秦(qin)皮染(ran)料法PCR鑒定試劑盒(he)*

儲(chu)存條(tiao)件(jian)：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品收(shou)集(ji)、處理及保(bao)存方(fang)法(fa)
1. 血(xue)清(qing)：使(shi)用不(bu)含(han)熱(re)原和內毒素的試(shi)管，操作(zuo)過(guo)程中避免任(ren)何細(xi)胞(bao)刺(ci)激，收(shou)集(ji)血(xue)液(ye)後，3000 轉離(li)心10 分鐘(zhong)將血(xue)清(qing)和紅(hong)細胞(bao)迅速(su)小心地(di)分離(li)。
2. 血(xue)漿：EDTA、檸檬酸鹽或(huo)肝素抗(kang)凝(ning)。3000 轉離(li)心30 分鐘(zhong)取上(shang)清(qing)。
3. 細胞(bao)上(shang)清(qing)液(ye)：3000 轉離(li)心10 分鐘(zhong)去除顆(ke)粒和聚合(he)物(wu)。
4. 組(zu)織勻漿：將(jiang)組(zu)織加(jia)入(ru)適量生理(li)鹽水(shui)搗碎(sui)。3000 轉離(li)心10 分鐘(zhong)取上(shang)清(qing)。
5. 保存：如(ru)果(guo)樣(yang)本收(shou)集(ji)後不(bu)及(ji)時檢(jian)測(ce)，請(qing)按壹次用(yong)量分(fen)裝，凍存於(yu)-20℃，避免反復(fu)凍融(rong)，在室(shi)溫(wen)下解凍並(bing)確保樣(yang)品均勻地(di)充分(fen)解(jie)凍。

特(te)點(dian)：
1. 即開即用，用(yong)戶只(zhi)需(xu)要提(ti)供病(bing)毒樣(yang)品。
2. 根據(ju)地(di)黃保守(shou)序(xu)列設(she)計的專(zhuan)壹性引(yin)物，與相(xiang)關(guan)病(bing)毒無交叉(cha)反應。
3. 靈(ling)敏度(du)可(ke)以(yi)達到幾百拷(kao)貝/反應。
4. 壹管(guan)式熒(ying)光定量 PCR 檢(jian)測(ce)，避免後續汙(wu)染(ran)。
5. 本試(shi)劑盒(he)足夠(gou) 50 次 20μL 反應體(ti)系(xi)的熒(ying)光定量 PCR。
6. 本產品只適用於(yu)科(ke)研(yan)，不(bu)能(neng)用(yong)於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷。

使(shi)用方(fang)法(fa)：
壹、樣(yang)品采(cai)集(ji)：
1、食品樣(yang)品：樣(yang)品的采(cai)集(ji)與預(yu)培養(yang)按照樣(yang)品的采(cai)集(ji)與預(yu)培養(yang)按照《食品衛生微生(sheng)物(wu)學(xue)檢(jian)驗(yan)阪(ban)崎腸桿(gan)菌(jun)檢(jian)驗(yan)要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)。
2、血(xue)液(ye)樣(yang)品：用無菌(jun)註(zhu)射(she)器抽取受檢(jian)者靜脈血(xue)2mL，註入(ru)無菌(jun)EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬酸鈉(na))抗(kang)凝(ning)管(guan)，立(li)即混勻。
3、糞便(bian)樣(yang)品：取糞便(bian)置(zhi)於(yu)滅菌(jun)的收(shou)集(ji)管中送(song)檢(jian)。
4、病竈部位(wei)樣(yang)品：取發(fa)病部(bu)位(wei)新(xin)鮮滲出(chu)物、粘液(ye)膿血(xue)送(song)檢(jian)。
壹、稀(xi)釋 PCR 陽性對(dui)照(zhao)（以(yi) 10E2-10E7 拷(kao)貝/μL 這(zhe) 6 個(ge) 10 倍稀釋度(du)為(wei)例(li)）
1. 註意(yi)：由於(yu)標準品濃度(du)非(fei)常(chang)高，因此(ci)下列(lie)稀釋操作(zuo)壹(yi)定要在獨(du)立(li)的區(qu)域進(jin)行(xing)，千萬不(bu)能(neng)汙(wu)染(ran)樣(yang)品或(huo)本試(shi)劑盒(he)的其(qi)他成分(fen)）。為(wei)增加產品穩定性和避免擴(kuo)散(san)傳(chuan)染(ran)性病(bing)原，本產品不(bu)提(ti)供活(huo)體樣(yang)品做陽性對(dui)照(zhao)，只提(ti)供可(ke)以(yi)直接使(shi)用的 DNA段作(zuo)為(wei)陽性對(dui)照(zhao)。
2. 標記(ji) 6 個(ge)離(li)心管(guan)，分別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭分別加(jia)入(ru) 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(ye)（用帶芯(xin)槍(qiang)頭，下同(tong)）。
4. 在 7 號管(guan)中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分鐘(zhong)，得1×10E7 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待(dai)用。
5. 換槍(qiang)頭(tou)，在 6 號管(guan)中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)(上(shang)步(bu)稀(xi)釋所得)，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分鐘(zhong)，得 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待(dai)用。
6. 換槍(qiang)頭(tou)，在 5 號管(guan)中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)到 5 號管(guan)中，充(chong)分(fen)震(zhen)蕩 1 分鐘(zhong)，得 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待(dai)用。
7. 重復(fu)上(shang)面的操作(zuo)直到得(de)到 6 個(ge)稀釋度(du)的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待(dai)用。
註：上(shang)述樣(yang)品建議經過(guo)增菌(jun)後，收(shou)集(ji)培養(yang)物用於(yu)檢(jian)測(ce)。 
二、DNA提(ti)取：
可采(cai)用(yong)PCR試劑盒(he)配(pei)備(bei)的DNA抽提(ti)液(ye)，按以(yi)下說(shuo)明進行(xing)DNA核酸(suan)的粗(cu)提(ti)。也可(ke)采(cai)購(gou)上(shang)海澤(ze)葉生物(wu)科(ke)技(ji)有限公司(si)生(sheng)產的DNA提(ti)取試(shi)劑盒(he)(過(guo)柱法(fa)-熒光配(pei)套(tao))或(huo)其(qi)他合適的商(shang)業化(hua)產品，並(bing)按照相(xiang)應(ying)試(shi)劑盒(he)說明(ming)進(jin)行(xing)操作(zuo)。
1、液(ye)體培養(yang)物：取液(ye)體培養(yang)物100μL加到1.5mL無菌(jun)離(li)心管(guan)中，8000rpm離(li)心3min，盡(jin)量(liang)吸棄(qi)上(shang)清(qing)，加(jia)入50μL DNA抽提(ti)液(ye)充分混勻，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min，取上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反應。
2、固體(ti)培養(yang)物：挑取單克(ke)隆(long)菌(jun)落(luo)與50μL DNA抽提(ti)液(ye)充分混勻，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min，取上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反應。
3、糞便(bian)樣(yang)品：挑取米粒大(da)小(xiao)糞便(bian)於(yu)滅菌(jun)離(li)心管(guan)中，加(jia)入(ru)0.5mL生理(li)鹽水(shui)，振(zhen)蕩混勻，13000rpm離(li)心3分鐘(zhong)，棄(qi)上(shang)清(qing)，沈(chen)澱中加(jia)入(ru)50μL DNA抽提(ti)液(ye)充分混勻，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min取上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反應。
4、其他液(ye)體標本：取標本2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄(qi)上(shang)清(qing)，沈(chen)澱中加(jia)入(ru)50μL DNA抽提(ti)液(ye)充分混勻，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min取上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反應。
註：陽(yang)性對(dui)照(zhao)和陰性對(dui)照(zhao)為已(yi)經(jing)抽提(ti)好的核(he)酸(無需(xu)提(ti)取)，直接取5μL加入(ru)到反應體(ti)系(xi)中即可。由於(yu)陽性對(dui)照(zhao)濃度(du)較(jiao)高，建議在樣(yang)品制備(bei)區(qu)域(yu)加(jia)入陽性對(dui)照(zhao)。 
甲磺(huang)酸(suan)*(標準品)  Dolasetron mesylate   質(zhi)量(liang)規(gui)格：HPLC>99%,標準品 大(da)鼠(shu)可溶(rong)性髓(sui)系細胞觸發受體-2(sEM-2)試劑盒(he) Rat soluble iggering receptor expresses on myeloid cells-2,sEM-2 ELISA Kit

鹽酸(suan)*  Doxepin HCl   質(zhi)量(liang)規(gui)格：>99%,BP2008,BR 英(ying)文名(ming)稱(cheng)RatproteinkinaseBELISAKit大(da)鼠(shu)蛋(dan)白(bai)激酶(mei)B(PKB)規(gui)格：96T/48T

鹽酸(suan)*（標準品）  Doxepin HCl   質(zhi)量(liang)規(gui)格：HPLC>98%,標準品 *(ARG)氧化高效液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)(HPLC)分析(xi)試劑盒(he)20

*  Duloxetine hcl  質(zhi)量(liang)規(gui)格：>99%,BR ELISAKitGTE-AGE人腎(shen)小球(qiu)組(zu)織糖基(ji)化(hua)終末(mo)產物(wu)規(gui)格：48T/96T

*(標準品)  Duloxetine hcl  質(zhi)量(liang)規(gui)格：HPLC>98%,標準品 小鼠(shu)酸脫(tuo)氫(qing)酶(mei)E1(PDH E1)ELISA試劑盒(he) ，英(ying)文名(ming)： PDH E1 ELISA Kit

度(du)他雄胺  Dutasteride  質(zhi)量(liang)規(gui)格：>99%,BR 大(da)鼠(shu)抑(yi)制素結(jie)合(he)蛋(dan)白(bai)(INHBP)ELISA檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)RatInhibinbindingprotein,INHBPELISAKit 96T/48T

度(du)他雄胺(標準品)  Dutasteride  質(zhi)量(liang)規(gui)格：HPLC>98%,標準品 人α乳(ru)清(qing)蛋(dan)白(bai)(α-La)試劑盒(he) Human α-La ELISA Kit

*  Edaravone  質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98.5% 英(ying)文名(ming)稱(cheng)MouseCytochromeCELISAKit小鼠(shu)細胞(bao)色(se)素C(CytochromeC)規(gui)格：96T/48T

*（標準品）  Edaravone  質(zhi)量(liang)規(gui)格：HPLC>98%,標準品 SiRNA大(da)量(liang)SperfusinX脂(zhi)質(zhi)體(ti)靜脈法(fa)動物轉染(ran)試(shi)劑盒(he)10

氫化(hua)奎(kui)寧定;雙氫(qing)奎(kui)尼(ni)丁(ding)  Hydroquinidine  質(zhi)量(liang)規(gui)格：>95% rabbitHistamine,HISELISA試劑盒(he)兔子組(zu)胺(HIS)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T
Decoquinate  18507-89-6  中文(wen)名(ming)：癸(gui)氧喹酯  分子(zi)式：C24H35NO5    兔兒茶(cha)酚胺(CA)ELISA試劑盒(he)  

Quinocetone  81810-66-4  中文(wen)名(ming)：喹烯(xi)酮(tong)  分子(zi)式：C18H14N2O3    兔超(chao)敏C反應蛋(dan)白(bai)(hs-CRP)ELISA試劑盒(he)           

Dimetridazole  551-92-8  中文(wen)名(ming)：二甲硝咪唑(zuo)  分子(zi)式：C4H5N3O2    兔睪(gao)(rabbit TESTO)   作(zuo)用(yong)：   ELISA   規(gui)格：   48T/96T   進口(kou)分裝

Antipyrine  60-80-0  中文(wen)名(ming)：*  分子(zi)式：C11H12N2O    兔抗(kang)酸(suan)性0酸酶(mei)5b(rabbit ACP-5b)   作(zuo)用(yong)：   ELISA   規(gui)格：   48T/96T   進口(kou)分裝

Tiamulin  55297-95-5  中文(wen)名(ming)：泰妙菌(jun)素  分子(zi)式：C28H47NO4S    兔血(xue)栓(shuan)調(tiao)節(jie)蛋(dan)白(bai)(rabbit TM)   作(zuo)用(yong)：   ELISA   規(gui)格：   48T/96T   進口(kou)分裝
普伐(fa)他丁(ding)鈉（標準品）  Pravastatin    質(zhi)量(liang)規(gui)格：HPLC>98%,標準品 RatSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit大(da)鼠(shu)基(ji)質(zhi)細(xi)胞衍(yan)生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

普伐(fa)他丁(ding)鈉  Pravastatin    質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98% RatSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit大(da)鼠(shu)基(ji)質(zhi)細(xi)胞衍(yan)生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

*龍  Prednisolone  質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98.5%,USP/BP RatSomatostatin,SSELISAKit大(da)鼠(shu)*(SS)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

*龍（標準品）  Prednisolone  質(zhi)量(liang)規(gui)格：HPLC>98%,標準品 RatStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAKit大(da)鼠(shu)幹細(xi)胞因子/肥大(da)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

匹莫(mo)範色(se)林(lin)；哌馬(ma)色(se)林(lin)  Pimavanserin;ACP-103  質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98%,5-HT2A高效選(xuan)擇性激(ji)動劑 RatStemCellFactorReceptor,SCFRELISAKit大(da)鼠(shu)幹細(xi)胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

富馬(ma)酸(suan)*  Quetiapine Fumarate  質(zhi)量(liang)規(gui)格：>99% RatSubstanceP,SPELISAKit大(da)鼠(shu)P物質(zhi)(SP)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

富馬(ma)酸(suan)*（標準品）  Quetiapine Fumarate  質(zhi)量(liang)規(gui)格：HPLC>98%,標準品 RatsubstancePreceptor,SP-RELISAKit大(da)鼠(shu)P物質(zhi)受體(SP-R)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

雷特(te)格韋鉀(jia)  Raltegravir K  質(zhi)量(liang)規(gui)格：含量>98.5%,BR RatSuperOxidaseDimase,SODELISAKit大(da)鼠(shu)超(chao)氧化物歧(qi)化(hua)酶(mei)(SOD)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

雷特(te)格韋  Raltegravir  質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98.5%,BR Rattarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit大(da)鼠(shu)抗(kang)酸(suan)性0酸酶(mei)5b(ACP-5b)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

雷帕(pa)黴素/*  Rapamycin(Sirolimus)  質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98.0%,BR,可用(yong)於(yu)細胞(bao)培養(yang) Rattelomerase,TEELISAKit大(da)鼠(shu)端粒(li)酶(mei)(TE)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T
秦(qin)皮染(ran)料法PCR鑒定試劑盒(he)*Metolachlor D6 (propyl D6) 標準品 Palmitoleicacid - 純品型，10mg 特(te)征(zheng)形態(tai) 固態(tai)

4-甲基(ji)戊酸(suan) 標準品 Decafluorotriphenylphosphine 646-07-1 純品型，0.25G 特(te)征(zheng)形態(tai) 固態(tai)

反-β-乙烯(xi) 標準品 PCBNo.204 873-66-5 純品型，1ML 特(te)征(zheng)形態(tai) 固態(tai)
實(shi)驗(yan)流(liu)程(cheng)：
1. 整個(ge)檢(jian)測(ce)過(guo)程應(ying)嚴(yan)格按照本說(shuo)明(ming)書(shu)要求(qiu)分別(bie)在試劑準備區、樣(yang)本處理區和PCR擴增區進(jin)行(xing)操作(zuo)，各(ge)區(qu)實(shi)驗(yan)服(fu)、儀器 、耗(hao)材(cai)應獨(du)立(li)使(shi)用，不(bu)能(neng)混用(yong)；實(shi)驗(yan)用(yong)吸頭采(cai)用(yong)帶(dai)濾芯(xin)吸頭；樣(yang)本處理區應(ying)配(pei)有生物安(an)全櫃，樣(yang)本處理在生(sheng)物(wu)安(an)全櫃中進(jin)行(xing)操作(zuo)；三個(ge)區應(ying)該配(pei)有紫外線殺菌(jun)裝(zhuang)置。
2. 為避免RNA降解，樣(yang)本處理過(guo)程應(ying)在(zai)0-4℃條(tiao)件(jian)下(xia)操作(zuo)，且完成實(shi)驗(yan)後立(li)即上(shang)機(ji)檢(jian)測(ce)；樣(yang)本處理過(guo)程中使(shi)用的器(qi)具(ju)耗(hao)材(cai)應經過(guo)無核酶(mei)處理。

3. 每(mei)次實(shi)驗(yan)應(ying)該設(she)置(zhi)陰、陽(yang)性對(dui)照(zhao)。
4. 試劑盒(he)所有試劑在使(shi)用前(qian)應(ying)該在常(chang)溫(wen)下充分融(rong)化混勻，並(bing)應瞬(shun)時離(li)心。
5. 試劑盒(he)內所配(pei)陰性和陽性對(dui)照(zhao)在壹(yi)次使(shi)用前(qian)應(ying)全部轉移至標本準備區，並(bing)單獨(du)存放(fang)。
6. 為防(fang)止熒光幹(gan)擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管(guan)，並(bing)應避免在(zai)PCR反應管(guan)上(shang)進(jin)行(xing)任(ren)何標記(ji)。
7. 儀器 擴增相(xiang)關(guan)參(can)數應(ying)按(an)照本說(shuo)明(ming)書(shu)相(xiang)關(guan)要(yao)求進(jin)行(xing)設(she)置(zhi)；不(bu)同(tong)批號(hao)試(shi)劑不(bu)能(neng)混用(yong)。
8. ABI系列(lie)熒光定量PCR儀參數設(she)置(zhi)中不(bu)選(xuan)ROX校正(zheng)，淬(cui)滅基(ji)因選擇None。
9. 實(shi)驗(yan)過(guo)程中產品的廢(fei)棄(qi)物應(ying)該進行(xing)無害(hai)化(hua)處理後方(fang)可(ke)丟(diu)棄(qi)。