萹蓄(xu)PCR鑒定(ding)試(shi)劑(ji)盒(he)保存(cun)

特點：
1. 即開(kai)即(ji)用(yong)，用(yong)戶只需要提(ti)供(gong)病毒樣(yang)品(pin)。
2. 根(gen)據(ju)地(di)黃保守(shou)序(xu)列設(she)計的(de)專壹(yi)性引(yin)物，與(yu)相關(guan)病毒無交叉反應(ying)。
3. 靈敏度可以(yi)達(da)到幾百拷貝/反應(ying)。
4. 壹管(guan)式熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR 檢(jian)測，避(bi)免(mian)後續汙染。
5. 本試劑(ji)盒足夠 50 次 20μL 反應(ying)體系(xi)的(de)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR。
6. 本產品(pin)只適用(yong)於(yu)科(ke)研(yan)，不能用(yong)於(yu)臨(lin)床診斷(duan)。

使用(yong)方法：
壹、樣品(pin)采集(ji)：
1、食品(pin)樣品(pin)：樣品(pin)的采集(ji)與(yu)預(yu)培(pei)養按照(zhao)樣(yang)品(pin)的采集(ji)與(yu)預(yu)培(pei)養按照(zhao)《食(shi)品(pin)衛生(sheng)微生(sheng)物學檢(jian)驗(yan)阪(ban)崎腸(chang)桿(gan)菌檢(jian)驗(yan)要求(qiu)進行(xing)。
2、血液樣品(pin)：用(yong)無菌(jun)註(zhu)射器抽取受(shou)檢(jian)者靜(jing)脈(mai)血2mL，註(zhu)入無菌(jun)EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬(meng)酸(suan)鈉)抗(kang)凝管(guan)，立即混勻。
3、糞便樣(yang)品(pin)：取糞(fen)便(bian)置於(yu)滅(mie)菌的(de)收(shou)集(ji)管(guan)中送(song)檢(jian)。
4、病竈部(bu)位(wei)樣品(pin)：取發病部位(wei)新鮮(xian)滲(shen)出物、粘(zhan)液(ye)膿(nong)血送檢(jian)。
壹、稀釋(shi) PCR 陽(yang)性對照（以(yi) 10E2-10E7 拷貝/μL 這(zhe) 6 個(ge) 10 倍稀釋(shi)度(du)為例）
1. 註(zhu)意：由於(yu)標(biao)準品(pin)濃度非(fei)常高，因(yin)此下(xia)列稀釋(shi)操作(zuo)壹定要在(zai)獨立的區(qu)域(yu)進行(xing)，千萬(wan)不(bu)能汙染樣(yang)品(pin)或(huo)本試(shi)劑盒的其他成(cheng)分(fen)）。為增加(jia)產(chan)品(pin)穩定性和(he)避免(mian)擴散傳(chuan)染性(xing)病原，本(ben)產品(pin)不提(ti)供(gong)活體(ti)樣(yang)品(pin)做陽(yang)性對照，只提(ti)供(gong)可以(yi)直(zhi)接使用(yong)的(de) DNA段作(zuo)為陽(yang)性對照。
2. 標(biao)記(ji) 6 個(ge)離心管(guan)，分(fen)別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯槍(qiang)頭(tou)分(fen)別(bie)加(jia)入(ru) 45 μL 熒(ying)光(guang) PCR 模板(ban)稀釋(shi)液(ye)（用(yong)帶(dai)芯槍(qiang)頭(tou)，下同(tong)）。
4. 在(zai) 7 號管(guan)中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yang)性對照，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷貝/μL 的陽(yang)性對照。放冰上待用(yong)。
5. 換(huan)槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 6 號管(guan)中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yang)性對照(上步(bu)稀釋(shi)所(suo)得)，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yang)性對照。放冰上待用(yong)。
6. 換(huan)槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 5 號管(guan)中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yang)性對照到 5 號管(guan)中，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yang)性對照。放冰上待用(yong)。
7. 重復上面(mian)的(de)操作(zuo)直(zhi)到得到 6 個(ge)稀釋(shi)度(du)的(de)陽(yang)性對照。放冰上待用(yong)。
註(zhu)：上述樣品(pin)建議經(jing)過(guo)增(zeng)菌後，收(shou)集(ji)培(pei)養物用(yong)於(yu)檢(jian)測。 
二、DNA提(ti)取：
可采(cai)用(yong)PCR試劑盒(he)配備(bei)的DNA抽提(ti)液(ye)，按以(yi)下(xia)說明(ming)進行(xing)DNA核酸(suan)的粗(cu)提(ti)。也(ye)可采(cai)購上海澤葉(ye)生(sheng)物科(ke)技(ji)有限公(gong)司(si)生(sheng)產的(de)DNA提(ti)取試(shi)劑(ji)盒(過(guo)柱(zhu)法-熒(ying)光(guang)配(pei)套)或(huo)其他合(he)適的商業化(hua)產(chan)品(pin)，並按照相應(ying)試劑盒(he)說明(ming)進行(xing)操作(zuo)。
1、液體培(pei)養物：取液(ye)體(ti)培(pei)養物100μL加(jia)到1.5mL無菌(jun)離心管(guan)中，8000rpm離心3min，盡(jin)量吸(xi)棄(qi)上清(qing)，加(jia)入(ru)50μL DNA抽提(ti)液(ye)充分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min，取上清(qing)5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
2、固體培(pei)養物：挑取單(dan)克隆菌落(luo)與(yu)50μL DNA抽提(ti)液(ye)充分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min，取上清(qing)5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
3、糞便樣(yang)品(pin)：挑取米粒(li)大(da)小(xiao)糞(fen)便(bian)於滅(mie)菌離心管(guan)中，加(jia)入(ru)0.5mL生(sheng)理鹽(yan)水，振(zhen)蕩(dang)混勻，13000rpm離心3分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上清(qing)，沈澱(dian)中加(jia)入(ru)50μL DNA抽提(ti)液(ye)充分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min取上清(qing)5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
4、其他液(ye)體標(biao)本(ben)：取標(biao)本(ben)2-3mL，13000rpm離心3min，棄(qi)上清(qing)，沈澱(dian)中加(jia)入(ru)50μL DNA抽提(ti)液(ye)充分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min取上清(qing)5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
註(zhu)：陽(yang)性對照和(he)陰(yin)性對照為已經抽提(ti)好的核酸(suan)(無需(xu)提(ti)取)，直(zhi)接取5μL加(jia)入(ru)到反應(ying)體系(xi)中(zhong)即(ji)可。由(you)於陽(yang)性對照濃度(du)較高，建議在(zai)樣品(pin)制備區(qu)域(yu)加(jia)入(ru)陽(yang)性對照。 
實(shi)驗(yan)流程(cheng)：
1. 整個(ge)檢(jian)測過(guo)程(cheng)應(ying)嚴格(ge)按(an)照本說明(ming)書要求(qiu)分(fen)別(bie)在(zai)試劑準備區(qu)、樣(yang)本處(chu)理(li)區(qu)和(he)PCR擴增區(qu)進(jin)行(xing)操作(zuo)，各(ge)區(qu)實(shi)驗(yan)服(fu)、儀(yi)器(qi) 、耗材應(ying)獨立使用(yong)，不(bu)能混用(yong)；實(shi)驗(yan)用(yong)吸(xi)頭(tou)采用(yong)帶(dai)濾(lv)芯(xin)吸(xi)頭(tou)；樣本(ben)處(chu)理(li)區(qu)應(ying)配有生(sheng)物安(an)全櫃(gui)，樣本(ben)處(chu)理(li)在(zai)生(sheng)物安(an)全櫃(gui)中進(jin)行(xing)操作(zuo)；三個(ge)區(qu)應(ying)該配(pei)有紫(zi)外(wai)線殺菌(jun)裝(zhuang)置(zhi)。
2. 為避免(mian)RNA降(jiang)解，樣本處(chu)理(li)過(guo)程(cheng)應(ying)在(zai)0-4℃條件(jian)下(xia)操作(zuo)，且完成(cheng)實(shi)驗(yan)後立即上機檢(jian)測；樣(yang)本處(chu)理(li)過(guo)程(cheng)中使用(yong)的(de)器具(ju)耗(hao)材(cai)應(ying)經過(guo)無核酶(mei)處(chu)理(li)。
3. 每(mei)次實(shi)驗(yan)應(ying)該設(she)置陰(yin)、陽(yang)性對照。
4. 試劑盒(he)所(suo)有試(shi)劑(ji)在(zai)使用(yong)前(qian)應(ying)該在(zai)常溫下充分(fen)融(rong)化(hua)混勻，並應(ying)瞬(shun)時(shi)離心。
5. 試劑盒(he)內所(suo)配陰(yin)性和(he)陽(yang)性對照在(zai)壹次使用(yong)前(qian)應(ying)全部轉(zhuan)移(yi)至(zhi)標(biao)本(ben)準備區(qu)，並(bing)單(dan)獨存(cun)放。
6. 為防止(zhi)熒(ying)光(guang)幹擾，應(ying)避免(mian)裸手(shou)直(zhi)接接觸PCR反應(ying)管(guan)，並應(ying)避免(mian)在(zai)PCR反應(ying)管(guan)上進行(xing)任何標(biao)記(ji)。
7. 儀器 擴增相關(guan)參(can)數(shu)應(ying)按照本(ben)說明(ming)書相關(guan)要求(qiu)進行(xing)設(she)置；不(bu)同批(pi)號試劑(ji)不(bu)能混用(yong)。
8. ABI系(xi)列(lie)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀參(can)數(shu)設(she)置中(zhong)不選(xuan)ROX校正(zheng)，淬(cui)滅(mie)基因(yin)選(xuan)擇(ze)None。
9. 實(shi)驗(yan)過(guo)程(cheng)中產(chan)品(pin)的廢棄(qi)物應(ying)該進(jin)行(xing)無害化(hua)處(chu)理(li)後方可丟(diu)棄(qi)。
儲存(cun)條件(jian)：
14℃或(huo)－20℃樣品(pin)收(shou)集(ji)、處(chu)理(li)及(ji)保存(cun)方法
1. 血清(qing)：使用(yong)不(bu)含(han)熱原和(he)內毒素的試(shi)管(guan)，操作(zuo)過(guo)程(cheng)中避(bi)免(mian)任(ren)何細(xi)胞刺激(ji)，收(shou)集(ji)血液後，3000 轉離心10 分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血清(qing)和(he)紅細(xi)胞迅(xun)速小(xiao)心(xin)地(di)分(fen)離。
2. 血漿：EDTA、檸(ning)檬(meng)酸(suan)鹽或(huo)肝(gan)素抗(kang)凝。3000 轉離心30 分(fen)鐘(zhong)取上清(qing)。
3. 細(xi)胞上清(qing)液：3000 轉離心10 分(fen)鐘(zhong)去除(chu)顆(ke)粒(li)和(he)聚合物。
4. 組(zu)織勻漿(jiang)：將(jiang)組(zu)織加(jia)入(ru)適量生(sheng)理鹽(yan)水搗碎(sui)。3000 轉離心10 分(fen)鐘(zhong)取上清(qing)。
5. 保存(cun)：如果樣(yang)本收(shou)集(ji)後不及(ji)時(shi)檢(jian)測，請(qing)按壹次用(yong)量(liang)分(fen)裝(zhuang)，凍存於(yu)-20℃，避免(mian)反(fan)復凍融，在(zai)室溫下解(jie)凍並確(que)保樣(yang)品(pin)均勻地(di)充分(fen)解(jie)凍。
EFNA3 Protein Human 重組(zu)人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白(bai) (His & Fc 標(biao)簽(qian))香(xiang)荊芥(jie)酚（標(biao)準品(pin)）5-Isopropyl-2-methylphel質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：供(gong)含(han)量(liang)測(ce)定(ding)用(yong)

HELF(人胚肺(fei)成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2 骨細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105方(1ml)十七碳(tan)酸(suan)甲酯(zhi)（標(biao)準品(pin)）METHYL HEPTADECAATE質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：內標(biao)

胎兒表(biao)皮(pi)角(jiao)化(hua)細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105方(1ml)鴨(ya)腳(jiao)樹(shu)葉(ye)堿（標(biao)準品(pin)）2α,5α-Epoxy-1,2-dihydroakuammilan-17-oic acid methyl ester質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：含(han)量(liang)測(ce)定(ding)

PDE4B Others Human 人 PDE4B / DPDE4 桿(gan)狀病毒-昆蟲細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對照) 6-羥基-7-甲氧基（標(biao)準品(pin)）6-HYDROXY-7-METHOXYCOUMARIN質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：含(han)量(liang)測(ce)定(ding)

大(da)鼠(shu)垂體(ti)瘤細(xi)胞;MMQ苦玄參(can)苷IA（標(biao)準品(pin)）PIEFELTARRAENIN A質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：含(han)量(liang)測(ce)定(ding)
IFNB1 Protein Cymolgus 重組(zu)食蟹(xie)猴 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 蛋白(bai) (Fc 標(biao)簽(qian))羥苯磺(huang)酸(suan)鈣（標(biao)準品(pin)）Calcium dobesilate質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：含(han)量(liang)測(ce)定(ding)

HPAC(人胰腺(xian)腺泡上皮(pi)癌) 5×106cells/瓶×2 短小(xiao)芽(ya)孢(bao)桿(gan)菌異鼠(shu)李素-3-O-葡(pu)萄(tao)糖(tang)-7-O-鼠(shu)李糖(tang)苷（標(biao)準品(pin)）Isorhamnetin 3-glucoside-7-rhamside質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥95%,標(biao)準品(pin)

角(jiao)膜內皮(pi)細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105方(1ml)5'-tert-Butyldimethylsilyloxy 5'-tert-Butyldimethylsilyloxy Meloxicam質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口

GRK5 Others Human 人 GRK5 / GPRK5 桿(gan)狀病毒-昆蟲細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對照) 二甲(jia)基(ji)酯(zhi)Methotrexate Dimethyl Ester質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口

人肺(fei)粘(zhan)液(ye)上皮(pi)樣癌(ai)細(xi)胞;NCI-H292-甲基-d3，二甲(jia)基(ji)酯(zhi)Methotrexate-methyl-d3, Dimethyl Ester質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口
RAB27B Others Human 人 RAB27B 人細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對照) Δ2-質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口Δ2-Ceftazidime

CL-0077Eca-109(人食管(guan)癌細(xi)胞)5×106cells/瓶×2五(wu)水化(hua)合(he)物質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口Ceftazidime Pentahydrate

Wish細(xi)胞，人羊(yang)膜細(xi)胞系(xi) 人T細(xi)胞瘤,Hat-78細(xi)胞 小(xiao)鼠(shu)誘(you)導性(xing)多潛能幹細(xi)胞;PUMC-mips-A2質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口Cefazolin

BGC823(人胃癌(ai)細(xi)胞) 5×106cells/瓶×217β-羧酸(suan)氟替(ti)卡質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口Fluticasone 17β-Carboxylic Acid

CTSB Others Human 人 Cathepsin-B / CTSB 人細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對照) 質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>950µg/mg,BRCEFADROXIL
萹蓄(xu)PCR鑒定(ding)試(shi)劑(ji)盒(he)保存(cun)CM-H035人腸(chang)靜(jing)脈(mai)內皮(pi)細(xi)胞*培(pei)養基100mL基三乙(yi)酸(suan)，英(ying)文(wen)名(ming)或(huo)英(ying)文(wen)縮寫(xie)：NTA，級別(bie)：高，60%，規(gui)格(ge)：5克

A549, 人肺(fei)癌(ai)細(xi)胞系(xi)頭(tou)孢(bao)滌(di)泥相關(guan)物質(zhi)B Cqfdinir Rqlctqd CoMpound B;(6R,7R)-7-[2-(2-cMi-4-thiczolyl)ccqtcMido]-8-oxo-3-vinyl-5-thic-1-czcbicyclo[4,2,0]oct-2-qnq-2-ccrboxylic ccid 79320-10-0

人卵(luan)巢腺(xian)癌(ai)細(xi)胞;SK-OV-3 大(da)鼠(shu)肺(fei)微(wei)血管(guan)內皮(pi)細(xi)