狗(gou)脊(ji)染料(liao)法PCR鑒定(ding)試劑(ji)盒(he)保(bao)存(cun)

實驗流(liu)程：
1. 整(zheng)個(ge)檢測(ce)過(guo)程應(ying)嚴(yan)格(ge)按照(zhao)本(ben)說(shuo)明書(shu)要求分別(bie)在(zai)試劑(ji)準(zhun)備(bei)區(qu)、樣本(ben)處理區(qu)和PCR擴(kuo)增區(qu)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)，各(ge)區(qu)實驗服、儀(yi)器 、耗材應獨(du)立(li)使(shi)用(yong)，不能混用(yong)；實(shi)驗用(yong)吸(xi)頭(tou)采用(yong)帶(dai)濾(lv)芯吸(xi)頭(tou)；樣本(ben)處理區(qu)應配有(you)生物安(an)全(quan)櫃(gui)，樣本(ben)處理在(zai)生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)中進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)；三(san)個(ge)區(qu)應該(gai)配有紫(zi)外(wai)線(xian)殺(sha)菌裝(zhuang)置。
2. 為避免RNA降解，樣本(ben)處理過(guo)程應(ying)在(zai)0-4℃條(tiao)件(jian)下(xia)操作(zuo)，且完(wan)成實(shi)驗後立(li)即(ji)上(shang)機檢測(ce)；樣本(ben)處理過(guo)程中(zhong)使(shi)用(yong)的(de)器具耗材應經(jing)過(guo)無核(he)酶處理。
3. 每次實驗應該(gai)設置陰(yin)、陽性(xing)對照(zhao)。
4. 試劑(ji)盒(he)所(suo)有(you)試劑(ji)在(zai)使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)該(gai)在常溫(wen)下(xia)充分(fen)融化(hua)混勻，並應瞬(shun)時離(li)心(xin)。
5. 試劑(ji)盒(he)內(nei)所(suo)配(pei)陰(yin)性(xing)和(he)陽性(xing)對照(zhao)在(zai)壹(yi)次使用(yong)前(qian)應(ying)全(quan)部轉移至標(biao)本(ben)準備(bei)區(qu)，並單獨存(cun)放(fang)。
6. 為防(fang)止熒(ying)光(guang)幹(gan)擾，應(ying)避免裸手(shou)直(zhi)接(jie)接觸PCR反(fan)應管(guan)，並應避免在PCR反(fan)應管(guan)上(shang)進(jin)行(xing)任(ren)何(he)標記。
7. 儀(yi)器 擴(kuo)增相(xiang)關(guan)參數應(ying)按(an)照本(ben)說(shuo)明書(shu)相(xiang)關(guan)要求進(jin)行(xing)設置；不同(tong)批(pi)號試劑(ji)不能混用(yong)。
8. ABI系列熒(ying)光(guang)定(ding)量PCR儀(yi)參(can)數設置中(zhong)不選ROX校正，淬滅基(ji)因選擇None。
9. 實驗過(guo)程中(zhong)產(chan)品的(de)廢棄物應(ying)該(gai)進(jin)行(xing)無(wu)害(hai)化處理後(hou)方(fang)可(ke)丟(diu)棄。

特點：
1. 即開即用(yong)，用(yong)戶只需要提(ti)供病毒(du)樣品。
2. 根據(ju)地(di)黃保守(shou)序列(lie)設計的專(zhuan)壹(yi)性(xing)引(yin)物(wu)，與(yu)相關(guan)病毒(du)無交(jiao)叉反(fan)應。
3. 靈敏(min)度(du)可(ke)以(yi)達(da)到(dao)幾百拷(kao)貝(bei)/反(fan)應。
4. 壹(yi)管式(shi)熒(ying)光(guang)定(ding)量 PCR 檢測(ce)，避免後續(xu)汙染。
5. 本(ben)試劑(ji)盒(he)足(zu)夠 50 次 20μL 反(fan)應體系的熒(ying)光(guang)定(ding)量 PCR。
6. 本(ben)產(chan)品只適用(yong)於科研，不能用(yong)於臨床(chuang)診斷。
使用(yong)方(fang)法(fa)：
壹(yi)、樣品采集：
1、食品樣(yang)品：樣(yang)品的(de)采集與預(yu)培養(yang)按(an)照(zhao)樣(yang)品的(de)采集與預(yu)培養(yang)按(an)照(zhao)《食(shi)品衛(wei)生微(wei)生(sheng)物(wu)學檢驗阪崎腸(chang)桿(gan)菌檢驗要求進(jin)行(xing)。
2、血液樣品：用(yong)無(wu)菌註(zhu)射(she)器抽(chou)取(qu)受檢者靜(jing)脈(mai)血(xue)2mL，註(zhu)入(ru)無菌EDTA2Na(或檸(ning)檬酸鈉)抗凝管(guan)，立(li)即(ji)混勻。
3、糞(fen)便樣品：取(qu)糞(fen)便置於滅菌的(de)收集管中(zhong)送檢。
4、病竈(zao)部位(wei)樣品：取(qu)發(fa)病部(bu)位(wei)新鮮滲出(chu)物、粘(zhan)液(ye)膿(nong)血送檢。
壹(yi)、稀釋 PCR 陽性(xing)對照(zhao)（以(yi) 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(ge) 10 倍稀釋度(du)為(wei)例(li)）
1. 註(zhu)意(yi)：由於標準(zhun)品濃度(du)非(fei)常(chang)高(gao)，因(yin)此(ci)下(xia)列稀(xi)釋操(cao)作(zuo)壹(yi)定(ding)要在(zai)獨立(li)的(de)區(qu)域進(jin)行(xing)，千萬(wan)不能汙染樣品或本(ben)試劑(ji)盒(he)的(de)其他成(cheng)分）。為(wei)增加產(chan)品穩(wen)定(ding)性(xing)和(he)避免擴(kuo)散傳(chuan)染性(xing)病原(yuan)，本(ben)產(chan)品不提(ti)供(gong)活體樣品做陽性(xing)對照(zhao)，只提供(gong)可以(yi)直(zhi)接(jie)使用(yong)的(de) DNA段(duan)作為陽性(xing)對照(zhao)。
2. 標記 6 個(ge)離(li)心(xin)管，分別(bie)為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯槍(qiang)頭(tou)分別(bie)加入(ru) 45 μL 熒(ying)光(guang) PCR 模(mo)板稀(xi)釋液(ye)（用(yong)帶(dai)芯槍(qiang)頭(tou)，下(xia)同）。
4. 在 7 號管中加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性(xing)對照(zhao)，充(chong)分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用(yong)。
5. 換(huan)槍(qiang)頭(tou)，在 6 號管中加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性(xing)對照(zhao)(上(shang)步稀(xi)釋所(suo)得(de))，充分震蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用(yong)。
6. 換(huan)槍(qiang)頭(tou)，在 5 號管中加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性(xing)對照(zhao)到(dao) 5 號管中，充(chong)分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用(yong)。
7. 重復(fu)上(shang)面的(de)操作(zuo)直(zhi)到(dao)得到(dao) 6 個(ge)稀(xi)釋度(du)的(de)陽性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用(yong)。
註(zhu)：上(shang)述樣品建(jian)議(yi)經(jing)過(guo)增菌後(hou)，收集培養(yang)物用(yong)於檢測(ce)。 
二、DNA提取(qu)：
可采用(yong)PCR試劑(ji)盒(he)配(pei)備(bei)的(de)DNA抽(chou)提(ti)液(ye)，按以下(xia)說(shuo)明進(jin)行(xing)DNA核酸的粗提。也可(ke)采購(gou)上(shang)海(hai)澤(ze)葉(ye)生物科技(ji)有限公司(si)生產(chan)的DNA提取(qu)試劑(ji)盒(he)(過(guo)柱法(fa)-熒(ying)光(guang)配(pei)套(tao))或其他合(he)適的商(shang)業(ye)化(hua)產(chan)品，並按照相(xiang)應試劑(ji)盒(he)說(shuo)明進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)。
1、液體培養物：取(qu)液體培養物100μL加到(dao)1.5mL無菌離(li)心管中(zhong)，8000rpm離心3min，盡量吸(xi)棄上(shang)清(qing)，加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分混勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min，取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應。
2、固(gu)體培養物：挑(tiao)取(qu)單克隆菌落(luo)與50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分混勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min，取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應。
3、糞(fen)便樣品：挑(tiao)取(qu)米粒大(da)小(xiao)糞(fen)便於滅菌離(li)心管中(zhong)，加入(ru)0.5mL生理鹽水(shui)，振蕩(dang)混勻，13000rpm離心3分鐘(zhong)，棄上(shang)清(qing)，沈澱(dian)中加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分混勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應。
4、其他液(ye)體標本(ben)：取(qu)標本(ben)2-3mL，13000rpm離心3min，棄上(shang)清(qing)，沈澱(dian)中加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分混勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應。
註(zhu)：陽性(xing)對照(zhao)和(he)陰(yin)性(xing)對照(zhao)為(wei)已經(jing)抽(chou)提(ti)好(hao)的核酸(suan)(無需提取(qu))，直(zhi)接(jie)取(qu)5μL加入(ru)到(dao)反(fan)應體系中即可(ke)。由於陽性(xing)對照(zhao)濃度(du)較(jiao)高(gao)，建(jian)議(yi)在(zai)樣(yang)品制備(bei)區(qu)域加入(ru)陽性(xing)對照(zhao)。 
CGB7 Others Human 人(ren) CGB7 桿(gan)狀病毒(du)-昆蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 硬脂(zhi)酸(suan)鈉(>95%,BR) stearate質(zhi)量規(gui)格(ge)：>95%,BR

CL-0073DH82(犬巨噬細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2無水(shui)(>98.5%,BC) thiosulfate anhydrous質(zhi)量規(gui)格(ge)：>98.5%,BC

QGY-7701, 人(ren)肝(gan)癌細胞(bao) 肝(gan)癌細胞(bao),Hep3B細胞(bao) Hs 578T(癌細胞(bao))Sulfo NHS LC BiotinSulfo NHS LC Biotin質(zhi)量規(gui)格(ge)：BR

小(xiao)鼠胚(pei)胎(tai)成(cheng)骨(gu)細(xi)胞(bao)前(qian)體細胞(bao);MC3T3-E1Sulfo NHS SS BiotinSulfo NHS SS Biotin質(zhi)量規(gui)格(ge)：BR

SERPIND1 Others Mouse 小(xiao)鼠 SerpinD1 / HCII 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 四(si)乙(yi)酰核糖(>98% (HPLC),BC)Tetraacetylribose質(zhi)量規(gui)格(ge)：>98% (HPLC),BC
人(ren)成(cheng)纖維母(mu)細胞(bao)-胎兒(HDF-f)( 5×105 )達(da)格(ge)列嗪(qin);Dapagliflozin質(zhi)量規(gui)格(ge)：>97%，BR，生化試劑(ji)級(ji)

RN-s, 大(da)鼠(shu)紋狀體神經(jing)元甘草(cao)查(zha)而(er)酮 A(標準品)Licochalcone A質(zhi)量規(gui)格(ge)：含量≥98.0%，標準品

人(ren)T瘤(liu)細(xi)胞(bao)Jurkat亞系;Jurkat77 大(da)鼠(shu)腎成纖維細胞(bao)*培(pei)養(yang)基(ji) 100mL三氯卡(ka)班(ban)Triclocarban 質(zhi)量規(gui)格(ge)：>98.0%

P815 小(xiao)鼠肥(fei)大(da)細(xi)胞(bao)癌細胞(bao)氯法(fa)齊(qi)明（標準品）Clofazimine質(zhi)量規(gui)格(ge)：供TCL鑒別用(yong)

CDNF Others Mouse 小(xiao)鼠 CDNF / ARMETL1 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 酯Cefuroxime axetil質(zhi)量規(gui)格(ge)：745~875μg/mg,USP
原(yuan)代(dai)平(ping)滑(hua)肌(ji)細胞(bao)特(te)制無血(xue)清(qing)添加劑(ji)Many types of cells包裝(zhuang)：1ml呫(呫)噸酸(suan)（標(biao)準品）質(zhi)量規(gui)格(ge)：供檢查(zha)用(yong)Xanthene-9-carboxylic acid

MN-c, 小(xiao)鼠皮質(zhi)神(shen)經(jing)元 小(xiao)鼠脂(zhi)肪(fang)細(xi)胞(bao)，3T3-L1細胞(bao) SP2/0(骨(gu)髓(sui)瘤(liu)細(xi)胞(bao))呫(呫)噸酮（標準(zhun)品）質(zhi)量規(gui)格(ge)：供HPLC法有關(guan)物質(zhi)檢查(zha)用(yong)Xanthone

人(ren)內(nei)膜(mo)腺(xian)癌細胞(bao);HEC-1-B甲(jia)基（標(biao)準(zhun)品）質(zhi)量規(gui)格(ge)：含量測(ce)定(ding)Methyl eugenol

IL1RL1 Others Human 人(ren) IL1RL1 / ST2 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 香(xiang)葉(ye)醇（標準品）質(zhi)量規(gui)格(ge)：含量測(ce)定(ding)Geraniol

C3H/An小(xiao)鼠結締(di)組(zu)織(zhi)細(xi)胞(bao)(L929-TK-);LTK-(標準品)質(zhi)量規(gui)格(ge)：HPLC>99%,標準品Procaine
狗脊染料(liao)法PCR鑒定(ding)試劑(ji)盒(he)保(bao)存(cun)293T, SV40轉化的人(ren)胚(pei)腎(shen)上(shang)皮細胞(bao)系(xi) 小(xiao)鼠原(yuan)B細胞(bao)，BA/F3細胞(bao) Hs 181.Tes(正常人(ren)細(xi)胞(bao))銅鐵試劑(ji)shēng huà shì jì容量：100克

人(ren)肺(fei)粘(zhan)液(ye)上(shang)皮樣癌細胞(bao);NCI-H2922,7-二溴芴 2,7-Dibromofluorqnq 16433-88-8

MET Others Human 人(ren) c-MET / HGFR 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 鉭(tan)芬(fen)，英(ying)文名或英(ying)文縮寫：Tantalum，級別：基準(zhun)試劑(ji),99.95%，規(gui)格(ge)：500毫克

人(ren)胚(pei)胎(tai)眼(yan)鞏(gong)膜(mo)成(cheng)纖維細胞(bao);HFSF雙岐(qi)桿(gan)菌生(sheng)化基礎(chu)
儲存(cun)條(tiao)件(jian)：
14℃或－20℃樣品收集、處理及(ji)保(bao)存(cun)方(fang)法(fa)
1. 血清(qing)：使用(yong)不含熱(re)原(yuan)和(he)內(nei)毒(du)素的(de)試管(guan)，操作過(guo)程中(zhong)避免任何(he)細胞(bao)刺(ci)激(ji)，收集血液(ye)後，3000 轉離心10 分鐘(zhong)將(jiang)血(xue)清(qing)和紅(hong)細胞(bao)迅(xun)速小(xiao)心地(di)分離。
2. 血漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬酸鹽或肝(gan)素抗凝。3000 轉離心30 分鐘(zhong)取(qu)上(shang)清(qing)。
3. 細胞(bao)上(shang)清(qing)液：3000 轉離心10 分鐘(zhong)去除顆(ke)粒和聚合(he)物。
4. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)：將(jiang)組(zu)織(zhi)加入(ru)適量生(sheng)理鹽水(shui)搗碎。3000 轉離心10 分鐘(zhong)取(qu)上(shang)清(qing)。
5. 保存(cun)：如(ru)果樣本(ben)收集後不及(ji)時檢測(ce)，請按(an)壹(yi)次用(yong)量分(fen)裝(zhuang)，凍存(cun)於-20℃，避免反(fan)復(fu)凍融(rong)，在室溫(wen)下(xia)解凍並確保樣(yang)品均勻(yun)地(di)充分解凍。