人參(can)探針(zhen)法PCR鑒(jian)定試劑(ji)盒*

儲(chu)存(cun)條件：
14℃或－20℃樣(yang)品收集、處(chu)理(li)及保(bao)存方(fang)法
1. 血(xue)清：使用(yong)不(bu)含(han)熱(re)原(yuan)和內(nei)毒(du)素(su)的(de)試管，操(cao)作過程(cheng)中(zhong)避免任(ren)何(he)細胞刺(ci)激(ji)，收集血(xue)液(ye)後，3000 轉(zhuan)離(li)心10 分(fen)鐘將(jiang)血(xue)清和紅細胞迅速(su)小(xiao)心地(di)分離(li)。
2. 血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬酸鹽或肝素(su)抗凝(ning)。3000 轉(zhuan)離(li)心30 分(fen)鐘取(qu)上(shang)清。
3. 細(xi)胞上(shang)清液(ye)：3000 轉(zhuan)離(li)心10 分(fen)鐘去(qu)除(chu)顆(ke)粒和聚(ju)合物(wu)。
4. 組織勻(yun)漿(jiang)：將(jiang)組織加入(ru)適(shi)量生理(li)鹽(yan)水搗(dao)碎。3000 轉(zhuan)離(li)心10 分(fen)鐘取(qu)上(shang)清。
5. 保(bao)存：如果(guo)樣(yang)本(ben)收集後不及時檢(jian)測(ce)，請(qing)按(an)壹(yi)次用(yong)量分裝(zhuang)，凍(dong)存(cun)於(yu)-20℃，避(bi)免反(fan)復(fu)凍(dong)融，在(zai)室溫下(xia)解(jie)凍並(bing)確保(bao)樣(yang)品均(jun)勻(yun)地(di)充分(fen)解(jie)凍。

特點：
1. 即(ji)開即(ji)用(yong)，用(yong)戶只(zhi)需要(yao)提(ti)供病毒樣(yang)品。
2. 根(gen)據(ju)地(di)黃(huang)保(bao)守(shou)序列(lie)設計的(de)專壹(yi)性引(yin)物(wu)，與(yu)相(xiang)關病毒無交(jiao)叉(cha)反應(ying)。
3. 靈敏度可以達到幾(ji)百拷(kao)貝(bei)/反(fan)應。
4. 壹(yi)管式(shi)熒光(guang)定量 PCR 檢(jian)測(ce)，避免後續汙染(ran)。
5. 本(ben)試劑(ji)盒足夠(gou) 50 次 20μL 反(fan)應體系(xi)的(de)熒光(guang)定量 PCR。
6. 本(ben)產品只(zhi)適(shi)用於科研，不能用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)。

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使(shi)用方(fang)法：
壹(yi)、樣(yang)品采集：
1、食(shi)品樣(yang)品：樣(yang)品的(de)采集與(yu)預(yu)培養按(an)照(zhao)樣(yang)品的(de)采集與(yu)預(yu)培養按(an)照(zhao)《食(shi)品衛生微(wei)生物(wu)學檢驗(yan)阪崎腸(chang)桿(gan)菌檢驗(yan)要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)。
2、血(xue)液(ye)樣(yang)品：用無(wu)菌註(zhu)射器抽(chou)取(qu)受檢者(zhe)靜脈血(xue)2mL，註(zhu)入無(wu)菌EDTA2Na(或檸(ning)檬酸鈉)抗凝(ning)管，立(li)即(ji)混(hun)勻(yun)。
3、糞(fen)便樣(yang)品：取(qu)糞(fen)便置於(yu)滅菌的(de)收集管中(zhong)送檢。
4、病竈(zao)部(bu)位(wei)樣(yang)品：取(qu)發病部位新(xin)鮮滲(shen)出物(wu)、粘(zhan)液(ye)膿血(xue)送檢。
壹(yi)、稀釋 PCR 陽(yang)性對(dui)照(zhao)（以(yi) 10E2-10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 這 6 個(ge) 10 倍(bei)稀釋度(du)為例）
1. 註(zhu)意：由(you)於(yu)標(biao)準(zhun)品濃度(du)非(fei)常(chang)高，因此下(xia)列(lie)稀(xi)釋操(cao)作壹定要(yao)在(zai)獨(du)立(li)的(de)區域(yu)進(jin)行(xing)，千(qian)萬不能汙染(ran)樣(yang)品或本(ben)試劑(ji)盒的(de)其他(ta)成(cheng)分(fen)）。為增加產(chan)品穩定性和避(bi)免擴散(san)傳染(ran)性病原(yuan)，本(ben)產品不提(ti)供活體樣(yang)品做陽(yang)性對(dui)照(zhao)，只(zhi)提(ti)供可以(yi)直接使用的(de) DNA段(duan)作為陽(yang)性對(dui)照(zhao)。
2. 標(biao)記(ji) 6 個(ge)離(li)心管，分(fen)別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶芯槍頭(tou)分別(bie)加入(ru) 45 μL 熒(ying)光 PCR 模(mo)板(ban)稀(xi)釋液(ye)（用(yong)帶(dai)芯(xin)槍頭(tou)，下(xia)同(tong)）。
4. 在(zai) 7 號(hao)管中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)，充分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得(de)1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待用。
5. 換(huan)槍頭(tou)，在(zai) 6 號(hao)管中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)(上(shang)步稀釋所(suo)得(de))，充分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待用。
6. 換(huan)槍頭(tou)，在(zai) 5 號(hao)管中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)到(dao) 5 號(hao)管中(zhong)，充分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待用。
7. 重(zhong)復(fu)上(shang)面(mian)的(de)操作直到得(de)到(dao) 6 個(ge)稀釋度(du)的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待用。
註(zhu)：上(shang)述樣(yang)品建議(yi)經(jing)過增菌後，收集培(pei)養物(wu)用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)。 
二(er)、DNA提(ti)取(qu)：
可(ke)采用PCR試劑(ji)盒配備的(de)DNA抽(chou)提(ti)液(ye)，按(an)以(yi)下(xia)說(shuo)明進(jin)行(xing)DNA核(he)酸(suan)的(de)粗提(ti)。也(ye)可采購上(shang)海(hai)澤(ze)葉(ye)生物(wu)科技有限(xian)公(gong)司(si)生產(chan)的(de)DNA提(ti)取(qu)試劑(ji)盒(過(guo)柱法-熒(ying)光配套)或其(qi)他(ta)合適(shi)的(de)商業化(hua)產品，並按(an)照(zhao)相(xiang)應試劑(ji)盒說(shuo)明進(jin)行(xing)操作。
1、液(ye)體培(pei)養物(wu)：取(qu)液(ye)體培(pei)養物(wu)100μL加到(dao)1.5mL無(wu)菌離(li)心管中(zhong)，8000rpm離(li)心3min，盡量吸棄(qi)上(shang)清，加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應。
2、固(gu)體培(pei)養物(wu)：挑(tiao)取(qu)單(dan)克(ke)隆(long)菌落(luo)與50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應。
3、糞(fen)便樣(yang)品：挑(tiao)取(qu)米(mi)粒大(da)小(xiao)糞(fen)便於(yu)滅菌離(li)心管中(zhong)，加入(ru)0.5mL生理(li)鹽(yan)水，振蕩(dang)混(hun)勻(yun)，13000rpm離(li)心3分(fen)鐘，棄上(shang)清，沈(chen)澱中加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應。
4、其(qi)他液(ye)體標(biao)本(ben)：取(qu)標本(ben)2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱中加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應。
註(zhu)：陽(yang)性對(dui)照(zhao)和陰(yin)性對(dui)照(zhao)為已經(jing)抽提(ti)好(hao)的(de)核(he)酸(suan)(無(wu)需提(ti)取(qu))，直接取(qu)5μL加入(ru)到(dao)反應(ying)體系(xi)中即(ji)可(ke)。由(you)於(yu)陽(yang)性對(dui)照(zhao)濃(nong)度(du)較高，建議(yi)在(zai)樣(yang)品制備(bei)區域(yu)加入(ru)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。 
小(xiao)鼠單(dan)核(he)巨(ju)噬(shi)細(xi)胞;J774A.1氯(lv)化(hua)鍶(si)六水Strontium chloride, hexhydrate質(zhi)量規(gui)格：AR,≥99%

tTA基因修(xiu)飾(shi)的(de)小(xiao)鼠畸(ji)胎瘤(liu)細胞(B類);F9-CAG-tTA-1A3 IV型(xing)膠原(yuan)酶(含(han)100mL酶解(jie)緩沖(chong)液(ye)) 10mL硫(liu)酸鈣二水Calcium sulfate, dihydrate質(zhi)量規(gui)格：>99%,AR

AGS人胃(wei)腺癌(ai)細胞 Human2'-脫(tuo)氧(yang)胞苷'-5'-1酸(suan)(dCMP)dCMP, 2'-Deoxycytidine 5'-mophosphate, free acid質(zhi)量規(gui)格：>98%,分(fen)子生物(wu)學級

TNFRSF1B Others Mouse 小(xiao)鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) DSS(分(fen)子生物(wu)學級)DSS質(zhi)量規(gui)格：分子生物(wu)學級

人心臟成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞-心房HCF-aa腺苷脫(tuo)氨(an)酶(15U/mg)Adesine deaminase from calf spleen 15U/mg質(zhi)量規(gui)格：15U/mg,進(jin)口(kou)
大(da)鼠(shu)骨(gu)髓基質細(xi)胞*培養(yang)基 100mL丙(bing)硫異煙胺(an)質(zhi)量規(gui)格：>98.5%,BRProthionamide

BV-2小(xiao)鼠小(xiao)膠質(zhi)細胞 Microglial cells of BV-2 mice 1640+20%FBS丙(bing)硫異煙胺(an)(標(biao)準(zhun)品)質(zhi)量規(gui)格：>98%,標(biao)準(zhun)品Prothionamide

EREG Protein Human 重(zhong)組人 Epiregulin / EREG 蛋(dan)白(bai) (Fc 標(biao)簽)硬脂酸(suan)甲(jia)酯(zhi)(>99.5%(GC),標(biao)準(zhun)物(wu)質(zhi))質(zhi)量規(gui)格：>99.5%(GC),標(biao)準(zhun)物(wu)質(zhi)Methyl Stearate

VE(人血(xue)管內(nei)皮(pi)細胞) 5×106cells/瓶×2 胰島(dao)β細(xi)胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)亞(ya)麻酸甲酯(zhi)(>98.0%(GC),標(biao)準(zhun)物(wu)質(zhi))質(zhi)量規(gui)格：>98.0%(GC),標(biao)準(zhun)物(wu)質(zhi)Methyl Lilenate

大(da)鼠(shu)嗜堿性粒細胞性白(bai)血(xue)病細胞;RBL-2H3甲(jia)酯(>99.0%(GC)，標(biao)準(zhun)物(wu)質(zhi))質(zhi)量規(gui)格：>99.0%(GC)，標(biao)準(zhun)物(wu)質(zhi)Methyl Lileate
HT-3細(xi)胞，人子(zi)細胞 人腎小(xiao)球(qiu)髓(sui)母細胞,HBZY-1細(xi)胞 軟(ruan)骨(gu)細胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)辛(xin)二(er)酸(suan)(>98%,BR)質(zhi)量規(gui)格：>98%,BROctanedioic acid

兔(tu)腎細胞;RK-13橄(gan)欖油質量規(gui)格：商品級Olive oil

SOST Others Human 人 SOST / Sclerostin 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 鄰(lin)甲氧基肉桂醛(quan)(>98%,BR)質(zhi)量規(gui)格：>98%，BRo-Methoxycinnamaldehyde

CL-0103Hep G2(人肝癌(ai)細胞)5×106cells/瓶×2苔(tai)紅素（合成）質量規(gui)格：BSOrcein, synthetic

IgG2a Others Mouse 小(xiao)鼠 IgG2a-Fc 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 蔗(zhe)糖1酸(suan)化(hua)酶質量規(gui)格：BC GradeSucrose phosphorylase from L. Mesenteroides
人參(can)探針(zhen)法PCR鑒(jian)定試劑(ji)盒*HUM, 正(zheng)常人主(zhu)動脈平(ping)滑(hua)肌細(xi)胞 HumanAmmoniumferrilbrown枸櫞酸鐵(tie)250毫(hao)克(ke)AR，98%

EFNA1 Others Mouse 小(xiao)鼠 EFNA1 / Ephrin-A1 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 4- 4-Methoxyacetophene,99% 100-06-1 10G 通用試劑(ji)

人前(qian)脂肪細(xi)胞-內(nei)臟總RNAHPA-v NA肖(xiao)醋胍(*)¤ Gucnidinq nitnctq 206-93-4

IL6ST Others Cymolgus 食(shi)蟹(xie)猴(hou) IL6ST / gp130 人細(xi)胞
實驗(yan)流程：
1. 整(zheng)個(ge)檢測(ce)過程(cheng)應嚴格按(an)照(zhao)本(ben)說(shuo)明書要(yao)求(qiu)分(fen)別(bie)在(zai)試劑(ji)準(zhun)備區、樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)區和PCR擴增區進(jin)行(xing)操作，各區實驗(yan)服、儀器 、耗(hao)材(cai)應(ying)獨(du)立(li)使用，不能(neng)混(hun)用(yong)；實驗(yan)用吸頭采用帶(dai)濾(lv)芯(xin)吸頭；樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)區應(ying)配有生物(wu)安(an)全櫃，樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)在(zai)生物(wu)安(an)全櫃中進(jin)行(xing)操作；三(san)個(ge)區應(ying)該配有紫(zi)外線(xian)殺(sha)菌裝(zhuang)置。
2. 為避免RNA降(jiang)解(jie)，樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)過(guo)程(cheng)應(ying)在(zai)0-4℃條件下(xia)操(cao)作，且完成(cheng)實驗(yan)後立即(ji)上(shang)機(ji)檢測(ce)；樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)過(guo)程(cheng)中(zhong)使用的(de)器具(ju)耗(hao)材(cai)應(ying)經(jing)過無核(he)酶處(chu)理(li)。

3. 每(mei)次實驗(yan)應該設置陰(yin)、陽(yang)性對(dui)照(zhao)。
4. 試劑(ji)盒所(suo)有試劑(ji)在(zai)使用前應該在(zai)常溫下(xia)充分(fen)融化(hua)混(hun)勻(yun)，並應(ying)瞬時(shi)離(li)心。
5. 試劑(ji)盒內(nei)所(suo)配陰(yin)性和陽(yang)性對(dui)照(zhao)在(zai)壹次使(shi)用(yong)前應(ying)全部轉(zhuan)移至標(biao)本(ben)準(zhun)備區，並(bing)單(dan)獨(du)存(cun)放。
6. 為防止熒(ying)光(guang)幹擾，應(ying)避免裸(luo)手(shou)直接接觸PCR反(fan)應管，並(bing)應(ying)避免在(zai)PCR反(fan)應管上(shang)進(jin)行(xing)任何(he)標(biao)記(ji)。
7. 儀(yi)器 擴增相(xiang)關參(can)數應(ying)按(an)照(zhao)本(ben)說(shuo)明書相(xiang)關要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)設置；不(bu)同批(pi)號(hao)試劑(ji)不能混(hun)用(yong)。
8. ABI系(xi)列熒光定量PCR儀(yi)參(can)數設(she)置中(zhong)不選ROX校(xiao)正(zheng)，淬(cui)滅基因選擇None。
9. 實驗(yan)過程中產品的(de)廢棄(qi)物(wu)應(ying)該進(jin)行(xing)無害化(hua)處(chu)理(li)後方(fang)可丟(diu)棄。