海螵蛸染料(liao)法(fa)PCR鑒定(ding)試(shi)劑(ji)盒(he)*

實(shi)驗(yan)流(liu)程：
1. 整個檢(jian)測(ce)過程應(ying)嚴格按(an)照(zhao)本說(shuo)明書要求(qiu)分(fen)別(bie)在(zai)試劑(ji)準(zhun)備(bei)區、樣(yang)本處理區(qu)和PCR擴增(zeng)區進(jin)行操作，各區(qu)實(shi)驗(yan)服、儀(yi)器(qi) 、耗材應(ying)獨立(li)使用，不能混(hun)用；實(shi)驗(yan)用吸頭采用帶濾芯(xin)吸頭；樣本處理區(qu)應配(pei)有生(sheng)物(wu)安全櫃(gui)，樣(yang)本(ben)處理在(zai)生(sheng)物(wu)安全櫃(gui)中進行操作；三個區(qu)應(ying)該配(pei)有紫外線(xian)殺菌裝置。
2. 為避(bi)免RNA降解，樣(yang)本處理過程應(ying)在(zai)0-4℃條(tiao)件下操(cao)作，且完(wan)成實(shi)驗(yan)後(hou)立(li)即上機檢(jian)測(ce)；樣(yang)本處理過程中使用的(de)器(qi)具耗(hao)材應(ying)經(jing)過無(wu)核酶處理。
3. 每(mei)次(ci)實(shi)驗(yan)應(ying)該設(she)置陰、陽(yang)性對照(zhao)。
4. 試劑(ji)盒(he)所(suo)有試(shi)劑(ji)在(zai)使用前應(ying)該在(zai)常(chang)溫(wen)下充(chong)分融化(hua)混(hun)勻，並應瞬(shun)時離心。
5. 試劑(ji)盒(he)內(nei)所(suo)配(pei)陰性和陽(yang)性對照(zhao)在(zai)壹次(ci)使用前應(ying)全(quan)部轉移(yi)至(zhi)標(biao)本準(zhun)備(bei)區，並(bing)單獨存放(fang)。
6. 為(wei)防止(zhi)熒(ying)光幹擾，應避(bi)免裸手直接(jie)接(jie)觸PCR反(fan)應管(guan)，並(bing)應(ying)避(bi)免在(zai)PCR反(fan)應管(guan)上進行任何標記(ji)。
7. 儀(yi)器(qi) 擴增相(xiang)關(guan)參(can)數(shu)應按(an)照(zhao)本說(shuo)明書相關要求(qiu)進(jin)行設(she)置；不(bu)同批(pi)號(hao)試劑(ji)不(bu)能混(hun)用。
8. ABI系(xi)列熒光定量PCR儀參(can)數(shu)設(she)置中不選(xuan)ROX校(xiao)正(zheng)，淬滅(mie)基(ji)因選擇None。
9. 實(shi)驗(yan)過程中產品(pin)的(de)廢(fei)棄(qi)物(wu)應該進行無(wu)害(hai)化處理後(hou)方(fang)可丟(diu)棄(qi)。

特點：
1. 即開即用，用戶(hu)只(zhi)需要提供(gong)病毒(du)樣品(pin)。
2. 根(gen)據(ju)地(di)黃保(bao)守(shou)序(xu)列設(she)計的(de)專(zhuan)壹(yi)性(xing)引(yin)物(wu)，與相關病毒(du)無(wu)交叉(cha)反(fan)應。
3. 靈(ling)敏度(du)可以達到(dao)幾(ji)百拷貝(bei)/反(fan)應。
4. 壹(yi)管式(shi)熒光定量 PCR 檢(jian)測(ce)，避(bi)免後續汙(wu)染。
5. 本試(shi)劑(ji)盒(he)足(zu)夠(gou) 50 次(ci) 20μL 反(fan)應體(ti)系(xi)的(de)熒光定量 PCR。
6. 本產品(pin)只(zhi)適(shi)用於科研(yan)，不(bu)能用於臨(lin)床診斷。
使用方(fang)法：
壹(yi)、樣品(pin)采集(ji)：
1、食品(pin)樣(yang)品(pin)：樣(yang)品(pin)的(de)采集(ji)與(yu)預培(pei)養按(an)照(zhao)樣品(pin)的(de)采集(ji)與(yu)預培(pei)養按(an)照(zhao)《食品(pin)衛(wei)生(sheng)微(wei)生(sheng)物(wu)學檢(jian)驗(yan)阪(ban)崎腸桿菌檢(jian)驗(yan)要求(qiu)進(jin)行。
2、血(xue)液樣品(pin)：用無(wu)菌註射器(qi)抽取受檢(jian)者(zhe)靜脈血(xue)2mL，註入無(wu)菌EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬(meng)酸(suan)鈉)抗(kang)凝管(guan)，立(li)即混(hun)勻。
3、糞便樣品(pin)：取(qu)糞便置於滅菌的(de)收集(ji)管(guan)中送(song)檢(jian)。
4、病竈部(bu)位(wei)樣品(pin)：取(qu)發(fa)病部位(wei)新(xin)鮮(xian)滲(shen)出(chu)物(wu)、粘(zhan)液膿(nong)血(xue)送(song)檢(jian)。
壹、稀釋(shi) PCR 陽(yang)性對照(zhao)（以 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這(zhe) 6 個 10 倍(bei)稀釋(shi)度(du)為例(li)）
1. 註(zhu)意：由(you)於(yu)標(biao)準(zhun)品(pin)濃(nong)度(du)非常(chang)高(gao)，因此(ci)下列(lie)稀釋(shi)操(cao)作壹定(ding)要在(zai)獨立(li)的(de)區域進行，千(qian)萬(wan)不能汙(wu)染樣(yang)品(pin)或(huo)本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)其他(ta)成分(fen)）。為增加(jia)產(chan)品(pin)穩(wen)定性和(he)避(bi)免擴散傳(chuan)染性(xing)病原(yuan)，本產(chan)品(pin)不(bu)提供(gong)活(huo)體樣(yang)品(pin)做陽(yang)性對照(zhao)，只提供(gong)可以直接(jie)使用的(de) DNA段作為陽(yang)性對照(zhao)。
2. 標記(ji) 6 個(ge)離(li)心管，分別(bie)為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯(xin)槍頭(tou)分別(bie)加(jia)入 45 μL 熒(ying)光 PCR 模(mo)板稀釋(shi)液（用帶芯(xin)槍頭(tou)，下同）。
4. 在(zai) 7 號管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)，充分(fen)震蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待用。
5. 換槍(qiang)頭，在(zai) 6 號管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)(上步稀釋(shi)所(suo)得(de))，充分震蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待用。
6. 換槍(qiang)頭，在(zai) 5 號管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)到 5 號管中，充分(fen)震蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待用。
7. 重(zhong)復(fu)上面的(de)操作直到(dao)得到(dao) 6 個稀釋(shi)度(du)的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待用。
註(zhu)：上述樣品(pin)建議(yi)經(jing)過增菌後，收(shou)集(ji)培(pei)養物(wu)用於檢(jian)測(ce)。 
二(er)、DNA提取(qu)：
可(ke)采用PCR試(shi)劑(ji)盒(he)配(pei)備(bei)的(de)DNA抽提液，按(an)以下說(shuo)明進行DNA核酸(suan)的(de)粗(cu)提。也(ye)可采購上海澤(ze)葉(ye)生(sheng)物(wu)科技(ji)有限(xian)公司(si)生(sheng)產(chan)的(de)DNA提取(qu)試劑(ji)盒(he)(過柱(zhu)法(fa)-熒(ying)光配(pei)套)或(huo)其(qi)他(ta)合適(shi)的(de)商業化產品(pin)，並(bing)按(an)照(zhao)相應(ying)試劑(ji)盒(he)說(shuo)明(ming)進行操作。
1、液體培(pei)養物(wu)：取液體培(pei)養物(wu)100μL加到(dao)1.5mL無(wu)菌離心管中，8000rpm離心3min，盡量(liang)吸棄(qi)上清，加入(ru)50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進行PCR反(fan)應。
2、固(gu)體培(pei)養物(wu)：挑取單克(ke)隆菌落與(yu)50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進行PCR反(fan)應。
3、糞便樣品(pin)：挑取米(mi)粒(li)大小(xiao)糞便於滅菌離心管中，加入(ru)0.5mL生(sheng)理鹽(yan)水，振蕩混(hun)勻，13000rpm離心3分鐘(zhong)，棄(qi)上清，沈(chen)澱(dian)中加入(ru)50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反(fan)應。
4、其(qi)他(ta)液體標(biao)本：取(qu)標(biao)本(ben)2-3mL，13000rpm離心3min，棄(qi)上清，沈(chen)澱(dian)中加入(ru)50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反(fan)應。
註(zhu)：陽(yang)性對照(zhao)和陰性對照(zhao)為已(yi)經(jing)抽提好(hao)的(de)核酸(無(wu)需提取(qu))，直(zhi)接(jie)取5μL加(jia)入到反(fan)應體(ti)系(xi)中即可。由(you)於(yu)陽(yang)性對照(zhao)濃度(du)較高(gao)，建議(yi)在(zai)樣品(pin)制(zhi)備(bei)區域(yu)加入陽(yang)性對照(zhao)。 
莫(mo)索尼(ni)定  Moxonidine   質(zhi)量(liang)規格(ge)：度(du)>99%,BR,可用於細(xi)胞培(pei)養 RatHaptoglobin,Hpt/HPELISAKit大(da)鼠(shu)結合珠(zhu)蛋白(bai)/觸(chu)珠(zhu)蛋白(bai)(Hpt/HP)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

莫(mo)索尼(ni)定(標(biao)準(zhun)品(pin))  Moxonidine   質量(liang)規格(ge)：HPLC>98%,標準(zhun)品(pin) BCA蛋白(bai)質濃度(du)定量(liang)試劑(ji)盒(he)100/500

奈帕(pa)芬(fen)胺(an)  Nepafenac  質量規格(ge)：>99%,BR MouseInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)小(xiao)鼠(shu)胰島(dao)素樣(yang)生(sheng)長因子1(IGF-1)ELISA試劑(ji)盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

奈(nai)帕芬(fen)胺(an)(標準(zhun)品(pin))  Nepafenac  質量(liang)規格(ge)：>99%,標準(zhun)品(pin) 小鼠(shu)嗜酸(suan)粒(li)細胞趨(qu)化蛋白(bai)Eotaxin 3(Eotaxin 3)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) ，英文(wen)名(ming)： Eotaxin 3 ELISA Kit

尼(ni)卡(ka)巴嗪   Nicarbazin   質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>98% 小(xiao)鼠(shu)轉化(hua)生(sheng)長因子α(TGF-α)ELISA檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)Mouseansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit 96T/48T

鹽(yan)酸尼(ni)莫(mo)司汀(ting)  Nimustine HCl(ACNU)  質量規(gui)格：>97.0%,BR,可(ke)用於細(xi)胞培(pei)養 人(ren)高(gao)密(mi)度(du)脂蛋白(bai)膽(HDL-C)試劑(ji)盒(he) Human High density lipoprotein cholesterol,HDL-C ELISA Kit

BEZ235 (Dactolisib)  NVP-BEZ 235  質量(liang)規(gui)格：>98%;ATP競爭性PI3K和mTOR抑(yi)制劑(ji) RatHeatShockFactor1,HSF1ELISAKit大(da)鼠(shu)熱休(xiu)克(ke)因子1(HSF1)ELISA試劑(ji)盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

吡嘧(mi)司特鉀  Pemirolast potassium  質量(liang)規(gui)格：>98% BCA蛋白(bai)質濃度(du)定量(liang)試劑(ji)盒(he)100/500

  Perindopril erbumine  質(zhi)量規格(ge)：>98%,鹽(yan)形(xing)式(shi) MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1,IGFBP-1ELISA試劑(ji)盒(he)小(xiao)鼠(shu)胰島(dao)素樣(yang)生(sheng)長因子結合蛋白(bai)1(IGFBP-1)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

  phenylbutazone  質量(liang)規格：>98%,USP 小(xiao)鼠(shu)嗜酸(suan)粒(li)細胞趨(qu)化蛋白(bai)Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) ，英文(wen)名(ming)： Eotaxin 2/CCL24 ELISA Kit
Cryptanoside A  98570-81-1  中文名(ming)：  分子式(shi)：C30H42O10  度(du)：98.5%  關鍵詞：  古鉤藤; 強心苷; 甾(zai)苷(gan); 植物(wu)提取(qu)物(wu); 天(tian)然(ran)產物(wu); 天(tian)然(ran)產物(wu)庫  小(xiao)鼠(shu)破(po)骨(gu)細胞分(fen)化(hua)因子elisa試劑(ji)盒(he)   小鼠(shu)破(po)骨(gu)細胞分(fen)化(hua)因子試(shi)劑(ji)盒(he)   規格(ge)型號：96T/48T   小鼠(shu)破(po)骨(gu)細胞分(fen)化(hua)因子試(shi)劑(ji)盒(he)，規(gui)格(ge)型號：96T/48T，來源：elisa試(shi)劑(ji)盒(he)（進(jin)口(kou)分裝），產品(pin)別(bie)名(ming)：小鼠(shu)破(po)骨(gu)細胞分(fen)化(hua)因子試(shi)劑(ji)盒(he)、小(xiao)鼠(shu)破(po)骨(gu)細胞分(fen)化(hua)因子elisa試劑(ji)盒(he)   保存(cun)條(tiao)件：2-8℃   保(bao)質(zhi)期(qi)：6個(ge)月。  

Creoside III  1038602-12-8  中文名(ming)：  分子式(shi)：C18H24O9  度(du)：98.0%  關鍵詞：    小鼠(shu)前列(lie)腺素(su)F(PGF)ELISA試劑(ji)盒(he)  

Crenulatin  63026-02-8  中文名(ming)：大花紅天(tian)素(su)  分子式(shi)：C11H20O6  度(du)：98.5%  關鍵詞：  抗(kang)真菌; 抑(yi)制細(xi)胞雕(diao)亡(wang); 促進生(sheng)長; 阿魏(wei); 半(ban)萜(tie)類(lei); 中藥(yao)對照(zhao)品(pin); 中藥(yao)標(biao)準(zhun)品(pin); 植物(wu)提取(qu)物(wu); 天(tian)然(ran)產物(wu); 天(tian)然(ran)產物(wu)庫  小(xiao)鼠(shu)前列(lie)腺素(su)E2(PGE2)ELISA試劑(ji)盒(he)  

Coumarin 7  27425-55-4  中文名(ming)： 7  分子式(shi)：C20H19N3O2  度(du)：98.0%  關鍵詞：    小鼠(shu)前列(lie)腺素(su)E1(PGE1)ELISA試劑(ji)盒(he)  

Coumarin 6  38215-36-0  中文名(ming)： 6  分子式(shi)：C20H18N2O2S  度(du)：98.0%  關鍵詞：    小鼠(shu)遷移(yi)率(lv)族(zu)蛋白(bai)B1（HMGB-1）ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)
尼(ni)羅紅(>95%,BS)  Nile red  質(zhi)量(liang)規(gui)格：>95%,BS 寡核(he)苷(gan)酸(suan)探針非同位(wei)素(su)AP-BCIP/NBT法RNA北方(fang)雜交(jiao)*試(shi)劑(ji)盒(he)5

N-苯基(ji)脲(niao)(>97%,BR)  N-Phenylurea  質(zhi)量(liang)規格：>97%,BR 寡(gua)核(he)苷酸探針非同位(wei)素(su)AP化學發(fa)光法DNA斑(ban)點雜交(jiao)*試(shi)劑(ji)盒(he)5

軟海綿(mian)酸(>95.0%,BC)  Okadaic acid, free acid  質(zhi)量規格：>95.0%,BC 寡(gua)核(he)苷(gan)酸(suan)探針非同位(wei)素(su)AP化學發(fa)光法DNA南(nan)方(fang)雜交(jiao)*試(shi)劑(ji)盒(he)5

軟海綿(mian)酸鈉(>95.0%,BC)  Okadaic acid,  salt  質量(liang)規(gui)格(ge)：>95.0%,BC 寡(gua)核苷酸探針非同位(wei)素(su)AP化學發(fa)光法RNA北(bei)方(fang)雜交(jiao)*試(shi)劑(ji)盒(he)5

結晶(jing)碳(tan)酸鉀(>98%,BR)  Potassium carbonate, hydrate  質量(liang)規(gui)格：>98%,BR 寡核(he)苷(gan)酸(suan)探針非同位(wei)素(su)HRP-DAB顯色(se)法DNA斑點雜交(jiao)*試(shi)劑(ji)盒(he)5

焦鉀(>97%,BC)  Potassium pyrophosphate, tetrabasic  質量(liang)規(gui)格：>97%,BC 寡核(he)苷(gan)酸(suan)探針非同位(wei)素(su)HRP-DAB顯色(se)法DNA南(nan)方(fang)雜交(jiao)*試(shi)劑(ji)盒(he)5

鎢(wu)酸(suan)鉀二(er)水(>98%,BR)  Potassium tungstate, dehydrate  質(zhi)量規格：>98%,BR 寡核(he)苷酸(suan)探針非同位(wei)素(su)HRP-DAB顯色(se)法RNA北方(fang)雜交(jiao)*試(shi)劑(ji)盒(he)5

硫酸(suan)奎(kui)寧(ning)水合物(wu)(>98%,BR)  Quinine hemisulfate salt hydrate  質量(liang)規格(ge)：>98%,BR 寡(gua)核苷酸探針非同位(wei)素(su)HRP化學發(fa)光法DNA斑(ban)點雜交(jiao)*試(shi)劑(ji)盒(he)5

氫二(er)鈉十二(er)水(>98%,BR)   phosphate, dibasic, dodecahydrate  質(zhi)量規格：>98%,BR 寡核(he)苷酸(suan)探針非同位(wei)素(su)HRP化學發(fa)光法DNA南(nan)方(fang)雜交(jiao)*試(shi)劑(ji)盒(he)5

磷鎢(wu)酸(suan)鈉(>98%,BC)   phosphotungstate, hydrate  質量(liang)規(gui)格(ge)：>98%,BC 寡(gua)核苷酸探針非同位(wei)素(su)HRP化學發(fa)光法RNA北(bei)方(fang)雜交(jiao)*試(shi)劑(ji)盒(he)5
海螵蛸染料(liao)法(fa)PCR鑒定(ding)試(shi)劑(ji)盒(he)*N-Nitroso-diphenylamine,10ng/ul 標準(zhun)品(pin) trans-Nonachlor  10ng/ul於甲(jia)醇,10ml 特征形(xing)態 液態

N-Nitroso-diethanolamine 10 μg/mL in Ace 2-Nitrotoluene  10μg/mL於乙(yi)腈,10ml 特征形(xing)態 液態

10ng/ul，10ml除(chu)草(cao)醚(mi)溶(rong)於環(huan)己烷 標準(zhun)品(pin) Mirex  10ng/ul於環(huan)己烷,10ml 特征形(xing)態 液態
儲(chu)存(cun)條(tiao)件：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品(pin)收(shou)集(ji)、處理及(ji)保(bao)存(cun)方(fang)法
1. 血(xue)清：使用不含(han)熱原(yuan)和內(nei)毒(du)素的(de)試管，操作過程中避(bi)免任何細胞刺(ci)激，收(shou)集(ji)血(xue)液後，3000 轉離(li)心10 分鐘(zhong)將血(xue)清和紅細(xi)胞迅(xun)速小心地(di)分離(li)。
2. 血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸檬(meng)酸(suan)鹽(yan)或(huo)肝(gan)素(su)抗(kang)凝。3000 轉離(li)心30 分鐘(zhong)取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離(li)心10 分鐘(zhong)去除顆粒(li)和聚(ju)合物(wu)。
4. 組(zu)織勻漿：將組(zu)織加(jia)入(ru)適(shi)量(liang)生(sheng)理鹽(yan)水搗碎。3000 轉離(li)心10 分鐘(zhong)取上清。
5. 保存(cun)：如(ru)果樣(yang)本(ben)收(shou)集(ji)後(hou)不及(ji)時檢(jian)測(ce)，請(qing)按(an)壹次(ci)用量分(fen)裝，凍(dong)存於(yu)-20℃，避(bi)免反(fan)復(fu)凍(dong)融，在(zai)室溫(wen)下解(jie)凍(dong)並確(que)保樣品(pin)均勻地(di)充分(fen)解(jie)凍(dong)。