白前PCR鑒定試(shi)劑盒(he)保存

特(te)點(dian)：
1. 即(ji)開(kai)即用(yong)，用(yong)戶只(zhi)需要提供病毒(du)樣品。
2. 根(gen)據地黃保守(shou)序列(lie)設(she)計(ji)的(de)專(zhuan)壹(yi)性(xing)引(yin)物，與(yu)相關(guan)病毒(du)無(wu)交叉(cha)反(fan)應。
3. 靈(ling)敏度可(ke)以達(da)到(dao)幾百(bai)拷貝(bei)/反(fan)應。
4. 壹(yi)管(guan)式熒光(guang)定量(liang) PCR 檢(jian)測，避(bi)免(mian)後續(xu)汙染。
5. 本試(shi)劑(ji)盒足夠 50 次 20μL 反(fan)應體(ti)系的(de)熒(ying)光(guang)定量(liang) PCR。
6. 本產(chan)品(pin)只適用(yong)於(yu)科研(yan)，不(bu)能(neng)用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)。

使(shi)用(yong)方(fang)法：
壹(yi)、樣品采集(ji)：
1、食品(pin)樣品：樣品的(de)采集(ji)與(yu)預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照樣品的(de)采集(ji)與(yu)預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照《食品(pin)衛(wei)生(sheng)微生(sheng)物學(xue)檢(jian)驗阪(ban)崎腸(chang)桿(gan)菌檢驗要求進(jin)行。
2、血液樣品：用(yong)無菌註(zhu)射(she)器(qi)抽取(qu)受檢者(zhe)靜脈(mai)血2mL，註(zhu)入(ru)無菌EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬酸鈉(na))抗凝管，立即混(hun)勻(yun)。
3、糞(fen)便(bian)樣品：取(qu)糞(fen)便(bian)置(zhi)於(yu)滅(mie)菌的(de)收(shou)集(ji)管中送檢(jian)。
4、病(bing)竈(zao)部(bu)位(wei)樣品：取(qu)發病(bing)部(bu)位(wei)新(xin)鮮(xian)滲(shen)出(chu)物、粘(zhan)液膿血送檢。
壹(yi)、稀(xi)釋 PCR 陽性(xing)對(dui)照（以 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這(zhe) 6 個 10 倍(bei)稀釋(shi)度為(wei)例）
1. 註(zhu)意：由於(yu)標(biao)準(zhun)品濃(nong)度非(fei)常高，因此下(xia)列稀(xi)釋操作壹定要在獨(du)立(li)的(de)區(qu)域進(jin)行，千萬(wan)不(bu)能(neng)汙(wu)染(ran)樣品或(huo)本試(shi)劑(ji)盒的(de)其他(ta)成(cheng)分(fen)）。為增加產(chan)品(pin)穩(wen)定性(xing)和避免(mian)擴散(san)傳染(ran)性(xing)病(bing)原(yuan)，本產(chan)品(pin)不(bu)提供活體(ti)樣品做(zuo)陽性(xing)對(dui)照，只提供可以(yi)直接(jie)使(shi)用(yong)的(de) DNA段作為陽性(xing)對(dui)照。
2. 標(biao)記 6 個離心(xin)管(guan)，分別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯(xin)槍頭(tou)分別(bie)加(jia)入(ru) 45 μL 熒(ying)光(guang) PCR 模(mo)板(ban)稀(xi)釋(shi)液(ye)（用(yong)帶(dai)芯(xin)槍頭(tou)，下(xia)同）。
4. 在(zai) 7 號(hao)管(guan)中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對(dui)照，充分震蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對(dui)照。放冰(bing)上(shang)待(dai)用(yong)。
5. 換(huan)槍(qiang)頭(tou)，在 6 號(hao)管(guan)中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對(dui)照(上(shang)步(bu)稀(xi)釋所(suo)得)，充分震蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對(dui)照。放冰(bing)上(shang)待(dai)用(yong)。
6. 換(huan)槍(qiang)頭(tou)，在 5 號(hao)管(guan)中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對(dui)照到(dao) 5 號(hao)管(guan)中，充分震蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對(dui)照。放冰(bing)上(shang)待(dai)用(yong)。
7. 重(zhong)復(fu)上面的(de)操(cao)作(zuo)直到(dao)得(de)到(dao) 6 個稀釋(shi)度的(de)陽性(xing)對(dui)照。放冰(bing)上(shang)待(dai)用(yong)。
註(zhu)：上述(shu)樣品建(jian)議(yi)經過增菌後，收(shou)集(ji)培養(yang)物用(yong)於(yu)檢(jian)測。 
二(er)、DNA提取：
可(ke)采用(yong)PCR試(shi)劑(ji)盒配備的(de)DNA抽提液，按(an)以下(xia)說明(ming)進行DNA核酸的(de)粗(cu)提。也可采購(gou)上(shang)海(hai)澤(ze)葉(ye)生(sheng)物科技有限公司(si)生(sheng)產(chan)的(de)DNA提取試劑(ji)盒(過柱(zhu)法-熒(ying)光(guang)配(pei)套(tao))或(huo)其他(ta)合(he)適的(de)商(shang)業(ye)化(hua)產(chan)品(pin)，並按(an)照相應試劑盒說明(ming)進(jin)行操作。
1、液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)物：取(qu)液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)物100μL加(jia)到(dao)1.5mL無(wu)菌離心管中(zhong)，8000rpm離(li)心(xin)3min，盡量吸棄(qi)上清，加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液充分混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
2、固(gu)體(ti)培(pei)養(yang)物：挑取單克隆(long)菌落(luo)與(yu)50μL DNA抽提液充分混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
3、糞(fen)便(bian)樣品：挑取米粒大(da)小(xiao)糞(fen)便(bian)於(yu)滅(mie)菌離心管中(zhong)，加(jia)入(ru)0.5mL生(sheng)理鹽水，振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)，13000rpm離(li)心(xin)3分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上清，沈(chen)澱(dian)中加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液充分混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
4、其他(ta)液(ye)體(ti)標(biao)本：取(qu)標(biao)本2-3mL，13000rpm離(li)心(xin)3min，棄(qi)上清，沈(chen)澱(dian)中加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液充分混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
註(zhu)：陽性(xing)對(dui)照和陰(yin)性(xing)對(dui)照為已(yi)經(jing)抽提好的(de)核酸(無(wu)需提取)，直接(jie)取(qu)5μL加(jia)入(ru)到(dao)反(fan)應體(ti)系中即(ji)可(ke)。由於(yu)陽性(xing)對(dui)照濃(nong)度較高，建議(yi)在樣品制(zhi)備區(qu)域加(jia)入(ru)陽性(xing)對(dui)照。 
實(shi)驗(yan)流(liu)程：
1. 整(zheng)個檢測過程應嚴格(ge)按(an)照本說(shuo)明(ming)書要求分(fen)別(bie)在試劑準(zhun)備區(qu)、樣本處理區(qu)和PCR擴(kuo)增區(qu)進行操作，各(ge)區(qu)實(shi)驗(yan)服、儀(yi)器(qi) 、耗材應獨(du)立(li)使(shi)用(yong)，不(bu)能(neng)混(hun)用(yong)；實(shi)驗(yan)用(yong)吸頭(tou)采用(yong)帶(dai)濾(lv)芯(xin)吸頭(tou)；樣本處理區(qu)應配有生(sheng)物安(an)全(quan)櫃，樣本處理在生(sheng)物安(an)全(quan)櫃中(zhong)進(jin)行操作；三(san)個區(qu)應該(gai)配有紫外線殺菌裝置(zhi)。
2. 為(wei)避(bi)免(mian)RNA降(jiang)解，樣本處理過程應在0-4℃條(tiao)件(jian)下(xia)操作(zuo)，且(qie)完成(cheng)實(shi)驗(yan)後立(li)即上機(ji)檢測；樣本處理過程中(zhong)使用(yong)的(de)器(qi)具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實(shi)驗(yan)應該(gai)設置(zhi)陰(yin)、陽性(xing)對(dui)照。
4. 試(shi)劑(ji)盒所(suo)有試劑(ji)在使用(yong)前應該(gai)在常溫下(xia)充分融(rong)化(hua)混(hun)勻(yun)，並(bing)應瞬時離心。
5. 試(shi)劑(ji)盒內所(suo)配陰(yin)性(xing)和陽性(xing)對(dui)照在壹次使(shi)用(yong)前應全部(bu)轉移(yi)至(zhi)標(biao)本準(zhun)備區(qu)，並單獨(du)存放。
6. 為(wei)防(fang)止熒(ying)光(guang)幹(gan)擾，應避免(mian)裸手(shou)直接(jie)接(jie)觸(chu)PCR反(fan)應管，並應避免(mian)在PCR反(fan)應管上進行任何標(biao)記。
7. 儀(yi)器(qi) 擴(kuo)增相關(guan)參數應按(an)照本說(shuo)明(ming)書相關(guan)要求進(jin)行設置(zhi)；不(bu)同(tong)批號(hao)試(shi)劑不(bu)能(neng)混(hun)用(yong)。
8. ABI系列熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR儀(yi)參數設置(zhi)中不(bu)選ROX校(xiao)正，淬(cui)滅(mie)基因選擇(ze)None。
9. 實(shi)驗(yan)過程中(zhong)產品的(de)廢(fei)棄(qi)物應該(gai)進行無害(hai)化(hua)處理後方(fang)可丟(diu)棄(qi)。
儲(chu)存條(tiao)件(jian)：
14℃或(huo)－20℃樣品收(shou)集(ji)、處理及保存方(fang)法
1. 血清：使(shi)用(yong)不(bu)含(han)熱(re)原(yuan)和內毒(du)素的(de)試(shi)管(guan)，操(cao)作(zuo)過程中(zhong)避免(mian)任何細(xi)胞(bao)刺(ci)激(ji)，收(shou)集(ji)血液後，3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)將血清和紅(hong)細(xi)胞(bao)迅(xun)速(su)小(xiao)心(xin)地(di)分離。
2. 血漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬酸鹽或肝(gan)素抗凝。3000 轉離(li)心30 分(fen)鐘(zhong)取上清。
3. 細(xi)胞(bao)上(shang)清液(ye)：3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)去(qu)除顆粒(li)和聚合(he)物。
4. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)：將組(zu)織(zhi)加(jia)入(ru)適量(liang)生(sheng)理鹽水搗(dao)碎(sui)。3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)取上清。
5. 保存：如果樣本收(shou)集(ji)後不(bu)及(ji)時(shi)檢(jian)測，請按(an)壹次用(yong)量分(fen)裝，凍(dong)存於(yu)-20℃，避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)，在(zai)室(shi)溫下(xia)解凍(dong)並(bing)確(que)保樣品均勻(yun)地(di)充分解凍(dong)。
CM-R099大(da)鼠表皮(pi)色(se)素細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基100mL維(wei)生(sheng)素C棕(zong)櫚(lv)酸酯/L-抗壞(huai)血酸棕(zong)櫚(lv)酸酯6-O-Palmitoyl-L-ascorbic Acid質(zhi)量(liang)規格(ge)：0.99

Saos-2，人(ren)成(cheng)骨(gu)肉瘤細(xi)胞(bao)阿(e)斯(si)巴(ba)甜(tian)Aspartame質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%,BR

EB病(bing)毒(du)轉化(hua)的(de)人(ren)B細(xi)胞(bao);KMY0927 人(ren)脂肪(fang)細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基 100mLPotassium clavulanate質(zhi)量(liang)規格(ge)：標(biao)準(zhun)品

小(xiao)鼠雪旺(wang)細(xi)胞(bao)MSC刺(ci)槐(huai)素ROBININ質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%，標(biao)準(zhun)品

FAS Others Rat 大(da)鼠 FAS / TNFRSF6 / CD95 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對(dui)照) Amfebutamone 質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98.0%，進(jin)口
3T3細(xi)胞(bao)，小(xiao)鼠成(cheng)纖維細(xi)胞(bao) COLO 205(結(jie)腸(chang)癌(ai)細(xi)胞(bao)) 人(ren)腎(shen)透(tou)明細(xi)胞(bao)癌(ai);Caki-1(1S,4S)-N-去(qu)甲基(1S,4S)-N-Desmethyl Sertraline 質(zhi)量(liang)規格(ge)：美(mei)國進口

CSF2 Protein Mouse 重(zhong)組(zu)小(xiao)鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biao)簽(qian))N-去(qu)甲基N-Demethyl Rifampin質(zhi)量(liang)規格(ge)：美(mei)國進口

T-47D(人(ren)管(guan)癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神經(jing)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對(dui)照) 去(qu)甲基Desmethyl Bosentan質(zhi)量(liang)規格(ge)：美(mei)國進口

人(ren)表皮(pi)色(se)素細(xi)胞(bao)-淺(qian)色(se)素HEM-l羥基去(qu)甲基Hydroxy Desmethyl Bosentan質(zhi)量(liang)規格(ge)：美(mei)國進口

CD22 Others Human 人(ren) Siglec-2 / CD22 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對(dui)照) Bosentan質(zhi)量(liang)規格(ge)：美(mei)國進口
人(ren)表皮(pi)微血管內皮(pi)細(xi)胞(bao)(HDMEC)( 5×105 ) 人(ren)少突(tu)膠(jiao)質細(xi)胞(bao) Human雷(lei)氏曼(man)著色(se)劑(ji)質量(liang)規(gui)格(ge)：BSLeishman's stain

CM-H033人(ren)腸(chang)微血管內皮(pi)細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基100mL來(lai)普黴素B 1%溶(rong)液(ye)質量規格(ge)：>95%(HPLC),BCLeptomycin B 1% soluton

DDR1 Others Rat 大(da)鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對(dui)照) 醋(cu)酸氟(fu)氫(qing)可的(de)(標(biao)準(zhun)品)質(zhi)量(liang)規格(ge)：含(han)量97%-103%,標(biao)準(zhun)品Fludrocortisone acetate

人(ren)腦(nao)血管平(ping)滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao)HBVSMC醋(cu)酸氟(fu)氫(qing)可的(de)質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>97%Fludrocortisone acetate

HEL細(xi)胞(bao)，人(ren)紅(hong)白細(xi)胞(bao)白(bai)血病細(xi)胞(bao) 小(xiao)鼠腎(shen)集(ji)合(he)管(guan)細(xi)胞(bao)(SV40轉化(hua)),M-1細(xi)胞(bao) 成(cheng)纖維細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基FM-acf質(zhi)量(liang)規格(ge)：>99%,BRAzelnidipine
白(bai)前(qian)PCR鑒(jian)定試(shi)劑盒(he)保存人(ren)正常上皮(pi)細(xi)胞(bao);MCF 10AAmresco 進(jin)分(fen)瓊脂粉質量規(gui)格(ge)：BR,進(jin)分(fen)Agar

人(ren)肺(fei)動脈(mai)平(ping)滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao)(HPASMC) ( 5×105 )氟(fu)伏(fu)沙(sha)明質量(liang)規(gui)格(ge)：>98%,油(you)狀Fluvoxamine

CL-0325C3H/10T1/2, Clone 8(小(xiao)鼠胚(pei)胎成(cheng)纖維細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2醋(cu)酸鋅(xin)（二(er)水）質(zhi)量(liang)規格(ge)：AR,>98%Zinc acetate

人(ren)侵(qin)襲性(xing)脈(mai)絡膜色(se)素瘤細(xi)胞(bao);M619 大(da)鼠胎兒成(cheng)纖維細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基 100mL舒巴(ba)坦(tan)鈉(na)質(zhi)量規格(ge)：BR,>99%Sulbactam

H-4-II-