探(tan)針法(fa)PCR鑒定試(shi)劑盒直銷(xiao)

儲存(cun)條件：
14℃或－20℃樣(yang)品收(shou)集、處(chu)理及(ji)保存(cun)方法
1. 血清：使用不(bu)含(han)熱原(yuan)和內(nei)毒(du)素的(de)試(shi)管，操(cao)作過(guo)程中(zhong)避(bi)免任何(he)細胞刺激(ji)，收(shou)集血(xue)液後(hou)，3000 轉(zhuan)離心10 分鐘將(jiang)血(xue)清和(he)紅細(xi)胞迅速(su)小心地分(fen)離。
2. 血漿(jiang)：EDTA、檸檬酸(suan)鹽(yan)或肝素(su)抗凝。3000 轉(zhuan)離心30 分鐘取上(shang)清。
3. 細胞上(shang)清液：3000 轉(zhuan)離心10 分鐘去除(chu)顆(ke)粒和聚合物(wu)。
4. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)：將(jiang)組(zu)織(zhi)加(jia)入適量(liang)生理鹽(yan)水搗碎。3000 轉(zhuan)離心10 分鐘取上(shang)清。
5. 保存(cun)：如果樣(yang)本收(shou)集後(hou)不(bu)及(ji)時(shi)檢(jian)測(ce)，請(qing)按壹次(ci)用量(liang)分(fen)裝(zhuang)，凍(dong)存(cun)於-20℃，避(bi)免反(fan)復(fu)凍(dong)融，在室(shi)溫下解(jie)凍(dong)並確(que)保樣(yang)品均勻(yun)地充分解(jie)凍(dong)。

特點：
1. 即開(kai)即用，用戶(hu)只(zhi)需要提供病毒(du)樣(yang)品。
2. 根(gen)據地(di)黃保守(shou)序列(lie)設計的(de)專壹性(xing)引物(wu)，與相關(guan)病毒(du)無交(jiao)叉(cha)反(fan)應。
3. 靈敏(min)度(du)可以(yi)達(da)到(dao)幾百拷(kao)貝/反(fan)應。
4. 壹管(guan)式(shi)熒(ying)光(guang)定量(liang) PCR 檢測，避(bi)免後(hou)續(xu)汙(wu)染。
5. 本試(shi)劑盒足夠 50 次 20μL 反(fan)應體(ti)系的(de)熒(ying)光(guang)定量(liang) PCR。
6. 本產(chan)品(pin)只(zhi)適(shi)用於科研，不(bu)能(neng)用於臨床診(zhen)斷(duan)。

使用方法：
壹、樣(yang)品采集(ji)：
1、食品樣(yang)品：樣(yang)品的(de)采集(ji)與預(yu)培養按照樣(yang)品的(de)采集(ji)與預(yu)培養按照《食品衛(wei)生微生物(wu)學檢(jian)驗(yan)阪(ban)崎腸桿(gan)菌(jun)檢驗(yan)要求進行。
2、血液樣(yang)品：用無菌(jun)註射(she)器抽取(qu)受檢(jian)者(zhe)靜(jing)脈(mai)血2mL，註入無菌(jun)EDTA2Na(或檸檬(meng)酸(suan)鈉)抗凝管，立(li)即混(hun)勻(yun)。
3、糞便樣(yang)品：取糞便置(zhi)於(yu)滅(mie)菌(jun)的(de)收(shou)集管(guan)中送檢。
4、病竈(zao)部位(wei)樣(yang)品：取發病部位(wei)新(xin)鮮(xian)滲出物(wu)、粘(zhan)液膿血送檢。
壹、稀釋(shi) PCR 陽(yang)性對照(zhao)（以(yi) 10E2-10E7 拷(kao)貝/μL 這(zhe) 6 個 10 倍稀釋(shi)度(du)為(wei)例(li)）
1. 註意：由於標準品濃(nong)度非(fei)常(chang)高，因此下列(lie)稀釋(shi)操(cao)作壹定要在獨(du)立(li)的(de)區域(yu)進行，千(qian)萬(wan)不(bu)能(neng)汙(wu)染樣(yang)品或本試(shi)劑盒的(de)其他成(cheng)分(fen)）。為增(zeng)加產(chan)品(pin)穩(wen)定性(xing)和(he)避(bi)免擴散傳(chuan)染性病原(yuan)，本產(chan)品(pin)不(bu)提供活(huo)體(ti)樣(yang)品做陽(yang)性對照(zhao)，只(zhi)提供可(ke)以(yi)直(zhi)接使用的(de) DNA段(duan)作(zuo)為(wei)陽(yang)性對照(zhao)。
2. 標記(ji) 6 個離心管(guan)，分別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯槍(qiang)頭分別加(jia)入(ru) 45 μL 熒(ying)光(guang) PCR 模(mo)板(ban)稀釋(shi)液（用帶(dai)芯槍(qiang)頭，下同）。
4. 在 7 號管中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)，充(chong)分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘，得(de)1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用。
5. 換槍頭(tou)，在 6 號管中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)(上(shang)步稀釋(shi)所(suo)得(de))，充分震蕩(dang) 1 分鐘，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用。
6. 換槍頭(tou)，在 5 號管中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)到(dao) 5 號管中(zhong)，充(chong)分震蕩(dang) 1 分鐘，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用。
7. 重復(fu)上(shang)面的(de)操(cao)作直(zhi)到(dao)得(de)到(dao) 6 個稀釋(shi)度(du)的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用。
註：上(shang)述樣(yang)品建(jian)議(yi)經(jing)過增(zeng)菌(jun)後(hou)，收(shou)集培養物(wu)用於檢測。 
二、DNA提取：
可采用PCR試(shi)劑盒配備(bei)的(de)DNA抽提液，按以(yi)下說明(ming)進行DNA核酸(suan)的(de)粗提。也可采購(gou)上(shang)海澤葉生物(wu)科技(ji)有限(xian)公(gong)司生產(chan)的(de)DNA提取試(shi)劑盒(過柱法(fa)-熒(ying)光(guang)配套(tao))或其他合適(shi)的(de)商業(ye)化產(chan)品(pin)，並(bing)按照相應試(shi)劑盒說明(ming)進行操(cao)作。
1、液體培養物(wu)：取(qu)液體培養物(wu)100μL加到(dao)1.5mL無菌(jun)離心管(guan)中，8000rpm離心3min，盡量(liang)吸棄(qi)上(shang)清，加(jia)入50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上(shang)清5μL進行PCR反(fan)應。
2、固體(ti)培養物(wu)：挑(tiao)取(qu)單克(ke)隆(long)菌(jun)落與50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上(shang)清5μL進行PCR反(fan)應。
3、糞便樣(yang)品：挑取米(mi)粒大小糞便於(yu)滅(mie)菌(jun)離心管(guan)中，加(jia)入(ru)0.5mL生理鹽(yan)水，振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)，13000rpm離心3分鐘，棄上(shang)清，沈澱(dian)中加入50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上(shang)清5μL進行PCR反(fan)應。
4、其他液體標本：取標本2-3mL，13000rpm離心3min，棄上(shang)清，沈澱(dian)中加入50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上(shang)清5μL進行PCR反(fan)應。
註：陽(yang)性對照(zhao)和(he)陰(yin)性(xing)對照(zhao)為(wei)已經(jing)抽提好的(de)核酸(suan)(無需提取)，直接取5μL加入到(dao)反(fan)應體(ti)系中(zhong)即可。由於(yu)陽(yang)性對照(zhao)濃(nong)度較高，建(jian)議(yi)在樣(yang)品制備(bei)區(qu)域(yu)加(jia)入(ru)陽(yang)性對照(zhao)。 
MA-891(小鼠癌高轉(zhuan)移細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2 腦(nao)成(cheng)纖(xian)維細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)（標準品）Troxerutin質量(liang)規格：HPLC法含(han)量(liang)測(ce)定

神(shen)經(jing)星形膠(jiao)質(zhi)細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)二羥丙（標準品）Diprophylline質量(liang)規格：含(han)量(liang)測(ce)定

ANGPTL4 Others Human 人 ANGPTL4 人細胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照(zhao)) 鹽(yan)酸(suan)（標準品）Bendazol 質量(liang)規格：HPLC法含(han)量(liang)測(ce)定

大鼠腎足突(tu)細胞*培養基 100mL1酸(suan)（標準品）Chloroquine diphosphate質量(liang)規格：HPLC法含(han)量(liang)測(ce)定

AE-1雜交瘤(liu)細胞抗AChE AE-1 hybridoma cells against AChE DMEM+10% Hyclone 滅(mie)活血清（標準品）Promethazine 質量(liang)規格：含(han)量(liang)測(ce)定
BRL(大鼠肝細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M054小鼠成(cheng)纖(xian)維細胞*培養基100mL 人結直(zhi)腸腺(xian)癌(ai)細(xi)胞;Caco-2五(wu)甲氧基紅(>98.0%(HPLC))Pentamethoxy Red質量(liang)規格：>98.0%(HPLC)

恒河猴(hou)皮膚(fu)細(xi)胞;RM-S1苯甲基橙(>95.0%(W))Benzyl Orange質量(liang)規格：>95.0%(W)

NCF2 Others Human 人 NCF2 / NCF-2 / P67phox 桿狀病毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照(zhao)) 3,4,5-三(san)咖(ka)啡酰奎寧酸(suan)(標準品)3,4,5-Tricaffeoylquinic acid質量(liang)規格：HPLC≥98%，標準品

胰腺(xian)星狀(zhuang)細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)澤瀉(xie)醇(chun)A醋(cu)酸(suan)酯Alisol A 24-acetate質量(liang)規格：HPLC≥98%，標準品

恒河猴(hou)腎細胞;RM-3 人卵(luan)巢透明(ming)細胞癌細(xi)胞，ES-2細胞 ZR-75-30(癌細胞)澤瀉(xie)醇(chun)C-23-醋(cu)酸(suan)酯;澤瀉(xie)醇(chun)C單乙(yi)酸(suan)酯Alisol C moacetate 質量(liang)規格：HPLC≥98%，標準品
NGF Others Human 人 β-NGF / Beta-NGF CHO細胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照(zhao)) (標準品)質量(liang)規格：HPLC>98%,標準品Isine

角(jiao)膜上(shang)皮細(xi)胞培養基CEpiCM-prf5‘-腺(xian)嘌呤核苷(gan)酸(suan)二鈉鹽(yan)(AMP2Na)質量(liang)規格：>98%,BR5'-AMP-Na2

婆(po)羅(luo)門(men)牛(niu)皮(pi)膚(fu)成(cheng)纖(xian)維樣(yang)細胞;BOS-4 白血病原(yuan)髓細胞，HL-60細胞 Dami(巨核細(xi)胞白血(xue)病細胞)滅(mie)菌(jun)唑(分析標準品,99.2%)質量(liang)規格：分(fen)析(xi)標準品,99.2% Triticonazole

EB病毒(du)轉(zhuan)化的(de)人B細胞;KMY0901標準溶(rong)液(10μg/ml,u=6%)質量(liang)規格：10μg/ml,u=6%Tsumacide solution

BAMBI Others Human 人 BAMBI / NMA 人細胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照(zhao)) 嗪氨(an)靈(標準品)質量(liang)規格：分(fen)析(xi)標準品Triforin
探(tan)針法(fa)PCR鑒定試(shi)劑盒直銷(xiao)人支(zhi)氣(qi)管平滑肌(ji)細胞*培養基 100mL地布卡(ka)因(yin)質(zhi)量(liang)規格：美(mei)國進口Dibucaine

MuM-2C細胞， 人眼脈(mai)絡色(se)素(su)瘤(liu)細胞 赭綠青黴(mei) 小鼠成(cheng)纖(xian)維細胞;φ2鹽(yan)酸(suan)地布卡(ka)因(yin)-d9質量(liang)規格：美(mei)國進口Dibucaine-d9

ANGPT2 Protein Human 重組(zu)人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 標簽)多(duo)利(li)培南質量(liang)規格：美(mei)國進口Doripenem

LLC(小鼠肺癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型(xing)流(liu)感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素 (Hema
實(shi)驗(yan)流(liu)程：
1. 整個檢測(ce)過程(cheng)應(ying)嚴(yan)格按照本說明(ming)書要求分別在(zai)試(shi)劑準備(bei)區(qu)、樣(yang)本處(chu)理區和(he)PCR擴增(zeng)區進行操(cao)作，各(ge)區實(shi)驗(yan)服(fu)、儀(yi)器 、耗(hao)材應(ying)獨(du)立(li)使用，不(bu)能(neng)混(hun)用；實(shi)驗(yan)用吸頭(tou)采用帶(dai)濾(lv)芯吸頭(tou)；樣(yang)本處(chu)理區應(ying)配(pei)有生物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)，樣(yang)本處(chu)理在生物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)中(zhong)進行操(cao)作；三(san)個區應(ying)該配有(you)紫外線殺(sha)菌(jun)裝置(zhi)。
2. 為避(bi)免RNA降解(jie)，樣(yang)本處(chu)理過程(cheng)應(ying)在0-4℃條件下操(cao)作，且(qie)完(wan)成(cheng)實(shi)驗(yan)後(hou)立(li)即上(shang)機(ji)檢(jian)測；樣(yang)本處(chu)理過程(cheng)中(zhong)使用的(de)器具耗(hao)材應(ying)經(jing)過無核酶(mei)處(chu)理。

3. 每(mei)次(ci)實(shi)驗(yan)應(ying)該設置(zhi)陰(yin)、陽(yang)性對照(zhao)。
4. 試(shi)劑盒所(suo)有(you)試(shi)劑在使用前應該在常(chang)溫下充分(fen)融化混(hun)勻(yun)，並應瞬時(shi)離心。
5. 試(shi)劑盒內所(suo)配(pei)陰(yin)性(xing)和陽(yang)性對照(zhao)在(zai)壹次(ci)使用前應全(quan)部(bu)轉(zhuan)移至標本準備(bei)區(qu)，並單(dan)獨(du)存(cun)放。
6. 為防止(zhi)熒(ying)光(guang)幹(gan)擾，應(ying)避(bi)免裸(luo)手(shou)直(zhi)接接觸PCR反(fan)應管(guan)，並(bing)應(ying)避(bi)免在PCR反(fan)應管(guan)上(shang)進行任(ren)何(he)標記(ji)。
7. 儀器 擴增(zeng)相關(guan)參(can)數應按照本說明(ming)書相(xiang)關(guan)要求進行設置(zhi)；不(bu)同批號試(shi)劑不(bu)能(neng)混(hun)用。
8. ABI系列(lie)熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR儀參(can)數設置(zhi)中(zhong)不(bu)選ROX校正(zheng)，淬(cui)滅(mie)基因選擇None。
9. 實(shi)驗(yan)過(guo)程(cheng)中(zhong)產(chan)品(pin)的(de)廢棄(qi)物(wu)應(ying)該進行無(wu)害(hai)化處(chu)理後(hou)方(fang)可(ke)丟棄(qi)。