京大(da)戟探(tan)針法(fa)PCR鑒(jian)定(ding)試(shi)劑(ji)盒(he)*

特(te)點：
1. 即開(kai)即用，用戶(hu)只(zhi)需要(yao)提供病毒樣品。
2. 根據(ju)地黃(huang)保(bao)守(shou)序列(lie)設(she)計(ji)的專(zhuan)壹(yi)性(xing)引物，與相關病毒無(wu)交叉反應。
3. 靈(ling)敏度(du)可(ke)以(yi)達(da)到(dao)幾(ji)百(bai)拷貝/反應。
4. 壹(yi)管式(shi)熒光定(ding)量(liang) PCR 檢(jian)測，避(bi)免(mian)後續(xu)汙(wu)染(ran)。
5. 本(ben)試劑(ji)盒(he)足夠 50 次 20μL 反應體系(xi)的(de)熒光定(ding)量(liang) PCR。
6. 本(ben)產品只(zhi)適用於科(ke)研(yan)，不能(neng)用於臨(lin)床(chuang)診斷。

使用方法(fa)：
壹(yi)、樣品采(cai)集：
1、食(shi)品樣品：樣品的采(cai)集與預培(pei)養(yang)按(an)照樣(yang)品的采(cai)集與預培(pei)養(yang)按(an)照《食(shi)品衛(wei)生(sheng)微生(sheng)物學檢(jian)驗阪崎腸桿菌(jun)檢(jian)驗要(yao)求進(jin)行。
2、血(xue)液樣品：用無菌(jun)註(zhu)射(she)器(qi)抽取(qu)受(shou)檢(jian)者靜脈血2mL，註(zhu)入無菌(jun)EDTA2Na(或(huo)檸檬酸(suan)鈉)抗凝管(guan)，立(li)即混(hun)勻。
3、糞便樣品：取(qu)糞便置於滅菌(jun)的(de)收(shou)集管中送(song)檢(jian)。
4、病(bing)竈部位(wei)樣品：取(qu)發病(bing)部位(wei)新(xin)鮮滲出(chu)物、粘(zhan)液膿血(xue)送(song)檢(jian)。
壹(yi)、稀釋 PCR 陽(yang)性(xing)對照（以(yi) 10E2-10E7 拷(kao)貝/μL 這 6 個(ge) 10 倍(bei)稀釋度(du)為(wei)例(li)）
1. 註(zhu)意：由(you)於(yu)標準品濃度(du)非(fei)常(chang)高(gao)，因(yin)此下列(lie)稀釋操作壹(yi)定(ding)要(yao)在獨立(li)的區(qu)域(yu)進(jin)行，千(qian)萬不能(neng)汙(wu)染樣(yang)品或(huo)本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)的其他成分）。為(wei)增(zeng)加產品穩(wen)定(ding)性(xing)和避(bi)免(mian)擴散(san)傳(chuan)染性(xing)病原(yuan)，本產品不提(ti)供(gong)活體樣(yang)品做(zuo)陽(yang)性(xing)對照，只(zhi)提供(gong)可(ke)以(yi)直(zhi)接(jie)使用的 DNA段(duan)作(zuo)為(wei)陽(yang)性(xing)對照。
2. 標記 6 個(ge)離(li)心(xin)管，分(fen)別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯槍頭分(fen)別加入 45 μL 熒光 PCR 模(mo)板稀釋液（用帶(dai)芯槍頭，下(xia)同）。
4. 在(zai) 7 號(hao)管(guan)中加入 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照，充(chong)分震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照。放(fang)冰上待(dai)用。
5. 換(huan)槍頭，在(zai) 6 號(hao)管(guan)中加入 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(上步(bu)稀釋所(suo)得)，充(chong)分震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照。放(fang)冰上待(dai)用。
6. 換(huan)槍頭，在(zai) 5 號(hao)管(guan)中加入 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照到(dao) 5 號(hao)管(guan)中，充(chong)分震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照。放(fang)冰上待(dai)用。
7. 重復(fu)上面的(de)操作(zuo)直到得到(dao) 6 個(ge)稀釋度(du)的(de)陽(yang)性(xing)對照。放(fang)冰上待(dai)用。
註(zhu)：上述樣(yang)品建議經(jing)過增(zeng)菌後(hou)，收(shou)集培養(yang)物用於檢(jian)測。 
二(er)、DNA提(ti)取(qu)：
可(ke)采(cai)用PCR試(shi)劑(ji)盒(he)配備(bei)的(de)DNA抽(chou)提液，按(an)以(yi)下(xia)說明(ming)進(jin)行DNA核(he)酸(suan)的(de)粗(cu)提(ti)。也可(ke)采(cai)購(gou)上海(hai)澤葉(ye)生(sheng)物科技有限(xian)公(gong)司生(sheng)產的(de)DNA提(ti)取(qu)試劑(ji)盒(he)(過柱(zhu)法(fa)-熒光配(pei)套)或(huo)其他合(he)適的(de)商(shang)業化(hua)產品，並按(an)照相(xiang)應試(shi)劑(ji)盒(he)說明(ming)進(jin)行操(cao)作。
1、液(ye)體培(pei)養物：取(qu)液體培(pei)養物100μL加到1.5mL無(wu)菌離心(xin)管中，8000rpm離(li)心(xin)3min，盡(jin)量吸棄(qi)上清，加入50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反應。
2、固體培(pei)養物：挑(tiao)取(qu)單(dan)克隆(long)菌落與50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反應。
3、糞便樣品：挑(tiao)取(qu)米(mi)粒(li)大(da)小糞便於滅菌(jun)離(li)心(xin)管中，加入0.5mL生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)，振(zhen)蕩混(hun)勻，13000rpm離(li)心(xin)3分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上清，沈澱(dian)中加入50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反應。
4、其他液(ye)體標本：取(qu)標本2-3mL，13000rpm離(li)心(xin)3min，棄(qi)上清，沈澱(dian)中加入50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反應。
註(zhu)：陽(yang)性(xing)對照和陰(yin)性(xing)對照為(wei)已(yi)經(jing)抽提好的核(he)酸(suan)(無(wu)需提取(qu))，直(zhi)接取(qu)5μL加入到(dao)反應體系(xi)中即可(ke)。由(you)於(yu)陽(yang)性(xing)對照濃(nong)度(du)較(jiao)高(gao)，建(jian)議在樣品制備(bei)區(qu)域(yu)加入陽(yang)性(xing)對照。 
實(shi)驗流程(cheng)：
1. 整個(ge)檢(jian)測過程(cheng)應嚴(yan)格(ge)按(an)照本(ben)說明(ming)書要(yao)求分(fen)別在試劑(ji)準(zhun)備(bei)區(qu)、樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)區(qu)和PCR擴增(zeng)區(qu)進(jin)行操(cao)作，各(ge)區(qu)實(shi)驗(yan)服(fu)、儀器(qi) 、耗(hao)材(cai)應獨立(li)使用，不能(neng)混(hun)用；實驗(yan)用吸頭采(cai)用帶(dai)濾芯吸頭；樣(yang)本處理(li)區(qu)應配(pei)有生(sheng)物安全(quan)櫃，樣本(ben)處(chu)理(li)在(zai)生(sheng)物安全(quan)櫃中進(jin)行操(cao)作；三(san)個(ge)區(qu)應該(gai)配(pei)有紫外(wai)線(xian)殺菌裝(zhuang)置。
2. 為(wei)避免(mian)RNA降(jiang)解(jie)，樣本(ben)處(chu)理(li)過程(cheng)應在(zai)0-4℃條(tiao)件下(xia)操(cao)作(zuo)，且完成實驗(yan)後(hou)立(li)即上機檢(jian)測；樣(yang)本處理(li)過程(cheng)中使用的器(qi)具耗(hao)材(cai)應經(jing)過無(wu)核(he)酶(mei)處(chu)理(li)。
3. 每(mei)次實驗(yan)應該(gai)設(she)置陰(yin)、陽(yang)性(xing)對照。
4. 試(shi)劑(ji)盒(he)所(suo)有試劑(ji)在(zai)使用前應該(gai)在(zai)常(chang)溫(wen)下(xia)充(chong)分融化(hua)混(hun)勻，並應瞬時(shi)離(li)心(xin)。
5. 試(shi)劑(ji)盒(he)內所(suo)配陰(yin)性(xing)和陽(yang)性(xing)對照在(zai)壹(yi)次使用前應全(quan)部轉(zhuan)移至標本準(zhun)備(bei)區(qu)，並單(dan)獨存(cun)放(fang)。
6. 為(wei)防止(zhi)熒光幹(gan)擾(rao)，應避(bi)免(mian)裸(luo)手(shou)直接接(jie)觸PCR反應管(guan)，並應避(bi)免(mian)在PCR反應管(guan)上進(jin)行任(ren)何標記。
7. 儀器(qi) 擴增(zeng)相關參數應按(an)照本(ben)說明(ming)書相(xiang)關要(yao)求進(jin)行設(she)置；不同批號(hao)試(shi)劑(ji)不能(neng)混(hun)用。
8. ABI系(xi)列(lie)熒光定(ding)量(liang)PCR儀參數設(she)置中不選(xuan)ROX校(xiao)正(zheng)，淬(cui)滅基因(yin)選(xuan)擇(ze)None。
9. 實(shi)驗過程(cheng)中產品的廢(fei)棄物應該(gai)進(jin)行無(wu)害化(hua)處(chu)理(li)後(hou)方可丟棄(qi)。
儲(chu)存(cun)條(tiao)件：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品收(shou)集、處理(li)及(ji)保(bao)存(cun)方(fang)法(fa)
1. 血(xue)清：使用不含(han)熱(re)原(yuan)和內(nei)毒素的(de)試(shi)管，操(cao)作過程(cheng)中避(bi)免(mian)任(ren)何細(xi)胞(bao)刺(ci)激(ji)，收(shou)集血液(ye)後(hou)，3000 轉(zhuan)離心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血清和紅(hong)細(xi)胞(bao)迅速(su)小心(xin)地分(fen)離(li)。
2. 血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸檬酸(suan)鹽(yan)或(huo)肝(gan)素抗凝。3000 轉(zhuan)離心(xin)30 分(fen)鐘(zhong)取(qu)上清。
3. 細(xi)胞(bao)上清液：3000 轉(zhuan)離心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)去(qu)除顆(ke)粒和聚(ju)合物。
4. 組織(zhi)勻(yun)漿(jiang)：將(jiang)組織(zhi)加入適量(liang)生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)搗碎。3000 轉(zhuan)離心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)取(qu)上清。
5. 保(bao)存(cun)：如(ru)果(guo)樣本收(shou)集後不及(ji)時(shi)檢(jian)測，請(qing)按(an)壹(yi)次用量分(fen)裝(zhuang)，凍(dong)存(cun)於(yu)-20℃，避(bi)免(mian)反復(fu)凍(dong)融，在(zai)室(shi)溫(wen)下解(jie)凍(dong)並確保(bao)樣(yang)品均勻(yun)地充(chong)分(fen)解(jie)凍(dong)。
人侵(qin)襲(xi)性(xing)脈絡膜(mo)色素瘤(liu)細(xi)胞(bao);C918馬來酸(suan)氟(fu)吡汀Flupirtine maleate質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>98%

HuH-7細(xi)胞(bao)，人肝(gan)癌(ai)細(xi)胞(bao) 小鼠(shu)樣瘤(liu)細(xi)胞(bao),P388D1細(xi)胞(bao) 小型豬(zhu)腎細(xi)胞(bao);MPK馬來酸(suan)氟(fu)吡汀(標準品)Flupirtine maleate質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC>98%,標準品

MDA-MB-435S(人導(dao)管癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2氟(fu)維司群Fulvestrant質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>99%,進(jin)分,ER(雌(ci)激素受(shou)體)拮(jie)抗劑(ji)

Promocell C-22121 Endothelial Cell GrowthMedium MV 2 KIT, 內(nei)皮細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)培(pei)養(yang)基MV2套裝(zhuang) 500ml孕(yun)二1酮(tong)Gestodene質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>99%

人雪(xue)旺(wang)細(xi)胞(bao)HSC孕(yun)二1酮(tong)(標準品)Gestodene質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>99%,標準品
L6565 小鼠(shu)白血(xue)病(bing)克隆細(xi)胞(bao)系(xi)二(er)十(shi)八(ba)烷(standard for GC,≥98.5%(GC))質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：standard for GC,≥98.5%(GC)Octacosane

HEC-1-B人內(nei)膜(mo)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao) HEC-1-B human endomeial adecarcima cells MEM培(pei)養基(GIBCO)+10%FBS草(cao)酸(Standard for GC,≥99.6%)質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：Standard for GC,≥99.6%Oxalic acid dihydrate

LGALS1 Protein Rat 重組大(da)鼠 Galectin-1 / LGALS1 蛋白(bai)正(zheng)(Standard for GC,>99.5%(GC))質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：Standard for GC,>99.5%(GC)1-Hexal

小鼠(shu)心(xin)肌細(xi)胞(bao)(MCM)(1×106) QGY-7701, 人肝(gan)癌(ai)細(xi)胞(bao) Human正(zheng)(分(fen)析(xi)標準品,>99.8%(GC))質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：分(fen)析(xi)標準品,>99.8%(GC)1-Hexal

大(da)鼠胰島β細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao);RIN-m5F十(shi)六(liu)醇(chun)(分(fen)析(xi)標準品,≥99.5%(GC))質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：分(fen)析(xi)標準品,≥99.5%(GC)1-Hexadecal
IDS Others Human 人 Iduronate 2-Sulfatase / IDS 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照) 5-羥基鹽酸(suan)心(xin)得安(an)質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國(guo)進(jin)口5-Hydroxy Propralol

中國(guo)倉鼠(shu)卵巢細(xi)胞(bao)系(xi);CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF(R)-4-羥基鹽酸(suan)心(xin)得安(an)質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國(guo)進(jin)口(R)-4-Hydroxy Propralol

NA Others H3N2 甲型流(liu)感(gan) H3N2 (A/Babol/36/2005) 神經(jing)氨(an)酸(suan)酶 (Neuraminidase/NA) 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照) (S)-4-羥基鹽酸(suan)心(xin)得安(an)質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國(guo)進(jin)口(S)-4-Hydroxy Propralol

K562 人慢(man)性(xing)骨髓(sui)性(xing)白血(xue)病細(xi)胞(bao)(+/-)-4-羥基鹽酸(suan)心(xin)得安(an)質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國(guo)進(jin)口(+/-)-4-Hydroxy Propralol

HeLa人細(xi)胞(bao) Human cervix cancer HeLa cells DMEM+10% FBS外(wai)消(xiao)旋西(xi)替(ti)利(li)嗪(qin)N氧化(hua)物（非(fei)對映(ying)）質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國(guo)進(jin)口rac Cetirizine N-Oxide(Mixture of Diastereomers)
京大(da)戟探(tan)針法(fa)PCR鑒(jian)定(ding)試(shi)劑(ji)盒(he)*IFNA4 Others Cymolgus 食(shi)蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照) LeucomalachiteGreen無(wu)色孔雀(que)石綠100克(ke)BS

中國(guo)倉鼠(shu)卵巢細(xi)胞(bao)(亞(ya)系(xi)克(ke)隆(long));CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA酰(xian)基輔(fu)酶A氧化(hua)酶(mei) Acyl Coenzyme A Oxidase (10-40 units/mg) 61116-22-1 500UN 通用試劑(ji)

AR42J細(xi)胞(bao)，人胰腺(xian)細(xi)胞(bao) 人皮(pi)膚(fu)成纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)系(xi),BJ細(xi)胞(bao) 小鼠(shu)神經(jing)母(mu)細(xi)