蓽(bi)茇探針(zhen)法PCR鑒定試劑盒保(bao)存

儲(chu)存(cun)條件(jian)：
14℃或－20℃樣(yang)品收(shou)集(ji)、處理及(ji)保(bao)存方法
1. 血清(qing)：使(shi)用不(bu)含熱原和(he)內(nei)毒(du)素的試管(guan)，操(cao)作過程(cheng)中(zhong)避免(mian)任(ren)何細胞(bao)刺激(ji)，收(shou)集(ji)血液後(hou)，3000 轉離心10 分鐘(zhong)將血清(qing)和(he)紅(hong)細胞(bao)迅(xun)速小(xiao)心(xin)地分離(li)。
2. 血漿：EDTA、檸(ning)檬酸(suan)鹽(yan)或肝素抗(kang)凝(ning)。3000 轉離心30 分鐘(zhong)取上(shang)清(qing)。
3. 細胞(bao)上(shang)清(qing)液：3000 轉離心10 分鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆(ke)粒(li)和(he)聚合(he)物。
4. 組(zu)織勻(yun)漿：將組織加(jia)入適量(liang)生(sheng)理(li)鹽水(shui)搗(dao)碎(sui)。3000 轉離心10 分鐘(zhong)取上(shang)清(qing)。
5. 保(bao)存：如(ru)果樣(yang)本收(shou)集(ji)後不及(ji)時(shi)檢(jian)測(ce)，請(qing)按(an)壹(yi)次用量(liang)分裝(zhuang)，凍(dong)存(cun)於-20℃，避(bi)免反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)，在(zai)室(shi)溫下解凍(dong)並(bing)確保(bao)樣(yang)品均勻(yun)地充(chong)分解(jie)凍(dong)。

特(te)點：
1. 即(ji)開(kai)即(ji)用(yong)，用(yong)戶只(zhi)需要(yao)提(ti)供病毒(du)樣(yang)品。
2. 根(gen)據(ju)地黃保(bao)守序(xu)列設(she)計(ji)的專壹(yi)性引物(wu)，與相關(guan)病毒(du)無(wu)交叉反(fan)應(ying)。
3. 靈(ling)敏(min)度可(ke)以達到(dao)幾百(bai)拷(kao)貝(bei)/反(fan)應(ying)。
4. 壹(yi)管(guan)式(shi)熒(ying)光(guang)定量(liang) PCR 檢(jian)測(ce)，避(bi)免(mian)後(hou)續汙染。
5. 本(ben)試劑盒足夠(gou) 50 次(ci) 20μL 反(fan)應(ying)體系(xi)的熒(ying)光(guang)定量(liang) PCR。
6. 本(ben)產品只適(shi)用(yong)於科研，不(bu)能(neng)用於臨(lin)床診(zhen)斷。

使(shi)用方法：
壹(yi)、樣(yang)品采集(ji)：
1、食品樣(yang)品：樣(yang)品的采(cai)集(ji)與預培養(yang)按照樣(yang)品的采(cai)集(ji)與預培養(yang)按照《食品衛生(sheng)微(wei)生(sheng)物(wu)學(xue)檢(jian)驗阪(ban)崎腸桿(gan)菌(jun)檢(jian)驗要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)。
2、血液樣(yang)品：用無(wu)菌註射器(qi)抽取受(shou)檢(jian)者靜(jing)脈(mai)血2mL，註(zhu)入無(wu)菌EDTA2Na(或檸檬酸(suan)鈉)抗(kang)凝(ning)管(guan)，立即(ji)混(hun)勻(yun)。
3、糞便樣(yang)品：取糞便置(zhi)於滅(mie)菌(jun)的(de)收(shou)集(ji)管(guan)中(zhong)送(song)檢(jian)。
4、病竈(zao)部(bu)位(wei)樣(yang)品：取發病部(bu)位(wei)新(xin)鮮(xian)滲出(chu)物(wu)、粘(zhan)液膿(nong)血送(song)檢(jian)。
壹(yi)、稀(xi)釋(shi) PCR 陽(yang)性對照（以 10E2-10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 這(zhe) 6 個(ge) 10 倍(bei)稀(xi)釋(shi)度為(wei)例(li)）
1. 註(zhu)意(yi)：由(you)於標準(zhun)品濃度非常(chang)高，因此(ci)下列稀(xi)釋(shi)操(cao)作壹(yi)定要(yao)在(zai)獨(du)立的區域(yu)進(jin)行(xing)，千(qian)萬(wan)不(bu)能(neng)汙染樣(yang)品或本試劑盒的其他(ta)成(cheng)分）。為(wei)增加產品穩定(ding)性和(he)避(bi)免(mian)擴散(san)傳(chuan)染性病原，本產品不提(ti)供活體樣(yang)品做陽(yang)性對照，只(zhi)提(ti)供可(ke)以直接(jie)使(shi)用(yong)的 DNA段(duan)作為(wei)陽(yang)性對照。
2. 標(biao)記(ji) 6 個(ge)離(li)心(xin)管(guan)，分別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶芯(xin)槍(qiang)頭分別加入(ru) 45 μL 熒(ying)光(guang) PCR 模(mo)板稀(xi)釋(shi)液（用(yong)帶芯(xin)槍(qiang)頭，下同）。
4. 在(zai) 7 號(hao)管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照，充(chong)分震蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照。放冰上(shang)待(dai)用(yong)。
5. 換(huan)槍頭(tou)，在(zai) 6 號(hao)管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(上(shang)步(bu)稀(xi)釋(shi)所(suo)得(de))，充(chong)分震蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照。放冰上(shang)待(dai)用(yong)。
6. 換(huan)槍頭(tou)，在(zai) 5 號(hao)管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照到(dao) 5 號(hao)管(guan)中(zhong)，充(chong)分震蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照。放冰上(shang)待(dai)用(yong)。
7. 重(zhong)復(fu)上(shang)面(mian)的操(cao)作直到(dao)得到(dao) 6 個(ge)稀(xi)釋(shi)度的陽(yang)性對照。放冰上(shang)待(dai)用(yong)。
註(zhu)：上(shang)述樣(yang)品建議(yi)經過增菌後(hou)，收(shou)集(ji)培養(yang)物用(yong)於檢(jian)測(ce)。 
二(er)、DNA提(ti)取：
可(ke)采用(yong)PCR試劑盒配備(bei)的DNA抽(chou)提(ti)液，按(an)以下說明(ming)進(jin)行(xing)DNA核(he)酸(suan)的(de)粗提(ti)。也(ye)可(ke)采購(gou)上(shang)海(hai)澤葉生(sheng)物(wu)科技有(you)限公司(si)生(sheng)產的(de)DNA提(ti)取試劑盒(過柱(zhu)法-熒(ying)光(guang)配套)或其他(ta)合(he)適的(de)商(shang)業(ye)化(hua)產品，並(bing)按(an)照相(xiang)應(ying)試劑盒說明(ming)進(jin)行(xing)操(cao)作。
1、液體(ti)培(pei)養(yang)物：取液體(ti)培(pei)養(yang)物100μL加(jia)到(dao)1.5mL無(wu)菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，8000rpm離(li)心3min，盡(jin)量(liang)吸(xi)棄(qi)上(shang)清(qing)，加入50μL DNA抽(chou)提(ti)液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心3min，取上(shang)清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
2、固(gu)體培(pei)養(yang)物：挑(tiao)取單克隆菌(jun)落(luo)與50μL DNA抽(chou)提(ti)液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心3min，取上(shang)清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
3、糞便樣(yang)品：挑(tiao)取米(mi)粒(li)大(da)小(xiao)糞便於滅(mie)菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，加(jia)入(ru)0.5mL生(sheng)理(li)鹽水(shui)，振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)，13000rpm離(li)心3分鐘(zhong)，棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱中(zhong)加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心3min取上(shang)清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
4、其他(ta)液體(ti)標(biao)本(ben)：取標本2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱中(zhong)加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心3min取上(shang)清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
註(zhu)：陽(yang)性對照和(he)陰(yin)性對照為(wei)已(yi)經抽(chou)提(ti)好(hao)的(de)核(he)酸(suan)(無(wu)需提(ti)取)，直(zhi)接(jie)取5μL加(jia)入到(dao)反應(ying)體系(xi)中即(ji)可(ke)。由(you)於陽(yang)性對照濃(nong)度較(jiao)高，建(jian)議(yi)在(zai)樣(yang)品制備區(qu)域(yu)加入(ru)陽(yang)性對照。 
RL95-2, 人內(nei)膜(mo)腺癌(ai)細胞(bao)系鈦鐵試劑(AR)Tiron質(zhi)量(liang)規格(ge)：AR

人紅(hong)系(xi)白血病細胞(bao);TF-1 大(da)鼠腎實(shi)質細胞(bao)*培養(yang)基 100mL鈦鐵試劑(95%)Tiron質(zhi)量(liang)規格(ge)：0.95

L1210 小(xiao)鼠白血病細胞(bao)四溴乙酯鉀(jia)鹽(yan)TBPE質(zhi)量(liang)規格(ge)：IND

SLC3A2 Others Human 人 CD98 / SLC3A2 人細胞(bao)裂解液 (陽(yang)性對照) 金(jin)蓮橙(cheng)OTropaeolin O質(zhi)量(liang)規格(ge)：AR

小(xiao)鼠結腸癌細胞(bao);CT26.WT [CT26WT]鋅試劑(AR)Zincon質(zhi)量(liang)規格(ge)：AR
正(zheng)常(chang)小(xiao)鼠Leydig細胞(bao);TM3乙酰化(hua)白藜(li)蘆醇(chun)Acetyl-resveratrol質(zhi)量(liang)規格(ge)：≥98%,BR

LTEP-sm細胞(bao)，人小(xiao)細胞(bao)肺(fei)癌(ai)細胞(bao) 小(xiao)鼠皮膚細胞(bao),JB6-C41細胞(bao) CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人臍(qi)靜(jing)脈(mai)血管(guan)內(nei)皮(pi)細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2Fmoc-L-Fmoc-Ala-OH質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%,BR

TE-1(人食管(guan)癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2Fmoc-L-苯Fmoc-Phe-OH質(zhi)量(liang)規格(ge)：0.98

HUtMEC-c 人微(wei)血管(guan)內(nei)皮(pi)細胞(bao)(HUtMEC) 500,000cells 臍(qi)靜(jing)脈(mai)內(nei)皮細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105方(1ml)Fmoc-L-Fmoc-Val-OH質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%,BR

氣道(dao)平滑(hua)肌(ji)細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105方(1ml)Fmoc-N-三苯甲(jia)基-L-天(tian)冬酰胺Fmoc-Asn(Trt)-OH質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%,BR
大(da)鼠腦膠質瘤(liu)細胞(bao);C6氟(fu)甲(jia)喹(kui)質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%，BR，進(jin)分Flumequine

IL7R Others Human 人 IL7Ra / CD127 人細胞(bao)裂解液 (陽(yang)性對照) 噁(噁)喹(kui)酸(suan)/質(zhi)量(liang)規格(ge)：≥97%Oxolinic acid

小(xiao)鼠海馬神經膠(jiao)質細胞(bao)(EGFP標(biao)記(ji))柄(bing)曲(qu)黴(mei)素質量(liang)規格(ge)：>98%,進(jin)分Sterigmatocystin from Aspergillus Versicolor

LIF Others Human 人 LIF 人細胞(bao)裂解液 (陽(yang)性對照) 尼(ni)日(ri)利(li)亞菌素鈉鹽(yan)質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%,進(jin)分Nigericin

人結膜(mo)成(cheng)纖(xian)維細胞(bao)RNAHConF miRNA5 μg伏格(ge)列波(bo)糖（標(biao)準(zhun)品）質量(liang)規格(ge)：含量(liang)測(ce)定(ding)Voglibose
蓽(bi)茇探針(zhen)法PCR鑒定試劑盒保(bao)存人表(biao)皮(pi)角(jiao)質(zhi)細胞(bao)-總(zong)RNAHEK-a NA金(jin)25克(ke)

ACVRL1 Others Canine 狗(gou) ALK1 / ACVRL1 人細胞(bao)裂解液 (陽(yang)性對照) 重(zhong)1醋膽減(jian) Cholinq Bitcrtrctq 87-67-

人APP-PS1(M146L)雙(shuang)基因轉染CHO細胞(bao)株(zhu);7WML6.0咪唑(zuo) (分子(zi)生(sheng)物(wu)級) Imidazole (for molecular biology, ≥99%) 288-32-4 5G 通(tong)用試劑

CaPan-Ⅱ/Capan-2細胞(bao)，人胰(yi)腺(xian)癌細胞(bao) 人胸(xiong)腺(xian)激酶缺陷性細胞(bao)系,143TK細胞(bao)
實(shi)驗流(liu)程：
1. 整個(ge)檢(jian)測(ce)過程(cheng)應(ying)嚴格(ge)按照本(ben)說明(ming)書要(yao)求(qiu)分別在(zai)試劑準(zhun)備區(qu)、樣(yang)本處(chu)理區(qu)和(he)PCR擴(kuo)增區進(jin)行(xing)操(cao)作，各區(qu)實(shi)驗服、儀器(qi) 、耗(hao)材應(ying)獨立使用，不能(neng)混(hun)用；實(shi)驗用(yong)吸(xi)頭(tou)采(cai)用(yong)帶濾(lv)芯(xin)吸(xi)頭(tou)；樣(yang)本處(chu)理區(qu)應(ying)配有(you)生(sheng)物(wu)安全櫃，樣(yang)本處(chu)理在(zai)生(sheng)物(wu)安全櫃中進(jin)行(xing)操(cao)作；三個(ge)區(qu)應(ying)該配(pei)有(you)紫外線(xian)殺菌(jun)裝(zhuang)置(zhi)。
2. 為(wei)避(bi)免(mian)RNA降(jiang)解，樣(yang)本處(chu)理過程(cheng)應(ying)在(zai)0-4℃條件(jian)下操(cao)作，且完(wan)成(cheng)實(shi)驗後(hou)立即(ji)上(shang)機(ji)檢(jian)測(ce)；樣(yang)本處(chu)理過程(cheng)中(zhong)使用(yong)的(de)器(qi)具耗材應(ying)經過無(wu)核(he)酶處(chu)理。

3. 每次(ci)實(shi)驗應(ying)該設(she)置(zhi)陰(yin)、陽(yang)性對照。
4. 試劑盒所(suo)有(you)試劑在(zai)使(shi)用前(qian)應(ying)該在(zai)常(chang)溫下充(chong)分融(rong)化(hua)混(hun)勻(yun)，並(bing)應(ying)瞬時(shi)離心。
5. 試劑盒內所(suo)配(pei)陰(yin)性和(he)陽(yang)性對照在(zai)壹(yi)次使用(yong)前(qian)應(ying)全部(bu)轉移(yi)至標本(ben)準(zhun)備區(qu)，並(bing)單(dan)獨存放。
6. 為(wei)防(fang)止熒(ying)光(guang)幹擾(rao)，應(ying)避免(mian)裸(luo)手直(zhi)接(jie)接(jie)觸(chu)PCR反(fan)應(ying)管(guan)，並(bing)應(ying)避免(mian)在(zai)PCR反(fan)應(ying)管(guan)上(shang)進(jin)行(xing)任(ren)何標(biao)記(ji)。
7. 儀(yi)器(qi) 擴(kuo)增相關(guan)參數應(ying)按照本(ben)說明(ming)書相關(guan)要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)設(she)置(zhi)；不(bu)同(tong)批號試劑不能(neng)混(hun)用。
8. ABI系(xi)列熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR儀(yi)參數設置(zhi)中(zhong)不(bu)選(xuan)ROX校(xiao)正(zheng)，淬(cui)滅(mie)基(ji)因選(xuan)擇(ze)None。
9. 實(shi)驗過程(cheng)中(zhong)產品的廢棄物(wu)應(ying)該進(jin)行(xing)無(wu)害化(hua)處(chu)理(li)後(hou)方可(ke)丟(diu)棄。