桑(sang)椹(shen)探(tan)針(zhen)法PCR鑒定(ding)試劑(ji)盒(he)保(bao)存(cun)

特(te)點(dian)：
1. 即開即用(yong)，用(yong)戶(hu)只需要(yao)提供病(bing)毒(du)樣品(pin)。
2. 根(gen)據地黃(huang)保(bao)守序列(lie)設(she)計的(de)專壹(yi)性(xing)引物(wu)，與(yu)相(xiang)關病毒(du)無(wu)交叉(cha)反應(ying)。
3. 靈敏(min)度(du)可(ke)以達到幾百(bai)拷貝(bei)/反應(ying)。
4. 壹(yi)管(guan)式(shi)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR 檢測(ce)，避(bi)免(mian)後(hou)續汙染(ran)。
5. 本(ben)試劑(ji)盒(he)足(zu)夠 50 次(ci) 20μL 反應(ying)體(ti)系(xi)的(de)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR。
6. 本(ben)產(chan)品(pin)只適用(yong)於(yu)科(ke)研，不(bu)能(neng)用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診斷。

使(shi)用(yong)方(fang)法：
壹(yi)、樣品(pin)采(cai)集：
1、食品樣品(pin)：樣品(pin)的(de)采(cai)集與預培養(yang)按(an)照(zhao)樣品(pin)的(de)采(cai)集與預培養(yang)按(an)照(zhao)《食品衛生(sheng)微生(sheng)物(wu)學(xue)檢驗阪(ban)崎(qi)腸(chang)桿(gan)菌(jun)檢驗要(yao)求(qiu)進行。
2、血(xue)液樣品(pin)：用(yong)無(wu)菌註射器抽(chou)取受(shou)檢者(zhe)靜(jing)脈血(xue)2mL，註入無(wu)菌EDTA2Na(或(huo)檸檬酸(suan)鈉(na))抗(kang)凝管(guan)，立(li)即混勻(yun)。
3、糞便樣品(pin)：取(qu)糞便置於(yu)滅菌的(de)收集管中送(song)檢。
4、病(bing)竈(zao)部(bu)位(wei)樣品(pin)：取(qu)發(fa)病部(bu)位(wei)新(xin)鮮滲(shen)出物(wu)、粘液膿(nong)血送(song)檢。
壹(yi)、稀(xi)釋(shi) PCR 陽性對(dui)照(zhao)（以 10E2-10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 這(zhe) 6 個(ge) 10 倍(bei)稀(xi)釋(shi)度(du)為例）
1. 註意：由(you)於(yu)標(biao)準(zhun)品濃(nong)度(du)非常(chang)高，因此下列(lie)稀(xi)釋(shi)操(cao)作壹(yi)定(ding)要(yao)在(zai)獨(du)立(li)的(de)區域進行，千萬(wan)不(bu)能(neng)汙染(ran)樣品(pin)或(huo)本(ben)試劑(ji)盒(he)的(de)其他(ta)成(cheng)分）。為(wei)增加產(chan)品(pin)穩(wen)定(ding)性(xing)和(he)避(bi)免(mian)擴散(san)傳染(ran)性病(bing)原(yuan)，本(ben)產品不(bu)提供活(huo)體(ti)樣品(pin)做(zuo)陽性對(dui)照(zhao)，只提供可(ke)以直(zhi)接(jie)使(shi)用(yong)的(de) DNA段(duan)作(zuo)為(wei)陽性對(dui)照(zhao)。
2. 標(biao)記 6 個(ge)離(li)心(xin)管，分(fen)別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯槍頭分別加入(ru) 45 μL 熒(ying)光(guang) PCR 模(mo)板(ban)稀(xi)釋(shi)液（用(yong)帶(dai)芯槍頭，下同）。
4. 在(zai) 7 號(hao)管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽性對(dui)照(zhao)，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待(dai)用(yong)。
5. 換(huan)槍頭，在(zai) 6 號(hao)管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽性對(dui)照(zhao)(上(shang)步(bu)稀(xi)釋(shi)所(suo)得(de))，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待(dai)用(yong)。
6. 換(huan)槍頭，在(zai) 5 號(hao)管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽性對(dui)照(zhao)到 5 號(hao)管(guan)中，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待(dai)用(yong)。
7. 重(zhong)復(fu)上(shang)面(mian)的(de)操(cao)作直(zhi)到(dao)得(de)到(dao) 6 個(ge)稀(xi)釋(shi)度(du)的(de)陽性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待(dai)用(yong)。
註：上述樣品(pin)建議(yi)經(jing)過增菌後(hou)，收集培養(yang)物(wu)用(yong)於(yu)檢測(ce)。 
二(er)、DNA提(ti)取(qu)：
可(ke)采(cai)用(yong)PCR試劑(ji)盒(he)配備的(de)DNA抽(chou)提液，按(an)以下說明(ming)進行DNA核酸(suan)的(de)粗(cu)提。也可(ke)采(cai)購上(shang)海(hai)澤葉生(sheng)物(wu)科(ke)技(ji)有限公(gong)司生(sheng)產(chan)的(de)DNA提(ti)取(qu)試劑(ji)盒(he)(過柱(zhu)法-熒(ying)光(guang)配套(tao))或(huo)其(qi)他合(he)適的(de)商(shang)業化(hua)產(chan)品，並(bing)按(an)照(zhao)相應(ying)試劑(ji)盒(he)說明(ming)進行操(cao)作。
1、液體(ti)培養(yang)物(wu)：取(qu)液體(ti)培養(yang)物(wu)100μL加到(dao)1.5mL無(wu)菌離(li)心(xin)管中，8000rpm離(li)心(xin)3min，盡(jin)量(liang)吸(xi)棄(qi)上清，加入(ru)50μL DNA抽(chou)提液充分(fen)混勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上(shang)清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
2、固(gu)體(ti)培養(yang)物(wu)：挑(tiao)取單(dan)克(ke)隆菌落(luo)與(yu)50μL DNA抽(chou)提液充分(fen)混勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上(shang)清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
3、糞便樣品(pin)：挑(tiao)取米粒大(da)小糞便於(yu)滅菌離(li)心(xin)管中，加入(ru)0.5mL生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)，振蕩混勻(yun)，13000rpm離(li)心(xin)3分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上(shang)清，沈澱(dian)中加入(ru)50μL DNA抽(chou)提液充分(fen)混勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上(shang)清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
4、其(qi)他(ta)液體(ti)標(biao)本(ben)：取(qu)標(biao)本2-3mL，13000rpm離(li)心(xin)3min，棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱(dian)中加入(ru)50μL DNA抽(chou)提液充分(fen)混勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上(shang)清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
註：陽性對(dui)照(zhao)和(he)陰(yin)性對(dui)照(zhao)為已(yi)經抽(chou)提好(hao)的(de)核酸(suan)(無(wu)需提(ti)取)，直(zhi)接(jie)取5μL加入(ru)到(dao)反應(ying)體(ti)系(xi)中即可。由於(yu)陽性對(dui)照(zhao)濃(nong)度(du)較(jiao)高，建議(yi)在(zai)樣品(pin)制備區域加入(ru)陽性對(dui)照(zhao)。 
實(shi)驗流(liu)程(cheng)：
1. 整(zheng)個(ge)檢測(ce)過程(cheng)應(ying)嚴(yan)格按(an)照(zhao)本說明(ming)書要(yao)求(qiu)分(fen)別在(zai)試劑(ji)準備(bei)區(qu)、樣本(ben)處理(li)區(qu)和(he)PCR擴(kuo)增區進行操(cao)作，各(ge)區(qu)實(shi)驗服、儀器 、耗(hao)材(cai)應(ying)獨(du)立(li)使(shi)用(yong)，不(bu)能(neng)混用(yong)；實(shi)驗用(yong)吸(xi)頭采(cai)用(yong)帶(dai)濾芯吸(xi)頭；樣本(ben)處理(li)區(qu)應(ying)配有生(sheng)物(wu)安全櫃，樣本(ben)處理(li)在(zai)生(sheng)物(wu)安全櫃中進行操(cao)作；三個(ge)區應(ying)該(gai)配有紫外(wai)線殺菌(jun)裝(zhuang)置。
2. 為(wei)避(bi)免(mian)RNA降(jiang)解(jie)，樣本(ben)處理(li)過程(cheng)應(ying)在(zai)0-4℃條件下操(cao)作，且(qie)完(wan)成(cheng)實(shi)驗後(hou)立(li)即上機檢測(ce)；樣本(ben)處理(li)過程(cheng)中使(shi)用(yong)的(de)器具(ju)耗(hao)材(cai)應(ying)經(jing)過無(wu)核酶(mei)處理(li)。
3. 每(mei)次(ci)實(shi)驗應(ying)該(gai)設(she)置陰、陽性對(dui)照(zhao)。
4. 試劑(ji)盒(he)所(suo)有試劑(ji)在(zai)使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)該(gai)在(zai)常(chang)溫下充分(fen)融化(hua)混勻(yun)，並應(ying)瞬(shun)時(shi)離(li)心(xin)。
5. 試劑(ji)盒(he)內(nei)所配陰性和(he)陽性對(dui)照(zhao)在(zai)壹次(ci)使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)全部(bu)轉移(yi)至(zhi)標(biao)本(ben)準(zhun)備區(qu)，並(bing)單(dan)獨(du)存放(fang)。
6. 為(wei)防(fang)止(zhi)熒(ying)光(guang)幹(gan)擾(rao)，應(ying)避(bi)免(mian)裸手直(zhi)接(jie)接觸PCR反應(ying)管(guan)，並(bing)應(ying)避(bi)免(mian)在(zai)PCR反應(ying)管(guan)上(shang)進行任何(he)標記。
7. 儀(yi)器 擴(kuo)增相關參數(shu)應(ying)按(an)照(zhao)本說明(ming)書相(xiang)關要(yao)求(qiu)進行設置；不同(tong)批(pi)號試劑(ji)不能(neng)混用(yong)。
8. ABI系(xi)列(lie)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀(yi)參數(shu)設(she)置中不選(xuan)ROX校正，淬滅基因選(xuan)擇(ze)None。
9. 實(shi)驗過程(cheng)中產品(pin)的(de)廢棄(qi)物(wu)應(ying)該(gai)進行無(wu)害化(hua)處理(li)後(hou)方(fang)可丟(diu)棄(qi)。
儲(chu)存條件：
14℃或(huo)－20℃樣品(pin)收集、處理(li)及(ji)保(bao)存(cun)方(fang)法
1. 血(xue)清(qing)：使(shi)用(yong)不(bu)含(han)熱(re)原(yuan)和(he)內(nei)毒(du)素(su)的(de)試管，操(cao)作過程(cheng)中避免(mian)任何(he)細(xi)胞刺激，收集血液後(hou)，3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血(xue)清和(he)紅(hong)細(xi)胞迅(xun)速小(xiao)心(xin)地分(fen)離(li)。
2. 血(xue)漿：EDTA、檸檬酸(suan)鹽(yan)或(huo)肝(gan)素抗(kang)凝。3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)30 分(fen)鐘(zhong)取(qu)上(shang)清。
3. 細(xi)胞上(shang)清液：3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)去除顆粒和(he)聚(ju)合(he)物(wu)。
4. 組(zu)織勻(yun)漿：將組(zu)織加入(ru)適(shi)量生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)搗碎(sui)。3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)取(qu)上(shang)清。
5. 保(bao)存(cun)：如(ru)果(guo)樣本(ben)收集後(hou)不及(ji)時(shi)檢測(ce)，請按(an)壹(yi)次(ci)用(yong)量(liang)分(fen)裝(zhuang)，凍存於(yu)-20℃，避(bi)免(mian)反復凍融，在(zai)室(shi)溫下解凍並確保(bao)樣品(pin)均(jun)勻(yun)地充分(fen)解(jie)凍。
U266B1 [U266], 人(ren)多(duo)發(fa)性骨(gu)髓瘤(liu)細(xi)胞脫氟*鹽(yan)酸(suan)鹽(yan)Defluoro Paroxetine, 質(zhi)量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進口

人(ren)導(dao)管瘤(liu)細(xi)胞;BT-474 大(da)鼠(shu)腎(shen)動脈內(nei)皮細(xi)胞*培養(yang)基 100mL*馬(ma)來酸(suan)鹽(yan)Paroxetine maleate質(zhi)量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進口

MFC 小(xiao)鼠(shu)胃癌(ai)細(xi)胞4-羥(qiang)基-2H-1,2-苯(ben)並(bing)噻(sai)嗪-3-羧(suo)酸(suan)乙(yi)酯(zhi) 1,1-二(er)氧化(hua)物(wu)4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylic acid ethyl ester 1,1-Dioxide質(zhi)量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進口

IL21R Others Human 人(ren) IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照(zhao)) 甲基4-羥(qiang)基-2H-1,2-苯(ben)並(bing)噻(sai)嗪-3-羧(suo)酸(suan)鹽(yan) 1,1-二(er)氧化(hua)物(wu)Methyl 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide質(zhi)量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進口

小(xiao)鼠(shu)腦瘤細(xi)胞;BC3H1去甲基*(*雜(za)質(zhi)B)Desmethyl Piroxicam (Piroxicam Impurity B)質(zhi)量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進口
人(ren)胚肺細(xi)胞VA13細(xi)胞;WI-38 VA13亞(ya)系(xi)2RATPCKTPCK質(zhi)量(liang)規(gui)格：>97%,BR

大(da)鼠(shu)腎(shen)小球系膜(mo)細(xi)胞;HBZY-1 結(jie)腸(chang)腺(xian)癌細(xi)胞，LS 174T細(xi)胞 RPC細(xi)胞，大(da)鼠(shu)垂體(ti)細(xi)胞L-苯(ben)*甲酯鹽(yan)酸(suan)鹽(yan)(s)-2-phenylglycine methyl ester 質(zhi)量(liang)規(gui)格：0.98

CNE1, 人(ren)鼻(bi)咽癌(ai)細(xi)胞系(xi) HumanD-*乙(yi)酯(zhi)鹽(yan)酸(suan)鹽(yan)H-D-Ala-OEt·HCl質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98.5%,BR

CD180 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) CD180 / RP105 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照(zhao)) *;利拉(la)利汀Linagliptin質(zhi)量(liang)規(gui)格：>99%,二(er)肽(tai)肽(tai)酶(mei)-4(DPP-4)抑制劑(ji)

前(qian)脂肪(fang)細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)L-*-α-芐酯(zhi)L-Glutamic Acid 1-Benzyl Ester質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98%,BR
大(da)鼠(shu)內膜(mo)上(shang)皮(pi)細(xi)胞*培養(yang)基 100mL升(sheng)麻(ma)素(su)苷(gan)（標準品(pin)）質量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)Prim-O-glucosylcimifugin

KU812人(ren)外(wai)周(zhou)血(xue)嗜堿性(xing)白血(xue)病(bing)細(xi)胞 Human peripheral blood KU812 basophilic leukemia cells IMDM培養(yang)基(GIBCO)+10%FBS升(sheng)麻(ma)酮(tong)醇-3-O-α-L-拉(la)伯(bo)糖苷(gan)（標準品(pin)）質量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)Cimigel-3-O-α-L-arabiside

FGF9 Protein Human 重(zhong)組(zu)人 FGF9 蛋(dan)白 (Fc 標(biao)簽(qian))聖(sheng)草(cao)苷(gan)（標準品(pin)）質量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)Eriocitrin

COLO 320DM(人(ren)結(jie)直(zhi)腸(chang)腺(xian)癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2 人(ren)心(xin)臟成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞-心(xin)室(shi)HCF-av聖(sheng)草(cao)酚(標(biao)準(zhun)品(pin)）質(zhi)量規格：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)Eriodictyol

正常(chang)小鼠(shu)Sertoli細(xi)胞;TM4*（卡洛(luo)）標(biao)準(zhun)品質(zhi)量(liang)規(gui)格：供檢查用(yong)Carbazochrome
桑(sang)椹(shen)探(tan)針(zhen)法PCR鑒定(ding)試劑(ji)盒(he)保(bao)存(cun)SUP-B15(人(ren)Ph+急(ji)淋(lin)白血(xue)病(bing)細(xi)胞系(xi)) 5×106cells/瓶×2分(fen)子篩13X型(xing)100U2～8℃

Hepa 1-6(小(xiao)鼠(shu)肝癌(ai)細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0458U-118 MG(人(ren)腦星形膠質(zhi)母細(xi)胞瘤(liu))5×106cells/瓶×2 人(ren)胎(tai)兒(er)胸(xiong)腺(xian)細(xi)胞株(zhu);HFT-8810 [HFT8810]2，4，5-三拂(fu)本加醋(cu) 2,4,5-Trifluorobqnzoic ccid 446-17-3

人(ren)卵(luan)巢畸胎(tai)瘤(liu)細(xi)胞;PA-1礦(kuang)物(wu)油(you)100毫(hao)克(ke)

NCAM1 Others Rat 大(da)鼠(shu) NCAM1 / CD5