姜黃染料法PCR鑒(jian)定(ding)試劑(ji)盒(he)直(zhi)銷

特點(dian)：
1. 即(ji)開即(ji)用，用戶(hu)只(zhi)需要(yao)提(ti)供病毒樣品(pin)。
2. 根(gen)據(ju)地黃(huang)保(bao)守序列(lie)設(she)計(ji)的專(zhuan)壹性引(yin)物，與相關病毒無(wu)交叉反(fan)應。
3. 靈敏(min)度可(ke)以達到(dao)幾(ji)百(bai)拷貝(bei)/反(fan)應。
4. 壹管(guan)式熒(ying)光(guang)定(ding)量 PCR 檢測，避免(mian)後(hou)續(xu)汙(wu)染。
5. 本(ben)試劑(ji)盒(he)足(zu)夠(gou) 50 次(ci) 20μL 反(fan)應體系的熒(ying)光(guang)定(ding)量 PCR。
6. 本(ben)產品(pin)只(zhi)適(shi)用於(yu)科(ke)研(yan)，不能用於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷。

使用方法：
壹、樣品(pin)采(cai)集(ji)：
1、食品(pin)樣(yang)品(pin)：樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集(ji)與(yu)預培養按(an)照(zhao)樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集(ji)與(yu)預培養按(an)照(zhao)《食(shi)品(pin)衛生微生(sheng)物學檢驗(yan)阪(ban)崎(qi)腸(chang)桿(gan)菌(jun)檢驗(yan)要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)。
2、血液樣(yang)品(pin)：用無(wu)菌註(zhu)射器抽(chou)取(qu)受檢者(zhe)靜脈血2mL，註入(ru)無(wu)菌EDTA2Na(或檸(ning)檬(meng)酸鈉)抗凝(ning)管(guan)，立(li)即(ji)混勻。
3、糞(fen)便(bian)樣品(pin)：取(qu)糞(fen)便(bian)置(zhi)於(yu)滅(mie)菌(jun)的收(shou)集(ji)管(guan)中(zhong)送(song)檢。
4、病竈部(bu)位樣品(pin)：取(qu)發病部(bu)位新鮮滲出(chu)物、粘(zhan)液膿血送檢。
壹、稀釋(shi) PCR 陽(yang)性對(dui)照(zhao)（以 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這(zhe) 6 個 10 倍(bei)稀(xi)釋(shi)度(du)為例）
1. 註(zhu)意：由於標(biao)準品(pin)濃度非(fei)常高，因(yin)此下(xia)列(lie)稀釋(shi)操(cao)作壹定要(yao)在獨(du)立(li)的區(qu)域進(jin)行(xing)，千萬不(bu)能汙染樣(yang)品(pin)或本(ben)試劑(ji)盒(he)的(de)其他成分(fen)）。為增加產(chan)品(pin)穩(wen)定(ding)性(xing)和避免擴散(san)傳染性(xing)病原，本(ben)產品(pin)不(bu)提(ti)供活(huo)體(ti)樣(yang)品(pin)做陽(yang)性對(dui)照(zhao)，只(zhi)提(ti)供可(ke)以直接(jie)使用的(de) DNA段(duan)作為陽(yang)性對(dui)照(zhao)。
2. 標(biao)記 6 個(ge)離心管(guan)，分(fen)別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯(xin)槍頭(tou)分(fen)別(bie)加(jia)入(ru) 45 μL 熒(ying)光(guang) PCR 模(mo)板稀釋(shi)液（用帶(dai)芯(xin)槍頭(tou)，下同(tong)）。
4. 在 7 號(hao)管(guan)中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)，充(chong)分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上待用。
5. 換槍頭(tou)，在 6 號(hao)管(guan)中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)(上步(bu)稀(xi)釋(shi)所(suo)得)，充分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上待用。
6. 換槍頭(tou)，在 5 號(hao)管(guan)中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)到(dao) 5 號(hao)管(guan)中(zhong)，充(chong)分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上待用。
7. 重復(fu)上面(mian)的(de)操(cao)作(zuo)直(zhi)到(dao)得(de)到(dao) 6 個(ge)稀(xi)釋度的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上待用。
註：上述樣品(pin)建(jian)議經過增菌後(hou)，收(shou)集(ji)培(pei)養物用於(yu)檢測。 
二(er)、DNA提(ti)取(qu)：
可(ke)采用PCR試劑(ji)盒(he)配(pei)備的DNA抽(chou)提(ti)液，按(an)以下說(shuo)明進(jin)行(xing)DNA核(he)酸的粗提(ti)。也可(ke)采購上海澤葉(ye)生物(wu)科(ke)技有(you)限(xian)公(gong)司生產的DNA提(ti)取(qu)試劑(ji)盒(he)(過柱(zhu)法-熒(ying)光(guang)配(pei)套)或其(qi)他(ta)合適(shi)的(de)商(shang)業化(hua)產(chan)品(pin)，並(bing)按(an)照(zhao)相應試劑(ji)盒(he)說(shuo)明進行(xing)操作。
1、液體培養物：取(qu)液體(ti)培(pei)養物100μL加(jia)到(dao)1.5mL無(wu)菌離心管(guan)中(zhong)，8000rpm離心3min，盡量吸棄(qi)上清，加(jia)入50μL DNA抽(chou)提(ti)液充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min，取(qu)上清5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
2、固(gu)體(ti)培養物：挑(tiao)取(qu)單(dan)克隆菌(jun)落(luo)與50μL DNA抽(chou)提(ti)液充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min，取(qu)上清5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
3、糞(fen)便(bian)樣品(pin)：挑(tiao)取(qu)米粒大小(xiao)糞(fen)便(bian)於滅(mie)菌(jun)離心管(guan)中(zhong)，加(jia)入0.5mL生(sheng)理(li)鹽(yan)水，振(zhen)蕩(dang)混勻，13000rpm離心3分(fen)鐘，棄(qi)上清，沈(chen)澱中(zhong)加(jia)入50μL DNA抽(chou)提(ti)液充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min取(qu)上清5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
4、其他(ta)液(ye)體(ti)標本(ben)：取(qu)標本(ben)2-3mL，13000rpm離心3min，棄(qi)上清，沈(chen)澱中(zhong)加(jia)入50μL DNA抽(chou)提(ti)液充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min取(qu)上清5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
註：陽(yang)性對(dui)照(zhao)和陰性對(dui)照(zhao)為已經(jing)抽(chou)提(ti)好的(de)核(he)酸(無(wu)需提(ti)取(qu))，直(zhi)接取(qu)5μL加(jia)入到(dao)反(fan)應體系中(zhong)即(ji)可(ke)。由於陽(yang)性對(dui)照(zhao)濃度較(jiao)高，建(jian)議在樣品(pin)制備(bei)區(qu)域加(jia)入(ru)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。 
實(shi)驗(yan)流程(cheng)：
1. 整個檢測過程(cheng)應嚴格按(an)照(zhao)本(ben)說明(ming)書要(yao)求(qiu)分(fen)別(bie)在試劑(ji)準備(bei)區(qu)、樣本(ben)處理(li)區和PCR擴增區進(jin)行(xing)操作，各(ge)區(qu)實驗服、儀(yi)器 、耗材(cai)應獨(du)立(li)使用，不(bu)能混用；實(shi)驗(yan)用吸(xi)頭(tou)采用帶(dai)濾(lv)芯吸(xi)頭(tou)；樣本(ben)處理(li)區應配有生物(wu)安全(quan)櫃(gui)，樣本(ben)處理(li)在生物(wu)安全(quan)櫃(gui)中(zhong)進(jin)行(xing)操作；三(san)個(ge)區應該配有紫(zi)外(wai)線(xian)殺(sha)菌裝(zhuang)置(zhi)。
2. 為避免RNA降解(jie)，樣(yang)本(ben)處理(li)過程(cheng)應在0-4℃條件下操(cao)作(zuo)，且完(wan)成(cheng)實(shi)驗(yan)後(hou)立(li)即(ji)上機檢測；樣本(ben)處理(li)過程(cheng)中(zhong)使用的(de)器(qi)具(ju)耗材(cai)應經過無(wu)核(he)酶處理(li)。
3. 每次(ci)實(shi)驗應該設(she)置(zhi)陰、陽(yang)性對(dui)照(zhao)。
4. 試(shi)劑(ji)盒(he)所(suo)有試(shi)劑(ji)在使用前(qian)應該在常溫下充分(fen)融化混勻，並(bing)應瞬時(shi)離心。
5. 試(shi)劑(ji)盒(he)內(nei)所(suo)配陰性和陽(yang)性對(dui)照(zhao)在壹次使用前(qian)應全部(bu)轉(zhuan)移至(zhi)標本(ben)準備(bei)區，並(bing)單(dan)獨(du)存放。
6. 為防(fang)止熒(ying)光(guang)幹(gan)擾，應避免裸手(shou)直接(jie)接(jie)觸(chu)PCR反(fan)應管(guan)，並(bing)應避免在PCR反(fan)應管(guan)上進行(xing)任(ren)何(he)標記。
7. 儀(yi)器 擴增相關參(can)數應按(an)照(zhao)本(ben)說明(ming)書相關要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)設(she)置(zhi)；不(bu)同(tong)批號試(shi)劑(ji)不能混用。
8. ABI系列(lie)熒(ying)光(guang)定(ding)量PCR儀(yi)參(can)數設(she)置(zhi)中(zhong)不(bu)選ROX校(xiao)正(zheng)，淬滅基(ji)因(yin)選擇(ze)None。
9. 實驗過程(cheng)中(zhong)產(chan)品(pin)的(de)廢棄(qi)物(wu)應該進行(xing)無(wu)害化(hua)處理(li)後(hou)方可(ke)丟棄(qi)。
儲存條件：
14℃或－20℃樣品(pin)收(shou)集(ji)、處理(li)及保(bao)存方法
1. 血清：使用不(bu)含(han)熱原和內(nei)毒素的(de)試管(guan)，操(cao)作過程(cheng)中(zhong)避(bi)免任(ren)何(he)細胞(bao)刺激(ji)，收(shou)集(ji)血液後(hou)，3000 轉(zhuan)離心10 分(fen)鐘將(jiang)血清和紅(hong)細胞(bao)迅速小(xiao)心地(di)分(fen)離。
2. 血漿：EDTA、檸(ning)檬(meng)酸鹽(yan)或肝(gan)素(su)抗凝(ning)。3000 轉離心30 分(fen)鐘取(qu)上清。
3. 細胞(bao)上清液(ye)：3000 轉離心10 分(fen)鐘去(qu)除(chu)顆粒(li)和聚(ju)合物(wu)。
4. 組織(zhi)勻漿：將(jiang)組(zu)織(zhi)加入(ru)適(shi)量生理(li)鹽(yan)水搗碎(sui)。3000 轉(zhuan)離心10 分(fen)鐘取(qu)上清。
5. 保(bao)存：如果(guo)樣本(ben)收(shou)集(ji)後(hou)不(bu)及時(shi)檢測，請按(an)壹次用量分(fen)裝，凍存於-20℃，避(bi)免反(fan)復凍融，在室溫(wen)下(xia)解(jie)凍並(bing)確保(bao)樣品(pin)均(jun)勻地充(chong)分(fen)解(jie)凍。
CM-M009小(xiao)鼠肺(fei)大靜脈平滑(hua)肌(ji)細胞(bao)*培(pei)養基100mL文多靈Vindoline質(zhi)量規格：>98%,BR

UM-UC-3, 人(ren)膀胱(guang)移(yi)行(xing)細胞(bao)癌(ai) 小(xiao)鼠成(cheng)纖(xian)維細胞(bao),3T3/e細胞(bao) J774A1(單(dan)核(he)細胞(bao)巨(ju)噬細胞(bao))羅丹明B；玫瑰(gui)紅(hong)BRhodamine B質(zhi)量規格：BS

小(xiao)鼠前(qian)胃(wei)癌(ai)細胞(bao);MFC;酸Cefoperazone Acid質(zhi)量規格：>98%,BR

PRMT5 Others Human 人(ren) PRMT5 人細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) (標準(zhun)品(pin))Cefoperazone Acid質(zhi)量規格：含(han)量測定

小(xiao)鼠樹(shu)突(tu)狀細胞(bao)肉瘤(liu)細胞(bao);DCS羅丹明6G/堿性紅(hong)1/玫(mei)瑰(gui)紅(hong)6GRhodamine 6G質(zhi)量規格：BS
CM-H098人(ren)微血管(guan)內(nei)皮(pi)細胞(bao)*培(pei)養基100mLMethazolamide質(zhi)量規格：≥97.0%,BR

BGC-803細胞(bao)，人(ren)胃(wei)癌(ai)細胞(bao) 人(ren)骨肉瘤(liu)細胞(bao),HOS細胞(bao) 人(ren)臍靜脈內(nei)皮(pi)細胞(bao);HUV-ECNα-叔(shu)丁氧羰(tang)基-N'-醛基-L-Boc-L-Trp(For)-OH質(zhi)量規格：0.97

EL4(小(xiao)鼠瘤(liu)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2Boc-D-Boc-D-Tyr-OH質(zhi)量規格：0.98

BSG Others Human 人(ren) CD147 / EMMPRIN / Basigin 人細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) BOC-L-甲(jia)酯(zhi)Boc-Tyr-OMe質(zhi)量規格：>99%,BR

人(ren)癌(ai)細胞(bao);MDA-MB-231N-叔(shu)丁氧(yang)羰基-O-(2-溴芐(bian)氧羰基(ji))-L-Boc-O-(2-bromo-Cbz)-L-Tyrosine質(zhi)量規格：>98%,BR
膀胱(guang)平滑(hua)肌(ji)細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(1ml)4-丙(bing)氧基苯二(er)甲腈(jing)(>95.0%(GC))質(zhi)量規格：>95.0%(GC)4-Propoxyphthalonitrile

小(xiao)鼠成(cheng)纖(xian)維細胞(bao)(EGFP標(biao)記) 人(ren)肺(fei)癌(ai)細胞(bao)，SW 900[SW-900; SW900]細胞(bao) P3X63Ag8(骨(gu)髓瘤(liu)細胞(bao))4-戊(wu)氧基(ji)苯二(er)甲腈(jing)(>98.0%(GC))質(zhi)量規格：>98.0%(GC)4-Pentyloxyphthalonitrile

人(ren)髓母(mu)細胞(bao)瘤(liu)細胞(bao);D341Med四氟(fu)鄰苯二(er)甲腈(jing)(>98.0%(GC))質(zhi)量規格：>98.0%(GC)Tetrafluorophthalonitrile

CD1D Others Human 人(ren) CD1D / R3G1 人細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 1,2-萘(nai)二(er)甲腈(jing)(>98.0%(GC))質(zhi)量規格：>98.0%(GC)1,2-Naphthalenedicarbonitrile

小(xiao)鼠誘(you)導(dao)性多(duo)潛(qian)能幹(gan)細胞(bao);PUMC-mips-C2櫟(li)櫻(ying)酸(標準品(pin))質(zhi)量規格：HPLC≥98%，標(biao)準品(pin)Roburic acid
姜(jiang)黃(huang)染料法PCR鑒定試(shi)劑(ji)盒(he)直(zhi)銷小(xiao)鼠樹(shu)突(tu)狀細胞(bao)肉瘤(liu)低(di)轉移細胞(bao)(綠(lv)色熒(ying)光(guang)蛋白(bai)標(biao)記);DG6-GFP堿性黃(huang)1，英(ying)文名(ming)或英(ying)文縮寫：Thioflavin T，級(ji)別(bie)：BR，550/630NM，規格(ge)：100微克(ke)

CD200 Others Mouse 小(xiao)鼠 CD200 人細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 啊(a)皮(pi)油脂　M cPIqZON GRqcSq M 1704-91-2

人肝(gan)內(nei)膽(dan)管(guan)上皮細胞(bao)裂解(jie)物(wu)HIBEpiCLLBBROTH,MILLER(LURIA-BERTANI)LB肉湯(tang)組(zu)織(zhi)培養級米白色至棕褐色(se)粉末(mo)RTsigma

NRG1 Others Human 人