蒲(pu)黃探(tan)針(zhen)法(fa)PCR鑒(jian)定(ding)試(shi)劑(ji)盒保存(cun)

實(shi)時(shi)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指(zhi)在PCR反(fan)應體系中(zhong)加(jia)入熒光基團(tuan)，利(li)用(yong)熒光信號(hao)積(ji)累(lei)實(shi)時(shi)監(jian)測(ce)整(zheng)個PCR進(jin)程，通(tong)過(guo)標(biao)準曲(qu)線(xian)對(dui)未(wei)知模(mo)板(ban)進(jin)行定(ding)量(liang)分析的(de)方法(fa)。實(shi)時(shi)熒光定量PCR的化(hua)學(xue)原理(li)包括探(tan)針(zhen)類(lei)和非(fei)探(tan)針(zhen)類(lei)兩類，探針(zhen)類(lei)是利(li)用(yong)與(yu)靶細胞序列特(te)異性雜(za)交(jiao)的(de)探針(zhen)來(lai)指示擴增(zeng)產(chan)物的增加(jia)，非(fei)探(tan)針(zhen)類(lei)是利(li)用(yong)熒光染料(liao)或(huo)者(zhe)特(te)異性設(she)計的(de)引物來指示擴增(zeng)的(de)增加(jia)。運用(yong)該(gai)技(ji)術可(ke)以(yi)對(dui)DNA、RNA樣品進(jin)行定(ding)量(liang)（包(bao)括定(ding)量(liang)和相對(dui)定(ding)量）和定(ding)性分析。
主要(yao)服務(wu)：DNA或RNA的定(ding)量(liang)分析、基(ji)因表(biao)達(da)差(cha)異分析、基(ji)因分型。
主要(yao)技(ji)術：引物設(she)計、RNA提(ti)取、cDNA合成(cheng)、qPCR

產品及(ji)特(te)點(dian)：
本產(chan)品包(bao)含(han)Taq DNA聚(ju)合酶、dNTPs、MgCl2、反(fan)應緩(huan)沖液，濃度(du)為(wei)2×。具有(you)快速簡(jian)便(bian)、靈(ling)敏(min)度(du)高(gao)、特(te)異性強、穩定(ding)性(xing)好(hao)等優(you)點，可(ke)大(da)限度(du)的(de)減(jian)少人(ren)為誤(wu)差。使(shi)用(yong)時(shi)只需加(jia)入DNA模(mo)板(ban)和引物既可(ke)。使(shi)用(yong)方(fang)便(bian)快捷(jie)，能(neng)避(bi)免PCR操作(zuo)過(guo)程中(zhong)的(de)汙染，使(shi)用(yong)時(shi)只需取(qu)適量2×TaqPCR MasterMix溶液，加(jia)入模(mo)板(ban)和引物，並(bing)加(jia)入去(qu)離子(zi)水補足體積(ji)，使(shi)MasterMix溶液濃度(du)為(wei)1×即(ji)可(ke)進(jin)行反(fan)應。使(shi)用(yong)前(qian)請保證(zheng)充(chong)分溶解並(bing)混(hun)勻(yun)，操作(zuo)需在冰上(shang)進(jin)行。本(ben)產(chan)品就是為(wei)此目(mu)的(de)根據 PCR 原理(li)開發(fa)的(de)試(shi)劑(ji)盒。
具有(you)高(gao)靈敏度(du)、高(gao)特(te)異性、高穩定(ding)性(xing)
可(ke)在同壹個(ge)管子中(zhong)高(gao)特(te)異性的執(zhi)行cDNA合成(cheng)與(yu)基(ji)於探(tan)針(zhen)的(de)qPCR反(fan)應。更(geng)多(duo)優(you)點如(ru)1.的特(te)異性；2.多(duo)重(zhong)反(fan)應（高(gao)通(tong)量）；3.反(fan)應體系配置，無需冰(bing)塊；4.無懼高(gao)GC含(han)量PCR；5.預防(fang)交(jiao)叉(cha)汙染；6.廣泛的(de)設(she)備兼(jian)容性。
PCR反(fan)應的(de)特(te)異性決定因素(su)為：
①引物與模(mo)板(ban)DNA特(te)異正確的結合；
②堿基(ji)配(pei)對(dui)原(yuan)則(ze)；
③Taq DNA聚(ju)合酶合成(cheng)反(fan)應的(de)忠實(shi)性(xing)；
④靶基因(yin)的(de)特(te)異性與保守性(xing)。
其中(zhong)引物與模(mo)板(ban)的正確結合是關(guan)鍵。引物與模(mo)板(ban)的結合及(ji)引物鏈(lian)的(de)延伸(shen)是遵循堿(jian)基配(pei)對(dui)原(yuan)則(ze)的。聚(ju)合酶合成(cheng)反(fan)應的(de)忠實(shi)性(xing)及(ji)Taq DNA聚(ju)合酶耐高(gao)溫性，使(shi)反(fan)應中(zhong)模(mo)板(ban)與引物的結合(復性)可(ke)以(yi)在較高(gao)的溫度(du)下進(jin)行，結合的特(te)異性大(da)大(da)增(zeng)加(jia)，被擴增(zeng)的(de)靶基因(yin)片(pian)段也(ye)就能保(bao)持(chi)很(hen)高的正確度(du)。再(zai)通(tong)過(guo)選(xuan)擇(ze)特(te)異性和保(bao)守性(xing)高(gao)的(de)靶基因(yin)區，其特(te)異性程度(du)就更高(gao)。
(2) 靈敏(min)度(du)高(gao)
PCR產物(wu)的(de)生成(cheng)量(liang)是以(yi)指數(shu)方(fang)式增加(jia)的，能(neng)將皮(pi)克(pg=10-12g)量級(ji)的(de)起(qi)始(shi)待(dai)測(ce)模(mo)板(ban)擴增(zeng)到(dao)微克(ug=10-6g)水平。能(neng)從(cong)100萬個細胞中(zhong)檢出(chu)壹個(ge)靶細胞；在病毒(du)的檢測(ce)中(zhong)，PCR的靈(ling)敏(min)度(du)可(ke)達(da)3個RFU(空斑(ban)形(xing)成(cheng)單(dan)位)；在細菌學(xue)中(zhong)zui小檢出(chu)率為3個細菌。
(3) 簡(jian)便(bian)、快速
PCR反(fan)應用(yong)耐高(gao)溫的Taq DNA聚(ju)合酶，壹次性地將反(fan)應液加(jia)好(hao)後，即(ji)在DNA擴增(zeng)液和水浴鍋(guo)上(shang)進(jin)行變(bian)性(xing)-退火-延伸(shen)反(fan)應，壹般(ban)在2～4 小時(shi)完成(cheng)擴增(zeng)反(fan)應。擴增(zeng)產(chan)物壹般(ban)用(yong)電(dian)泳(yong)分析，不(bu)壹定(ding)要(yao)用(yong)同(tong)位素(su)，無放(fang)射(she)性汙染、易推(tui)廣。
(4) 對(dui)標(biao)本的(de)純(chun)度(du)要(yao)求低(di)
不(bu)需要(yao)分離病毒(du)或細菌及(ji)培養(yang)細胞，DNA 粗制(zhi)品及(ji)總(zong)RNA均可(ke)作(zuo)為擴增(zeng)模(mo)板(ban)。可(ke)直接用(yong)臨床(chuang)標(biao)本如(ru)血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fa)、細胞、活(huo)PCR技(ji)術概論(lun)。
實(shi)驗(yan)註(zhu)意事(shi)項(xiang)：
1）RT-PCR可(ke)以(yi)檢測(ce)組(zu)織、細胞、血(xue)液、細菌等很多(duo)材(cai)料(liao)，不(bu)同(tong)的樣本有(you)不(bu)同(tong)要(yao)求，實(shi)驗(yan)前請充(chong)分溝(gou)通(tong)確認(ren)實(shi)驗(yan)方案和樣本情況；
2）客(ke)戶(hu)盡(jin)可(ke)能(neng)提(ti)供(gong)實(shi)驗(yan)的背景(jing)信息(xi)、物種、基因(yin)準確(que)的名(ming)稱和ID號(hao)；
3）客(ke)戶(hu)盡(jin)量(liang)不(bu)要(yao)提(ti)供(gong)DNA或RNA樣品。
4）樣本保(bao)存(cun)於液氮(dan)或幹(gan)冰(bing)，也(ye)可(ke)以(yi)保存於Trizol液中(zhong)。
人骨(gu)肉(rou)瘤(liu)細胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]普拉(la)洛(luo)芬(fen)Praprofen質量(liang)規(gui)格：>97%,BR

NP69-SV40T細胞，永(yong)生(sheng)化(hua)鼻咽(yan)上(shang)皮細胞系 小鼠細胞,C127細胞 非(fei)洲綠(lv)猴腎細胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2普拉(la)洛(luo)芬(fen)(標(biao)準品)Praprofen質量(liang)規(gui)格：HPLC>97%,標(biao)準品

MS1(小鼠胰島內皮細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2牛血清白蛋(dan)白(BSA);牛血清白蛋(dan)白組(zu)分五Albumin(bovine fraction V);BSA質量(liang)規(gui)格：Purity>98%,分子生物(wu)學(xue)級(ji)

Promocell C-23160 Skeletal Muscle Cell GrowthMedium KIT, 骨(gu)骼(ge)肌(ji)細胞生(sheng)長培養(yang)基套裝(zhuang) 500ml萘啶酮酸；Nalidixic acid質量(liang)規(gui)格：>98%

軟骨(gu)細胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105方(1ml)糖(tang)原,α-1,6 葡聚(ju)糖(tang),糖(tang)元Glycogen from oyster質量(liang)規(gui)格：BR,>99%,河蚌提(ti)取,Type II
人胚腎(shen)細胞;293 [HEK-293]2’-脫氧(yang)腺(xian)苷(gan)2'-Deoxyadesine mohydrate質量(liang)規(gui)格：>99%,BR

Mv.1.Lu細胞，貂肺上(shang)皮細胞 人結腸(chang)癌(ai)細胞,CW-2細胞 CM-H093人顱(lu)蓋(gai)造(zao)骨(gu)細胞*培養(yang)基100mL魚精(jing)DNADNA, Fishsperm質量(liang)規(gui)格：進(jin)分，Sigma74782,蛋(dan)白小於1%

大(da)鼠腎(shen)系膜細胞;RMC2,7-雙(shuang)(4,4,5,5-四(si)甲(jia)基(ji)-1,3,2-二氧(yang)硼戊(wu)環(huan)-2-基)芘(bi)(>97.0%(GC))2,7-Bis(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyrene質量(liang)規(gui)格：>97.0%(GC)

HA Others H1N1 甲(jia)型流感(gan) H1N1 (A/Brevig Mission/1/1918) 血凝(ning)素(su) (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 2,7-二(4,4,5,5-四(si)甲(jia)基(ji)-1,3,2-二氧(yang)硼戊(wu)環(huan)-2-基)-9,9-十二烷芴(wu)(>98.0%(HPLC))2,7-Bis(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-9,9-dihexylfluorene質量(liang)規(gui)格：>98.0%(HPLC)

狗肺成(cheng)纖(xian)維(wei)樣細胞;DogL11,4-二溴(xiu)萘(>97.0%(GC))1,4-Dibromonaphthalene質量(liang)規(gui)格：>97.0%(GC)
MDCK(NBL-2)狗腎(shen)細胞 MDCK (NBL-2) dog kidney cells MEM(GIBCO)+10%FBS賴酸鐵瓊(qiong)脂(zhi)100克RT

IFNG Protein Mouse 重組(zu)小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 蛋(dan)白 (Fc 標(biao)簽)1-亞肖基(ji)-2-酚;α-亞肖基(ji)-β-酚;鈷試(shi)劑(ji) 1-nitso-2-ncphthol;1,2-Ncphthoineonq-1-oxiMq;C.I. 10005 131-91-9

NCI-H1688(人典型小細胞肺癌(ai)細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 3T6-Swiss albi(胚胎(tai)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞)BL瓊(qiong)脂(zhi)培養(yang)基500毫(hao)升(sheng)

293來源(yuan)病毒(du)包裝(zhuang)細胞;ΦA-GPpotewwiumPHOSPHATETRIBASICANxy7US無水嶙酸(suan)鉀(jia)白色(se)粗料(liao)RTsigma

MAX Others Human 人 MAX / MYC 桿狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 5332-24-13-溴(xiu)3-Bromoineoline
蒲(pu)黃探(tan)針(zhen)法(fa)PCR鑒(jian)定(ding)試(shi)劑(ji)盒保存(cun)IFNG Others Rat 大(da)鼠 IFNG / Ierferon Gamma 人細胞裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) G-6-PD葡萄(tao)糖(tang)-6-嶙酸(suan)脫氫酶500克BR，50u/mg，酵母(mu)

大(da)鼠胎(tai)兒成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞*培養(yang)基 100mL3，4，5-三芐氧(yang)基(ji)本(ben)加(jia)醋(cu) 3,4,5-TRIS(BqNZYLOXY)BqNZOIC cCID 1486-48-

Vero非(fei)洲綠(lv)猴腎細胞 Vero the African green monkey kidney cells MEM培養(yang)基(GIBCO)+10%FBSetxyloctaate辛(xin)酸