香(xiang)附(fu)PCR鑒(jian)定試劑(ji)盒(he)直(zhi)銷(xiao)

實驗流程(cheng)：
1. 整個(ge)檢(jian)測過(guo)程應(ying)嚴格(ge)按(an)照(zhao)本(ben)說明(ming)書要求分別(bie)在(zai)試劑(ji)準備(bei)區、樣本(ben)處理(li)區和(he)PCR擴(kuo)增區進(jin)行操作(zuo)，各區實驗服(fu)、儀器(qi) 、耗材應獨(du)立(li)使用，不能混(hun)用(yong)；實驗用吸(xi)頭(tou)采用帶濾(lv)芯吸(xi)頭(tou)；樣本(ben)處理(li)區應(ying)配有(you)生物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)，樣本(ben)處理(li)在(zai)生物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)中進(jin)行操作(zuo)；三(san)個區應(ying)該配(pei)有紫(zi)外(wai)線殺菌(jun)裝(zhuang)置。
2. 為(wei)避免RNA降(jiang)解(jie)，樣本(ben)處理(li)過(guo)程應(ying)在0-4℃條件下操作(zuo)，且(qie)完成實驗後(hou)立即上(shang)機檢(jian)測(ce)；樣本(ben)處理(li)過(guo)程中(zhong)使用的器(qi)具(ju)耗材應經(jing)過(guo)無核(he)酶(mei)處(chu)理(li)。
3. 每(mei)次(ci)實驗應該設(she)置陰、陽(yang)性對(dui)照(zhao)。
4. 試劑(ji)盒(he)所有(you)試劑(ji)在(zai)使用前應(ying)該在(zai)常(chang)溫(wen)下充(chong)分融(rong)化混(hun)勻(yun)，並應(ying)瞬(shun)時(shi)離心。
5. 試劑(ji)盒(he)內(nei)所配(pei)陰性和(he)陽(yang)性對(dui)照(zhao)在(zai)壹(yi)次使用前應(ying)全部(bu)轉移(yi)至標本(ben)準備(bei)區，並單(dan)獨(du)存(cun)放(fang)。
6. 為(wei)防(fang)止(zhi)熒(ying)光(guang)幹(gan)擾(rao)，應避(bi)免裸手直接(jie)接(jie)觸(chu)PCR反應(ying)管，並應(ying)避(bi)免在PCR反應(ying)管上(shang)進(jin)行任(ren)何標記。
7. 儀器(qi) 擴(kuo)增相(xiang)關(guan)參數(shu)應按(an)照(zhao)本(ben)說明(ming)書相關要求進(jin)行設(she)置；不同批號(hao)試劑(ji)不能混(hun)用(yong)。
8. ABI系(xi)列熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀參數(shu)設(she)置中不選(xuan)ROX校正，淬(cui)滅基(ji)因(yin)選(xuan)擇(ze)None。
9. 實驗過(guo)程中(zhong)產品(pin)的廢棄物(wu)應(ying)該(gai)進(jin)行無害(hai)化處理(li)後(hou)方可丟棄(qi)。

特(te)點(dian)：
1. 即開(kai)即用，用戶(hu)只需(xu)要提(ti)供病毒樣品。
2. 根(gen)據地(di)黃(huang)保守(shou)序列設(she)計(ji)的專(zhuan)壹(yi)性引(yin)物(wu)，與(yu)相(xiang)關病(bing)毒無交(jiao)叉(cha)反應(ying)。
3. 靈敏度可以(yi)達到(dao)幾百拷貝/反應(ying)。
4. 壹管式熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR 檢測，避免後(hou)續(xu)汙染。
5. 本(ben)試劑(ji)盒(he)足(zu)夠 50 次 20μL 反應(ying)體系(xi)的熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR。
6. 本(ben)產品(pin)只適(shi)用於(yu)科(ke)研，不能用(yong)於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷(duan)。
使用方法(fa)：
壹、樣品采集：
1、食(shi)品(pin)樣品：樣品的采集與預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照(zhao)樣品的采集與預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照(zhao)《食(shi)品(pin)衛生微(wei)生物(wu)學檢驗(yan)阪崎腸(chang)桿(gan)菌(jun)檢(jian)驗要求進(jin)行。
2、血液樣品：用無菌(jun)註(zhu)射(she)器(qi)抽取(qu)受(shou)檢者(zhe)靜脈血2mL，註(zhu)入(ru)無菌(jun)EDTA2Na(或檸檬酸鈉(na))抗凝(ning)管，立(li)即混(hun)勻(yun)。
3、糞(fen)便樣品：取(qu)糞(fen)便置(zhi)於(yu)滅菌(jun)的收集(ji)管(guan)中送(song)檢。
4、病竈(zao)部位(wei)樣品：取(qu)發病(bing)部位(wei)新(xin)鮮(xian)滲出物(wu)、粘(zhan)液(ye)膿血(xue)送檢。
壹、稀釋(shi) PCR 陽(yang)性對(dui)照(zhao)（以(yi) 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍(bei)稀釋(shi)度為(wei)例）
1. 註(zhu)意(yi)：由(you)於(yu)標準品(pin)濃(nong)度(du)非(fei)常(chang)高，因(yin)此(ci)下列稀釋(shi)操作(zuo)壹(yi)定要(yao)在獨(du)立(li)的區域(yu)進(jin)行，千(qian)萬不能汙染樣品或本(ben)試劑(ji)盒(he)的其(qi)他(ta)成分）。為(wei)增加產品穩(wen)定性和(he)避免擴(kuo)散(san)傳(chuan)染(ran)性病(bing)原，本(ben)產品(pin)不提供活(huo)體樣品做(zuo)陽(yang)性對(dui)照(zhao)，只提(ti)供可(ke)以(yi)直(zhi)接(jie)使用的 DNA段作(zuo)為(wei)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。
2. 標記 6 個離心管(guan)，分別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍(qiang)頭(tou)分別加入(ru) 45 μL 熒(ying)光(guang) PCR 模板稀釋(shi)液（用帶(dai)芯槍(qiang)頭(tou)，下同）。
4. 在 7 號(hao)管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)，充(chong)分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用(yong)。
5. 換槍(qiang)頭(tou)，在 6 號(hao)管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)(上(shang)步稀釋(shi)所得(de))，充(chong)分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用(yong)。
6. 換槍(qiang)頭(tou)，在 5 號(hao)管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)到(dao) 5 號(hao)管(guan)中，充(chong)分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用(yong)。
7. 重復上(shang)面的操(cao)作(zuo)直(zhi)到(dao)得(de)到(dao) 6 個稀釋(shi)度的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用(yong)。
註(zhu)：上(shang)述樣品建議(yi)經過(guo)增菌(jun)後(hou)，收集(ji)培(pei)養(yang)物(wu)用(yong)於(yu)檢(jian)測。 
二、DNA提取(qu)：
可采用PCR試劑(ji)盒(he)配(pei)備的DNA抽提液，按(an)以(yi)下說明(ming)進(jin)行DNA核酸的粗(cu)提(ti)。也可采購上(shang)海澤(ze)葉(ye)生物(wu)科(ke)技(ji)有限公(gong)司(si)生產的DNA提取(qu)試劑(ji)盒(he)(過(guo)柱法(fa)-熒(ying)光(guang)配(pei)套)或其(qi)他(ta)合適(shi)的商(shang)業(ye)化產品(pin)，並按(an)照(zhao)相(xiang)應(ying)試劑(ji)盒(he)說明(ming)進(jin)行操作(zuo)。
1、液體培(pei)養(yang)物(wu)：取(qu)液體培(pei)養(yang)物(wu)100μL加到(dao)1.5mL無菌(jun)離心管(guan)中，8000rpm離心3min，盡量吸(xi)棄(qi)上(shang)清(qing)，加入(ru)50μL DNA抽提液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min，取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行PCR反應(ying)。
2、固體培(pei)養(yang)物(wu)：挑(tiao)取(qu)單克隆(long)菌(jun)落(luo)與(yu)50μL DNA抽提液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min，取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行PCR反應(ying)。
3、糞(fen)便樣品：挑(tiao)取(qu)米粒(li)大小糞(fen)便於(yu)滅菌(jun)離心管(guan)中，加入(ru)0.5mL生理鹽水(shui)，振(zhen)蕩混(hun)勻(yun)，13000rpm離心3分鐘(zhong)，棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱中加入(ru)50μL DNA抽提液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行PCR反應(ying)。
4、其他液體標本(ben)：取(qu)標本(ben)2-3mL，13000rpm離心3min，棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱中加入(ru)50μL DNA抽提液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行PCR反應(ying)。
註(zhu)：陽(yang)性對(dui)照(zhao)和(he)陰(yin)性對(dui)照(zhao)為(wei)已經抽(chou)提(ti)好的核(he)酸(suan)(無需(xu)提(ti)取(qu))，直接(jie)取(qu)5μL加入(ru)到(dao)反應(ying)體系(xi)中(zhong)即可。由(you)於(yu)陽(yang)性對(dui)照(zhao)濃(nong)度(du)較高，建議(yi)在樣品制備區域(yu)加入(ru)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。 
CREG1 Others Mouse 小鼠 CREG / CREG1 人細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) (標準品(pin))Meclofenoxate HCl質量(liang)規格(ge)：含(han)量測(ce)定(ding)

EB病毒轉(zhuan)化的人(ren)B細(xi)胞;KM0501Megestrol Acetate質量(liang)規格(ge)：>98%,BR,USP31

GP2-293細(xi)胞，人胚腎上(shang)皮(pi)包裝(zhuang)細(xi)胞 大鼠腎小球系(xi)膜(mo)細(xi)胞EC(HBZY-1),HBZY-1細(xi)胞 CL-0336FC33(人胚胎腎細(xi)胞(Asp-2基(ji)因(yin)修飾))5×106cells/瓶(ping)×2（標準品(pin)）Megestrol Acetate質量(liang)規格(ge)：HPLC>98%,標準品(pin)

BC-020(人癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2美拉諾坦II；MTIIMelanotan ⅡAcetate質量(liang)規格(ge)：>98%,BR

HRCEpC-c 人腎皮(pi)質上(shang)皮(pi)細(xi)胞(HRCEpC) 500,000cells 人星形膠質細(xi)胞HAMeloxicam質量(liang)規格(ge)：>99%
GSK3B Others Mouse 小鼠 GSK3B 桿狀(zhuang)病毒-昆蟲細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) Amberlite® IRP-69陽(yang)離子交(jiao)換樹(shu)脂(zhi) Amberlite® IRP-69質量(liang)規格(ge)：

小鼠誘(you)導(dao)性多(duo)潛(qian)能幹(gan)細(xi)胞;PUMC-mips-A4(標準品(pin))4,4'-Diaminodiphenylsulfone質量(liang)規格(ge)：含(han)量測(ce)定(ding)

TE-11細(xi)胞，食(shi)管(guan)癌(ai)細(xi)胞 人食(shi)管(guan)癌(ai)細(xi)胞,CaEs-17細(xi)胞 大鼠胰腺(xian)外(wai)分(fen)泌(mi)腺(xian)細(xi)胞;AR42J（標準品(pin)）Dimenhydrinate質量(liang)規格(ge)：HPLC法含(han)量測(ce)定(ding)

小鼠誘(you)導(dao)性多(duo)潛(qian)能幹(gan)細(xi)胞;PUMC-mips-B2醋酸潑尼(ni)龍（標準品(pin)）Prednisolone acetate質量(liang)規格(ge)：含(han)量測(ce)定(ding)

ICAM1 Others Human 人 ICAM-1 / CD54 人細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 醋酸（標準品(pin)）xx質量(liang)規格(ge)：含(han)量測(ce)定(ding)
人髓核細(xi)胞HNPC己二酸(suan)二甲酯(zhi)(standard for GC,≥99.5%(GC))質量(liang)規格(ge)：standard for GC,≥99.5%(GC)Dimethyl adipate

9L-E細(xi)胞，人前(qian)列腺(xian)癌(ai)細(xi)胞 果子貍(li)腎(shen)上(shang)皮(pi)細(xi)胞,Hed68細(xi)胞 小鼠腦(nao)脊(ji)神(shen)經(jing)元(yuan)MN-r馬(ma)來(lai)酸二丁(ding)酯(zhi)(standard for GC,≥99.5%(GC))質量(liang)規格(ge)：standard for GC,≥99.5%(GC)Dibutyl maleate

KiMA(人胚腎上(shang)皮(pi)細(xi)胞系(xi)) 5×106cells/瓶(ping)×2三水(shui)合鹽(yan)酸鹽(yan)質量(liang)規格(ge)：>98%,三水(shui)合物(wu)Vardenafil  trihydrate

A673(人橫紋肌(ji)瘤(liu)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 CM-R011大鼠肺大動脈內(nei)皮(pi)細(xi)胞*培(pei)養(yang)基(ji)100mL 人正常(chang)肺上(shang)皮(pi)細(xi)胞;BEAS-2三水(shui)合鹽(yan)酸鹽(yan)(標準品(pin))質量(liang)規格(ge)：HPLC>98%,標準品(pin)Vardenafil  trihydrate

CM-H127人晶狀(zhuang)體上(shang)皮(pi)細(xi)胞*培(pei)養(yang)基(ji)100mL抑(yi)氨肽(tai)酶(mei),,貝他定(ding)，苯丁抑(yi)制素質量(liang)規格(ge)：>98.5%,BR,可用於(yu)細(xi)胞培(pei)養(yang)Bestatin,Ubenimex
香附PCR鑒定試劑(ji)盒(he)直(zhi)銷(xiao)豬腎(shen)細(xi)胞;PK(15)2-脫(tuo)氧-D-葡(pu)萄糖質量(liang)規格(ge)：>98%,BR2-Deoxy-D-glucose

RL95-2, 人內膜(mo)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞系(xi)坎(kan)地(di)沙(sha)坦質量(liang)規格(ge)：>99%,BR,可用於(yu)細(xi)胞培(pei)養(yang) Candesartan

人急(ji)性單(dan)核細(xi)胞白血(xue)病(bing)細(xi)胞;THP-1 大鼠管內皮(pi)細(xi)胞*培(pei)養(yang)基(ji) 100mLRuxolitinib(INCB018424) phosphate質量(liang)規格(ge)：>98%,JAK1/2抑(yi)制劑(ji)INCB018424) phosphate

神(shen)經(jing)膠質細(xi)胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105方(1
儲存(cun)條件：
14℃或－20℃樣品收集(ji)、處(chu)理及(ji)保存(cun)方法
1. 血清(qing)：使用不含(han)熱原和內(nei)毒素(su)的試管，操(cao)作(zuo)過(guo)程中(zhong)避免任(ren)何細(xi)胞刺(ci)激(ji)，收集(ji)血(xue)液後(hou)，3000 轉離心10 分鐘(zhong)將血清(qing)和(he)紅(hong)細(xi)胞迅(xun)速小心地(di)分(fen)離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽(yan)或肝(gan)素(su)抗凝(ning)。3000 轉離心30 分鐘(zhong)取(qu)上(shang)清(qing)。
3. 細(xi)胞上(shang)清(qing)液(ye)：3000 轉離心10 分鐘(zhong)去除顆(ke)粒(li)和聚合物(wu)。
4. 組織勻(yun)漿(jiang)：將組織加入(ru)適(shi)量生理鹽水(shui)搗碎(sui)。3000 轉離心10 分鐘(zhong)取(qu)上(shang)清(qing)。
5. 保存(cun)：如果樣本(ben)收集(ji)後(hou)不及時檢(jian)測(ce)，請(qing)按(an)壹次(ci)用(yong)量(liang)分裝，凍(dong)存(cun)於(yu)-20℃，避免反復凍融(rong)，在(zai)室(shi)溫(wen)下解(jie)凍(dong)並確(que)保樣品均勻(yun)地(di)充(chong)分解(jie)凍(dong)。