗碎。3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)取(qu)上清(qing)。
5. 保存(cun)：如果(guo)樣(yang)本收(shou)集(ji)後(hou)不(bu)及(ji)時檢測，請(qing)按(an)壹次用量分裝，凍(dong)存(cun)於(yu)-20℃，避(bi)免反復凍(dong)融(rong)，在室溫(wen)下解凍(dong)並確(que)保樣(yang)品均(jun)勻(yun)地(di)充分解凍(dong)。