大腹(fu)皮探(tan)針(zhen)法(fa)PCR鑒(jian)定試(shi)劑(ji)盒(he)直銷(xiao)

特點(dian)：
1. 即(ji)開(kai)即(ji)用，用戶只需(xu)要提(ti)供(gong)病(bing)毒樣品(pin)。
2. 根(gen)據(ju)地(di)黃保(bao)守序(xu)列(lie)設計(ji)的(de)專(zhuan)壹(yi)性引(yin)物，與相(xiang)關(guan)病(bing)毒無(wu)交(jiao)叉反應。
3. 靈(ling)敏(min)度(du)可(ke)以達(da)到(dao)幾百(bai)拷貝/反應。
4. 壹(yi)管(guan)式(shi)熒光定量 PCR 檢測，避(bi)免後續(xu)汙(wu)染(ran)。
5. 本試(shi)劑(ji)盒(he)足夠(gou) 50 次 20μL 反應體(ti)系(xi)的(de)熒光定量 PCR。
6. 本產(chan)品(pin)只適用於科(ke)研(yan)，不(bu)能(neng)用於臨床(chuang)診斷(duan)。

​

使(shi)用方(fang)法(fa)：
壹(yi)、樣品(pin)采集：
1、食(shi)品(pin)樣品(pin)：樣品(pin)的(de)采集與預培(pei)養(yang)按照(zhao)樣品(pin)的(de)采集與預培(pei)養(yang)按照(zhao)《食品(pin)衛(wei)生(sheng)微生(sheng)物學檢驗(yan)阪崎(qi)腸桿菌檢驗(yan)要求(qiu)進行。
2、血(xue)液樣品(pin)：用無(wu)菌註(zhu)射器抽取受(shou)檢者靜(jing)脈(mai)血(xue)2mL，註(zhu)入(ru)無(wu)菌EDTA2Na(或(huo)檸檬(meng)酸鈉(na))抗(kang)凝(ning)管，立即(ji)混勻(yun)。
3、糞便(bian)樣品(pin)：取糞便(bian)置(zhi)於滅(mie)菌的收(shou)集(ji)管(guan)中(zhong)送(song)檢(jian)。
4、病(bing)竈(zao)部(bu)位(wei)樣品(pin)：取發病(bing)部(bu)位(wei)新鮮滲(shen)出物、粘液(ye)膿血(xue)送檢。
壹(yi)、稀(xi)釋(shi) PCR 陽(yang)性對(dui)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這(zhe) 6 個(ge) 10 倍(bei)稀(xi)釋(shi)度為例）
1. 註(zhu)意(yi)：由(you)於標(biao)準(zhun)品(pin)濃度非(fei)常(chang)高，因此(ci)下(xia)列(lie)稀釋(shi)操作(zuo)壹(yi)定要在(zai)獨(du)立的區(qu)域(yu)進行，千(qian)萬(wan)不(bu)能(neng)汙染(ran)樣品(pin)或(huo)本試(shi)劑(ji)盒(he)的其他(ta)成分(fen)）。為增(zeng)加(jia)產(chan)品(pin)穩(wen)定性和(he)避(bi)免擴(kuo)散(san)傳染(ran)性病(bing)原，本產(chan)品(pin)不(bu)提供(gong)活體(ti)樣品(pin)做(zuo)陽(yang)性對(dui)照，只提供(gong)可(ke)以直接(jie)使(shi)用的 DNA段作(zuo)為陽(yang)性對(dui)照。
2. 標(biao)記(ji) 6 個離(li)心管，分(fen)別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭(tou)分(fen)別(bie)加(jia)入(ru) 45 μL 熒光 PCR 模板稀(xi)釋(shi)液（用帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭(tou)，下(xia)同）。
4. 在(zai) 7 號管中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照，充(chong)分(fen)震蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照。放(fang)冰(bing)上(shang)待(dai)用。
5. 換槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 6 號管(guan)中(zhong)加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(上(shang)步(bu)稀釋(shi)所(suo)得(de))，充分(fen)震蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照。放(fang)冰(bing)上(shang)待(dai)用。
6. 換槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 5 號管(guan)中(zhong)加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照到(dao) 5 號(hao)管中(zhong)，充分(fen)震蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照。放(fang)冰(bing)上(shang)待(dai)用。
7. 重(zhong)復上(shang)面(mian)的操作直(zhi)到得(de)到 6 個(ge)稀釋(shi)度的(de)陽(yang)性對(dui)照。放(fang)冰(bing)上(shang)待(dai)用。
註(zhu)：上(shang)述樣品(pin)建(jian)議經過增(zeng)菌後，收(shou)集培(pei)養(yang)物用於檢測。 
二(er)、DNA提取：
可(ke)采用PCR試(shi)劑(ji)盒(he)配(pei)備(bei)的(de)DNA抽提(ti)液，按以下(xia)說(shuo)明(ming)進(jin)行DNA核(he)酸的(de)粗提。也(ye)可(ke)采購上海澤葉(ye)生(sheng)物科(ke)技(ji)有(you)限(xian)公司(si)生(sheng)產(chan)的(de)DNA提取試(shi)劑(ji)盒(he)(過柱(zhu)法(fa)-熒光配(pei)套)或其他(ta)合(he)適的(de)商業(ye)化產(chan)品(pin)，並(bing)按照(zhao)相(xiang)應(ying)試(shi)劑(ji)盒(he)說明進行操(cao)作。
1、液體培(pei)養(yang)物：取液體培(pei)養(yang)物100μL加(jia)到1.5mL無(wu)菌離(li)心管中(zhong)，8000rpm離(li)心3min，盡量(liang)吸(xi)棄(qi)上(shang)清，加(jia)入50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min，取上清5μL進(jin)行PCR反應。
2、固(gu)體培(pei)養(yang)物：挑取單(dan)克(ke)隆(long)菌落(luo)與50μL DNA抽(chou)提(ti)液充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min，取上清5μL進(jin)行PCR反應。
3、糞(fen)便(bian)樣品(pin)：挑取米粒大小糞便(bian)於滅(mie)菌離(li)心管中(zhong)，加入(ru)0.5mL生(sheng)理鹽(yan)水，振蕩混(hun)勻(yun)，13000rpm離(li)心3分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上清，沈澱中(zhong)加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液充分(fen)混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min取上清5μL進(jin)行PCR反應。
4、其(qi)他(ta)液(ye)體標(biao)本：取標(biao)本2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄上(shang)清(qing)，沈澱中(zhong)加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液充分(fen)混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min取上清5μL進(jin)行PCR反應。
註(zhu)：陽(yang)性對(dui)照和(he)陰(yin)性對(dui)照為已(yi)經抽(chou)提好(hao)的核(he)酸(無(wu)需(xu)提取)，直接(jie)取5μL加入(ru)到(dao)反應體(ti)系(xi)中(zhong)即(ji)可(ke)。由(you)於陽(yang)性對(dui)照濃度較(jiao)高，建(jian)議在樣品(pin)制備區(qu)域(yu)加入陽(yang)性對(dui)照。 
實(shi)驗(yan)流程(cheng)：
1. 整個檢(jian)測(ce)過程(cheng)應(ying)嚴格(ge)按照(zhao)本說明(ming)書(shu)要求(qiu)分(fen)別(bie)在(zai)試(shi)劑(ji)準(zhun)備區(qu)、樣本處理區(qu)和(he)PCR擴增(zeng)區(qu)進(jin)行操(cao)作，各(ge)區(qu)實(shi)驗(yan)服、儀器 、耗材應(ying)獨立(li)使(shi)用，不(bu)能(neng)混用；實(shi)驗(yan)用吸頭采用帶(dai)濾芯(xin)吸(xi)頭(tou)；樣本處理區(qu)應(ying)配(pei)有(you)生(sheng)物安(an)全櫃(gui)，樣本處理在(zai)生(sheng)物安(an)全櫃(gui)中(zhong)進行操(cao)作；三(san)個(ge)區(qu)應(ying)該配(pei)有(you)紫(zi)外線(xian)殺菌裝(zhuang)置(zhi)。
2. 為避(bi)免RNA降(jiang)解(jie)，樣本處理過程(cheng)應(ying)在0-4℃條(tiao)件下(xia)操(cao)作(zuo)，且(qie)完(wan)成實(shi)驗(yan)後立(li)即(ji)上機(ji)檢(jian)測(ce)；樣本處理過程(cheng)中(zhong)使(shi)用的器具耗材應(ying)經過無(wu)核(he)酶處理。
3. 每次(ci)實(shi)驗(yan)應該(gai)設置(zhi)陰(yin)、陽(yang)性對(dui)照。
4. 試(shi)劑(ji)盒(he)所(suo)有試(shi)劑(ji)在(zai)使(shi)用前應該在(zai)常(chang)溫(wen)下(xia)充(chong)分(fen)融(rong)化混勻，並應(ying)瞬(shun)時(shi)離(li)心。
5. 試(shi)劑(ji)盒(he)內所(suo)配(pei)陰(yin)性和(he)陽(yang)性對(dui)照在(zai)壹(yi)次(ci)使(shi)用前應全部(bu)轉移(yi)至標(biao)本準備(bei)區(qu)，並(bing)單(dan)獨存(cun)放(fang)。
6. 為防止熒光幹擾，應避(bi)免裸(luo)手直接接(jie)觸PCR反應管(guan)，並應(ying)避(bi)免在(zai)PCR反應管(guan)上進(jin)行任(ren)何標(biao)記(ji)。
7. 儀器 擴增(zeng)相(xiang)關(guan)參(can)數(shu)應(ying)按照(zhao)本說明(ming)書(shu)相(xiang)關(guan)要(yao)求(qiu)進(jin)行設置(zhi)；不(bu)同批號(hao)試(shi)劑(ji)不(bu)能(neng)混用。
8. ABI系(xi)列(lie)熒光定量PCR儀參數(shu)設置(zhi)中不(bu)選(xuan)ROX校(xiao)正，淬(cui)滅(mie)基(ji)因(yin)選(xuan)擇(ze)None。
9. 實(shi)驗(yan)過程(cheng)中(zhong)產(chan)品(pin)的(de)廢棄(qi)物應(ying)該進行無(wu)害(hai)化處理後方(fang)可(ke)丟(diu)棄。
儲(chu)存條(tiao)件：
14℃或－20℃樣品(pin)收(shou)集、處理及保存方(fang)法(fa)
1. 血(xue)清：使(shi)用不(bu)含(han)熱(re)原和內毒素(su)的(de)試(shi)管(guan)，操作過程(cheng)中(zhong)避(bi)免任(ren)何細(xi)胞刺(ci)激，收集(ji)血(xue)液後，3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血(xue)清和紅細(xi)胞迅(xun)速(su)小心地(di)分(fen)離(li)。
2. 血(xue)漿：EDTA、檸檬(meng)酸鹽(yan)或(huo)肝素(su)抗(kang)凝。3000 轉離(li)心30 分(fen)鐘(zhong)取上清。
3. 細(xi)胞上(shang)清(qing)液：3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)去除(chu)顆粒和聚合(he)物。
4. 組(zu)織勻漿：將組(zu)織加入適量(liang)生(sheng)理鹽(yan)水搗碎(sui)。3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)取上清。
5. 保(bao)存(cun)：如果(guo)樣本收集(ji)後不(bu)及時(shi)檢測(ce)，請(qing)按壹(yi)次(ci)用量分(fen)裝(zhuang)，凍(dong)存於(yu)-20℃，避(bi)免反復凍(dong)融，在(zai)室溫(wen)下(xia)解(jie)凍(dong)並確(que)保樣品(pin)均(jun)勻(yun)地(di)充分(fen)解(jie)凍(dong)。
Promocell C-26130 Renal Epithelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 腎上皮細(xi)胞生(sheng)長培(pei)養(yang)基(ji)2型(xing)套裝(zhuang) 500ml羥乙(yi)基(ji)纖(xian)維(wei)素(20000~30000 mpa.s)Hydroxyethyl Cellulose質量規格(ge)：粘度(du)20000~30000 mpa.s

少突(tu)膠(jiao)質(zhi)前體細(xi)胞培(pei)養(yang)基(ji)OPCM-prf羥(qiang)乙(yi)基(ji)纖(xian)維(wei)素(5500-6500 mpa.s)Hydroxyethyl Cellulose質量規格(ge)：粘度(du)5500-6500 mpa.s

HA Others H5N1 甲型(xing)流感(gan) H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血(xue)凝素HA1 (Hemagglutinin) 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照) 羥(qiang)乙(yi)基(ji)纖(xian)維(wei)素(40~60 mpa.s)Hydroxyethyl Cellulose質量規格(ge)：粘度(du)40~60 mpa.s

Sars結(jie)構蛋白(bai)表達(da)株(zhu);293 001A異丙(bing)基(ji)-β-D-硫(liu)代(dai)半乳糖(tang)苷(IPTG)Isopropyl β-D-thiogalactoside質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%,BR

大鼠(shu)嗜(shi)堿性粒細(xi)胞性白(bai)血(xue)病(bing)細(xi)胞;RBL-1 膠(jiao)質(zhi)母(mu)細(xi)胞瘤細(xi)胞，A172細(xi)胞 Tb 1 Lu細(xi)胞，蝙(bian)蝠肺細(xi)胞甘(gan)露(lu)糖(tang)；D-甘(gan)露(lu)糖(tang)D-Manse質量規格(ge)：>99%,BR
M-NFS-60 (小鼠白(bai)血(xue)病(bing)細(xi)胞G-CSF依賴(lai)性) 5×106cells/瓶(ping)×2 腎系(xi)膜細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)2-氨(an)基(ji)-6-嘌(piao)呤-9-D-核(he)苷水合(he)物2-Ami-6-mercaptopurine-9-D-riboside Hydrate質(zhi)量規(gui)格(ge)：美國(guo)進口(kou)

人Butt瘤細(xi)胞;RAJIS-甲基(ji)-3-硫(liu)代(dai)S-Methyl-3-thioacetamiphen質量規(gui)格(ge)：美國(guo)進口(kou)

DDR2 Others Rat 大鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照) 2-羥(qiang)基(ji)2-Hydroxy Nevirapine質(zhi)量(liang)規格(ge)：美國(guo)進口(kou)

人胎盤滋養(yang)層(ceng)細(xi)胞*培(pei)養(yang)基(ji) 100mL3-羥(qiang)基(ji)3-Hydroxy Nevirapine質(zhi)量(liang)規格(ge)：美國(guo)進口(kou)

SAC-II C3細(xi)胞，小鼠腹水瘤細(xi)胞 NRK(大鼠(shu)腎(shen)細(xi)胞) 人胚(pei)胎膀(pang)胱(guang)組(zu)織來源(yuan)細(xi)胞;CCC-HB-24-亞硝基(ji)磺(huang)胺(an)甲惡(e)唑(zuo)4-Nitroso Sulfamethoxazole質量規格(ge)：美國(guo)進口(kou)
NCI-H358(人非(fei)小細(xi)胞肺癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 PC-12(腎上(shang)腺嗜鉻(ge)細(xi)胞瘤細(xi)胞)富(fu)馬酸酮(tong)替芬質(zhi)量規(gui)格(ge)：>99%,BRKetotifen fumarate

CL-0464USMC(大鼠(shu)血(xue)管平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2富(fu)馬酸酮(tong)替芬(標(biao)準(zhun)品(pin))質(zhi)量規(gui)格(ge)：HPLC>98%,標(biao)準(zhun)品(pin)Ketotifen fumarate

CD44 Others Human 人(ren) CD44 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照) 倍(bei)他(ta)米(mi)質量(liang)規格(ge)：>98% Betamethasone

人肝(gan)內膽(dan)管(guan)上皮(pi)細(xi)胞RNAHIBEpiC miRNA5 μg倍(bei)他(ta)米(mi)（標(biao)準(zhun)品(pin)）質(zhi)量規(gui)格(ge)：HPLC>98% ,標(biao)準(zhun)品(pin)Betamethasone

5637(HTB-9)細(xi)胞，人(ren)膀(pang)胱(guang)癌(ai)細(xi)胞 大鼠(shu)肝(gan)癌(ai)細(xi)胞(癌細(xi)胞接(jie)種到(dao)肝臟成瘤),Walker-256細(xi)胞 MLF, 小鼠成纖維(wei)細(xi)胞比(bi)阿培(pei)南(nan)質(zhi)量規(gui)格(ge)：度>97%Biapenem
大(da)腹(fu)皮(pi)探(tan)針(zhen)法(fa)PCR鑒(jian)定試(shi)劑(ji)盒(he)直銷(xiao)人成纖維(wei)母(mu)細(xi)胞-HDF-a2'-(二(er)芐(bian)氨基(ji))-6'-(二(er)乙(yi)氨(an)基(ji))熒烷(wan)(>98.0%(HPLC)(T))質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98.0%(HPLC)(T)2'-(Dibenzylami)-6'-(diethylami)fluoran

CGB5 Others Human 人 CGB5 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照) 3',6'-二(er)甲(jia)氧基(ji)熒烷(wan)(>98.0%(HPLC))質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98.0%(HPLC)3',6'-Dimethoxyfluoran

家(jia)兔骨(gu)髓(sui)間充(chong)質幹細(xi)胞;2012083MSC1,1'-亞甲(jia)基(ji)二(er)-2-萘酚(fen)(>97