仙(xian)茅(mao)染料(liao)法(fa)PCR鑒(jian)定(ding)試劑(ji)盒(he)保(bao)存

儲存條件：
14℃或－20℃樣品收(shou)集、處理(li)及(ji)保(bao)存方法(fa)
1. 血(xue)清(qing)：使(shi)用(yong)不(bu)含(han)熱(re)原和(he)內毒素(su)的試(shi)管，操(cao)作(zuo)過(guo)程(cheng)中避(bi)免(mian)任何細(xi)胞(bao)刺(ci)激，收(shou)集血(xue)液(ye)後，3000 轉離(li)心10 分鐘將(jiang)血(xue)清(qing)和(he)紅(hong)細(xi)胞(bao)迅(xun)速小(xiao)心地分離(li)。
2. 血(xue)漿：EDTA、檸檬酸(suan)鹽(yan)或(huo)肝素(su)抗(kang)凝(ning)。3000 轉離(li)心30 分鐘取(qu)上清(qing)。
3. 細胞上清(qing)液(ye)：3000 轉離(li)心10 分鐘去(qu)除(chu)顆(ke)粒和(he)聚(ju)合(he)物(wu)。
4. 組(zu)織勻(yun)漿：將組(zu)織加(jia)入適(shi)量(liang)生(sheng)理鹽(yan)水(shui)搗碎。3000 轉離(li)心10 分鐘取(qu)上清(qing)。
5. 保(bao)存：如果(guo)樣本(ben)收(shou)集後不(bu)及(ji)時檢測(ce)，請按壹(yi)次(ci)用(yong)量(liang)分裝(zhuang)，凍存於(yu)-20℃，避免反復(fu)凍融，在室溫下解(jie)凍並確保(bao)樣(yang)品均(jun)勻地(di)充分解(jie)凍。

特(te)點(dian)：
1. 即開即用，用(yong)戶(hu)只(zhi)需(xu)要(yao)提(ti)供(gong)病毒樣品。
2. 根(gen)據(ju)地黃(huang)保(bao)守(shou)序(xu)列設(she)計的(de)專壹(yi)性(xing)引(yin)物(wu)，與相(xiang)關病毒無交(jiao)叉(cha)反應(ying)。
3. 靈(ling)敏(min)度(du)可(ke)以達到幾(ji)百拷(kao)貝(bei)/反應(ying)。
4. 壹(yi)管式熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR 檢測(ce)，避免(mian)後(hou)續(xu)汙(wu)染(ran)。
5. 本試劑(ji)盒(he)足夠(gou) 50 次(ci) 20μL 反應(ying)體(ti)系(xi)的(de)熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR。
6. 本產品只(zhi)適用(yong)於(yu)科(ke)研，不(bu)能用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診斷(duan)。

使用方法(fa)：
壹(yi)、樣(yang)品采(cai)集：
1、食品樣(yang)品：樣(yang)品的(de)采(cai)集與預(yu)培養按照樣品的(de)采(cai)集與預(yu)培養按照《食品衛生(sheng)微生(sheng)物(wu)學檢驗(yan)阪(ban)崎腸桿(gan)菌(jun)檢驗要(yao)求(qiu)進(jin)行。
2、血(xue)液(ye)樣品：用(yong)無菌(jun)註(zhu)射(she)器(qi)抽(chou)取(qu)受(shou)檢者(zhe)靜脈(mai)血(xue)2mL，註(zhu)入無菌(jun)EDTA2Na(或檸檬(meng)酸(suan)鈉)抗(kang)凝(ning)管，立即混勻。
3、糞便樣(yang)品：取(qu)糞便置(zhi)於(yu)滅(mie)菌(jun)的收(shou)集管中送(song)檢。
4、病竈部(bu)位樣(yang)品：取(qu)發(fa)病部(bu)位新(xin)鮮滲出物(wu)、粘液(ye)膿血(xue)送(song)檢。
壹(yi)、稀釋 PCR 陽性對(dui)照（以 10E2-10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 這(zhe) 6 個(ge) 10 倍稀釋度(du)為(wei)例）
1. 註(zhu)意：由於(yu)標(biao)準(zhun)品濃(nong)度(du)非(fei)常(chang)高(gao)，因此(ci)下列稀釋操(cao)作(zuo)壹(yi)定(ding)要(yao)在(zai)獨(du)立的(de)區域進(jin)行，千(qian)萬不(bu)能汙(wu)染(ran)樣(yang)品或(huo)本(ben)試劑(ji)盒(he)的其他成(cheng)分）。為(wei)增(zeng)加(jia)產品穩(wen)定(ding)性和(he)避免(mian)擴(kuo)散(san)傳(chuan)染性病原(yuan)，本(ben)產品不(bu)提(ti)供(gong)活(huo)體(ti)樣品做(zuo)陽性(xing)對照，只(zhi)提供(gong)可(ke)以直(zhi)接(jie)使用(yong)的 DNA段(duan)作為(wei)陽性(xing)對照。
2. 標記(ji) 6 個(ge)離(li)心管，分別(bie)為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍(qiang)頭分別(bie)加(jia)入 45 μL 熒光(guang) PCR 模(mo)板稀釋液(ye)（用帶芯槍(qiang)頭，下同）。
4. 在 7 號(hao)管中加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對(dui)照，充分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘，得(de)1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對(dui)照。放(fang)冰上待用。
5. 換槍(qiang)頭，在 6 號(hao)管中加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對(dui)照(上步(bu)稀釋所得)，充分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對(dui)照。放(fang)冰上待用。
6. 換槍(qiang)頭，在 5 號(hao)管中加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對(dui)照到 5 號(hao)管中，充分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對(dui)照。放(fang)冰上待用。
7. 重復(fu)上面(mian)的(de)操(cao)作(zuo)直(zhi)到得(de)到 6 個(ge)稀釋度(du)的(de)陽性對(dui)照。放(fang)冰上待用。
註(zhu)：上述(shu)樣品建(jian)議(yi)經(jing)過(guo)增(zeng)菌(jun)後，收(shou)集培養物(wu)用於(yu)檢(jian)測(ce)。 
二(er)、DNA提取：
可(ke)采用PCR試劑(ji)盒(he)配備的(de)DNA抽提液(ye)，按以下說明(ming)進行DNA核酸(suan)的(de)粗(cu)提(ti)。也可(ke)采購上海(hai)澤(ze)葉(ye)生(sheng)物(wu)科(ke)技有限(xian)公司(si)生(sheng)產的(de)DNA提取試(shi)劑(ji)盒(he)(過(guo)柱(zhu)法(fa)-熒光(guang)配套(tao))或其他合(he)適(shi)的商業(ye)化(hua)產品，並按照相(xiang)應(ying)試(shi)劑(ji)盒(he)說明(ming)進行操(cao)作(zuo)。
1、液(ye)體(ti)培養物(wu)：取液(ye)體(ti)培養物(wu)100μL加到1.5mL無菌(jun)離(li)心管中，8000rpm離(li)心3min，盡量(liang)吸(xi)棄上清(qing)，加(jia)入50μL DNA抽提液(ye)充分混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取上清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
2、固(gu)體(ti)培養物(wu)：挑取(qu)單克隆菌(jun)落與50μL DNA抽提液(ye)充分混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取上清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
3、糞便樣(yang)品：挑(tiao)取(qu)米粒大小(xiao)糞便於(yu)滅(mie)菌(jun)離(li)心管中，加(jia)入0.5mL生(sheng)理鹽(yan)水(shui)，振蕩(dang)混勻，13000rpm離(li)心3分鐘，棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱(dian)中加(jia)入50μL DNA抽提液(ye)充分混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min取上清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
4、其他液(ye)體(ti)標本：取(qu)標(biao)本2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄上清(qing)，沈(chen)澱(dian)中加(jia)入50μL DNA抽提液(ye)充分混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min取上清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
註(zhu)：陽(yang)性(xing)對(dui)照和(he)陰性對(dui)照為已(yi)經(jing)抽提(ti)好(hao)的核酸(suan)(無需(xu)提取(qu))，直(zhi)接(jie)取5μL加入到(dao)反應(ying)體(ti)系(xi)中即可(ke)。由於(yu)陽(yang)性(xing)對(dui)照濃度(du)較(jiao)高，建議(yi)在樣品制(zhi)備區域加(jia)入陽(yang)性對(dui)照。 
CL-0171NIH/3T3(小(xiao)鼠(shu)胚胎細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2溴化(hua)新(xin)斯的明(ming)(標準(zhun)品)Neostigmine bromide質量(liang)規格(ge)：>98%,標準(zhun)品

人癌細(xi)胞(bao);MDA-MB-468 大鼠(shu)小(xiao)腦(nao)顆(ke)粒細(xi)胞*培養基(ji) 100mL木蘭(lan)脂(zhi)素(su)Magnolin質量(liang)規格(ge)：HPLC≥98%，標準(zhun)品

Pcc4 小(xiao)鼠(shu)畸胎瘤(liu)細(xi)胞Racanisodamine質量(liang)規格(ge)：HPLC≥98%，標準(zhun)品

SIRPG Others Human 人 SIRPG / CD172g 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照) 鈉Sulfadimethoxine  salt質量(liang)規格(ge)：>98%

新(xin)生(sheng)兒(er)表(biao)皮(pi)角化(hua)細胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105方(1ml)鈉(標準(zhun)品)Sulfadimethoxine  salt質量(liang)規格(ge)：>98%,標準(zhun)品
MG-63 人成骨(gu)肉(rou)瘤(liu)細胞2'-甲氧基(ji)尿苷(gan)2’-OMe Uridine質量(liang)規格(ge)：>98%,BR

SK-MES-1人肺(fei)鱗癌細胞 SK-MES-1 human lung squamous carcinoma cells MEM培養基(ji)(GIBCO)+10%FBSTES. Na;2-[(三(羥甲基(ji))甲基(ji))氨基(ji)]-1-乙磺(huang)酸鈉TES 質量(liang)規格(ge)：>99%,AR

EPO Protein Rat 重組(zu)大鼠(shu) Erythropoietin / EPO 蛋(dan)白(bai) (His 標簽)TES；Tris乙磺(huang)酸,2-[（三（羥甲基(ji)）甲基(ji)）氨基(ji)]-1-乙磺(huang)酸TES質量(liang)規格(ge)：>99%,AR

SV40T轉化(hua)的人胚腎(shen)細胞(bao)(亞系(xi));293T/17 人呼吸(xi)道(dao)上皮(pi)細(xi)胞*培養基(ji) 100mL3-[ (N-三(羥甲基(ji))甲氨基(ji)]-2-羥基(ji)丙磺(huang)酸鈉TAPSO mono質量(liang)規格(ge)：>98%,BR

人導(dao)管瘤細(xi)胞(bao);UACC812TAPSO；3-[ (N-三(羥甲基(ji))甲氨基(ji)]-2-羥基(ji)丙磺(huang)酸TAPSO質量(liang)規格(ge)：>99%,BR
人巨(ju)細胞(bao)白(bai)血(xue)病細(xi)胞(bao)株;Mo7e 大鼠(shu)卵巢上皮(pi)細(xi)胞*培養基(ji) 100mL-內酰胺(an)質(zhi)量(liang)規格(ge)：美(mei)國(guo)進口Gabapentin-lactam

H22 小(xiao)鼠(shu)肝癌(ai)細胞(bao)相(xiang)關化(hua)合物(wu)B質量(liang)規格(ge)：美(mei)國(guo)進口Gabapentin Related Compound B

ERBB2 Others Rat 大鼠(shu) ErbB2 / HER2 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照) 相(xiang)關化(hua)合物(wu)E質量(liang)規格(ge)：美(mei)國(guo)進口Gabapentin Related Compound E

小(xiao)鼠(shu)肉(rou)瘤(liu)瘤株;S180相(xiang)關化(hua)合物(wu)D質量(liang)規格(ge)：美(mei)國(guo)進口Gabapentin Related Compound D

KLRC1 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照) 己(ji)酰(xian)胺(an)(>98.0%(N))質量(liang)規格(ge)：>98.0%(N)Hex*
仙(xian)茅(mao)染料(liao)法(fa)PCR鑒(jian)定(ding)試劑(ji)盒(he)保(bao)存EDAR Others Human 人 EDAR / DL 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照) xyleolOrangetetrawo7iumsalt兒(er)價分桔(ju)黃(huang)四(si)鈉5克高

人肺(fei)成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞裂(lie)解(jie)物(wu)HPFL聯本安;隊二(er)安基(ji)聯本(ben);4,4′-二(er)安基(ji)聯本(ben) Bqnzidinq;p-DicMinodiphqnyl;p,p′-Bicnilinq 9-87-2

CXADR Others Human 人 CXADR / CAR 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照) Di-n-octylamine二(er)辛(xin)基(ji)胺100毫(hao)克BR，98%

BNL CL.2
實驗流程(cheng)：
1. 整(zheng)個(ge)檢測(ce)過(guo)程(cheng)應(ying)嚴(yan)格(ge)按照本說明書(shu)要(yao)求(qiu)分別(bie)在(zai)試(shi)劑(ji)準(zhun)備區、樣本(ben)處理(li)區和(he)PCR擴(kuo)增(zeng)區進行操(cao)作(zuo)，各區實驗服(fu)、儀(yi)器(qi) 、耗材應(ying)獨(du)立使(shi)用(yong)，不(bu)能混用；實驗用(yong)吸(xi)頭采用(yong)帶濾芯(xin)吸(xi)頭；樣本(ben)處理(li)區應(ying)配有(you)生(sheng)物(wu)安全櫃(gui)，樣本(ben)處理(li)在(zai)生(sheng)物(wu)安全櫃(gui)中進(jin)行操(cao)作(zuo)；三個(ge)區應(ying)該(gai)配有(you)紫外(wai)線(xian)殺(sha)菌(jun)裝(zhuang)置(zhi)。
2. 為避免(mian)RNA降解(jie)，樣(yang)本(ben)處理(li)過(guo)程(cheng)應(ying)在(zai)0-4℃條件下操(cao)作(zuo)，且(qie)完(wan)成實驗後(hou)立即上機(ji)檢(jian)測(ce)；樣本(ben)處理(li)過(guo)程(cheng)中使(shi)用(yong)的(de)器(qi)具(ju)耗材應(ying)經(jing)過(guo)無核酶處理(li)。

3. 每次(ci)實驗應(ying)該(gai)設(she)置(zhi)陰、陽性(xing)對(dui)照。
4. 試劑(ji)盒(he)所有(you)試劑(ji)在(zai)使用前應(ying)該(gai)在(zai)常(chang)溫下充分融化(hua)混勻，並應(ying)瞬時離(li)心。
5. 試劑(ji)盒(he)內所(suo)配陰性和(he)陽性(xing)對照在壹(yi)次(ci)使(shi)用前應(ying)全(quan)部(bu)轉(zhuan)移(yi)至標本準(zhun)備區，並單獨(du)存放(fang)。
6. 為防(fang)止(zhi)熒光(guang)幹(gan)擾，應(ying)避(bi)免(mian)裸(luo)手(shou)直(zhi)接(jie)接(jie)觸PCR反應(ying)管，並應(ying)避(bi)免(mian)在(zai)PCR反應(ying)管上進(jin)行任何標(biao)記(ji)。
7. 儀(yi)器(qi) 擴(kuo)增(zeng)相(xiang)關參(can)數應(ying)按照本說明書(shu)相(xiang)關要(yao)求(qiu)進(jin)行設(she)置(zhi)；不(bu)同批號(hao)試(shi)劑(ji)不(bu)能混用。
8. ABI系(xi)列(lie)熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀(yi)參(can)數設(she)置(zhi)中不(bu)選(xuan)ROX校正，淬滅(mie)基(ji)因選(xuan)擇(ze)None。
9. 實驗過(guo)程(cheng)中產品的(de)廢(fei)棄物(wu)應(ying)該(gai)進(jin)行無害化(hua)處理(li)後(hou)方可(ke)丟棄。