黃連(lian)探針(zhen)法(fa)PCR鑒定試(shi)劑盒直銷

特點(dian)：
1. 即開(kai)即用，用戶只需要提供病毒(du)樣品(pin)。
2. 根據(ju)地(di)黃(huang)保(bao)守序(xu)列(lie)設(she)計的(de)專(zhuan)壹(yi)性(xing)引(yin)物(wu)，與(yu)相(xiang)關(guan)病(bing)毒(du)無交(jiao)叉反應。
3. 靈(ling)敏度(du)可(ke)以(yi)達到(dao)幾百拷貝(bei)/反應。
4. 壹管(guan)式熒(ying)光定量(liang) PCR 檢(jian)測(ce)，避(bi)免(mian)後(hou)續汙染。
5. 本試(shi)劑(ji)盒足夠 50 次(ci) 20μL 反應體(ti)系的(de)熒(ying)光定量(liang) PCR。
6. 本產(chan)品(pin)只適(shi)用於(yu)科研(yan)，不能(neng)用於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷(duan)。

使(shi)用方(fang)法(fa)：
壹、樣(yang)品(pin)采集：
1、食品(pin)樣(yang)品(pin)：樣品的(de)采集與(yu)預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照(zhao)樣(yang)品(pin)的(de)采集與(yu)預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照(zhao)《食(shi)品(pin)衛生微(wei)生物(wu)學檢(jian)驗阪崎腸桿(gan)菌(jun)檢(jian)驗要求進(jin)行。
2、血(xue)液(ye)樣品：用無菌(jun)註射(she)器抽(chou)取受(shou)檢(jian)者(zhe)靜脈(mai)血(xue)2mL，註入無菌(jun)EDTA2Na(或檸(ning)檬酸鈉(na))抗(kang)凝(ning)管(guan)，立即(ji)混勻(yun)。
3、糞便(bian)樣(yang)品(pin)：取糞便(bian)置於(yu)滅(mie)菌(jun)的(de)收集管(guan)中送檢(jian)。
4、病竈(zao)部位樣品：取(qu)發病(bing)部位新(xin)鮮滲出(chu)物、粘(zhan)液膿血(xue)送檢(jian)。
壹、稀釋 PCR 陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)（以(yi) 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這 6 個 10 倍(bei)稀釋度(du)為(wei)例）
1. 註意(yi)：由於(yu)標(biao)準品(pin)濃(nong)度(du)非常高(gao)，因此下(xia)列(lie)稀釋操(cao)作(zuo)壹(yi)定要在獨立(li)的(de)區(qu)域進(jin)行，千(qian)萬不能(neng)汙染樣品(pin)或(huo)本試劑(ji)盒的(de)其(qi)他(ta)成(cheng)分）。為(wei)增(zeng)加產(chan)品(pin)穩(wen)定性(xing)和避免(mian)擴(kuo)散傳染性病(bing)原(yuan)，本產(chan)品(pin)不提供活(huo)體(ti)樣品(pin)做(zuo)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)，只提供可以(yi)直接使(shi)用的(de) DNA段(duan)作為(wei)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)。
2. 標(biao)記(ji) 6 個離心管(guan)，分別(bie)為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯(xin)槍頭(tou)分別(bie)加入 45 μL 熒(ying)光 PCR 模(mo)板稀釋液(ye)（用帶芯(xin)槍頭(tou)，下(xia)同(tong)）。
4. 在 7 號管(guan)中加入 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)，充分震(zhen)蕩 1 分鐘，得(de)1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上待用。
5. 換槍(qiang)頭(tou)，在 6 號管(guan)中加入 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)(上步(bu)稀釋所(suo)得(de))，充分震(zhen)蕩 1 分鐘，得(de) 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上待用。
6. 換槍(qiang)頭(tou)，在 5 號管(guan)中加入 5 μL 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)到(dao) 5 號管(guan)中，充分震(zhen)蕩 1 分鐘，得(de) 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上待用。
7. 重復上面的(de)操(cao)作(zuo)直到(dao)得(de)到(dao) 6 個稀釋度(du)的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上待用。
註：上述(shu)樣(yang)品(pin)建(jian)議經(jing)過增(zeng)菌後，收集培(pei)養(yang)物用於(yu)檢(jian)測(ce)。 
二、DNA提取(qu)：
可采用PCR試劑(ji)盒配(pei)備的(de)DNA抽提液(ye)，按(an)以下(xia)說(shuo)明(ming)進(jin)行DNA核(he)酸的(de)粗提。也(ye)可采購上海澤(ze)葉(ye)生物(wu)科技(ji)有限(xian)公(gong)司生產(chan)的(de)DNA提取(qu)試劑盒(過柱(zhu)法(fa)-熒(ying)光配(pei)套(tao))或其(qi)他(ta)合適(shi)的(de)商(shang)業(ye)化產(chan)品(pin)，並(bing)按(an)照(zhao)相(xiang)應(ying)試(shi)劑(ji)盒說明(ming)進(jin)行操(cao)作(zuo)。
1、液體(ti)培(pei)養(yang)物：取(qu)液體(ti)培(pei)養(yang)物100μL加到(dao)1.5mL無菌(jun)離心管(guan)中，8000rpm離心3min，盡量(liang)吸(xi)棄(qi)上清，加入50μL DNA抽提液(ye)充分混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進(jin)行PCR反應。
2、固(gu)體(ti)培(pei)養(yang)物：挑(tiao)取(qu)單克隆菌(jun)落與(yu)50μL DNA抽提液(ye)充分混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進(jin)行PCR反應。
3、糞便(bian)樣(yang)品(pin)：挑(tiao)取(qu)米粒(li)大小(xiao)糞便(bian)於(yu)滅(mie)菌(jun)離心管(guan)中，加入0.5mL生理(li)鹽水，振(zhen)蕩混勻(yun)，13000rpm離心3分鐘，棄(qi)上清，沈(chen)澱(dian)中(zhong)加入50μL DNA抽提液(ye)充分混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進(jin)行PCR反應。
4、其他(ta)液體(ti)標(biao)本：取(qu)標(biao)本2-3mL，13000rpm離心3min，棄上清，沈(chen)澱(dian)中(zhong)加入50μL DNA抽提液(ye)充分混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進(jin)行PCR反應。
註：陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)和(he)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)為(wei)已經(jing)抽提好的(de)核(he)酸(無需提取(qu))，直接取(qu)5μL加入到(dao)反應體(ti)系中(zhong)即(ji)可(ke)。由於(yu)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)濃(nong)度(du)較高(gao)，建議在樣品(pin)制(zhi)備區(qu)域加入陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)。 
實驗流程：
1. 整(zheng)個檢(jian)測(ce)過(guo)程應(ying)嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)本(ben)說(shuo)明(ming)書(shu)要求分別在試劑(ji)準備區(qu)、樣本(ben)處理(li)區(qu)和PCR擴增(zeng)區(qu)進(jin)行操(cao)作(zuo)，各(ge)區(qu)實驗服(fu)、儀(yi)器(qi) 、耗(hao)材(cai)應(ying)獨(du)立(li)使(shi)用，不能(neng)混用；實驗用吸頭(tou)采用帶濾(lv)芯吸(xi)頭(tou)；樣本(ben)處理(li)區(qu)應配(pei)有(you)生物(wu)安全櫃(gui)，樣本(ben)處理(li)在生物(wu)安全櫃(gui)中進(jin)行操(cao)作(zuo)；三(san)個(ge)區(qu)應該(gai)配(pei)有(you)紫(zi)外(wai)線殺菌裝(zhuang)置。
2. 為(wei)避免(mian)RNA降(jiang)解，樣(yang)本(ben)處理(li)過(guo)程應(ying)在0-4℃條件下(xia)操(cao)作(zuo)，且(qie)完成(cheng)實驗後立即上機檢(jian)測(ce)；樣(yang)本處理(li)過(guo)程中(zhong)使(shi)用的(de)器(qi)具耗(hao)材(cai)應(ying)經(jing)過無核(he)酶處理(li)。
3. 每次(ci)實(shi)驗應該設(she)置陰(yin)、陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)。
4. 試劑(ji)盒所有試(shi)劑在使(shi)用前應(ying)該在常溫下(xia)充分融化混勻(yun)，並(bing)應(ying)瞬(shun)時離心。
5. 試劑(ji)盒內(nei)所(suo)配(pei)陰(yin)性(xing)和(he)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)在壹次(ci)使(shi)用前應(ying)全部轉移至(zhi)標(biao)本準備區(qu)，並單(dan)獨(du)存(cun)放。
6. 為(wei)防(fang)止(zhi)熒(ying)光幹(gan)擾(rao)，應(ying)避(bi)免(mian)裸(luo)手(shou)直接接(jie)觸(chu)PCR反應管(guan)，並應(ying)避免(mian)在PCR反應管(guan)上進(jin)行任(ren)何標(biao)記(ji)。
7. 儀(yi)器(qi) 擴增(zeng)相關(guan)參(can)數應按(an)照(zhao)本(ben)說(shuo)明(ming)書(shu)相(xiang)關(guan)要求進(jin)行設(she)置；不同(tong)批(pi)號(hao)試(shi)劑不能(neng)混用。
8. ABI系列(lie)熒(ying)光定量(liang)PCR儀(yi)參(can)數設(she)置中不選ROX校正(zheng)，淬(cui)滅(mie)基(ji)因(yin)選擇(ze)None。
9. 實驗過程中(zhong)產(chan)品(pin)的(de)廢(fei)棄(qi)物(wu)應該進(jin)行無害(hai)化處理(li)後(hou)方(fang)可丟(diu)棄。
儲(chu)存(cun)條件：
14℃或－20℃樣品(pin)收集、處理(li)及(ji)保(bao)存(cun)方(fang)法(fa)
1. 血(xue)清(qing)：使(shi)用不含(han)熱(re)原(yuan)和(he)內(nei)毒(du)素(su)的(de)試(shi)管(guan)，操(cao)作(zuo)過(guo)程中(zhong)避(bi)免(mian)任(ren)何細(xi)胞(bao)刺(ci)激(ji)，收集血(xue)液(ye)後，3000 轉離心10 分鐘將(jiang)血(xue)清(qing)和紅細(xi)胞(bao)迅速(su)小(xiao)心地(di)分離。
2. 血(xue)漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝(gan)素(su)抗(kang)凝(ning)。3000 轉離心30 分鐘取(qu)上清。
3. 細(xi)胞(bao)上清液(ye)：3000 轉離心10 分鐘去(qu)除(chu)顆(ke)粒(li)和(he)聚(ju)合物(wu)。
4. 組(zu)織勻(yun)漿：將組(zu)織加入適(shi)量(liang)生理(li)鹽水搗(dao)碎。3000 轉離心10 分鐘取(qu)上清。
5. 保(bao)存(cun)：如果樣本(ben)收集後(hou)不及(ji)時檢(jian)測(ce)，請(qing)按(an)壹次(ci)用量(liang)分(fen)裝(zhuang)，凍存(cun)於(yu)-20℃，避免(mian)反復凍融，在室溫下(xia)解(jie)凍並確保(bao)樣品均勻(yun)地(di)充分解(jie)凍。
CL-0077Eca-109(人食管(guan)癌細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2Indocyanine Green質量(liang)規(gui)格(ge)：>94%,BS

Wish細(xi)胞(bao)，人羊膜(mo)細(xi)胞(bao)系(xi) 人T細(xi)胞(bao)瘤,Hat-78細(xi)胞(bao) 小(xiao)鼠誘(you)導(dao)性多(duo)潛能(neng)幹(gan)細(xi)胞(bao);PUMC-mips-A2靛(dian)藍(lan)Indigotin質量(liang)規(gui)格(ge)：BS

BGC823(人胃癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2甲基(ji)藍(lan)Methyl blue質量(liang)規(gui)格(ge)：AR

CTSB Others Human 人 Cathepsin-B / CTSB 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 伊文思藍(lan)；埃(ai)文斯(si)藍(lan)Evans Blue質量(liang)規(gui)格(ge)：BS,進(jin)分BIOFER,>85%

中國(guo)倉(cang)鼠卵(luan)巢細(xi)胞(bao)(亞系(xi)克隆);CHO-HCV-p7曲(qu)利苯(ben)藍(lan)Trypan Blue質量(liang)規(gui)格(ge)：BS
人關(guan)節軟骨細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基(ji) 100mL醋酸氟氫可的(de)(標(biao)準品(pin))Fludrocortisone acetate質量(liang)規(gui)格(ge)：含(han)量(liang)97%-103%,標(biao)準品(pin)

Vero細(xi)胞(bao)，綠猴腎細(xi)胞(bao) RSC96(大鼠(shu)雪旺(wang)細(xi)胞(bao)) 小(xiao)鼠肉瘤瘤株(zhu);S180醋酸氟氫可的(de)Fludrocortisone acetate質量(liang)規(gui)格(ge)：>97%

EFNB2 Protein Human 重組(zu)人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋(dan)白Azelnidipine質量(liang)規(gui)格(ge)：>99%,BR

U-937(人組(zu)織細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 小(xiao)鼠瘤細(xi)胞(bao);EL4噻奈(nai)普(pu)汀(ting)酸;噻奈(nai)普(pu)汀(ting)Tianeptine質量(liang)規(gui)格(ge)：>98%,BR

人結腸(chang)平(ping)滑肌(ji)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)物(wu)HCSMCL噻奈(nai)普(pu)汀(ting)酸;噻奈(nai)普(pu)汀(ting)(標(biao)準品(pin))Tianeptine質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC>99%,標(biao)準品(pin)
敘利(li)亞(ya)倉(cang)鼠細(xi)胞(bao)系(xi);Syrian Hamster AV12鉬粉(>99%,BR)質量(liang)規(gui)格(ge)：>99%,BRMolybdenium powder

IFNA4 Others Cynomolgus 食蟹(xie)猴 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 二硫化鉬(>98%,BR)質量(liang)規(gui)格(ge)：>98%,BRMolybdenium(IV) sulfide

角(jiao)膜上皮(pi)細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)1-萘乙(yi)酸鈉(na)(>98%,植物(wu)激(ji)素(su)級(ji))質量(liang)規(gui)格(ge)：>98%,植物(wu)激(ji)素(su)級(ji)NAA-Na, 1-naphthaleneacetic acid  salt

BB7.2細(xi)胞(bao)， 分泌(mi)A2抗(kang)體(ti)B細(xi)胞(bao) 大鼠(shu)肉瘤細(xi)胞(bao),WK256細(xi)胞(bao) 人臍動(dong)脈(mai)平(ping)滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)物(wu)HUASMCLN-乙酰(xian)-DL-(>98%,BR)質量(liang)規(gui)格(ge)：>98%,BRN-Acetyl-DL-valine

NCI-H524(人非小(xiao)細(xi)胞(bao)肺(fei)癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2氯(lv)舒(shu)隆質量(liang)規(gui)格(ge)：>98%,BRClorsulon
黃連(lian)探針(zhen)法(fa)PCR鑒定試(shi)劑盒直銷小(xiao)鼠色(se)素(su)瘤細(xi)胞(bao);B16-F1N-Acetyle-D-LeucineN-乙酰(xian)-D-白酸1克BR，99%

Hep3B2.1-7細(xi)胞(bao)，人肝癌(ai)細(xi)胞(bao) 人髓母(mu)細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao),D341Med細(xi)胞(bao) 中國(guo)倉(cang)鼠卵(luan)巢細(xi)胞(bao);CTLA4 Ig-24Nα-FMOC-Nω-PBF-D... Fmoc-D-Arg(Pbf)-OH,≥98.0% 187618-60-6 1G 通用試劑(ji)

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小(xiao)鼠成(cheng)纖(xian)維 5×106cells/瓶×2啊魏(wei)醋;4-羌(qiang)