山藥(yao)染(ran)料法PCR鑒(jian)定試劑(ji)盒(he)*

特(te)點(dian)：
1. 即(ji)開(kai)即用(yong)，用戶(hu)只(zhi)需(xu)要提供病毒(du)樣(yang)品。
2. 根據(ju)地黃保守序列設計的專(zhuan)壹性(xing)引(yin)物，與(yu)相(xiang)關(guan)病毒(du)無(wu)交(jiao)叉反(fan)應(ying)。
3. 靈敏(min)度可(ke)以(yi)達(da)到(dao)幾(ji)百拷貝(bei)/反(fan)應(ying)。
4. 壹管式(shi)熒光定量(liang) PCR 檢(jian)測(ce)，避(bi)免後(hou)續(xu)汙染。
5. 本(ben)試劑(ji)盒(he)足(zu)夠(gou) 50 次(ci) 20μL 反(fan)應體(ti)系(xi)的熒光定量(liang) PCR。
6. 本產(chan)品只(zhi)適用(yong)於(yu)科(ke)研，不能(neng)用(yong)於(yu)臨床診(zhen)斷。

使(shi)用(yong)方(fang)法：
壹(yi)、樣(yang)品采(cai)集(ji)：
1、食(shi)品(pin)樣(yang)品：樣(yang)品的采集(ji)與(yu)預培養(yang)按照(zhao)樣(yang)品的采集(ji)與(yu)預培養(yang)按照(zhao)《食品衛生微生物學(xue)檢(jian)驗(yan)阪(ban)崎(qi)腸桿菌(jun)檢(jian)驗(yan)要求(qiu)進(jin)行(xing)。
2、血(xue)液(ye)樣(yang)品：用(yong)無(wu)菌(jun)註(zhu)射器抽(chou)取受(shou)檢(jian)者(zhe)靜(jing)脈(mai)血(xue)2mL，註(zhu)入(ru)無(wu)菌(jun)EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬(meng)酸鈉)抗(kang)凝(ning)管，立即(ji)混勻(yun)。
3、糞便(bian)樣(yang)品：取糞便(bian)置(zhi)於(yu)滅(mie)菌(jun)的收集管中送(song)檢(jian)。
4、病竈(zao)部(bu)位樣(yang)品：取發病部位新鮮(xian)滲(shen)出(chu)物(wu)、粘(zhan)液(ye)膿血(xue)送(song)檢(jian)。
壹、稀釋(shi) PCR 陽性(xing)對照（以 10E2-10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 這 6 個(ge) 10 倍(bei)稀釋(shi)度為(wei)例）
1. 註(zhu)意：由(you)於(yu)標(biao)準品(pin)濃度非常(chang)高(gao)，因此下列稀(xi)釋(shi)操(cao)作(zuo)壹(yi)定要在(zai)獨立(li)的區域(yu)進(jin)行(xing)，千(qian)萬不能汙染樣(yang)品或(huo)本(ben)試劑(ji)盒(he)的其(qi)他(ta)成(cheng)分）。為(wei)增(zeng)加產(chan)品穩定性(xing)和(he)避免擴(kuo)散傳染性(xing)病原，本產(chan)品不(bu)提供活(huo)體(ti)樣(yang)品做陽性(xing)對照，只提供可(ke)以(yi)直(zhi)接(jie)使(shi)用(yong)的 DNA段作(zuo)為(wei)陽性(xing)對照。
2. 標(biao)記 6 個(ge)離(li)心管，分別(bie)為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭(tou)分別加入(ru) 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋(shi)液（用(yong)帶芯(xin)槍(qiang)頭(tou)，下同）。
4. 在(zai) 7 號管中加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照，充分震蕩 1 分鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照。放(fang)冰(bing)上待(dai)用(yong)。
5. 換槍(qiang)頭(tou)，在 6 號管中加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照(上(shang)步(bu)稀(xi)釋(shi)所(suo)得(de))，充(chong)分震蕩 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照。放(fang)冰(bing)上待(dai)用(yong)。
6. 換槍(qiang)頭(tou)，在 5 號管中加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照到(dao) 5 號管中，充(chong)分(fen)震蕩 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照。放(fang)冰(bing)上待(dai)用(yong)。
7. 重復(fu)上面(mian)的操(cao)作(zuo)直(zhi)到(dao)得(de)到(dao) 6 個(ge)稀釋(shi)度的陽性(xing)對照。放(fang)冰(bing)上待(dai)用(yong)。
註(zhu)：上述(shu)樣(yang)品建(jian)議經(jing)過增(zeng)菌(jun)後，收集培養(yang)物用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)。 
二、DNA提取：
可(ke)采(cai)用(yong)PCR試劑(ji)盒(he)配(pei)備(bei)的DNA抽(chou)提液，按以(yi)下說(shuo)明進行(xing)DNA核(he)酸(suan)的粗提。也可(ke)采(cai)購上海(hai)澤葉生物科(ke)技有限公(gong)司生產(chan)的DNA提取試劑(ji)盒(he)(過柱法-熒光配(pei)套(tao))或其(qi)他(ta)合(he)適的商(shang)業化產(chan)品，並(bing)按照(zhao)相(xiang)應試劑(ji)盒(he)說(shuo)明進行(xing)操(cao)作(zuo)。
1、液體培(pei)養(yang)物：取液體(ti)培(pei)養(yang)物100μL加到(dao)1.5mL無(wu)菌(jun)離(li)心管中，8000rpm離(li)心3min，盡(jin)量(liang)吸(xi)棄上(shang)清，加入(ru)50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取上清5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
2、固(gu)體(ti)培(pei)養(yang)物：挑(tiao)取單(dan)克隆菌(jun)落(luo)與50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取上清5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
3、糞便(bian)樣(yang)品：挑(tiao)取米粒大小糞便(bian)於(yu)滅(mie)菌(jun)離(li)心管中，加入(ru)0.5mL生理鹽(yan)水，振(zhen)蕩混勻(yun)，13000rpm離(li)心3分(fen)鐘(zhong)，棄上(shang)清，沈澱中(zhong)加入(ru)50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min取上清5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
4、其(qi)他(ta)液(ye)體標(biao)本：取標(biao)本2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄上(shang)清，沈澱中(zhong)加入(ru)50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min取上清5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
註(zhu)：陽性(xing)對照和(he)陰性(xing)對照為(wei)已經抽(chou)提好的核酸(suan)(無(wu)需(xu)提取)，直(zhi)接(jie)取5μL加入(ru)到(dao)反應(ying)體(ti)系中(zhong)即可(ke)。由(you)於(yu)陽性(xing)對照濃度較高(gao)，建(jian)議在(zai)樣(yang)品制(zhi)備(bei)區域(yu)加入(ru)陽性(xing)對照。 
實(shi)驗(yan)流程：
1. 整個(ge)檢(jian)測(ce)過(guo)程應嚴(yan)格(ge)按照(zhao)本說(shuo)明書要求(qiu)分(fen)別(bie)在試劑(ji)準(zhun)備(bei)區、樣(yang)本處(chu)理區和(he)PCR擴(kuo)增(zeng)區(qu)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)，各(ge)區實驗服(fu)、儀(yi)器 、耗(hao)材(cai)應(ying)獨立(li)使(shi)用(yong)，不能(neng)混用(yong)；實(shi)驗用(yong)吸(xi)頭采(cai)用帶(dai)濾芯(xin)吸(xi)頭；樣(yang)本處(chu)理區應(ying)配(pei)有(you)生物安(an)全櫃(gui)，樣(yang)本處(chu)理在生物安(an)全櫃(gui)中(zhong)進行操(cao)作(zuo)；三個(ge)區應該配(pei)有(you)紫(zi)外(wai)線殺(sha)菌(jun)裝置(zhi)。
2. 為(wei)避(bi)免RNA降解(jie)，樣(yang)本處(chu)理過程(cheng)應在(zai)0-4℃條(tiao)件下操(cao)作(zuo)，且(qie)完成實驗(yan)後(hou)立(li)即上(shang)機(ji)檢(jian)測(ce)；樣(yang)本處(chu)理過程(cheng)中使(shi)用(yong)的器具(ju)耗(hao)材(cai)應(ying)經過無(wu)核(he)酶處(chu)理。
3. 每次(ci)實驗應(ying)該設置(zhi)陰(yin)、陽性(xing)對照。
4. 試劑(ji)盒(he)所(suo)有(you)試劑(ji)在(zai)使(shi)用(yong)前應該在常(chang)溫下充分融化混勻(yun)，並(bing)應(ying)瞬時離(li)心。
5. 試劑(ji)盒(he)內(nei)所(suo)配(pei)陰(yin)性(xing)和(he)陽性(xing)對照在壹次(ci)使(shi)用(yong)前應全部(bu)轉(zhuan)移(yi)至標(biao)本準(zhun)備(bei)區，並(bing)單(dan)獨存(cun)放(fang)。
6. 為(wei)防(fang)止(zhi)熒光幹擾(rao)，應(ying)避免裸(luo)手(shou)直(zhi)接接觸PCR反應管，並(bing)應(ying)避免在(zai)PCR反(fan)應管上進(jin)行(xing)任何(he)標(biao)記。
7. 儀(yi)器 擴(kuo)增(zeng)相(xiang)關(guan)參數(shu)應按照(zhao)本說(shuo)明書相(xiang)關(guan)要求(qiu)進(jin)行(xing)設置(zhi)；不(bu)同(tong)批(pi)號試劑(ji)不(bu)能(neng)混用(yong)。
8. ABI系(xi)列熒光定量(liang)PCR儀(yi)參數(shu)設置(zhi)中(zhong)不(bu)選(xuan)ROX校(xiao)正(zheng)，淬(cui)滅(mie)基因選(xuan)擇(ze)None。
9. 實驗(yan)過程(cheng)中產(chan)品的廢棄物(wu)應(ying)該進行(xing)無(wu)害化處(chu)理後方(fang)可(ke)丟(diu)棄。
儲(chu)存條(tiao)件：
14℃或－20℃樣(yang)品收集、處理及(ji)保(bao)存(cun)方(fang)法
1. 血(xue)清：使(shi)用(yong)不含(han)熱原和(he)內毒(du)素(su)的試管，操(cao)作(zuo)過(guo)程中避免任何(he)細(xi)胞刺激，收集血(xue)液(ye)後(hou)，3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)將血(xue)清和(he)紅(hong)細(xi)胞迅速(su)小心地分(fen)離(li)。
2. 血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬(meng)酸鹽(yan)或肝素抗(kang)凝。3000 轉離(li)心30 分(fen)鐘(zhong)取上清。
3. 細(xi)胞上(shang)清液：3000 轉(zhuan)離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆(ke)粒和(he)聚合(he)物(wu)。
4. 組織勻漿(jiang)：將組織加入(ru)適量生理鹽(yan)水搗(dao)碎。3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)取上清。
5. 保存(cun)：如果(guo)樣(yang)本收集後不及(ji)時(shi)檢(jian)測(ce)，請(qing)按壹(yi)次(ci)用量分(fen)裝，凍存(cun)於(yu)-20℃，避(bi)免反(fan)復(fu)凍融(rong)，在室(shi)溫(wen)下解(jie)凍並(bing)確(que)保樣(yang)品均勻(yun)地充(chong)分解(jie)凍。
CXCL9 Protein Cynomolgus 重組食蟹(xie)猴(hou) CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋(dan)白(bai)三十(shi)壹(yi)烷(Standard for GC≥97.0%(GC))Hentriacontane質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：Standard for GC≥97.0%(GC)

NCI-H292(人肺癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血(xue)凝(ning)素(su)HA1 (Hemagglutinin) 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性(xing)對照) 二(er)十(shi)六烷(分析(xi)標(biao)準品(pin), ≥99.5% (GC))Hexacosane質量規(gui)格(ge)：分析(xi)標(biao)準品(pin), ≥99.5% (GC)

小鼠誘導(dao)性(xing)多潛(qian)能幹細(xi)胞;PUMC-mips-D22,5-己二酮(standard for GC,≥99%(GC))2,5-Hexanedione質量規(gui)格(ge)：standard for GC,≥99%(GC)

ALOX15B Others Human 人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 桿狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性(xing)對照) 2,5-己二酮(分析(xi)標(biao)準品(pin),≥99.5%(GC))2,5-Hexanedione質量規(gui)格(ge)：分析(xi)標(biao)準品(pin),≥99.5%(GC)

膀胱平滑肌(ji)細(xi)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(fang)(1ml)3',3'',5',5''-四(si)溴(xiu)*乙(yi)酯(zhi)(80%,用於(yu)顯(xian)微鏡(jing))3',3'',5',5''-Tetrabromophenolphthaleinethyl ester質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：80%,用(yong)於(yu)顯(xian)微鏡(jing)
NRK-52E，大(da)鼠(shu)腎細(xi)胞 RattusD-木糖(tang)D-(+)-Xylose 質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>98.5%,BR

EFNA5 Others Mouse 小鼠 EFNA5 / Ephrin-A5 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性(xing)對照) N-乙(yi)酰磺(huang)胺(an)甲惡唑(zuo)N-Acetyl Sulfamethoxazole質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進(jin)口

人(ren)腸平滑肌(ji)細(xi)胞HISMC磺(huang)胺(an)甲惡唑(zuo) β-D-葡萄(tao)糖(tang)苷酸Sulfamethoxazole β-D-Glucuronide質(zhi)量規(gui)格(ge)：美國(guo)進(jin)口

HA Others H7N8 甲(jia)型流感 H7N8 (A/mallard/Netherlands/33/2006) 血(xue)凝(ning)素(su) (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性(xing)對照) 頭(tou)孢(bao)匹(pi)羅(luo)Cefpirome質量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進(jin)口

豬(zhu)腎細(xi)胞;PK(15)阿米*-d5Amisulpride-d5質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進(jin)口
人(ren)海(hai)馬(ma)趾神(shen)經(jing)細(xi)胞(HN-h)(1×106)(R型)人(ren)參(can)皂(zao)苷(gan)Rg3(標(biao)準品(pin))質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準品(pin)20(R)Ginsenoside Rg3

原代(dai)神(shen)經(jing)元(yuan)細(xi)胞特(te)制(zhi)無(wu)血(xue)清添加劑(ji)Many types of cells包(bao)裝：1ml(S型)人(ren)參皂(zao)苷(gan)Rg3(標(biao)準品(pin))質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準品(pin)Ginsenoside Rg3

人結(jie)直腸腺(xian)癌細(xi)胞;HCT-8 [HRT-18] 大鼠卵巢(chao)顆(ke)粒細(xi)胞*培(pei)養(yang)基 100mL人參皂(zao)苷(gan)Rh1(標(biao)準品(pin))質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準品(pin)Ginsenoside Rh1

EMT-6 小鼠癌(S型(xing))人參(can)皂(zao)苷(gan)Rh2(標(biao)準品(pin))質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%,標(biao)準品(pin)Ginsenoside Rh2

ERBB2 Others Rhesus 恒河(he)猴(hou) ErbB2 / HER2 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性(xing)對照) 人(ren)參(can)皂(zao)苷(gan)Rb1(標(biao)準品(pin))質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%,標(biao)準品(pin)Ginsenoside Rb1
山藥(yao)染(ran)料法PCR鑒(jian)定試劑(ji)盒(he)*PC-3細(xi)胞，人(ren)胰(yi)腺(xian)癌細(xi)胞 人表皮癌細(xi)胞,A-431細(xi)胞 小鼠胚(pei)胎成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞;BALB/C 3T3色胺(an)100克(ke)

Hs 746T(人胃癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶×22-酚-3,7-二磺(huang)酸(suan)... 2-Naphthol-3,7-disulfonic a... 83949-45-5 1G 通用試劑(ji)

Gibco 17100017 Collagenase Type I 1g肖醋(*) litxium nitnctq

人(ren)晶狀(zhuang)體上皮細(xi)胞裂解(jie)物HLEpiCLGUANIDINEHCL,8MSOLUTION鹽(yan)酸胍(gua),