肉蓯蓉(rong)染料(liao)法(fa)PCR鑒定(ding)試(shi)劑盒(he)保存(cun)

儲存(cun)條件(jian)：
14℃或－20℃樣(yang)品收集、處理(li)及(ji)保存(cun)方(fang)法(fa)
1. 血(xue)清(qing)：使(shi)用不(bu)含(han)熱原(yuan)和(he)內毒(du)素的(de)試(shi)管(guan)，操作過(guo)程(cheng)中避(bi)免任何細胞(bao)刺激(ji)，收集血(xue)液(ye)後，3000 轉離心(xin)10 分鐘將血(xue)清(qing)和(he)紅細胞(bao)迅(xun)速(su)小(xiao)心地分離(li)。
2. 血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸檬酸(suan)鹽(yan)或肝(gan)素抗(kang)凝(ning)。3000 轉離心(xin)30 分鐘取上(shang)清(qing)。
3. 細胞(bao)上(shang)清(qing)液(ye)：3000 轉離心(xin)10 分鐘去(qu)除顆粒和聚合物(wu)。
4. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)：將(jiang)組(zu)織(zhi)加入適量(liang)生(sheng)理(li)鹽(yan)水搗(dao)碎。3000 轉離心(xin)10 分鐘取上(shang)清(qing)。
5. 保存(cun)：如果(guo)樣(yang)本收集後不(bu)及時檢測(ce)，請(qing)按(an)壹次(ci)用量(liang)分裝(zhuang)，凍存(cun)於(yu)-20℃，避(bi)免反(fan)復(fu)凍融，在(zai)室溫下(xia)解凍(dong)並(bing)確(que)保樣(yang)品均勻(yun)地(di)充分解(jie)凍(dong)。

特點(dian)：
1. 即開即用，用戶(hu)只(zhi)需要(yao)提供病毒(du)樣(yang)品。
2. 根據(ju)地黃(huang)保守(shou)序(xu)列設(she)計的專(zhuan)壹性(xing)引(yin)物(wu)，與相(xiang)關病毒(du)無交叉(cha)反(fan)應(ying)。
3. 靈敏度可(ke)以達(da)到(dao)幾百拷(kao)貝(bei)/反(fan)應(ying)。
4. 壹管(guan)式(shi)熒光定(ding)量(liang) PCR 檢測，避(bi)免後續汙染。
5. 本試劑盒(he)足夠 50 次(ci) 20μL 反(fan)應(ying)體系(xi)的熒光定(ding)量(liang) PCR。
6. 本產品只(zhi)適用於科(ke)研，不(bu)能用於臨(lin)床診斷。

使用方(fang)法(fa)：
壹、樣(yang)品采(cai)集：
1、食品樣(yang)品：樣(yang)品的(de)采(cai)集與預(yu)培養(yang)按照(zhao)樣(yang)品的(de)采(cai)集與預(yu)培養(yang)按照(zhao)《食品衛生(sheng)微生(sheng)物(wu)學檢(jian)驗阪崎(qi)腸(chang)桿(gan)菌檢驗要(yao)求進(jin)行。
2、血(xue)液(ye)樣(yang)品：用無菌註射器(qi)抽(chou)取(qu)受(shou)檢者靜脈血(xue)2mL，註入無菌EDTA2Na(或檸檬酸(suan)鈉(na))抗凝管(guan)，立即混(hun)勻(yun)。
3、糞便(bian)樣(yang)品：取(qu)糞便(bian)置(zhi)於(yu)滅(mie)菌的收集管(guan)中(zhong)送檢。
4、病竈部位(wei)樣(yang)品：取(qu)發(fa)病部位(wei)新(xin)鮮(xian)滲(shen)出(chu)物(wu)、粘液(ye)膿血(xue)送(song)檢(jian)。
壹、稀(xi)釋 PCR 陽性對照(zhao)（以 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這 6 個 10 倍(bei)稀(xi)釋度為例(li)）
1. 註意：由於標準品(pin)濃度非(fei)常高，因此下(xia)列稀(xi)釋操作壹定(ding)要(yao)在(zai)獨立的區(qu)域進(jin)行，千(qian)萬(wan)不(bu)能汙(wu)染樣(yang)品或(huo)本(ben)試(shi)劑盒(he)的其(qi)他(ta)成(cheng)分）。為(wei)增(zeng)加產品(pin)穩(wen)定性(xing)和避(bi)免擴(kuo)散(san)傳染性病原(yuan)，本(ben)產(chan)品不(bu)提供活(huo)體(ti)樣(yang)品做(zuo)陽(yang)性(xing)對照(zhao)，只(zhi)提(ti)供可(ke)以直(zhi)接(jie)使用的 DNA段作為陽性對(dui)照(zhao)。
2. 標記(ji) 6 個離心管(guan)，分別(bie)為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯(xin)槍頭分別(bie)加入 45 μL 熒光 PCR 模(mo)板稀(xi)釋液(ye)（用帶(dai)芯(xin)槍頭，下(xia)同）。
4. 在(zai) 7 號管(guan)中(zhong)加入 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的陽性對(dui)照(zhao)，充分震蕩 1 分鐘，得(de)1×10E7 拷貝(bei)/μL 的陽性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待(dai)用。
5. 換(huan)槍頭，在(zai) 6 號管(guan)中(zhong)加入 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的陽性對(dui)照(zhao)(上(shang)步(bu)稀(xi)釋所(suo)得(de))，充分震蕩 1 分鐘，得(de) 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的陽性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待(dai)用。
6. 換(huan)槍頭，在(zai) 5 號管(guan)中(zhong)加入 5 μL 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的陽性對(dui)照(zhao)到(dao) 5 號管(guan)中(zhong)，充分震蕩 1 分鐘，得(de) 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的陽性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待(dai)用。
7. 重復(fu)上(shang)面(mian)的操作直到得(de)到 6 個稀(xi)釋度的陽(yang)性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待(dai)用。
註：上(shang)述樣(yang)品建議(yi)經(jing)過(guo)增(zeng)菌後，收集培養(yang)物(wu)用於檢(jian)測(ce)。 
二(er)、DNA提取：
可(ke)采用PCR試劑盒(he)配備的(de)DNA抽(chou)提(ti)液(ye)，按以下(xia)說(shuo)明(ming)進行DNA核酸的粗(cu)提(ti)。也可(ke)采購(gou)上(shang)海(hai)澤葉生(sheng)物(wu)科(ke)技(ji)有限(xian)公(gong)司生(sheng)產(chan)的(de)DNA提取試劑(ji)盒(he)(過(guo)柱(zhu)法(fa)-熒光配(pei)套)或其他合(he)適的商(shang)業化產(chan)品(pin)，並按(an)照(zhao)相(xiang)應(ying)試劑(ji)盒(he)說(shuo)明(ming)進行操作。
1、液(ye)體培養(yang)物(wu)：取液(ye)體培養(yang)物(wu)100μL加到1.5mL無菌離心管(guan)中(zhong)，8000rpm離心3min，盡量(liang)吸棄(qi)上(shang)清(qing)，加入50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上(shang)清(qing)5μL進行PCR反(fan)應(ying)。
2、固體培養(yang)物(wu)：挑取(qu)單(dan)克(ke)隆(long)菌落(luo)與(yu)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上(shang)清(qing)5μL進行PCR反(fan)應(ying)。
3、糞便(bian)樣(yang)品：挑(tiao)取(qu)米(mi)粒大小(xiao)糞便(bian)於(yu)滅(mie)菌離心管(guan)中(zhong)，加入0.5mL生(sheng)理(li)鹽(yan)水，振(zhen)蕩混(hun)勻(yun)，13000rpm離心3分鐘，棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)中加入50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上(shang)清(qing)5μL進行PCR反(fan)應(ying)。
4、其他液(ye)體標本：取(qu)標本2-3mL，13000rpm離心3min，棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)中加入50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上(shang)清(qing)5μL進行PCR反(fan)應(ying)。
註：陽性對(dui)照(zhao)和(he)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)為(wei)已經(jing)抽(chou)提(ti)好(hao)的核酸(suan)(無需提取)，直接取5μL加入到(dao)反(fan)應(ying)體系(xi)中即(ji)可(ke)。由於陽性對照(zhao)濃(nong)度較高，建議(yi)在(zai)樣(yang)品制(zhi)備區(qu)域加入陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)。 
小(xiao)腸粘膜上(shang)皮(pi)細胞(bao)Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)胃(wei)泌素釋(shi)放(fang)肽(tai)，豬Gastrin Releasing Peptide,procine質(zhi)量(liang)規格(ge)：>95%,BR

SERPINA1A Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) Alpha 1 Aiypsin / SerpinA1a 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性對照(zhao)) 胃(wei)泌素釋(shi)放(fang)肽(tai)-Lys（），人(ren)Gastrin Releasing Peptide-Lys(Biotin), human質(zhi)量(liang)規格(ge)：>95%,BR

大鼠(shu)胸(xiong)大動(dong)脈平(ping)滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao);A7r5胃(wei)饑餓(e)素，人(ren)Ghrelin (human)質(zhi)量(liang)規格(ge)：>95%,BR

中國倉(cang)鼠(shu)卵巢細(xi)胞(bao)(亞系克(ke)隆(long));CHO-HCV-p7 表(biao)皮(pi)癌細(xi)胞(bao)，A-431細胞(bao) H22-H8D8細胞(bao)，鼠(shu)肝(gan)癌細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)激(ji)素釋(shi)放(fang)因子(zi)，大鼠(shu)GHRF, rat質(zhi)量(liang)規格(ge)：>95%,BR

人(ren)胚(pei)肝(gan)二(er)倍(bei)體(ti)細胞(bao);CCC-HEL-1生(sheng)長(chang)激(ji)素釋(shi)放(fang)因子(zi)（1-44），人(ren)GHRF (1-44), human質(zhi)量(liang)規格(ge)：>95%,BR
腦成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)Cefotetan acid 質(zhi)量(liang)規格(ge)：Potency>960 mg,JP

PILRA Others Human 人(ren) PILR-alpha / PILRA 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性對照(zhao)) AZD8055AZD-8055 質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%,ATP競(jing)爭(zheng)性的mTOR抑(yi)制(zhi)劑

小(xiao)鼠(shu)骨(gu)髓瘤(liu)細(xi)胞(bao);Fox-NYAlectinib；CH5424802CH5424802 質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%,ALK抑(yi)制(zhi)劑

中國倉(cang)鼠(shu)卵巢細(xi)胞(bao)(亞系克(ke)隆(long));DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163 瘤細胞(bao)，YAC-1細胞(bao) RSMC細胞(bao)，大鼠(shu)主(zhu)動脈(mai)平(ping)滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao)對(dui)甲(jia)氧(yang)基肉桂酸p-Methoxycinnamic acid 質(zhi)量(liang)規格(ge)：AR,99%

人(ren)肺細胞(bao);HLF-a5-羥(qiang)基色胺鹽(yan)酸鹽(yan),血(xue)清(qing)胺(an)鹽(yan)酸鹽(yan)Serotonin (5-HT)質(zhi)量(liang)規格(ge)：>97%,BR
SV40轉化的(de)非(fei)洲綠猴腎細胞(bao);COS-1醋酸辛(xin)酯（標準品(pin)）Octyl acetate質(zhi)量(liang)規格(ge)：HPLC≥98%，標準品(pin)

EPHB4 Others Human 人(ren) EphB4 / HTK 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性對照(zhao)) 大車(che)前苷(標準品(pin))Plantamajoside質(zhi)量(liang)規格(ge)：HPLC≥98%，標準品(pin)

人(ren)結(jie)直(zhi)腸(chang)腺癌細(xi)胞(bao);Caco-2大豆(dou)苷(gan),黃豆(dou)苷(gan) （標準品(pin)）Daidzin質(zhi)量(liang)規格(ge)：HPLC≥98%，標準品(pin)

USP46 Others Human 人(ren) USP46 桿狀病毒(du)-昆蟲細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性對照(zhao)) 大黃(huang)酚(標準品(pin))Chrysophal質(zhi)量(liang)規格(ge)：HPLC≥98%，標準品(pin)

人(ren)間(jian)充質(zhi)幹細(xi)胞(bao)-肝大黃(huang)素Emodin質(zhi)量(liang)規格(ge)：≥97%,BR
肉蓯蓉(rong)染料(liao)法(fa)PCR鑒定(ding)試(shi)劑盒(he)保存(cun)人(ren)腦瘤細(xi)胞(bao);SF17對本基酚，英(ying)文(wen)名(ming)或(huo)英(ying)文(wen)縮(suo)寫(xie)：4-xy7xybipxenyl，級別：CP，95%，規格：500克(ke)

雜交瘤(B類(lei));Z1510A2G6A2C7 急性(xing)母(mu)細(xi)胞(bao)白(bai)血(xue)病細胞(bao)，MOLT-4細胞(bao) H9c2(2-1)細胞(bao)，大鼠(shu)心(xin)肌(ji)細(xi)胞(bao)二(er)醋(cu)6-羧基熒光速(su)(-20℃) 6-CcRBOXYFLUORqSCqIN DIcCqTcTq 3348-3-6

C6, 大鼠(shu)腦膠(jiao)質(zhi)瘤(liu)細(xi)胞(bao) Rattus6,6-二(er)甲(jia)基-2-亞甲基-二(er)環(huan)[3.1.1]-庚烷，英(ying)文(wen)名(ming)或(huo)英(ying)文(wen)縮(suo)寫(xie)：β-Pinen，級別：BR，規格：25克(ke)

CD97
實(shi)驗流(liu)程(cheng)：
1. 整個檢測(ce)過(guo)程(cheng)應(ying)嚴(yan)格按(an)照(zhao)本(ben)說(shuo)明(ming)書要(yao)求分別(bie)在(zai)試劑準備區(qu)、樣(yang)本處(chu)理(li)區(qu)和PCR擴(kuo)增區(qu)進行操作，各區(qu)實(shi)驗服、儀(yi)器(qi) 、耗材(cai)應(ying)獨立使用，不(bu)能混(hun)用；實(shi)驗用吸頭采用帶(dai)濾芯吸(xi)頭；樣(yang)本處(chu)理(li)區(qu)應(ying)配有(you)生(sheng)物(wu)安全(quan)櫃，樣(yang)本處(chu)理(li)在(zai)生(sheng)物(wu)安全(quan)櫃中(zhong)進行操作；三個區(qu)應(ying)該(gai)配有紫(zi)外(wai)線(xian)殺(sha)菌裝(zhuang)置。
2. 為避(bi)免RNA降(jiang)解，樣(yang)本處(chu)理(li)過(guo)程(cheng)應(ying)在(zai)0-4℃條件(jian)下(xia)操作，且完(wan)成(cheng)實(shi)驗後立即上(shang)機(ji)檢測；樣(yang)本處(chu)理(li)過(guo)程(cheng)中使(shi)用的器(qi)具耗材(cai)應(ying)經過(guo)無核酶(mei)處理(li)。

3. 每(mei)次(ci)實(shi)驗應(ying)該(gai)設置陰(yin)、陽(yang)性(xing)對照(zhao)。
4. 試劑盒(he)所有(you)試(shi)劑在(zai)使用前應(ying)該(gai)在(zai)常溫下(xia)充分融(rong)化混(hun)勻(yun)，並(bing)應(ying)瞬(shun)時離心(xin)。
5. 試劑盒(he)內所(suo)配陰(yin)性(xing)和(he)陽性(xing)對照(zhao)在(zai)壹次(ci)使(shi)用前應(ying)全(quan)部轉移(yi)至標本準備區(qu)，並單(dan)獨(du)存(cun)放(fang)。
6. 為防止(zhi)熒光幹擾(rao)，應(ying)避(bi)免裸手(shou)直接(jie)接觸(chu)PCR反(fan)應(ying)管(guan)，並(bing)應(ying)避(bi)免在(zai)PCR反(fan)應(ying)管(guan)上(shang)進(jin)行任何標記(ji)。
7. 儀器(qi) 擴(kuo)增相(xiang)關參(can)數應(ying)按照(zhao)本(ben)說(shuo)明(ming)書相(xiang)關要(yao)求進(jin)行設置(zhi)；不(bu)同批(pi)號試劑(ji)不(bu)能混(hun)用。
8. ABI系列熒光定(ding)量(liang)PCR儀參(can)數設置(zhi)中不(bu)選ROX校正，淬滅(mie)基因(yin)選(xuan)擇None。
9. 實(shi)驗過(guo)程(cheng)中產(chan)品的廢棄物(wu)應(ying)該(gai)進行無害化處(chu)理(li)後方(fang)可(ke)丟(diu)棄(qi)。