澤(ze)瀉PCR鑒(jian)定試(shi)劑盒(he)保存(cun)

特(te)點：
1. 即開(kai)即用，用(yong)戶只需(xu)要提供病毒樣(yang)品。
2. 根(gen)據(ju)地黃(huang)保守(shou)序(xu)列設(she)計(ji)的(de)專(zhuan)壹(yi)性引物(wu)，與相(xiang)關(guan)病(bing)毒(du)無(wu)交(jiao)叉(cha)反應。
3. 靈敏度(du)可(ke)以(yi)達到幾(ji)百(bai)拷貝(bei)/反應。
4. 壹(yi)管式熒光(guang)定量(liang) PCR 檢(jian)測(ce)，避免後(hou)續(xu)汙(wu)染。
5. 本(ben)試(shi)劑盒(he)足夠(gou) 50 次(ci) 20μL 反應體(ti)系(xi)的(de)熒光(guang)定量(liang) PCR。
6. 本(ben)產(chan)品只(zhi)適用(yong)於科(ke)研，不(bu)能(neng)用於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷。

使(shi)用(yong)方(fang)法：
壹(yi)、樣品采(cai)集(ji)：
1、食品樣(yang)品：樣(yang)品的(de)采(cai)集(ji)與預(yu)培(pei)養按照(zhao)樣(yang)品的(de)采(cai)集(ji)與預(yu)培(pei)養按照(zhao)《食品衛(wei)生(sheng)微生物學檢(jian)驗阪崎腸桿(gan)菌檢(jian)驗要求進(jin)行。
2、血(xue)液(ye)樣品：用(yong)無(wu)菌註(zhu)射(she)器抽(chou)取(qu)受(shou)檢(jian)者(zhe)靜(jing)脈血(xue)2mL，註(zhu)入(ru)無(wu)菌EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬酸(suan)鈉)抗(kang)凝管，立即混勻(yun)。
3、糞便(bian)樣(yang)品：取(qu)糞便(bian)置(zhi)於滅菌的(de)收(shou)集(ji)管(guan)中送檢(jian)。
4、病(bing)竈(zao)部(bu)位樣品：取(qu)發(fa)病(bing)部(bu)位新鮮(xian)滲(shen)出(chu)物(wu)、粘液(ye)膿(nong)血(xue)送檢(jian)。
壹(yi)、稀(xi)釋 PCR 陽(yang)性(xing)對照（以(yi) 10E2-10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 這(zhe) 6 個 10 倍(bei)稀(xi)釋度(du)為(wei)例）
1. 註(zhu)意(yi)：由於(yu)標準品濃(nong)度(du)非常(chang)高，因此(ci)下列稀(xi)釋操作(zuo)壹(yi)定要在獨(du)立(li)的(de)區域進(jin)行，千(qian)萬不(bu)能(neng)汙(wu)染樣品或(huo)本試(shi)劑盒(he)的(de)其(qi)他(ta)成(cheng)分(fen)）。為(wei)增加產(chan)品穩定(ding)性(xing)和(he)避免擴散傳染(ran)性(xing)病原，本(ben)產品不(bu)提供(gong)活體(ti)樣(yang)品做(zuo)陽性(xing)對照，只提供可(ke)以(yi)直接使(shi)用的(de) DNA段作(zuo)為(wei)陽性(xing)對照。
2. 標記 6 個離(li)心管，分(fen)別(bie)為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯(xin)槍頭分(fen)別(bie)加入(ru) 45 μL 熒光(guang) PCR 模板稀(xi)釋液(ye)（用帶(dai)芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照。放(fang)冰上(shang)待用。
5. 換(huan)槍(qiang)頭，在 6 號管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(上(shang)步稀(xi)釋所得)，充(chong)分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照。放(fang)冰上(shang)待用。
6. 換(huan)槍(qiang)頭，在 5 號管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照到 5 號管(guan)中，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得 1×10E5 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照。放(fang)冰上(shang)待用。
7. 重(zhong)復(fu)上面(mian)的(de)操(cao)作(zuo)直到(dao)得到 6 個稀(xi)釋度(du)的(de)陽(yang)性(xing)對照。放(fang)冰上(shang)待用。
註(zhu)：上(shang)述樣品建議(yi)經(jing)過(guo)增菌後(hou)，收(shou)集培養物(wu)用(yong)於檢(jian)測(ce)。 
二(er)、DNA提(ti)取(qu)：
可(ke)采(cai)用(yong)PCR試(shi)劑盒(he)配備(bei)的(de)DNA抽(chou)提(ti)液(ye)，按以(yi)下說明(ming)進(jin)行DNA核(he)酸(suan)的(de)粗提(ti)。也(ye)可采(cai)購(gou)上(shang)海(hai)澤(ze)葉生(sheng)物(wu)科技(ji)有限(xian)公司(si)生產(chan)的(de)DNA提(ti)取(qu)試(shi)劑盒(he)(過(guo)柱法-熒光(guang)配套(tao))或(huo)其(qi)他(ta)合適的(de)商(shang)業(ye)化產(chan)品，並(bing)按照(zhao)相(xiang)應試(shi)劑盒(he)說明(ming)進(jin)行操作(zuo)。
1、液(ye)體培(pei)養物(wu)：取(qu)液(ye)體培(pei)養物(wu)100μL加到(dao)1.5mL無(wu)菌離(li)心(xin)管中，8000rpm離(li)心(xin)3min，盡(jin)量(liang)吸棄(qi)上(shang)清(qing)，加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行PCR反應。
2、固體培(pei)養物(wu)：挑(tiao)取(qu)單(dan)克(ke)隆(long)菌落(luo)與(yu)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行PCR反應。
3、糞便(bian)樣(yang)品：挑(tiao)取(qu)米(mi)粒大小糞便(bian)於(yu)滅菌離(li)心(xin)管中，加入(ru)0.5mL生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)，振(zhen)蕩混勻(yun)，13000rpm離(li)心(xin)3分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱(dian)中加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行PCR反應。
4、其(qi)他(ta)液(ye)體標本：取(qu)標本2-3mL，13000rpm離(li)心(xin)3min，棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱(dian)中加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行PCR反應。
註(zhu)：陽(yang)性(xing)對照和(he)陰性對照為(wei)已經(jing)抽(chou)提好(hao)的(de)核(he)酸(suan)(無(wu)需提(ti)取(qu))，直(zhi)接(jie)取(qu)5μL加入(ru)到(dao)反應體(ti)系(xi)中即可。由於(yu)陽性(xing)對照濃度(du)較(jiao)高，建議(yi)在樣(yang)品制(zhi)備(bei)區域加入(ru)陽(yang)性(xing)對照。 
實(shi)驗流程：
1. 整個檢(jian)測(ce)過(guo)程應嚴(yan)格(ge)按照(zhao)本(ben)說明(ming)書要求分(fen)別(bie)在試(shi)劑準備(bei)區、樣本(ben)處(chu)理(li)區和(he)PCR擴增區進(jin)行操作(zuo)，各區實驗服(fu)、儀(yi)器(qi) 、耗(hao)材(cai)應獨(du)立(li)使(shi)用，不(bu)能(neng)混用(yong)；實(shi)驗用吸頭采(cai)用(yong)帶濾(lv)芯吸頭；樣本(ben)處(chu)理(li)區應配(pei)有生(sheng)物安(an)全(quan)櫃，樣(yang)本處(chu)理(li)在生(sheng)物(wu)安全(quan)櫃中進(jin)行操作(zuo)；三個區應該(gai)配有紫(zi)外(wai)線(xian)殺菌裝置(zhi)。
2. 為(wei)避免RNA降(jiang)解(jie)，樣(yang)本處(chu)理(li)過(guo)程應在0-4℃條(tiao)件下操作(zuo)，且完(wan)成(cheng)實(shi)驗後立即上機(ji)檢(jian)測(ce)；樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)過(guo)程中使用的(de)器(qi)具耗(hao)材應經(jing)過(guo)無(wu)核(he)酶(mei)處(chu)理(li)。
3. 每(mei)次(ci)實(shi)驗應該(gai)設(she)置(zhi)陰、陽性(xing)對照。
4. 試(shi)劑盒(he)所有試(shi)劑在使(shi)用(yong)前應該(gai)在常(chang)溫下充分(fen)融化混勻(yun)，並(bing)應瞬(shun)時(shi)離心。
5. 試(shi)劑盒(he)內所(suo)配陰性和(he)陽(yang)性對照在壹(yi)次(ci)使(shi)用(yong)前應全(quan)部轉移至標本準備(bei)區，並單(dan)獨(du)存(cun)放(fang)。
6. 為(wei)防止(zhi)熒光(guang)幹(gan)擾，應避免裸(luo)手直(zhi)接(jie)接觸(chu)PCR反應管(guan)，並(bing)應避免在PCR反應管(guan)上(shang)進(jin)行任何(he)標記。
7. 儀(yi)器(qi) 擴增相(xiang)關(guan)參數(shu)應按照(zhao)本(ben)說明(ming)書相(xiang)關(guan)要求進(jin)行設(she)置(zhi)；不(bu)同批(pi)號試(shi)劑不(bu)能(neng)混用(yong)。
8. ABI系(xi)列熒光(guang)定量(liang)PCR儀(yi)參數(shu)設(she)置(zhi)中不(bu)選(xuan)ROX校(xiao)正(zheng)，淬(cui)滅基(ji)因(yin)選(xuan)擇(ze)None。
9. 實(shi)驗過(guo)程中產品的(de)廢(fei)棄(qi)物(wu)應該(gai)進(jin)行無(wu)害化(hua)處(chu)理(li)後方(fang)可(ke)丟棄(qi)。
儲(chu)存(cun)條(tiao)件：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品收(shou)集、處(chu)理(li)及保存(cun)方(fang)法
1. 血(xue)清(qing)：使用(yong)不(bu)含熱原(yuan)和(he)內毒(du)素(su)的(de)試(shi)管，操作(zuo)過(guo)程中避免任(ren)何(he)細(xi)胞刺(ci)激，收(shou)集(ji)血液(ye)後，3000 轉離心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)將血(xue)清(qing)和(he)紅(hong)細(xi)胞迅(xun)速(su)小心(xin)地分(fen)離。
2. 血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬酸(suan)鹽(yan)或(huo)肝素(su)抗(kang)凝。3000 轉離心(xin)30 分(fen)鐘(zhong)取(qu)上(shang)清(qing)。
3. 細(xi)胞上(shang)清(qing)液(ye)：3000 轉離心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)去(qu)除顆(ke)粒和(he)聚(ju)合物。
4. 組(zu)織(zhi)勻漿：將組(zu)織(zhi)加入(ru)適(shi)量(liang)生理鹽(yan)水(shui)搗碎(sui)。3000 轉離心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)取(qu)上(shang)清(qing)。
5. 保(bao)存(cun)：如(ru)果樣(yang)本收集後不(bu)及時(shi)檢(jian)測(ce)，請按壹(yi)次(ci)用(yong)量(liang)分(fen)裝，凍(dong)存(cun)於(yu)-20℃，避免反復(fu)凍融(rong)，在室(shi)溫(wen)下解凍並(bing)確保樣品均(jun)勻地充(chong)分(fen)解凍。
ANGPT4 Others Human 人(ren) Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 人(ren)細(xi)胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 吲(yin)哚(duo)布(bu)芬(fen)（標準品）Indobufen質(zhi)量(liang)規格：含量(liang)測定

人(ren)內皮(pi)細(xi)胞*培(pei)養基(ji) 100mL（標準品）Triprolidine 質(zhi)量(liang)規格：含量(liang)測定

HS-1細(xi)胞，人(ren)皮膚(fu)癌細(xi)胞系(xi) 滑(hua)念(nian)珠菌 小鼠(shu)胰腺癌細(xi)胞(B類(lei));Pan02(標準品)Milrinone質(zhi)量(liang)規格：>98%,標準品

CCL20 Protein Human 重(zhong)組(zu)人(ren) CCL20 / MIP-3 alpha 蛋(dan)白(bai) (His 標簽(qian))壬(ren)二(er)酸(suan)（標準品）Azelaic acid質(zhi)量(liang)規格：檢(jian)查

MDCK(犬腎(shen)細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠(shu) CRELD2 人(ren)細(xi)胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 雜質S9780（拉(la)）（標準品）Perindoprilat質(zhi)量(liang)規格：供(gong)HPLC法系(xi)統(tong)適用性試(shi)驗用
AMTN Others Human 人(ren) AMTN / Amelotin 人(ren)細(xi)胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 醋(cu)酸(suan)恩(en)夫韋地 Enfuvirtide Acetate質(zhi)量(liang)規格：BR,>98%

小鼠(shu)胚胎成纖維(wei)細(xi)胞;3T3-Swiss albinoD-海(hai)藻(zao)糖無(wu)水D-(+)-Trehalose Anhydrous質(zhi)量(liang)規格：≥99%,BR

tTA基(ji)因(yin)修(xiu)飾的(de)小鼠(shu)畸胎瘤細(xi)胞(B類(lei));P19-CAG-tTA-1F3 彈性(xing)蛋白(bai)酶(含10mL酶(mei)解(jie)緩(huan)沖液(ye)) 1mL二(er)醋(cu)酸(suan)(LH-RH)Gonadorelin Acetate質(zhi)量(liang)規格：>98%,二(er)醋(cu)酸(suan)鹽(yan)

A549, 人(ren)肺癌細(xi)胞系(xi) Human醋(cu)酸(suan)戈(ge)舍(she)瑞(rui)林(lin) Goserelin Acetate質(zhi)量(liang)規格：BR,>98%

NETO1 Others Human 人(ren) NETO1 / BTCL1 人(ren)細(xi)胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) Leuprolide Acetate質(zhi)量(liang)規格：BR,>98%
敘(xu)利(li)亞(ya)倉鼠腎(shen)細(xi)胞;BHK-215- 羧(suo)基(ji)熒光(guang)素(su)二乙(yi)酸酯(zhi)；5-CFDA質(zhi)量(liang)規格：0.955-Carboxyfluorescein diacetate

CSNK2A2 Others Human 人(ren) CSNK2A2 / CK2A2 桿(gan)狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲細(xi)胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 5(6)-羧(suo)基(ji)熒光(guang)素(su)二乙(yi)酸酯(zhi)質量(liang)規格：0.95(6)-Carboxyfluorescein diacetate

骨(gu)骼(ge)肌(ji)細(xi)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(fang)(1ml)5-氨(an)基熒光(guang)素(su)質量(liang)規格：>95%5-Aminofluorescein

人(ren)間(jian)充(chong)質(zhi)幹(gan)細(xi)胞-肝 人(ren)肌肉成纖維(wei)細(xi)胞瘤(liu)，C2C12細(xi)胞 B16(色(se)素(su)瘤細(xi)胞)6-氨(an)基熒光(guang)素(su)質量(liang)規格：0.956-Aminofluorescein

人(ren)小細(xi)胞肺(fei)癌細(xi)胞;NCI-H446氯(lv)羥(qiang)喹(kui)（標準品）質(zhi)量(liang)規格：HPLC含量(liang)測定Clioquinol
澤(ze)瀉PCR鑒(jian)定(ding)試(shi)劑盒(he)保存(cun)非洲(zhou)綠(lv)猴腎(shen)細(xi)胞系(xi)/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-DL-2-(2-Chloropxenyl)glycineDL-2-錄(lu)本(ben)甘(gan)酸(suan)100克(ke)BR，98%

NCI-H1650細(xi)胞，人(ren)肺支(zhi)氣(qi)管(guan)癌細(xi)胞 小鼠(shu)前列腺癌細(xi)胞,RM-1細(xi)胞 CM-R031大(da)鼠(shu)腸(chang)動脈內皮(pi)細(xi)胞*培(pei)養基(ji)100mL2′-脫(tuo)氧(yang) 2′-Deoxyinosine,≥98% 890-38-0 100MG 通用(yong)試(shi)劑

Raji(人(ren)Butt's瘤(liu)細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2六(liu)亞基(ji)亞安98%(劇讀(du)) Hqxcmqthylqnqiminq

Pro