豬苓(ling)探(tan)針(zhen)法PCR鑒定試(shi)劑(ji)盒直(zhi)銷

特(te)點(dian)：
1. 即(ji)開(kai)即(ji)用(yong)，用(yong)戶只需(xu)要提(ti)供(gong)病(bing)毒樣(yang)品。
2. 根據地黃(huang)保(bao)守序(xu)列(lie)設(she)計(ji)的(de)專壹(yi)性引物，與(yu)相(xiang)關病(bing)毒(du)無交叉反應(ying)。
3. 靈(ling)敏度可(ke)以達(da)到(dao)幾百(bai)拷(kao)貝/反(fan)應(ying)。
4. 壹(yi)管式(shi)熒(ying)光定量(liang) PCR 檢(jian)測(ce)，避(bi)免(mian)後(hou)續汙染(ran)。
5. 本試劑(ji)盒足(zu)夠(gou) 50 次 20μL 反(fan)應(ying)體系(xi)的熒光定量(liang) PCR。
6. 本產(chan)品只適用(yong)於科研(yan)，不能(neng)用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷。

使(shi)用(yong)方(fang)法：
壹(yi)、樣品采集(ji)：
1、食(shi)品樣品：樣品的采(cai)集(ji)與預培(pei)養(yang)按照樣(yang)品的采(cai)集(ji)與預培(pei)養(yang)按照《食(shi)品衛生微生物學(xue)檢驗(yan)阪崎腸桿(gan)菌(jun)檢(jian)驗(yan)要求進行。
2、血(xue)液樣品：用(yong)無菌註射器(qi)抽取受(shou)檢者(zhe)靜(jing)脈血(xue)2mL，註(zhu)入無菌EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬酸(suan)鈉)抗凝管，立(li)即(ji)混(hun)勻。
3、糞(fen)便(bian)樣(yang)品：取糞(fen)便(bian)置於滅菌的(de)收(shou)集(ji)管中(zhong)送檢(jian)。
4、病(bing)竈(zao)部(bu)位(wei)樣品：取發病(bing)部(bu)位(wei)新鮮滲出(chu)物、粘(zhan)液膿(nong)血(xue)送檢(jian)。
壹(yi)、稀(xi)釋 PCR 陽(yang)性對照（以 10E2-10E7 拷(kao)貝/μL 這(zhe) 6 個(ge) 10 倍(bei)稀(xi)釋度為(wei)例(li)）
1. 註(zhu)意：由於標(biao)準品濃度(du)非(fei)常高，因(yin)此(ci)下列(lie)稀(xi)釋操(cao)作(zuo)壹定要在獨立的區域(yu)進(jin)行(xing)，千萬(wan)不能(neng)汙染(ran)樣(yang)品或(huo)本試劑(ji)盒的(de)其(qi)他成分）。為增加(jia)產(chan)品穩(wen)定性和(he)避(bi)免(mian)擴(kuo)散傳(chuan)染(ran)性病原，本產(chan)品不提(ti)供(gong)活(huo)體樣(yang)品做陽(yang)性對照，只提(ti)供(gong)可(ke)以直(zhi)接使(shi)用(yong)的 DNA段(duan)作(zuo)為陽(yang)性對照。
2. 標(biao)記 6 個(ge)離心管，分別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶芯(xin)槍頭(tou)分別(bie)加(jia)入 45 μL 熒(ying)光 PCR 模(mo)板(ban)稀(xi)釋液（用(yong)帶芯(xin)槍頭(tou)，下同(tong)）。
4. 在(zai) 7 號(hao)管中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對照，充(chong)分震蕩 1 分鐘，得(de)1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對照。放冰(bing)上待用(yong)。
5. 換(huan)槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 6 號(hao)管中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對照(上步(bu)稀(xi)釋所(suo)得(de))，充(chong)分震蕩 1 分鐘，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對照。放冰(bing)上待用(yong)。
6. 換(huan)槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 5 號(hao)管中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對照到(dao) 5 號(hao)管中(zhong)，充(chong)分震蕩 1 分鐘，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對照。放冰(bing)上待用(yong)。
7. 重(zhong)復(fu)上面的(de)操(cao)作(zuo)直(zhi)到(dao)得(de)到(dao) 6 個(ge)稀(xi)釋度的(de)陽(yang)性對照。放冰(bing)上待用(yong)。
註(zhu)：上述(shu)樣(yang)品建議(yi)經(jing)過增菌後(hou)，收(shou)集(ji)培養(yang)物用(yong)於檢(jian)測(ce)。 
二(er)、DNA提(ti)取：
可(ke)采(cai)用(yong)PCR試(shi)劑盒配備的DNA抽提(ti)液，按以下說明(ming)進(jin)行DNA核(he)酸(suan)的粗(cu)提(ti)。也可(ke)采(cai)購(gou)上海澤(ze)葉(ye)生物科技有(you)限公(gong)司生產(chan)的DNA提(ti)取試劑盒(he)(過(guo)柱法-熒(ying)光配套(tao))或(huo)其(qi)他合適(shi)的商(shang)業化(hua)產(chan)品，並按照相(xiang)應(ying)試(shi)劑盒說(shuo)明進行操(cao)作(zuo)。
1、液(ye)體培(pei)養物：取液體培(pei)養物100μL加(jia)到(dao)1.5mL無菌離心(xin)管中(zhong)，8000rpm離(li)心3min，盡(jin)量(liang)吸棄(qi)上清(qing)，加(jia)入50μL DNA抽提(ti)液充(chong)分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取上清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
2、固(gu)體培(pei)養物：挑取單(dan)克隆(long)菌(jun)落與(yu)50μL DNA抽提(ti)液充(chong)分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取上清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
3、糞(fen)便(bian)樣(yang)品：挑取米粒(li)大小糞(fen)便(bian)於(yu)滅(mie)菌離(li)心(xin)管中(zhong)，加(jia)入0.5mL生(sheng)理鹽(yan)水(shui)，振(zhen)蕩混(hun)勻，13000rpm離(li)心3分鐘，棄上清(qing)，沈(chen)澱中(zhong)加(jia)入50μL DNA抽提(ti)液充(chong)分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min取上清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
4、其(qi)他液體標(biao)本：取標(biao)本2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱中(zhong)加(jia)入50μL DNA抽提(ti)液充(chong)分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min取上清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
註(zhu)：陽性對照和(he)陰(yin)性對照為已(yi)經抽提(ti)好的(de)核(he)酸(suan)(無需(xu)提(ti)取)，直(zhi)接取5μL加(jia)入到(dao)反應(ying)體系(xi)中即(ji)可(ke)。由於陽(yang)性對照濃度(du)較高，建議(yi)在(zai)樣品制備區域(yu)加(jia)入陽(yang)性對照。 
實驗(yan)流程(cheng)：
1. 整(zheng)個(ge)檢測(ce)過(guo)程(cheng)應(ying)嚴(yan)格按照本說明(ming)書要求分別(bie)在試(shi)劑(ji)準備區、樣(yang)本處(chu)理區和(he)PCR擴(kuo)增區進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)，各區實驗(yan)服、儀(yi)器 、耗(hao)材(cai)應(ying)獨立使(shi)用(yong)，不能(neng)混(hun)用(yong)；實驗(yan)用(yong)吸頭(tou)采(cai)用(yong)帶濾芯(xin)吸頭(tou)；樣(yang)本處(chu)理區應(ying)配有(you)生物安(an)全櫃(gui)，樣(yang)本處(chu)理在(zai)生物安(an)全櫃(gui)中(zhong)進行操(cao)作(zuo)；三(san)個(ge)區應(ying)該配有(you)紫外線殺(sha)菌(jun)裝置。
2. 為(wei)避(bi)免(mian)RNA降(jiang)解，樣本處(chu)理過(guo)程(cheng)應(ying)在(zai)0-4℃條(tiao)件下操(cao)作(zuo)，且完(wan)成(cheng)實驗(yan)後立(li)即(ji)上機(ji)檢(jian)測(ce)；樣(yang)本處(chu)理過(guo)程(cheng)中使(shi)用(yong)的器(qi)具耗(hao)材(cai)應(ying)經(jing)過無核酶處(chu)理。
3. 每(mei)次實驗(yan)應(ying)該設(she)置陰、陽性對照。
4. 試(shi)劑盒所(suo)有(you)試劑(ji)在使(shi)用(yong)前應(ying)該在常(chang)溫下充(chong)分融化(hua)混(hun)勻，並應(ying)瞬時離(li)心(xin)。
5. 試(shi)劑盒內所(suo)配陰(yin)性和(he)陽(yang)性對照在壹(yi)次使(shi)用(yong)前應(ying)全(quan)部(bu)轉(zhuan)移(yi)至(zhi)標(biao)本準備區，並單(dan)獨存放。
6. 為(wei)防止熒(ying)光幹擾，應(ying)避(bi)免(mian)裸(luo)手直(zhi)接接(jie)觸PCR反(fan)應(ying)管，並應(ying)避(bi)免(mian)在(zai)PCR反(fan)應(ying)管上進(jin)行(xing)任何標(biao)記。
7. 儀(yi)器 擴(kuo)增相(xiang)關參(can)數(shu)應(ying)按照本說明(ming)書相(xiang)關要求進行設(she)置；不同(tong)批(pi)號(hao)試(shi)劑(ji)不能(neng)混(hun)用(yong)。
8. ABI系(xi)列(lie)熒(ying)光定量(liang)PCR儀(yi)參(can)數(shu)設(she)置中不選(xuan)ROX校正，淬(cui)滅基(ji)因(yin)選(xuan)擇(ze)None。
9. 實驗(yan)過程(cheng)中產(chan)品的廢(fei)棄(qi)物應(ying)該進行(xing)無害(hai)化(hua)處(chu)理後(hou)方(fang)可(ke)丟(diu)棄(qi)。
儲(chu)存(cun)條(tiao)件：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品收(shou)集(ji)、處(chu)理及(ji)保(bao)存方(fang)法
1. 血(xue)清(qing)：使(shi)用(yong)不含(han)熱(re)原和(he)內毒(du)素的(de)試管，操(cao)作(zuo)過程(cheng)中避(bi)免(mian)任何細胞刺(ci)激，收(shou)集(ji)血液(ye)後，3000 轉(zhuan)離(li)心10 分鐘將(jiang)血(xue)清(qing)和(he)紅細胞迅(xun)速小心地分離。
2. 血(xue)漿：EDTA、檸(ning)檬酸(suan)鹽(yan)或(huo)肝素抗凝。3000 轉(zhuan)離(li)心30 分鐘取上清(qing)。
3. 細胞上清(qing)液(ye)：3000 轉(zhuan)離(li)心10 分鐘去除顆(ke)粒(li)和(he)聚合物。
4. 組(zu)織勻漿(jiang)：將(jiang)組(zu)織加(jia)入適(shi)量(liang)生理鹽(yan)水(shui)搗(dao)碎。3000 轉(zhuan)離(li)心10 分鐘取上清(qing)。
5. 保(bao)存：如(ru)果樣(yang)本收(shou)集(ji)後不(bu)及時檢(jian)測(ce)，請(qing)按壹次用(yong)量(liang)分裝，凍(dong)存於(yu)-20℃，避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍融(rong)，在(zai)室(shi)溫下解凍(dong)並確(que)保(bao)樣品均勻地充(chong)分解凍。
HBMEC-c 人(ren)類腦(nao)部(bu)微血管內皮(pi)細胞(HBMEC) 500,000cells 腦(nao)微血管內皮(pi)細胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(fang)(1ml)普(pu)伐他丁鈉（標(biao)準品）Pravastatin  質(zhi)量(liang)規格：HPLC>98%,標(biao)準品

軟骨細胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(fang)(1ml)普(pu)伐他丁鈉Pravastatin  質(zhi)量(liang)規格：>98%

IL6ST Others Rat 大(da)鼠(shu) gp130 / IL6ST / CD130 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照) 潑(po)尼龍Prednisolone質(zhi)量(liang)規格：>98.5%,USP/BP

PA317 小鼠(shu)胚胎(tai)成纖維(wei)細胞潑尼(ni)龍(long)（標(biao)準品）Prednisolone質(zhi)量(liang)規格：HPLC>98%,標(biao)準品

山(shan)羊皮(pi)膚細胞;WGS1匹莫(mo)範色(se)林(lin)；哌(pai)馬(ma)色林(lin)Pimavanserin;ACP-103質(zhi)量(liang)規格：>98%,5-HT2A高效選(xuan)擇(ze)性激動劑
IGF1R Others Human 人(ren) IGF1R 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照) 2,7-二(er)溴(xiu)萘(>98.0%(GC))2,7-Dibromonaphthalene質(zhi)量(liang)規格：>98.0%(GC)

高背(bei)鯽(ji)魚尾(wei)鰭(qi)細胞;GBJd2,7-二(er)溴(xiu)-9,9'-螺(luo)二(er)[9H-芴(wu)](>98.0%(HPLC)(T))2,7-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]質(zhi)量(liang)規格：>98.0%(HPLC)(T)

SCG2 Others Human 人(ren) SCG2 / Secretogranin II 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照) 2,6-二(er)甲(jia)基(ji)-3,5-庚(geng)二(er)酮(>97.0%(GC))2,6-Dimethyl-3,5-heptanedione質(zhi)量(liang)規格：>97.0%(GC)

原代骨細胞特制(zhi)基(ji)礎培養(yang)基(ji)Many types of cells包(bao)裝：500/250/1009H,9H-三(san)十氟(fu)-8,10-十(shi)七烷二(er)酮(>98.0%(GC))9H,9H-Triacontafluoro-8,10-heptadecanedione質(zhi)量(liang)規格：>98.0%(GC)

G-401細胞，人腎(shen)癌(ai)Wilms 人(ren)癌(ai)細胞,MX-1細胞 周細胞生長添加(jia)物PGS9-溴(xiu)菲(>98.0%(GC))9-Bromophenanthrene質(zhi)量(liang)規格：>98.0%(GC)
MDA-MB-468-06(人(ren)癌(ai)細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 Y1(腎(shen)上腺(xian)皮(pi)質(zhi)細胞)氯(lv)解1定（標(biao)準品）質量(liang)規格：HPLC法含量(liang)測(ce)定2-Pyridinealdoxime methochloride

C57小鼠(shu)色素瘤(liu)瘤株(zhu);ME (Me)（標(biao)準品）質量(liang)規格：HPLC法含量(liang)測(ce)定CYPROHEPTADINE

OLR1 Others Human 人(ren) OLR1 / LOX1 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照) （標(biao)準品）質量(liang)規格：含(han)量(liang)測(ce)定Amidopyrine/amipyrine

CaEs-17 人(ren)食管癌(ai)細胞（標(biao)準品）質量(liang)規格：含(han)量(liang)測(ce)定Thalidomide

GBC-SD人(ren)膽囊癌(ai)細胞 GBC-SD cells in human gallbladder carcimas RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS鹽(yan)酸(suan)塞利(li)洛爾(er)（標(biao)準品）質量(liang)規格：UV法含量(liang)測(ce)定Celiprolol
豬苓(ling)探(tan)針(zhen)法PCR鑒定試(shi)劑(ji)盒直(zhi)銷人(ren)皮(pi)膚成(cheng)纖維(wei)細胞;CCC-HSF-1化(hua)啶(ding)shēng huà shì jì容(rong)量(liang)：1公(gong)斤(jin)

人(ren)肺成纖維(wei)細胞 (HPF)( 5×105 )環(huan)沙(sha)星 Ciprofloxacin (HPLC,≥98.0%) 85721-33-1 5G 通用(yong)試劑(ji)

CL-0277HCC94(人(ren)鱗癌(ai)細胞(高分化(hua)))5×106cells/瓶(ping)×2羌(qiang)安(an)言(yan)醋(cu)鹽(yan);言(yan)醋(cu)羌(qiang)安(an);錄(lu)化(hua)羌(qiang)銨(an);輕(qing)錄羌(qiang)安(an);言(yan)醋(cu)胲;羌(qiang)基(ji)錄化(hua)銨(an) xy7xylcMinq xy7chloridq;xy7xylcMMoniuM chloridq 2470-11-1

人(ren)肺粘液(ye)上皮(pi)樣(yang)癌(ai)細胞;