甘(gan)草(cao)染(ran)料法PCR鑒定(ding)試劑(ji)盒(he)*

特點：
1. 即開即用，用戶(hu)只(zhi)需(xu)要提供病(bing)毒(du)樣(yang)品。
2. 根據(ju)地(di)黃保(bao)守(shou)序列(lie)設計的(de)專(zhuan)壹性引(yin)物(wu)，與相(xiang)關(guan)病(bing)毒(du)無交叉反應。
3. 靈敏(min)度(du)可(ke)以達到(dao)幾百拷貝(bei)/反應。
4. 壹管(guan)式熒(ying)光定(ding)量(liang) PCR 檢(jian)測(ce)，避免(mian)後續汙(wu)染。
5. 本試劑(ji)盒(he)足(zu)夠(gou) 50 次(ci) 20μL 反應體系的(de)熒光定(ding)量(liang) PCR。
6. 本產品只(zhi)適(shi)用於(yu)科(ke)研，不能用於(yu)臨(lin)床(chuang)診斷。

使用方(fang)法：
壹、樣(yang)品采集：
1、食品樣(yang)品：樣(yang)品的(de)采集與預(yu)培(pei)養按(an)照(zhao)樣(yang)品的(de)采集與預(yu)培(pei)養按(an)照(zhao)《食品衛(wei)生(sheng)微生(sheng)物學(xue)檢(jian)驗阪崎腸(chang)桿菌檢(jian)驗要求進(jin)行(xing)。
2、血液樣(yang)品：用無菌註射器抽取(qu)受檢(jian)者(zhe)靜脈(mai)血(xue)2mL，註入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉(na))抗(kang)凝管(guan)，立(li)即(ji)混勻。
3、糞便樣(yang)品：取糞(fen)便(bian)置(zhi)於(yu)滅菌的(de)收集管(guan)中(zhong)送檢(jian)。
4、病(bing)竈部位樣(yang)品：取發(fa)病(bing)部(bu)位(wei)新鮮滲出(chu)物(wu)、粘液膿血(xue)送檢(jian)。
壹、稀(xi)釋 PCR 陽(yang)性對照(zhao)（以 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這(zhe) 6 個 10 倍(bei)稀釋(shi)度(du)為例(li)）
1. 註意：由於標準(zhun)品濃(nong)度(du)非(fei)常高(gao)，因(yin)此下列稀(xi)釋(shi)操(cao)作(zuo)壹定(ding)要在(zai)獨立(li)的(de)區域(yu)進(jin)行(xing)，千萬(wan)不(bu)能汙(wu)染樣(yang)品或本試劑(ji)盒(he)的(de)其他(ta)成(cheng)分(fen)）。為增(zeng)加產品穩定(ding)性和(he)避免(mian)擴(kuo)散傳(chuan)染性病(bing)原(yuan)，本產品不提(ti)供(gong)活體樣(yang)品做陽(yang)性對照(zhao)，只(zhi)提(ti)供可(ke)以直(zhi)接(jie)使用的(de) DNA段作為陽(yang)性對照(zhao)。
2. 標記(ji) 6 個離心(xin)管(guan)，分(fen)別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭(tou)分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板(ban)稀釋液(ye)（用帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭(tou)，下同）。
4. 在(zai) 7 號(hao)管(guan)中(zhong)加入 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)，充(chong)分(fen)震(zhen)蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放冰上(shang)待用。
5. 換槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 6 號(hao)管(guan)中(zhong)加入 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)(上(shang)步稀(xi)釋所(suo)得(de))，充(chong)分(fen)震(zhen)蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放冰上(shang)待用。
6. 換槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 5 號(hao)管(guan)中(zhong)加入 5 μL 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)到(dao) 5 號(hao)管(guan)中(zhong)，充(chong)分(fen)震(zhen)蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放冰上(shang)待用。
7. 重復上(shang)面的(de)操(cao)作(zuo)直(zhi)到(dao)得到(dao) 6 個稀釋(shi)度(du)的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放冰上(shang)待用。
註：上(shang)述樣(yang)品建(jian)議經過增(zeng)菌後，收集培(pei)養(yang)物用於(yu)檢(jian)測(ce)。 
二、DNA提取：
可(ke)采用PCR試劑(ji)盒(he)配(pei)備的(de)DNA抽提液，按(an)以(yi)下說明進(jin)行(xing)DNA核酸的(de)粗提。也(ye)可(ke)采購(gou)上(shang)海澤葉生(sheng)物科技有(you)限(xian)公(gong)司(si)生(sheng)產的(de)DNA提取試劑(ji)盒(he)(過柱法-熒光配套)或其他(ta)合適(shi)的(de)商業化產品，並按(an)照(zhao)相應試劑(ji)盒(he)說(shuo)明進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)。
1、液體培養(yang)物(wu)：取(qu)液體培(pei)養(yang)物(wu)100μL加到(dao)1.5mL無菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，8000rpm離心(xin)3min，盡(jin)量(liang)吸棄(qi)上(shang)清，加入50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心(xin)3min，取上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反應。
2、固(gu)體培養物：挑取單(dan)克(ke)隆菌落(luo)與50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心(xin)3min，取上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反應。
3、糞便樣(yang)品：挑取(qu)米(mi)粒(li)大(da)小糞(fen)便(bian)於滅菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，加入0.5mL生(sheng)理(li)鹽水，振蕩混勻，13000rpm離心(xin)3分鐘，棄上(shang)清，沈(chen)澱中(zhong)加入50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心(xin)3min取上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反應。
4、其他(ta)液(ye)體(ti)標本：取標本2-3mL，13000rpm離心(xin)3min，棄上(shang)清，沈(chen)澱中(zhong)加入50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心(xin)3min取上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反應。
註：陽(yang)性對照(zhao)和(he)陰(yin)性對照(zhao)為已(yi)經(jing)抽(chou)提(ti)好的(de)核酸(無需(xu)提(ti)取)，直(zhi)接(jie)取5μL加入到(dao)反應體系中即(ji)可(ke)。由於陽(yang)性對照(zhao)濃(nong)度(du)較(jiao)高，建(jian)議在(zai)樣(yang)品制備區域(yu)加入陽(yang)性對照(zhao)。 
實驗流程：
1. 整個檢(jian)測(ce)過(guo)程應嚴格按(an)照(zhao)本說明書(shu)要求分別在(zai)試劑(ji)準(zhun)備區、樣(yang)本處理(li)區(qu)和(he)PCR擴增(zeng)區進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)，各區實驗服、儀(yi)器 、耗材(cai)應獨立(li)使用，不(bu)能混用；實(shi)驗用吸頭(tou)采用帶(dai)濾(lv)芯吸頭(tou)；樣(yang)本處理(li)區(qu)應配有生(sheng)物安全(quan)櫃(gui)，樣(yang)本處理(li)在(zai)生(sheng)物安全(quan)櫃(gui)中(zhong)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)；三個區應該配(pei)有(you)紫(zi)外線(xian)殺(sha)菌裝置(zhi)。
2. 為避免(mian)RNA降解(jie)，樣(yang)本處理(li)過(guo)程應在(zai)0-4℃條件(jian)下操(cao)作(zuo)，且(qie)完(wan)成(cheng)實(shi)驗後立即(ji)上(shang)機(ji)檢(jian)測(ce)；樣(yang)本處理(li)過(guo)程中使用的(de)器具(ju)耗材(cai)應經過無核(he)酶處理(li)。
3. 每(mei)次(ci)實(shi)驗應該設置(zhi)陰(yin)、陽(yang)性對照(zhao)。
4. 試劑(ji)盒(he)所(suo)有(you)試劑(ji)在(zai)使用前應該在(zai)常溫(wen)下充(chong)分(fen)融化混勻，並應瞬時離(li)心(xin)。
5. 試劑(ji)盒(he)內所(suo)配(pei)陰(yin)性和(he)陽(yang)性對照(zhao)在(zai)壹次(ci)使用前應全(quan)部(bu)轉移(yi)至標本準(zhun)備區，並單(dan)獨存(cun)放。
6. 為防止(zhi)熒(ying)光幹擾，應避免(mian)裸(luo)手(shou)直(zhi)接(jie)接(jie)觸(chu)PCR反應管(guan)，並(bing)應避免(mian)在(zai)PCR反應管(guan)上(shang)進(jin)行(xing)任何(he)標記(ji)。
7. 儀(yi)器 擴增(zeng)相關(guan)參(can)數應按(an)照(zhao)本說明書(shu)相關(guan)要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)設置(zhi)；不(bu)同批(pi)號(hao)試劑(ji)不(bu)能混用。
8. ABI系列熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR儀(yi)參(can)數設置(zhi)中(zhong)不選(xuan)ROX校(xiao)正(zheng)，淬(cui)滅基(ji)因(yin)選(xuan)擇None。
9. 實驗過程中產品的(de)廢棄物(wu)應該進(jin)行(xing)無害(hai)化處理(li)後方可(ke)丟棄(qi)。
儲(chu)存條(tiao)件(jian)：
14℃或－20℃樣(yang)品收集、處理(li)及(ji)保(bao)存(cun)方(fang)法
1. 血清：使用不(bu)含(han)熱原和(he)內毒(du)素(su)的(de)試管(guan)，操(cao)作(zuo)過程中避免(mian)任何(he)細胞(bao)刺(ci)激(ji)，收(shou)集血(xue)液(ye)後，3000 轉離心(xin)10 分鐘將(jiang)血清和(he)紅細胞(bao)迅速小心(xin)地(di)分離(li)。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素(su)抗(kang)凝。3000 轉離心(xin)30 分鐘取上(shang)清。
3. 細胞(bao)上(shang)清液(ye)：3000 轉離心(xin)10 分鐘去除顆(ke)粒(li)和(he)聚合物。
4. 組織勻(yun)漿(jiang)：將(jiang)組織加入適(shi)量(liang)生(sheng)理(li)鹽水搗(dao)碎。3000 轉離心(xin)10 分鐘取上(shang)清。
5. 保(bao)存(cun)：如(ru)果樣(yang)本收集後不及(ji)時檢(jian)測(ce)，請(qing)按(an)壹次(ci)用量(liang)分(fen)裝，凍存(cun)於(yu)-20℃，避免(mian)反復凍(dong)融(rong)，在(zai)室溫下解凍(dong)並(bing)確(que)保(bao)樣(yang)品均勻(yun)地(di)充(chong)分(fen)解凍(dong)。
人(ren)心(xin)肌(ji)細胞(bao)-心(xin)房(fang)總RNAHCF-aa NA(標準(zhun)品)Loxoprofen 質量(liang)規(gui)格：含量(liang)測(ce)定(ding)

CD38 Others Cymolgus 食蟹(xie)猴(hou) SCARB3 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性對照(zhao)) 丹皮(pi)酚(fen)Paeol質量(liang)規(gui)格：>98.5%,BR

人(ren)大(da)隱靜脈(mai)內皮細胞(bao)*培(pei)養基(ji) 100mL丹皮(pi)酚(fen)(標準(zhun)品)Paeol質量(liang)規(gui)格：HPLC>98%,標準(zhun)品

Ana-1細胞(bao)，小鼠(shu)巨(ju)噬細胞(bao) WEHI 22.1(B細胞(bao)) 小鼠(shu)B細胞(bao)雜交瘤細胞(bao);SH2/左旋延胡(hu)索(suo)乙(yi)素(su)/左旋四氫巴(ba)馬汀(ting)Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine質量(liang)規(gui)格：≥97%,BR

CSF3R Protein Human 重組人(ren) G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白(bai) (Fc 標簽)Liranaftate質量(liang)規(gui)格：>99%,AR
大(da)鼠(shu)腎(shen)系膜細胞(bao);RMC棕櫚酸乙(yi)酯(standard for GC,≥99%(GC))質量(liang)規(gui)格：standard for GC,≥99%(GC)Ethyl palmitate

SMAD5 Others Mouse 小鼠(shu) Smad5 桿狀病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲細胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性對照(zhao)) 異辛酸(Standard for GC,≥99.5%(GC))質量(liang)規(gui)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)2-Ethylhexaic acid

肺成(cheng)纖維(wei)細胞(bao)Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)質量(liang)規(gui)格：>99%,EP6.0,BRIndapamide

人(ren)腦(nao)微(wei)血(xue)管(guan)內皮細胞(bao) 人(ren)肺癌細胞(bao)，NCI-H520[H520]細胞(bao) SAC-IIB2(腹水瘤細胞(bao))（標準(zhun)品）質量(liang)規(gui)格：HPLC>98%,標準(zhun)品Indapamide

人(ren)導(dao)管(guan)癌(ai)細胞(bao);ZR-75-1帕(pa)醇(標準(zhun)品)質量(liang)規(gui)格：HPLC>98%,USPIopamidol
HPrSMC Pellet 人(ren)類(lei)前列腺(xian)平滑肌細胞(bao)團(tuan)塊(kuai) > 1 mio.cells 人(ren)星(xing)形膠質細胞(bao)cDNAHA cDNA芝麻素(su)質量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%，BRSesamin

CL-0106HFL1(人(ren)肺成(cheng)纖維(wei)細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2芝麻素(su)(標準(zhun)品)質量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%,標準(zhun)品Sesamin

KIR2DL4 Others Human 人(ren) KIR2DL4 / CD158D CHO細胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性對照(zhao)) 槲皮素(su)-3-O-葡萄糖(tang)-7-O-鼠(shu)李(li)糖(tang)苷(標準(zhun)品)質量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%,標準(zhun)品Quercetin 3-O-glucoside-7-O-rhamside

人(ren)表(biao)皮色素(su)細胞(bao)-淺色素(su)裂解物(wu)HELM-l L知(zhi)母皂苷A3(標準(zhun)品)質量(liang)規(gui)格：HPLC(ELSD)>97%，標準(zhun)品Timosaponin A3

新生(sheng)牛眼(yan)晶體(ti)上(shang)皮細胞(bao);NBLE 人(ren)甲(jia)狀腺(xian)癌細胞(bao)，SW579細胞(bao) RIN-m5F細胞(bao)，小鼠(shu)β胰(yi)島(dao)素(su)瘤細胞(bao)正(zheng)十五(wu)烷（標準(zhun)品）質量(liang)規(gui)格：內標N-PENTADECANE
甘草(cao)染(ran)料法PCR鑒定(ding)試劑(ji)盒(he)*人(ren)前脂肪細胞(bao)-皮下HPA-swo7iumMETABISULFITE焦亞(ya)鈉(重亞(ya)鈉)ACS級(ji)白(bai)色粉(fen)末RTsigma

ERN1 Others Human 人(ren) ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 桿狀病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲細胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性對照(zhao)) 二苯基(ji) Diphenylcarbil,99% 91-01-0 25G 通用試劑(ji)

長尾(wei)綠(lv)猴胚(pei)胎細胞(bao);4179碳(tan)醋胍;碳(tan)醋亞(ya)安脲(niao);胍碳(tan)醋鹽 Gucnidinq ccronctq 293-82-1

HL-7702細胞(bao)，肝(gan)細胞(bao) 人(ren)結(jie)腸腺(xian)癌細胞(bao),LS180細胞(bao) CM-R037