澤(ze)蘭(lan)染(ran)料(liao)法(fa)PCR鑒(jian)定(ding)試劑(ji)盒保存

特(te)點：
1. 即開即用，用戶只(zhi)需(xu)要(yao)提(ti)供病毒(du)樣品(pin)。
2. 根據(ju)地黃(huang)保守序列設(she)計(ji)的專(zhuan)壹(yi)性(xing)引物，與相(xiang)關(guan)病毒(du)無(wu)交(jiao)叉反應。
3. 靈(ling)敏(min)度可(ke)以達到幾百(bai)拷貝/反(fan)應。
4. 壹(yi)管式熒(ying)光定(ding)量(liang) PCR 檢測，避(bi)免(mian)後續汙染(ran)。
5. 本(ben)試(shi)劑盒足(zu)夠(gou) 50 次 20μL 反(fan)應體(ti)系(xi)的熒(ying)光定(ding)量(liang) PCR。
6. 本(ben)產(chan)品(pin)只(zhi)適用於科(ke)研(yan)，不(bu)能(neng)用於臨床診斷。

使(shi)用方(fang)法(fa)：
壹(yi)、樣品(pin)采(cai)集(ji)：
1、食(shi)品(pin)樣品(pin)：樣品(pin)的采(cai)集(ji)與預培(pei)養按(an)照(zhao)樣品(pin)的采(cai)集(ji)與預培(pei)養按(an)照(zhao)《食品(pin)衛(wei)生(sheng)微(wei)生物學檢驗(yan)阪崎腸桿菌(jun)檢驗(yan)要(yao)求(qiu)進(jin)行。
2、血(xue)液(ye)樣品(pin)：用無(wu)菌註(zhu)射器抽(chou)取(qu)受(shou)檢者(zhe)靜(jing)脈(mai)血2mL，註(zhu)入(ru)無(wu)菌EDTA2Na(或檸(ning)檬酸(suan)鈉(na))抗(kang)凝(ning)管，立即混勻。
3、糞(fen)便樣品(pin)：取(qu)糞(fen)便置於滅菌的收(shou)集(ji)管中(zhong)送(song)檢。
4、病(bing)竈(zao)部(bu)位樣品(pin)：取(qu)發(fa)病(bing)部(bu)位新(xin)鮮(xian)滲(shen)出(chu)物、粘液膿血送(song)檢。
壹(yi)、稀釋(shi) PCR 陽性(xing)對(dui)照（以(yi) 10E2-10E7 拷貝/μL 這(zhe) 6 個(ge) 10 倍(bei)稀釋(shi)度為例(li)）
1. 註(zhu)意(yi)：由(you)於標(biao)準(zhun)品(pin)濃度非(fei)常(chang)高，因(yin)此下列(lie)稀釋(shi)操(cao)作(zuo)壹(yi)定(ding)要(yao)在(zai)獨(du)立的區域進(jin)行，千(qian)萬(wan)不(bu)能(neng)汙染(ran)樣品(pin)或本(ben)試(shi)劑盒的其(qi)他成(cheng)分(fen)）。為(wei)增(zeng)加(jia)產品(pin)穩(wen)定(ding)性和(he)避(bi)免(mian)擴(kuo)散傳(chuan)染(ran)性(xing)病(bing)原，本(ben)產(chan)品(pin)不(bu)提(ti)供活體(ti)樣品(pin)做陽性(xing)對(dui)照，只(zhi)提(ti)供可(ke)以直接使(shi)用的 DNA段(duan)作(zuo)為(wei)陽性(xing)對(dui)照。
2. 標(biao)記(ji) 6 個(ge)離(li)心管，分別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍(qiang)頭分別(bie)加(jia)入(ru) 45 μL 熒(ying)光 PCR 模(mo)板(ban)稀釋(shi)液(ye)（用帶芯槍(qiang)頭，下同）。
4. 在(zai) 7 號(hao)管中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性(xing)對(dui)照，充(chong)分震蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷貝/μL 的陽性(xing)對(dui)照。放(fang)冰上待用。
5. 換槍(qiang)頭，在 6 號(hao)管中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性(xing)對(dui)照(上步(bu)稀釋(shi)所(suo)得(de))，充(chong)分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷貝/μL 的陽性(xing)對(dui)照。放(fang)冰上待用。
6. 換槍(qiang)頭，在 5 號(hao)管中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性(xing)對(dui)照到(dao) 5 號(hao)管中(zhong)，充(chong)分震蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷貝/μL 的陽性(xing)對(dui)照。放(fang)冰上待用。
7. 重(zhong)復(fu)上面(mian)的操(cao)作(zuo)直到得(de)到 6 個(ge)稀釋(shi)度的陽性(xing)對(dui)照。放(fang)冰上待用。
註(zhu)：上述樣品(pin)建議經(jing)過增(zeng)菌(jun)後，收(shou)集(ji)培(pei)養物用於檢測。 
二(er)、DNA提(ti)取：
可(ke)采(cai)用PCR試(shi)劑(ji)盒(he)配(pei)備的DNA抽(chou)提(ti)液，按以(yi)下說(shuo)明(ming)進(jin)行DNA核(he)酸(suan)的粗(cu)提(ti)。也(ye)可(ke)采(cai)購上海(hai)澤(ze)葉生(sheng)物科(ke)技(ji)有(you)限公司生(sheng)產(chan)的DNA提(ti)取試劑(ji)盒(過(guo)柱(zhu)法(fa)-熒(ying)光配(pei)套(tao))或其(qi)他合(he)適的商(shang)業(ye)化(hua)產(chan)品(pin)，並按(an)照(zhao)相(xiang)應試劑(ji)盒說(shuo)明(ming)進(jin)行操(cao)作(zuo)。
1、液(ye)體(ti)培(pei)養物：取液(ye)體(ti)培(pei)養物100μL加(jia)到1.5mL無(wu)菌離(li)心管中(zhong)，8000rpm離(li)心3min，盡(jin)量(liang)吸(xi)棄上清(qing)，加(jia)入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液充分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取(qu)上清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
2、固(gu)體(ti)培(pei)養物：挑(tiao)取單(dan)克隆菌落與50μL DNA抽(chou)提(ti)液充分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取(qu)上清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
3、糞(fen)便樣品(pin)：挑(tiao)取米(mi)粒(li)大(da)小糞(fen)便於滅菌離(li)心管中(zhong)，加(jia)入(ru)0.5mL生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)，振(zhen)蕩(dang)混勻，13000rpm離(li)心3分(fen)鐘(zhong)，棄上清(qing)，沈澱(dian)中(zhong)加(jia)入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液充分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min取(qu)上清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
4、其(qi)他液體(ti)標(biao)本(ben)：取(qu)標本(ben)2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄上清(qing)，沈澱(dian)中(zhong)加(jia)入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液充分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min取(qu)上清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
註(zhu)：陽性(xing)對(dui)照和(he)陰性(xing)對(dui)照為(wei)已(yi)經抽(chou)提(ti)好的核(he)酸(suan)(無(wu)需(xu)提(ti)取)，直接取5μL加(jia)入(ru)到(dao)反(fan)應體(ti)系(xi)中(zhong)即可(ke)。由於陽性(xing)對(dui)照濃度較高，建議在(zai)樣品(pin)制(zhi)備區域加(jia)入(ru)陽性(xing)對(dui)照。 
實(shi)驗(yan)流(liu)程(cheng)：
1. 整(zheng)個(ge)檢測過程(cheng)應嚴格(ge)按照(zhao)本(ben)說(shuo)明(ming)書要(yao)求(qiu)分(fen)別在試(shi)劑準備區、樣本(ben)處(chu)理(li)區和(he)PCR擴(kuo)增(zeng)區進(jin)行操(cao)作(zuo)，各(ge)區實(shi)驗(yan)服(fu)、儀器 、耗(hao)材(cai)應獨立(li)使(shi)用，不(bu)能(neng)混用；實(shi)驗(yan)用吸頭采(cai)用帶濾(lv)芯吸(xi)頭；樣本(ben)處(chu)理(li)區應配有(you)生物安全(quan)櫃，樣本(ben)處(chu)理(li)在(zai)生物安全(quan)櫃中(zhong)進(jin)行操(cao)作(zuo)；三(san)個(ge)區應該(gai)配有(you)紫外線殺(sha)菌裝(zhuang)置。
2. 為(wei)避(bi)免(mian)RNA降解，樣本(ben)處(chu)理(li)過(guo)程(cheng)應在0-4℃條(tiao)件下操(cao)作(zuo)，且完(wan)成(cheng)實(shi)驗(yan)後(hou)立(li)即上機(ji)檢測；樣本(ben)處(chu)理(li)過(guo)程(cheng)中(zhong)使(shi)用的器具耗(hao)材(cai)應經過(guo)無(wu)核(he)酶處理(li)。
3. 每次實(shi)驗(yan)應該(gai)設置(zhi)陰(yin)、陽性(xing)對(dui)照。
4. 試(shi)劑(ji)盒(he)所(suo)有(you)試劑(ji)在使(shi)用前應該(gai)在常(chang)溫下充分(fen)融(rong)化(hua)混勻，並應瞬時(shi)離(li)心。
5. 試(shi)劑(ji)盒(he)內(nei)所(suo)配陰性(xing)和(he)陽性(xing)對(dui)照在(zai)壹(yi)次使(shi)用前應全部(bu)轉(zhuan)移(yi)至(zhi)標本(ben)準(zhun)備區，並單(dan)獨(du)存(cun)放。
6. 為(wei)防(fang)止(zhi)熒(ying)光幹擾(rao)，應避(bi)免(mian)裸手(shou)直接接觸(chu)PCR反(fan)應管，並應避(bi)免(mian)在PCR反(fan)應管上進(jin)行任(ren)何標記(ji)。
7. 儀器 擴(kuo)增(zeng)相(xiang)關(guan)參(can)數(shu)應按照(zhao)本(ben)說(shuo)明(ming)書相(xiang)關(guan)要(yao)求(qiu)進(jin)行設(she)置(zhi)；不(bu)同批號(hao)試劑(ji)不(bu)能(neng)混用。
8. ABI系(xi)列(lie)熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR儀參(can)數(shu)設(she)置中(zhong)不(bu)選(xuan)ROX校(xiao)正，淬(cui)滅基因(yin)選(xuan)擇None。
9. 實(shi)驗(yan)過(guo)程(cheng)中(zhong)產(chan)品(pin)的廢(fei)棄物應該(gai)進(jin)行無(wu)害(hai)化(hua)處(chu)理(li)後(hou)方(fang)可(ke)丟(diu)棄。
儲(chu)存(cun)條(tiao)件：
14℃或－20℃樣品(pin)收(shou)集(ji)、處理(li)及(ji)保存(cun)方(fang)法(fa)
1. 血(xue)清(qing)：使(shi)用不(bu)含熱(re)原和(he)內毒(du)素的試(shi)管，操(cao)作(zuo)過(guo)程(cheng)中(zhong)避(bi)免(mian)任何細胞刺激(ji)，收(shou)集(ji)血液(ye)後，3000 轉(zhuan)離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血清和(he)紅細(xi)胞迅(xun)速(su)小心地(di)分(fen)離(li)。
2. 血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬酸(suan)鹽(yan)或肝(gan)素抗凝(ning)。3000 轉(zhuan)離(li)心30 分(fen)鐘(zhong)取(qu)上清(qing)。
3. 細(xi)胞上清(qing)液：3000 轉(zhuan)離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)去(qu)除顆粒(li)和(he)聚合(he)物。
4. 組(zu)織勻漿(jiang)：將組(zu)織加(jia)入(ru)適量(liang)生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)搗碎(sui)。3000 轉(zhuan)離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)取(qu)上清(qing)。
5. 保(bao)存(cun)：如果樣本(ben)收(shou)集(ji)後不(bu)及(ji)時(shi)檢測，請按(an)壹(yi)次用量(liang)分(fen)裝(zhuang)，凍存(cun)於-20℃，避(bi)免(mian)反復(fu)凍融，在室(shi)溫下解凍(dong)並確保(bao)樣品(pin)均(jun)勻地(di)充(chong)分解凍(dong)。
兔(tu)主(zhu)動脈(mai)平(ping)滑肌(ji)細(xi)胞;SMC三(san)尖(jian)杉(shan)堿(jian)(標(biao)準(zhun)品(pin))Cephalotaxlen質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)

CSK Others Mouse 小鼠(shu) CSK / C-Src kinase 桿狀病毒(du)-昆(kun)蟲細胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 遼東(dong)楤(楤)木(mu)皂(zao)苷Ⅹ（標準(zhun)品(pin)）Araloside Ⅹ質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)

臍(qi)動脈(mai)內皮(pi)細(xi)胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)（標(biao)準(zhun)品(pin)）Glucosamine sulfate質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)

蚊(wen)子(zi)幼蟲體(ti)細(xi)胞;Aedes albopictus clone C6/36 人(ren)肺(fei)癌(ai)細(xi)胞，NCI-H1299細(xi)胞 A-431(表(biao)皮(pi)癌(ai)細(xi)胞)硫(liu)酸(suan)黃(huang)連(lian)堿(jian)（標準(zhun)品(pin)）Coptisine Sulfate質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)

人(ren)低(di)分(fen)化(hua)肺(fei)腺(xian)癌(ai)細胞;GLC-82 [GLC82](標(biao)準(zhun)品(pin))Chondroitin sulfate質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)
鯉(li)魚(yu)尾鰭(qi)細胞;YZ16金(jin)石蠶(can)苷（標準(zhun)品(pin)）Poliumoside質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)

人(ren)支(zhi)氣(qi)管平(ping)滑肌(ji)細(xi)胞 (HBSMC)( 5×105 )金(jin)絲(si)桃(tao)苷(標(biao)準(zhun)品(pin))Hyperoside質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)

CL-0268COLO 201(人(ren)結直腸腺癌細(xi)胞)5×106cells/瓶×26-甲(jia)氧(yang)基-2-萘(nai)乙(yi)酮(tong)（標(biao)準品(pin)）2-Acetyl-6-methoxynaphthalene質量(liang)規(gui)格(ge)：TLC法(fa)檢查(zha)

人(ren)低(di)侵襲(xi)性脈(mai)絡膜色(se)素素瘤(liu)細胞;OCM-1A 大(da)鼠(shu)腦(nao)動脈(mai)血管內皮(pi)細胞*培(pei)養基 100mL苯(ben)丙氨(an)酯（標準(zhun)品(pin)）Phenprobamate質量(liang)規(gui)格(ge)：含量(liang)測定(ding)

MLA144 MLA144長(chang)臂(bi)猿瘤(liu)細胞（標準(zhun)品(pin)）Halcinide質量(liang)規(gui)格(ge)：含量(liang)測定(ding)
RSPO1 Others Mouse 小鼠(shu) R-Spondin 1 / RSPO1 CHO細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 硫(liu)酸(suan)銨(an)鋁(lv)十(shi)二(er)水(shui)(>98%,BR)質量(liang)規(gui)格(ge)：>98%,BRAluminum ammonium sulfate, dodecahydrate

人(ren)虹(hong)膜色(se)素上皮(pi)細胞裂(lie)解物HIPEpiCLAMP緩(huan)沖液(ye)(>98%,BR)質量(liang)規(gui)格(ge)：>98%,BRAMP buffer concentrate

小耳豬(zhu)肺細(xi)胞;SEP-L2 大(da)細(xi)胞肺癌(ai)細胞，NCI-H661細(xi)胞 DSL-6A/C1細(xi)胞，大鼠(shu)胰腺(xian)癌細胞株苯(ben)並咪(mi)唑(>98%,BR)質量(liang)規(gui)格(ge)：>98%,BRBenzimidazole

人(ren)整(zheng)合(he)SV40基因(yin)的上皮(pi)細胞;HBL-100 [HBL100]羧(suo)肽(tai)酶 B >170 U/mg質量(liang)規(gui)格(ge)：BCCarboxypeptidase B

HA Others H1N1 甲(jia)型流(liu)感(gan) H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血(xue)凝(ning)素HA1 (Hemagglutinin) 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 2-氟-1,3-二(er)甲(jia)基氯化(hua)咪(mi)唑翁(weng)六(liu)氟1酸(suan)酯(DFIH) 質量(liang)規(gui)格(ge)：>98%,BR2-Fluoro-1,3-dimethylimidazolidinium hexafluorophosphate
澤(ze)蘭(lan)染(ran)料(liao)法(fa)PCR鑒(jian)定(ding)試劑(ji)盒保存人(ren)表(biao)皮(pi)角質形成(cheng)細(xi)胞*培(pei)養基 100mL0.5ml離(li)心管盒shēng huà shì jì容(rong)量(liang)：保(bao)存：-20℃25KU

ZA6細(xi)胞，轉(zhuan)S9基因(yin)倉鼠(shu)卵(luan)巢細胞 WI-38(人(ren)二(er)倍(bei)體(ti)胚(pei)肺(fei)細胞) 中(zhong)國倉鼠(shu)卵(luan)巢細胞K1(亞(ya)系(xi)克(ke)隆);CHO-K11酸(suan)1醇(chun)酸單(dan)環... Phospho(el)pyruvic acid cyclohexylam... 10526-80-4 100MG 通用試劑

EFNA2 Protein Mouse 重(zhong)組(zu)小鼠(shu) Ephrin-A2 / EFNA2 蛋(dan)白 (His 標(biao)簽)言(yan)醋吉(ji)西他濱 GqMc