蓽(bi)茇(ba)染料(liao)法PCR鑒(jian)定(ding)試劑(ji)盒(he)直(zhi)銷

實驗流程(cheng)：
1. 整(zheng)個(ge)檢(jian)測過程(cheng)應(ying)嚴(yan)格(ge)按(an)照本說明(ming)書(shu)要求(qiu)分(fen)別在試劑準(zhun)備(bei)區、樣本(ben)處理(li)區和(he)PCR擴(kuo)增(zeng)區進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)，各區實驗服(fu)、儀器(qi) 、耗(hao)材(cai)應(ying)獨(du)立使(shi)用(yong)，不(bu)能(neng)混用；實驗用吸(xi)頭采用帶(dai)濾(lv)芯(xin)吸(xi)頭；樣本(ben)處理(li)區應(ying)配(pei)有(you)生(sheng)物安(an)全櫃，樣本(ben)處理(li)在生(sheng)物安(an)全櫃中(zhong)進行(xing)操(cao)作(zuo)；三個(ge)區(qu)應(ying)該配有(you)紫外線(xian)殺菌裝(zhuang)置(zhi)。
2. 為避免RNA降(jiang)解，樣本(ben)處理(li)過程(cheng)應(ying)在0-4℃條(tiao)件下操(cao)作(zuo)，且(qie)完(wan)成(cheng)實驗後(hou)立即上機(ji)檢(jian)測；樣本(ben)處理(li)過程(cheng)中(zhong)使(shi)用(yong)的(de)器(qi)具(ju)耗材(cai)應(ying)經(jing)過無(wu)核(he)酶處理(li)。
3. 每(mei)次(ci)實驗應該設置(zhi)陰、陽性(xing)對(dui)照。
4. 試(shi)劑盒(he)所有試劑在(zai)使(shi)用(yong)前(qian)應該在常(chang)溫下充(chong)分(fen)融化混勻，並(bing)應(ying)瞬時(shi)離(li)心(xin)。
5. 試(shi)劑盒(he)內所配陰性和(he)陽(yang)性(xing)對(dui)照在壹(yi)次(ci)使(shi)用(yong)前(qian)應全部轉(zhuan)移(yi)至標(biao)本準備(bei)區，並(bing)單(dan)獨(du)存放。
6. 為防止熒(ying)光幹擾，應避(bi)免裸(luo)手直(zhi)接(jie)接觸PCR反(fan)應(ying)管(guan)，並(bing)應(ying)避免在(zai)PCR反(fan)應(ying)管(guan)上進行(xing)任(ren)何(he)標記(ji)。
7. 儀器(qi) 擴(kuo)增(zeng)相關(guan)參(can)數應按(an)照本說明(ming)書(shu)相關(guan)要求(qiu)進(jin)行(xing)設置(zhi)；不同批號試劑不(bu)能(neng)混用。
8. ABI系(xi)列(lie)熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR儀參(can)數設置(zhi)中不選(xuan)ROX校(xiao)正(zheng)，淬滅(mie)基因選(xuan)擇None。
9. 實驗過程(cheng)中(zhong)產品(pin)的(de)廢棄(qi)物應該進行(xing)無(wu)害(hai)化處理(li)後(hou)方可(ke)丟棄(qi)。

特點：
1. 即開即用，用(yong)戶只(zhi)需(xu)要提供(gong)病毒(du)樣品(pin)。
2. 根據地(di)黃保(bao)守序(xu)列(lie)設計(ji)的專壹(yi)性(xing)引(yin)物，與相(xiang)關病毒(du)無(wu)交(jiao)叉反(fan)應(ying)。
3. 靈(ling)敏(min)度可以(yi)達(da)到幾百拷貝/反(fan)應(ying)。
4. 壹(yi)管(guan)式(shi)熒(ying)光定(ding)量(liang) PCR 檢(jian)測，避免後(hou)續汙(wu)染。
5. 本(ben)試劑盒(he)足(zu)夠 50 次(ci) 20μL 反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)的熒(ying)光定(ding)量(liang) PCR。
6. 本(ben)產品(pin)只(zhi)適(shi)用(yong)於(yu)科(ke)研，不(bu)能(neng)用(yong)於(yu)臨床(chuang)診斷(duan)。
使(shi)用(yong)方(fang)法：
壹(yi)、樣品(pin)采集(ji)：
1、食(shi)品樣品(pin)：樣品(pin)的(de)采集(ji)與預(yu)培(pei)養(yang)按照樣品(pin)的(de)采集(ji)與預(yu)培(pei)養(yang)按照《食(shi)品衛生(sheng)微(wei)生(sheng)物學(xue)檢(jian)驗阪(ban)崎腸(chang)桿(gan)菌檢(jian)驗要求(qiu)進(jin)行(xing)。
2、血(xue)液樣品(pin)：用(yong)無(wu)菌註射器(qi)抽(chou)取(qu)受檢(jian)者(zhe)靜(jing)脈血2mL，註入(ru)無(wu)菌EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬(meng)酸鈉(na))抗(kang)凝(ning)管，立即混勻。
3、糞(fen)便樣品(pin)：取(qu)糞(fen)便置(zhi)於滅(mie)菌的(de)收集(ji)管中送(song)檢(jian)。
4、病竈(zao)部(bu)位樣品(pin)：取(qu)發(fa)病部(bu)位(wei)新(xin)鮮(xian)滲(shen)出(chu)物、粘液膿(nong)血(xue)送檢(jian)。
壹(yi)、稀(xi)釋(shi) PCR 陽(yang)性對(dui)照（以(yi) 10E2-10E7 拷(kao)貝/μL 這 6 個(ge) 10 倍(bei)稀(xi)釋(shi)度為例）
1. 註意(yi)：由於(yu)標(biao)準品(pin)濃度非(fei)常高，因此(ci)下列(lie)稀釋(shi)操(cao)作(zuo)壹(yi)定(ding)要在(zai)獨(du)立的區(qu)域(yu)進行(xing)，千(qian)萬(wan)不能(neng)汙(wu)染樣品(pin)或(huo)本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)的其(qi)他成(cheng)分(fen)）。為增(zeng)加(jia)產品(pin)穩(wen)定(ding)性和(he)避(bi)免擴(kuo)散傳(chuan)染性病原，本產品(pin)不(bu)提供(gong)活體(ti)樣品(pin)做(zuo)陽(yang)性對(dui)照，只提供(gong)可以(yi)直(zhi)接(jie)使(shi)用(yong)的(de) DNA段(duan)作為陽性(xing)對(dui)照。
2. 標(biao)記(ji) 6 個(ge)離(li)心(xin)管，分別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶芯槍頭分(fen)別(bie)加(jia)入 45 μL 熒(ying)光 PCR 模(mo)板稀釋(shi)液(ye)（用(yong)帶(dai)芯槍(qiang)頭，下同）。
4. 在(zai) 7 號管中加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對(dui)照，充分震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對(dui)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對(dui)照(上步(bu)稀(xi)釋所得)，充(chong)分震蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對(dui)照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在 5 號管中加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對(dui)照到 5 號管中，充(chong)分震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對(dui)照。放冰上待用。
7. 重(zhong)復(fu)上面的(de)操(cao)作直(zhi)到得到 6 個(ge)稀(xi)釋(shi)度的陽(yang)性對(dui)照。放冰上待用。
註：上述樣品(pin)建(jian)議(yi)經(jing)過增(zeng)菌後(hou)，收集(ji)培(pei)養(yang)物用於檢(jian)測。 
二、DNA提取(qu)：
可(ke)采用PCR試(shi)劑盒(he)配備(bei)的DNA抽(chou)提液(ye)，按以(yi)下說(shuo)明(ming)進(jin)行(xing)DNA核(he)酸的(de)粗(cu)提。也(ye)可采購上海澤葉(ye)生(sheng)物科(ke)技有(you)限公(gong)司(si)生(sheng)產的(de)DNA提取(qu)試劑(ji)盒(he)(過柱法-熒(ying)光配(pei)套(tao))或(huo)其(qi)他合適(shi)的(de)商(shang)業化產品(pin)，並(bing)按(an)照相應試(shi)劑盒(he)說明(ming)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)。
1、液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)物：取液體(ti)培(pei)養(yang)物100μL加(jia)到1.5mL無(wu)菌離(li)心(xin)管中，8000rpm離(li)心(xin)3min，盡量(liang)吸(xi)棄(qi)上清，加(jia)入50μL DNA抽(chou)提液(ye)充分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
2、固(gu)體(ti)培(pei)養(yang)物：挑(tiao)取(qu)單(dan)克(ke)隆菌落(luo)與50μL DNA抽(chou)提液(ye)充分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
3、糞(fen)便樣品(pin)：挑(tiao)取(qu)米粒大(da)小(xiao)糞(fen)便(bian)於滅(mie)菌離(li)心(xin)管中，加(jia)入0.5mL生(sheng)理(li)鹽(yan)水，振(zhen)蕩混勻，13000rpm離(li)心(xin)3分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上清，沈澱中(zhong)加(jia)入50μL DNA抽(chou)提液(ye)充分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
4、其(qi)他液體(ti)標(biao)本：取標本2-3mL，13000rpm離(li)心(xin)3min，棄(qi)上清，沈澱中(zhong)加(jia)入50μL DNA抽(chou)提液(ye)充分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
註：陽(yang)性(xing)對(dui)照和(he)陰(yin)性(xing)對(dui)照為已經抽提好(hao)的核(he)酸(無(wu)需提取(qu))，直(zhi)接(jie)取5μL加(jia)入到反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)中即可。由於(yu)陽(yang)性對(dui)照濃度較(jiao)高，建(jian)議(yi)在(zai)樣品(pin)制(zhi)備(bei)區域(yu)加(jia)入陽(yang)性(xing)對(dui)照。 
CaEs-17細胞，人食(shi)管癌(ai)細胞 人腦瘤細胞,SF767細胞 敘(xu)利(li)亞倉鼠肌(ji)肉(rou)細胞;GH-M1脫氧膽(dan)酸鈉(na)；去氧膽(dan)酸鈉(na) deoxycholate質(zhi)量(liang)規(gui)格：>99%,BR

CaES-17(人食(shi)管癌(ai)細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2牛(niu)磺Tauroursodeoxycholic Acid Dihydrate質(zhi)量(liang)規(gui)格：≥97%

CD55 Others Human 人 CD55 / DAF 人細胞裂解液 (陽(yang)性對(dui)照) 牛(niu)磺鈉Tauroursodeoxycholic Acid  Salt 質(zhi)量(liang)規(gui)格：≥97%

小(xiao)鼠結(jie)腸(chang)癌(ai)細胞;CT26.WT [CT26WT]新(xin)生(sheng)黴(mei)素鈉(na)鹽(yan)vobiocin 質(zhi)量(liang)規(gui)格：>90%,進(jin)分

人星形膠質細胞 (HA) (1×106 )磺胺(an)甲(jia)基(ji)嘧啶(ding)(標(biao)準品)Sulfamerazine質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98%,分(fen)析標(biao)準(zhun)品(pin)
SHZ-88大(da)鼠癌(ai)細胞 Breast cancer cells of SHZ-88 rats DMEM培(pei)養(yang)基+10%FBS芴(wu)甲(jia)氧(yang)羰基(ji)-L-天(tian)冬氨酸-1-叔(shu)丁(ding)酯(zhi)Fmoc-Asp(OH)-OtBu質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98.5%,BR

IGFBP4 Protein Mouse 重(zhong)組(zu)小(xiao)鼠 IGFBP4 蛋白 (His 標(biao)簽(qian))Fmoc-L-賴(lai)氨酸鹽(yan)酸鹽(yan)Fmoc-Lys-OH·HCl質(zhi)量(liang)規(gui)格：0.98

Hep B1.2(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 痢(li)疾(ji)誌賀(he)氏菌氧(yang)化白藜蘆(lu)醇(chun)(標(biao)準品)Oxyresveratrol質(zhi)量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%，標(biao)準品

氣道平滑肌(ji)細胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)氧(yang)化白藜蘆(lu)醇(chun)Oxyresveratrol質(zhi)量(liang)規(gui)格：≥98%,BR

PROCR Others Cymolgus 食(shi)蟹(xie)猴 Epcr / PROCR 人細胞裂解液 (陽(yang)性對(dui)照) 乙(yi)酰化白藜蘆(lu)醇(chun)(標(biao)準品)Acetyl-resveratrol質(zhi)量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%，標(biao)準品
大(da)鼠腦靜(jing)脈血管平(ping)滑肌(ji)細胞*培(pei)養(yang)基 100mLTRIS1.0MSTERILESOLUTIONpH10.0Tris溶(rong)液超級(ji)透明(ming)無(wu)混濁溶(rong)液(ye)RTsigma

B95-8絨(rong)猴EBV轉(zhuan)化的白細胞 B95-8 EBV conversion of leukocyte marmoset RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS1,4-醌(kun);α-醌(kun);隊醌(kun);1,4-二同 1,4-Ncphthoineonq;1,4-Dixy7-1,4-dikqtoncphclqnq;α-Ncphthoineonq 130-12-4

IFNA13 Protein Mouse 重(zhong)組(zu)小(xiao)鼠 IFNA13 / Ierferon alpha-13 蛋白 (Fc 標(biao)簽(qian))5-溴-2-錄(lu)煙(yan)醋(cu)酯(zhi) Mqthyl 5-bromo-2-chloropyridinq-3-ccrboxylctq 78686-79-0

MFC-GFP(小(xiao)鼠前(qian)胃(wei)癌細胞(綠(lv)色熒(ying)光蛋白標(biao)記(ji))) 5×106cells/瓶(ping)×2 CTLL-2(T細胞)葡聚糖酶，英文(wen)名(ming)或(huo)英(ying)文(wen)縮(suo)寫：β-Dextranase，級(ji)別：BR,4000BAEEu/mg,大(da)豆(dou)，規(gui)格(ge)：1克(ke)

786-O [786-0], 人腎(shen)透明(ming)腺癌細胞AOAC改(gai)良李(li)斯(si)特瓊(qiong)脂　(+4℃)NA
蓽(bi)茇(ba)染料(liao)法PCR鑒(jian)定(ding)試劑(ji)盒(he)直(zhi)銷氣道平滑肌(ji)細胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)，英(ying)文(wen)名(ming)或(huo)英(ying)文(wen)縮(suo)寫：s-Toxane，級(ji)別：AR，99.5%，規(gui)格：5克(ke)

KLK8 Others Human 人 KLK-8 / Kallikrein-8 人細胞裂解液 (陽(yang)性對(dui)照) 流(liu)醋鎳(nie)銨 cMMONIUM NICKqL(II) SULFcTq HqXcHYDRcTq 7782-0-8

PIEC 豬(zhu)髖動(dong)脈內皮(pi)細胞(S)-2-基(ji)-3,3-二甲(jia)基(ji)鹽(yan)酸鹽(yan)，英(ying)文(wen)名(ming)或(huo)英(ying)文(wen)縮(suo)寫：L-tert-Leucine xy7chloride
儲(chu)存條件：
14℃或(huo)－20℃樣品(pin)收集(ji)、處理(li)及保(bao)存方法
1. 血(xue)清：使(shi)用(yong)不(bu)含(han)熱(re)原和(he)內毒(du)素(su)的(de)試管，操作(zuo)過程(cheng)中(zhong)避免任(ren)何(he)細胞刺(ci)激，收集(ji)血液後(hou)，3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血(xue)清和(he)紅細胞迅(xun)速小(xiao)心(xin)地分離(li)。
2. 血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬酸鹽(yan)或(huo)肝(gan)素(su)抗(kang)凝(ning)。3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)30 分(fen)鐘(zhong)取(qu)上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)去除顆粒和(he)聚合物。
4. 組(zu)織勻漿(jiang)：將組(zu)織加(jia)入適(shi)量(liang)生(sheng)理(li)鹽(yan)水搗(dao)碎。3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)取(qu)上清。
5. 保(bao)存：如果樣本(ben)收集(ji)後(hou)不及(ji)時檢(jian)測，請(qing)按(an)壹(yi)次(ci)用量(liang)分(fen)裝(zhuang)，凍存於-20℃，避(bi)免反(fan)復(fu)凍融，在(zai)室(shi)溫下解凍並(bing)確(que)保(bao)樣品(pin)均(jun)勻地(di)充(chong)分解凍。