補骨脂染料(liao)法(fa)PCR鑒定(ding)試(shi)劑(ji)盒(he)*

特點(dian)：
1. 即(ji)開即(ji)用，用戶(hu)只需要(yao)提供(gong)病(bing)毒(du)樣(yang)品(pin)。
2. 根據地黃保守序列(lie)設計(ji)的(de)專(zhuan)壹性引(yin)物，與相關(guan)病(bing)毒(du)無(wu)交(jiao)叉(cha)反應。
3. 靈(ling)敏度可以(yi)達(da)到幾百拷(kao)貝(bei)/反應。
4. 壹管(guan)式熒(ying)光定量 PCR 檢(jian)測，避(bi)免(mian)後(hou)續(xu)汙(wu)染。
5. 本試(shi)劑(ji)盒(he)足(zu)夠(gou) 50 次 20μL 反應體系的(de)熒(ying)光定量 PCR。
6. 本產(chan)品只(zhi)適(shi)用於(yu)科(ke)研(yan)，不(bu)能(neng)用於(yu)臨(lin)床(chuang)診斷。

使用方(fang)法(fa)：
壹、樣(yang)品(pin)采集：
1、食(shi)品樣(yang)品(pin)：樣(yang)品(pin)的(de)采集與預(yu)培(pei)養(yang)按照(zhao)樣(yang)品(pin)的(de)采集與預(yu)培(pei)養(yang)按照(zhao)《食(shi)品衛(wei)生微生物學(xue)檢(jian)驗阪(ban)崎(qi)腸(chang)桿(gan)菌檢(jian)驗要(yao)求(qiu)進(jin)行。
2、血液樣(yang)品(pin)：用無(wu)菌註(zhu)射器(qi)抽取(qu)受(shou)檢(jian)者靜脈(mai)血2mL，註(zhu)入無(wu)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管(guan)，立即(ji)混勻。
3、糞便(bian)樣(yang)品(pin)：取(qu)糞便(bian)置於滅(mie)菌(jun)的(de)收(shou)集管(guan)中(zhong)送檢(jian)。
4、病(bing)竈部(bu)位(wei)樣(yang)品(pin)：取(qu)發(fa)病(bing)部(bu)位(wei)新(xin)鮮(xian)滲出(chu)物(wu)、粘液(ye)膿(nong)血送檢(jian)。
壹、稀釋(shi) PCR 陽性(xing)對(dui)照（以(yi) 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這 6 個(ge) 10 倍稀釋度為(wei)例）
1. 註(zhu)意(yi)：由(you)於(yu)標(biao)準品濃(nong)度非(fei)常(chang)高，因此(ci)下(xia)列(lie)稀(xi)釋操(cao)作壹定要(yao)在(zai)獨(du)立的(de)區(qu)域(yu)進(jin)行，千(qian)萬不(bu)能(neng)汙(wu)染樣(yang)品(pin)或本試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)其他成(cheng)分）。為(wei)增加(jia)產(chan)品穩(wen)定(ding)性和避(bi)免(mian)擴散(san)傳染(ran)性(xing)病(bing)原，本產(chan)品不(bu)提供(gong)活體樣(yang)品(pin)做(zuo)陽性(xing)對(dui)照，只(zhi)提供(gong)可以(yi)直(zhi)接使用的(de) DNA段作為陽性(xing)對(dui)照。
2. 標記 6 個(ge)離心(xin)管(guan)，分別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯(xin)槍頭分別(bie)加(jia)入(ru) 45 μL 熒(ying)光 PCR 模板稀釋液(ye)（用帶(dai)芯(xin)槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hao)管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對(dui)照，充(chong)分震蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對(dui)照。放冰上(shang)待(dai)用。
5. 換槍頭，在 6 號(hao)管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對(dui)照(上步稀釋所得)，充分震蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對(dui)照。放冰上(shang)待(dai)用。
6. 換槍頭，在 5 號(hao)管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對(dui)照到 5 號(hao)管(guan)中(zhong)，充(chong)分震蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對(dui)照。放冰上(shang)待(dai)用。
7. 重(zhong)復(fu)上(shang)面(mian)的(de)操作(zuo)直(zhi)到得到 6 個(ge)稀釋(shi)度的(de)陽性(xing)對(dui)照。放冰上(shang)待(dai)用。
註(zhu)：上述(shu)樣(yang)品(pin)建(jian)議經過(guo)增菌後(hou)，收(shou)集培(pei)養(yang)物用於(yu)檢(jian)測。 
二、DNA提取(qu)：
可采用PCR試(shi)劑(ji)盒(he)配備(bei)的(de)DNA抽提液，按(an)以(yi)下(xia)說明(ming)進(jin)行DNA核酸(suan)的(de)粗提。也可采購(gou)上(shang)海(hai)澤葉(ye)生物科(ke)技有限公(gong)司生產(chan)的(de)DNA提取(qu)試(shi)劑(ji)盒(he)(過(guo)柱法(fa)-熒(ying)光配套(tao))或其他合適的(de)商業(ye)化(hua)產(chan)品，並(bing)按照(zhao)相應試(shi)劑(ji)盒(he)說明(ming)進(jin)行操(cao)作。
1、液體培(pei)養(yang)物：取(qu)液(ye)體培(pei)養(yang)物100μL加(jia)到1.5mL無(wu)菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，8000rpm離心(xin)3min，盡量吸(xi)棄上(shang)清(qing)，加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液充(chong)分混勻，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離心(xin)3min，取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行PCR反應。
2、固體培(pei)養(yang)物：挑(tiao)取(qu)單克(ke)隆(long)菌(jun)落(luo)與50μL DNA抽提液充(chong)分混勻，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離心(xin)3min，取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行PCR反應。
3、糞便(bian)樣(yang)品(pin)：挑(tiao)取(qu)米(mi)粒大(da)小糞便(bian)於(yu)滅(mie)菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)，加(jia)入(ru)0.5mL生理鹽水(shui)，振蕩(dang)混勻，13000rpm離心(xin)3分鐘(zhong)，棄上(shang)清(qing)，沈澱中(zhong)加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液充(chong)分混勻，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離心(xin)3min取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行PCR反應。
4、其他液體標本：取(qu)標(biao)本2-3mL，13000rpm離心(xin)3min，棄上(shang)清(qing)，沈澱中(zhong)加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液充(chong)分混勻，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離心(xin)3min取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行PCR反應。
註(zhu)：陽性(xing)對(dui)照和(he)陰性(xing)對(dui)照為(wei)已經抽(chou)提好的(de)核酸(suan)(無(wu)需提取(qu))，直接取(qu)5μL加(jia)入(ru)到反應體系中即(ji)可。由於(yu)陽性(xing)對(dui)照濃(nong)度較(jiao)高，建(jian)議在樣(yang)品(pin)制備(bei)區(qu)域(yu)加(jia)入(ru)陽性(xing)對(dui)照。 
實(shi)驗流(liu)程(cheng)：
1. 整(zheng)個(ge)檢(jian)測過(guo)程(cheng)應嚴格(ge)按照本說明(ming)書要(yao)求(qiu)分別(bie)在試(shi)劑(ji)準備(bei)區(qu)、樣(yang)本處(chu)理(li)區(qu)和(he)PCR擴增區(qu)進(jin)行操(cao)作，各(ge)區(qu)實(shi)驗服(fu)、儀(yi)器(qi) 、耗材應獨立使用，不(bu)能(neng)混用；實(shi)驗用吸(xi)頭采用帶(dai)濾(lv)芯(xin)吸頭；樣(yang)本處(chu)理(li)區(qu)應配有(you)生物安全(quan)櫃，樣(yang)本處(chu)理(li)在生物安全(quan)櫃中(zhong)進(jin)行操(cao)作；三(san)個(ge)區(qu)應該配有(you)紫外線殺菌(jun)裝(zhuang)置。
2. 為避(bi)免(mian)RNA降解，樣(yang)本處(chu)理(li)過(guo)程(cheng)應在0-4℃條件下操作(zuo)，且(qie)完成(cheng)實(shi)驗後(hou)立即(ji)上機(ji)檢(jian)測；樣(yang)本處(chu)理(li)過(guo)程(cheng)中使用的(de)器(qi)具耗材應經過(guo)無(wu)核酶(mei)處(chu)理。
3. 每(mei)次(ci)實(shi)驗應該設置陰、陽性(xing)對(dui)照。
4. 試(shi)劑(ji)盒(he)所有(you)試(shi)劑(ji)在使用前(qian)應該在(zai)常(chang)溫(wen)下(xia)充分融(rong)化混勻，並(bing)應瞬時(shi)離心(xin)。
5. 試(shi)劑(ji)盒(he)內所配陰(yin)性(xing)和(he)陽性(xing)對(dui)照在(zai)壹次使用前(qian)應全部(bu)轉(zhuan)移至(zhi)標(biao)本準(zhun)備(bei)區(qu)，並(bing)單獨存放。
6. 為防止熒(ying)光幹擾，應避(bi)免(mian)裸手(shou)直(zhi)接(jie)接觸PCR反應管(guan)，並(bing)應避(bi)免(mian)在PCR反應管(guan)上(shang)進(jin)行任何標(biao)記(ji)。
7. 儀(yi)器(qi) 擴增相關參數應按照(zhao)本說明(ming)書相關要(yao)求(qiu)進(jin)行設置；不(bu)同批號(hao)試(shi)劑(ji)不(bu)能(neng)混用。
8. ABI系列(lie)熒(ying)光定量PCR儀(yi)參數設置中不(bu)選ROX校正(zheng)，淬(cui)滅(mie)基(ji)因選擇None。
9. 實(shi)驗過(guo)程(cheng)中產(chan)品的(de)廢(fei)棄物(wu)應該進(jin)行無(wu)害化(hua)處理後(hou)方(fang)可丟(diu)棄。
儲存條(tiao)件：
14℃或－20℃樣(yang)品(pin)收(shou)集、處理及保存方(fang)法(fa)
1. 血清(qing)：使用不(bu)含(han)熱原和內毒素(su)的(de)試(shi)管(guan)，操(cao)作(zuo)過(guo)程(cheng)中避(bi)免(mian)任何細(xi)胞(bao)刺(ci)激，收(shou)集血液後(hou)，3000 轉(zhuan)離心(xin)10 分鐘(zhong)將(jiang)血清(qing)和紅細(xi)胞(bao)迅(xun)速小(xiao)心(xin)地分離。
2. 血漿(jiang)：EDTA、檸檬酸鹽或肝素(su)抗凝。3000 轉(zhuan)離心(xin)30 分鐘(zhong)取(qu)上(shang)清(qing)。
3. 細(xi)胞(bao)上(shang)清(qing)液：3000 轉(zhuan)離心(xin)10 分鐘(zhong)去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻(yun)漿(jiang)：將(jiang)組織加(jia)入(ru)適(shi)量生理鹽水(shui)搗(dao)碎(sui)。3000 轉(zhuan)離心(xin)10 分鐘(zhong)取(qu)上(shang)清(qing)。
5. 保存：如果樣(yang)本收(shou)集後(hou)不(bu)及時檢(jian)測，請(qing)按壹次用量分裝(zhuang)，凍(dong)存於-20℃，避(bi)免(mian)反復凍(dong)融(rong)，在室(shi)溫(wen)下(xia)解凍(dong)並(bing)確保樣(yang)品(pin)均勻地充分解凍(dong)。
小鼠漿(jiang)細(xi)胞(bao)瘤(liu);MPC-11四丁(ding)基(ji)化銨(離子(zi)對(dui)色(se)譜級)Tetrabutylammonium iodide質量規(gui)格(ge)：離子(zi)對(dui)色(se)譜級

PTGDS Others Human 人 PTGDS / L-PGDS 人細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 三(san)辛胺(an)(離子(zi)對(dui)試(shi)劑(ji))Trioctylamine質量規(gui)格(ge)：離子(zi)對(dui)試(shi)劑(ji)

人食(shi)管(guan)平(ping)滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基(ji) 100mL草酸鈉容(rong)量分析(xi)用溶液(ye)標(biao)準物(wu)質(0.05M) oxalate solution質量規(gui)格(ge)：0.05M

7WPS1細(xi)胞(bao)，人APP-PS1雙(shuang)基(ji)因轉(zhuan)染CHO細(xi)胞(bao)株(zhu) 變異(yi)鏈球(qiu)菌(jun) 兔(tu)間變(bian)表皮(pi)鱗癌(ai)瘤(liu)株(zhu);VX2剛果紅(hong)(分析(xi)標準品(pin),≥97.0%(HPLC))Congo red質量規(gui)格(ge)：分析(xi)標準品(pin),≥97.0%(HPLC)

CXCL16 Protein Rat 重(zhong)組大(da)鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 標簽)正(zheng)癸(gui)酸(suan)(分析(xi)標準品(pin),≥99.5%(GC))Decaic acid質量規(gui)格(ge)：分析(xi)標準品(pin),≥99.5%(GC)
臍靜脈平(ping)滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao)Many types of cells包裝：5 × 105方(fang)(1ml)酮基(ji)他米巴羅(luo)汀(ting)Keto Tamibarotene質量規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口(kou)

HA Others H5N1 甲(jia)型(xing)流感(gan) H5N1 (A/common magpie/Hong Kong/5052/2007) 血凝素(su)HA1 (Hemagglutinin) 人細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) ent-ent-Voriconazole質量規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口(kou)

小鼠正(zheng)常(chang)肝細(xi)胞(bao);NCTC 1469 [NCTC1469]外消(xiao)旋(xuan)左旋(xuan)甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)素(su)鈉DL-Levothyroxine 質量規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口(kou)

中國倉(cang)鼠卵巢細(xi)胞(bao)(亞系克(ke)隆(long));CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA 小鼠神(shen)經細(xi)胞(bao)瘤(liu)與大(da)鼠神(shen)經膠(jiao)質(zhi)瘤(liu)之(zhi)融(rong)合細(xi)胞(bao)，NG108-15[108CC15]細(xi)胞(bao) LM8細(xi)胞(bao)，C3H小鼠骨(gu)肉瘤細(xi)胞(bao)β-腺(xian)嘌呤二(er)核苷1酸酸鈉鹽β-Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate  salt 質量規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口(kou)

人胚肺成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao);MRC-5硫酸(suan)腺(xian)嘌呤二(er)水(shui)化合物Adenine Hemisulfate Dihydrate質量規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口(kou)
大(da)鼠肝星形(xing)細(xi)胞(bao)RHSteC（標準品）質量規(gui)格(ge)：HPLC>98%,標準品Letrozole

NCI-H596[H596]細(xi)胞(bao)，人肺癌細(xi)胞(bao) 人腎癌細(xi)胞(bao),SK-RC-42細(xi)胞(bao) 人肝星形(xing)細(xi)胞(bao)HHSteC質量規(gui)格(ge)：>97%.BRLeuprorelin Acetate （Leuprolide Acetate）

小香豬皮(pi)膚(fu)細(xi)胞(bao);SSC-S2氟(fu)米龍(long)醋酸酯質量規(gui)格(ge)：>97%Fluorometholone Acetate

NCR3 Others Human 人 NKp30 人細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 十溴(xiu)二(er)苯質量規(gui)格(ge)：>98%Pentabromophenyl ether

CM-R068大(da)鼠腎(shen)小(xiao)管(guan)平(ping)滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基(ji)100mL氨(an)基(ji)雜環鹽酸(suan)鹽質(zhi)量規(gui)格(ge)：>98%3-Ami-3-azabicyclo[3.3.0]octane
補骨脂染料(liao)法(fa)PCR鑒定試(shi)劑(ji)盒(he)*KG-1細(xi)胞(bao)，白血(xue)病(bing)細(xi)胞(bao) 人肝癌細(xi)胞(bao),Hep3B2.1-7細(xi)胞(bao) CL-0032BEL-7404(人肝癌細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2川楝素(su)(標準品）質量規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標準品Toosendanin

敘利(li)亞(ya)倉(cang)鼠腎(shen)細(xi)胞(bao);BHK-21川芎(xiong)嗪(標準品)質量規(gui)格(ge)：HPLC≥98%,標準品Tetramethylpyrazine

F11R Others Human 人 JAM-A 人細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 川芎(xiong)嗪質(zhi)量規(gui)格(ge)：≥98%,BRTetramethylpyrazine

外周血白細(xi)胞(bao)Many type