花(hua)椒染(ran)料(liao)法(fa)PCR鑒(jian)定試(shi)劑盒直(zhi)銷

儲存條件(jian)：
14℃或(huo)－20℃樣品收(shou)集(ji)、處理(li)及保(bao)存方法
1. 血清(qing)：使(shi)用(yong)不含熱(re)原和(he)內(nei)毒(du)素(su)的試(shi)管，操作(zuo)過(guo)程中避(bi)免任何細胞(bao)刺激(ji)，收(shou)集(ji)血液後，3000 轉離(li)心(xin)10 分鐘將血(xue)清(qing)和(he)紅(hong)細胞(bao)迅速(su)小心(xin)地分離(li)。
2. 血漿：EDTA、檸(ning)檬酸(suan)鹽或(huo)肝(gan)素(su)抗凝(ning)。3000 轉離(li)心(xin)30 分鐘取(qu)上清(qing)。
3. 細胞(bao)上清(qing)液：3000 轉離(li)心(xin)10 分鐘去除顆粒(li)和聚(ju)合(he)物。
4. 組織勻(yun)漿(jiang)：將組織加入(ru)適量生(sheng)理(li)鹽水(shui)搗(dao)碎(sui)。3000 轉離(li)心(xin)10 分鐘取(qu)上清(qing)。
5. 保(bao)存：如果樣本(ben)收(shou)集(ji)後不及時檢測(ce)，請按(an)壹(yi)次(ci)用量分裝，凍存於-20℃，避(bi)免反復凍融，在室溫(wen)下(xia)解凍並(bing)確保(bao)樣品均勻(yun)地(di)充分解凍。

特(te)點：
1. 即(ji)開即(ji)用，用(yong)戶只需要(yao)提供(gong)病(bing)毒(du)樣品。
2. 根據(ju)地黃(huang)保(bao)守序列(lie)設(she)計的(de)專(zhuan)壹(yi)性(xing)引(yin)物，與(yu)相(xiang)關病(bing)毒無交(jiao)叉反應(ying)。
3. 靈(ling)敏(min)度(du)可以(yi)達(da)到(dao)幾(ji)百(bai)拷貝/反應(ying)。
4. 壹(yi)管(guan)式熒(ying)光定(ding)量 PCR 檢測(ce)，避(bi)免後續汙(wu)染(ran)。
5. 本試(shi)劑盒足(zu)夠(gou) 50 次 20μL 反應(ying)體系的熒(ying)光(guang)定量 PCR。
6. 本產品只適用(yong)於科研，不能用(yong)於臨床診(zhen)斷(duan)。

​

使(shi)用(yong)方法：
壹(yi)、樣品采(cai)集：
1、食(shi)品樣品：樣品的采(cai)集與(yu)預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照(zhao)樣品的采(cai)集與(yu)預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照(zhao)《食(shi)品衛(wei)生(sheng)微(wei)生(sheng)物學(xue)檢(jian)驗阪(ban)崎(qi)腸桿菌檢驗(yan)要(yao)求進行(xing)。
2、血液樣品：用無菌註射(she)器抽(chou)取(qu)受(shou)檢者(zhe)靜脈血2mL，註入無菌EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬酸(suan)鈉)抗凝管，立(li)即(ji)混勻(yun)。
3、糞便樣品：取(qu)糞(fen)便置於滅菌的收(shou)集(ji)管中送檢(jian)。
4、病竈部位(wei)樣品：取(qu)發病(bing)部位(wei)新鮮滲(shen)出(chu)物、粘(zhan)液膿血送(song)檢(jian)。
壹(yi)、稀釋(shi) PCR 陽性對照（以(yi) 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋(shi)度(du)為例）
1. 註意：由於標準品濃(nong)度(du)非常(chang)高(gao)，因此(ci)下(xia)列稀釋(shi)操作(zuo)壹(yi)定(ding)要(yao)在獨立的(de)區域進行(xing)，千萬(wan)不能汙(wu)染(ran)樣品或(huo)本(ben)試(shi)劑盒的(de)其他(ta)成分）。為增(zeng)加產(chan)品穩(wen)定性(xing)和避(bi)免擴(kuo)散傳(chuan)染(ran)性(xing)病(bing)原，本(ben)產(chan)品不提供(gong)活(huo)體樣品做陽性對照，只(zhi)提(ti)供(gong)可以(yi)直接使(shi)用(yong)的(de) DNA段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離(li)心(xin)管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯槍頭(tou)分別加入(ru) 45 μL 熒光 PCR 模(mo)板稀釋(shi)液（用帶(dai)芯槍頭(tou)，下(xia)同）。
4. 在 7 號管中加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充(chong)分震蕩(dang) 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放(fang)冰上待用。
5. 換槍頭(tou)，在(zai) 6 號管中加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋(shi)所(suo)得)，充分震蕩(dang) 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放(fang)冰上待用。
6. 換槍頭(tou)，在(zai) 5 號管中加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到(dao) 5 號管中，充(chong)分震蕩(dang) 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放(fang)冰上待用。
7. 重復上面的操作(zuo)直(zhi)到得到 6 個稀釋(shi)度(du)的陽性對照。放(fang)冰上待用。
註：上述(shu)樣品建議(yi)經(jing)過(guo)增(zeng)菌後，收(shou)集(ji)培養(yang)物用(yong)於檢測(ce)。 
二、DNA提取(qu)：
可采(cai)用PCR試(shi)劑盒配(pei)備(bei)的DNA抽(chou)提(ti)液，按以(yi)下(xia)說明進(jin)行(xing)DNA核(he)酸的(de)粗提(ti)。也(ye)可采(cai)購上海澤(ze)葉(ye)生(sheng)物科技有(you)限(xian)公(gong)司(si)生(sheng)產(chan)的DNA提取(qu)試(shi)劑盒(過(guo)柱法(fa)-熒光配套)或(huo)其(qi)他(ta)合(he)適(shi)的商(shang)業化(hua)產(chan)品，並按照(zhao)相(xiang)應(ying)試(shi)劑盒說明進(jin)行(xing)操作(zuo)。
1、液體培養(yang)物：取(qu)液體培養(yang)物100μL加到(dao)1.5mL無菌離(li)心(xin)管中(zhong)，8000rpm離(li)心(xin)3min，盡(jin)量吸棄上清(qing)，加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液充分混勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
2、固體培養(yang)物：挑(tiao)取(qu)單克(ke)隆菌落與(yu)50μL DNA抽(chou)提(ti)液充分混勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
3、糞便樣品：挑(tiao)取(qu)米(mi)粒(li)大小糞(fen)便於滅菌離(li)心(xin)管中(zhong)，加入(ru)0.5mL生(sheng)理(li)鹽水(shui)，振(zhen)蕩(dang)混勻(yun)，13000rpm離(li)心(xin)3分鐘，棄上清(qing)，沈(chen)澱中加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液充分混勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
4、其他液體標本：取(qu)標本2-3mL，13000rpm離(li)心(xin)3min，棄上清(qing)，沈(chen)澱中加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液充分混勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
註：陽性對照和(he)陰性對(dui)照(zhao)為已經(jing)抽(chou)提(ti)好(hao)的核(he)酸(無需提取(qu))，直接取(qu)5μL加入(ru)到反應(ying)體系中即(ji)可。由(you)於陽性對照濃(nong)度(du)較高(gao)，建(jian)議(yi)在(zai)樣品制備(bei)區域加入(ru)陽性對照。 
大鼠(shu)氣管(guan)上皮(pi)細(xi)胞(bao);RTE 慢(man)性(xing)髓原白(bai)血病細胞(bao)，K-562細胞(bao) P3X63Ag8.653細胞(bao)，小鼠(shu)骨(gu)髓瘤細(xi)胞(bao)羥(qiang)基基Hydroxy Itraconazole質量規格(ge)：美(mei)國(guo)進(jin)口

ACHN, 人(ren)腎細胞(bao)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao) Human反式(shi)trans Itraconazole質量規格(ge)：美(mei)國(guo)進(jin)口

CRTAM Others Human 人(ren) CRTAM 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽性對照) -d5Itraconazole-d5質量規格(ge)：美(mei)國(guo)進(jin)口

上皮(pi)細(xi)胞(bao)培養(yang)基MEpiCM酮(tong)基Keto Itraconazole質量規格(ge)：美(mei)國(guo)進(jin)口

CA1 Others Human 人(ren) CA1 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽性對照) -d4Fluconazole-d4質量規格(ge)：美(mei)國(guo)進(jin)口
HBZY-1細胞(bao)，人(ren)腎小球(qiu)髓(sui)母細胞(bao) 大鼠(shu)埀(埀)體瘤細胞(bao),GH3細胞(bao) CL-0210SiHa(人(ren)頸鱗癌細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2鈉Cefoperazone 質量規格(ge)：870μg-1015μg /mg,USP,BR

Vero(非洲(zhou)綠(lv)猴腎細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2鈉(標準品)Cefoperazone 質量規格(ge)：效價測(ce)定

NHEM-c M2 adult 正常(chang)人(ren)表(biao)皮(pi)素(su)細胞(bao)(NHEM)成年(nian)捐(juan)獻(xian)者(zhe)(M2培養(yang)液中培養(yang)) 500,000cells 胎(tai)盤(pan)羊膜(mo)細胞(bao)Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)2-甲基吲哚(duo)(>97%，BR)2-Methylindole質量規格(ge)：>97%，BR

骨細胞(bao)Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)硫酸銨(an)鋁(lv)十(shi)二水(shui)(>98%,BR)Aluminum ammonium sulfate, dodecahydrate質量規格(ge)：>98%,BR

GLYCOPROTEIN Others Sudan ebolavirus 蘇丹埃博拉病毒(du) Glycoprotein / GP 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽性對照) AMP緩沖液(>98%,BR)AMP buffer concentrate質量規格(ge)：>98%,BR
MZB1 Others Human 人(ren) MZB1 / PERP1 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽性對照) 膽(dan)酸(suan)(標準品)質量規格(ge)：HPLC≥98%，標準品Cholic acid

大鼠(shu)肺(fei)泡巨噬細胞(bao);NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]黨參(can)炔(que)苷(gan)（標準品）質量規格(ge)：僅供(gong)鑒(jian)別(bie)用(yong)Lobetyolin

PLC/PRF/5細胞(bao)，人(ren)肺癌(ai)亞歷(li)山大細(xi)胞(bao)系 小鼠(shu)胚(pei)成纖維(wei)包裝(zhuang)細胞(bao),PA317細胞(bao) CL-0018A9(小鼠(shu)皮(pi)下(xia)結締(di)組織細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2α-倒撚子素(su)(標準品)質量規格(ge)：HPLC≥98%,標準品α-mangostin

SPC-A-1(人(ren)肺癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2(標準品)質量規格(ge)：HPLC≥98%，標準品Diosimin

HDMEC-c adult 人(ren)微血(xue)管內(nei)皮(pi)細(xi)胞(bao)(HDMEC)來自(zi)成年(nian)捐(juan)獻(xian)者(zhe) 500,000cells 肝竇內(nei)皮(pi)細(xi)胞(bao)Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)質量規格(ge)：美(mei)國(guo)進(jin)口Choline Fefibrate
花椒染(ran)料(liao)法(fa)PCR鑒定試(shi)劑盒直(zhi)銷MM, 小鼠(shu)小膠(jiao)質細(xi)胞(bao) R3細胞(bao) C2C12(人(ren)肌肉成纖維(wei)細胞(bao)瘤)變色酸二(er)鈉鹽5克(ke)2～8℃

人(ren)細胞(bao);Hela 229 [HeLa229]茜(qian)速(su)絡(luo)合指(zhi)示劑(ji);茜(qian)速(su)安羧(suo)絡(luo)合劑(ji);3-茜(qian)速(su)基安-N,N-二醋(cu);茜(qian)速(su)絡(luo)合劑(ji) clizcrin coMplqxonq;clizcrin fluorin bluq;clizcrin-3-MqthylcMinq-N,N-diccqtic ccid;[(3,4-Dixy7xy-2-cnthrcineonyl)Mqthyl]iMidiccqtic ccid 392-78-1

SMYD3
實驗(yan)流(liu)程：
1. 整個檢(jian)測(ce)過(guo)程應(ying)嚴(yan)格按(an)照本說明書(shu)要(yao)求分別在(zai)試(shi)劑準(zhun)備(bei)區、樣本(ben)處(chu)理(li)區和PCR擴(kuo)增(zeng)區進行(xing)操作(zuo)，各(ge)區實驗(yan)服、儀器 、耗(hao)材應(ying)獨立使(shi)用(yong)，不能混用；實驗(yan)用(yong)吸頭(tou)采(cai)用帶(dai)濾芯吸頭(tou)；樣本(ben)處(chu)理(li)區應(ying)配有(you)生(sheng)物安全(quan)櫃，樣本(ben)處(chu)理(li)在生(sheng)物安全(quan)櫃中(zhong)進行(xing)操作(zuo)；三個區應(ying)該配有(you)紫(zi)外線殺菌裝置。
2. 為避(bi)免RNA降解，樣本(ben)處(chu)理(li)過(guo)程應(ying)在0-4℃條件(jian)下(xia)操作(zuo)，且(qie)完(wan)成實驗(yan)後(hou)立(li)即(ji)上機檢測(ce)；樣本(ben)處(chu)理(li)過(guo)程中使(shi)用(yong)的(de)器具(ju)耗(hao)材應(ying)經過(guo)無核(he)酶處理(li)。

3. 每(mei)次實驗(yan)應(ying)該設(she)置陰、陽性對照。
4. 試(shi)劑盒所(suo)有(you)試(shi)劑在(zai)使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)該在常(chang)溫(wen)下(xia)充分融化(hua)混勻(yun)，並(bing)應(ying)瞬(shun)時離(li)心(xin)。
5. 試(shi)劑盒內(nei)所(suo)配陰性和(he)陽性對照在(zai)壹(yi)次(ci)使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)全(quan)部轉(zhuan)移(yi)至標本準備(bei)區，並單獨存放(fang)。
6. 為防止熒光幹(gan)擾(rao)，應(ying)避(bi)免裸手直(zhi)接接觸PCR反應(ying)管，並應(ying)避(bi)免在PCR反應(ying)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴(kuo)增(zeng)相(xiang)關參(can)數(shu)應(ying)按照本說明書(shu)相關要(yao)求進行(xing)設(she)置；不同批(pi)號試(shi)劑不能混用。
8. ABI系列熒(ying)光(guang)定量PCR儀參(can)數(shu)設(she)置中(zhong)不選(xuan)ROX校正，淬滅基因選(xuan)擇(ze)None。
9. 實驗(yan)過(guo)程中產品的廢棄(qi)物應(ying)該進行無(wu)害(hai)化(hua)處(chu)理(li)後方可丟(diu)棄(qi)。