荊芥(jie)PCR鑒(jian)定試(shi)劑(ji)盒*

特(te)點(dian)：
1. 即(ji)開(kai)即(ji)用，用(yong)戶(hu)只(zhi)需(xu)要提供(gong)病毒樣(yang)品(pin)。
2. 根據(ju)地黃(huang)保(bao)守(shou)序(xu)列設(she)計的(de)專壹(yi)性(xing)引物，與(yu)相(xiang)關病毒無交(jiao)叉反(fan)應。
3. 靈敏度可以(yi)達(da)到幾百(bai)拷貝(bei)/反(fan)應。
4. 壹(yi)管(guan)式熒(ying)光定量(liang) PCR 檢(jian)測(ce)，避(bi)免(mian)後續(xu)汙染(ran)。
5. 本試(shi)劑(ji)盒足(zu)夠(gou) 50 次 20μL 反(fan)應體(ti)系的(de)熒(ying)光定量(liang) PCR。
6. 本產品(pin)只(zhi)適(shi)用於(yu)科(ke)研，不(bu)能(neng)用於(yu)臨床診斷(duan)。

使用方法(fa)：
壹(yi)、樣(yang)品(pin)采集(ji)：
1、食品(pin)樣(yang)品(pin)：樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集與(yu)預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集與(yu)預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照《食品(pin)衛生(sheng)微生(sheng)物學檢驗(yan)阪(ban)崎腸(chang)桿菌(jun)檢(jian)驗要求進行(xing)。
2、血(xue)液樣(yang)品(pin)：用無菌(jun)註(zhu)射器(qi)抽(chou)取(qu)受(shou)檢者靜(jing)脈血(xue)2mL，註(zhu)入(ru)無菌(jun)EDTA2Na(或檸(ning)檬(meng)酸鈉(na))抗(kang)凝管(guan)，立即(ji)混勻(yun)。
3、糞(fen)便(bian)樣(yang)品(pin)：取糞(fen)便(bian)置於(yu)滅(mie)菌(jun)的(de)收(shou)集管(guan)中(zhong)送檢。
4、病竈部位樣(yang)品(pin)：取發病部位新鮮滲(shen)出(chu)物、粘(zhan)液膿(nong)血(xue)送檢。
壹(yi)、稀釋(shi) PCR 陽性(xing)對照（以 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這 6 個 10 倍(bei)稀釋(shi)度為(wei)例(li)）
1. 註(zhu)意：由於(yu)標(biao)準(zhun)品(pin)濃(nong)度非常高(gao)，因(yin)此(ci)下列稀(xi)釋操(cao)作壹(yi)定要(yao)在(zai)獨(du)立的(de)區域(yu)進行(xing)，千(qian)萬不(bu)能(neng)汙染(ran)樣(yang)品(pin)或本試(shi)劑(ji)盒的(de)其他成分）。為(wei)增(zeng)加產品(pin)穩(wen)定性(xing)和(he)避(bi)免(mian)擴(kuo)散傳(chuan)染性(xing)病原，本產品(pin)不(bu)提供(gong)活(huo)體(ti)樣(yang)品(pin)做陽性(xing)對照，只(zhi)提供(gong)可(ke)以(yi)直(zhi)接(jie)使用的(de) DNA段作為(wei)陽性(xing)對照。
2. 標(biao)記 6 個離心(xin)管(guan)，分別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯(xin)槍頭分(fen)別加入(ru) 45 μL 熒(ying)光 PCR 模板(ban)稀(xi)釋液(ye)（用帶(dai)芯(xin)槍頭，下同）。
4. 在(zai) 7 號(hao)管(guan)中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對照，充(chong)分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘，得(de)1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對照。放冰(bing)上(shang)待(dai)用(yong)。
5. 換槍頭，在(zai) 6 號(hao)管(guan)中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對照(上(shang)步稀釋(shi)所得(de))，充(chong)分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘，得(de) 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對照。放冰(bing)上(shang)待(dai)用(yong)。
6. 換槍頭，在(zai) 5 號(hao)管(guan)中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對照到 5 號管(guan)中(zhong)，充(chong)分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘，得(de) 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對照。放冰(bing)上(shang)待(dai)用(yong)。
7. 重復上面(mian)的(de)操(cao)作直(zhi)到(dao)得(de)到(dao) 6 個(ge)稀釋度的(de)陽性(xing)對照。放冰(bing)上(shang)待(dai)用(yong)。
註(zhu)：上述樣(yang)品(pin)建議(yi)經(jing)過(guo)增(zeng)菌(jun)後，收(shou)集培(pei)養(yang)物用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)。 
二(er)、DNA提取：
可采用(yong)PCR試(shi)劑(ji)盒配(pei)備(bei)的(de)DNA抽提液，按(an)以(yi)下說明(ming)進行(xing)DNA核(he)酸的(de)粗(cu)提。也可(ke)采(cai)購(gou)上海(hai)澤(ze)葉(ye)生(sheng)物科(ke)技有(you)限公(gong)司(si)生(sheng)產的(de)DNA提取試(shi)劑(ji)盒(過(guo)柱法(fa)-熒(ying)光配(pei)套(tao))或其他合適(shi)的(de)商(shang)業化產品(pin)，並按照相應(ying)試(shi)劑(ji)盒說明(ming)進行(xing)操(cao)作。
1、液體培(pei)養(yang)物：取(qu)液體(ti)培(pei)養(yang)物100μL加到(dao)1.5mL無菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)，8000rpm離心(xin)3min，盡(jin)量(liang)吸棄(qi)上(shang)清(qing)，加入(ru)50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心(xin)3min，取上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
2、固體培(pei)養(yang)物：挑(tiao)取單(dan)克(ke)隆(long)菌(jun)落(luo)與(yu)50μL DNA抽提液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心(xin)3min，取上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
3、糞便(bian)樣(yang)品(pin)：挑取(qu)米粒(li)大小(xiao)糞便(bian)於(yu)滅(mie)菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)，加入(ru)0.5mL生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)，振(zhen)蕩混勻(yun)，13000rpm離心(xin)3分鐘，棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱(dian)中(zhong)加入(ru)50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心(xin)3min取上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
4、其他液體標(biao)本：取(qu)標(biao)本2-3mL，13000rpm離心(xin)3min，棄上(shang)清(qing)，沈澱(dian)中(zhong)加入(ru)50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心(xin)3min取上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
註(zhu)：陽性(xing)對照和陰(yin)性(xing)對照為(wei)已(yi)經(jing)抽(chou)提好的(de)核(he)酸(無需提取)，直(zhi)接(jie)取(qu)5μL加入(ru)到(dao)反(fan)應體(ti)系中(zhong)即(ji)可。由於(yu)陽性(xing)對照濃(nong)度較(jiao)高(gao)，建(jian)議(yi)在(zai)樣(yang)品(pin)制備(bei)區域(yu)加入(ru)陽性(xing)對照。 
實(shi)驗流程(cheng)：
1. 整(zheng)個檢(jian)測過程應嚴格(ge)按照本說明(ming)書要求分別在(zai)試(shi)劑(ji)準(zhun)備(bei)區、樣(yang)本處(chu)理(li)區和PCR擴(kuo)增(zeng)區進行(xing)操(cao)作，各區實驗服、儀(yi)器(qi) 、耗(hao)材(cai)應獨(du)立使用，不(bu)能(neng)混用(yong)；實驗用吸頭采(cai)用(yong)帶濾(lv)芯(xin)吸頭；樣(yang)本處(chu)理(li)區應配(pei)有(you)生(sheng)物安(an)全櫃，樣(yang)本處(chu)理(li)在(zai)生(sheng)物安(an)全櫃中(zhong)進行(xing)操(cao)作；三(san)個(ge)區應該(gai)配(pei)有(you)紫外(wai)線殺(sha)菌(jun)裝(zhuang)置。
2. 為(wei)避(bi)免(mian)RNA降(jiang)解(jie)，樣(yang)本處(chu)理(li)過程(cheng)應在(zai)0-4℃條件(jian)下操(cao)作，且(qie)完成實驗(yan)後立即(ji)上機(ji)檢測；樣(yang)本處(chu)理(li)過程(cheng)中(zhong)使用的(de)器(qi)具(ju)耗(hao)材(cai)應經(jing)過(guo)無核酶處理(li)。
3. 每(mei)次實驗(yan)應(ying)該(gai)設(she)置陰、陽性(xing)對照。
4. 試(shi)劑(ji)盒所(suo)有(you)試(shi)劑(ji)在(zai)使用前(qian)應(ying)該(gai)在(zai)常(chang)溫(wen)下充(chong)分融(rong)化混(hun)勻(yun)，並應瞬(shun)時(shi)離心(xin)。
5. 試(shi)劑(ji)盒內(nei)所配(pei)陰性(xing)和(he)陽性(xing)對照在(zai)壹(yi)次使用前(qian)應(ying)全部轉(zhuan)移(yi)至標(biao)本準(zhun)備(bei)區，並單獨(du)存(cun)放。
6. 為(wei)防(fang)止(zhi)熒光(guang)幹擾(rao)，應(ying)避(bi)免(mian)裸(luo)手(shou)直(zhi)接(jie)接(jie)觸PCR反(fan)應管(guan)，並應避免在(zai)PCR反(fan)應管(guan)上進行(xing)任(ren)何(he)標(biao)記。
7. 儀器(qi) 擴(kuo)增(zeng)相關參(can)數應按照本說明(ming)書相關要求進行(xing)設(she)置；不(bu)同批號試(shi)劑(ji)不(bu)能(neng)混用(yong)。
8. ABI系列熒(ying)光定量(liang)PCR儀(yi)參(can)數設(she)置中(zhong)不(bu)選ROX校(xiao)正(zheng)，淬滅基(ji)因(yin)選擇(ze)None。
9. 實驗過程(cheng)中(zhong)產品(pin)的(de)廢(fei)棄物應(ying)該(gai)進行(xing)無害(hai)化處(chu)理(li)後方(fang)可(ke)丟(diu)棄(qi)。
儲(chu)存(cun)條件(jian)：
14℃或－20℃樣(yang)品(pin)收(shou)集、處(chu)理(li)及保(bao)存(cun)方法(fa)
1. 血(xue)清(qing)：使用不(bu)含(han)熱(re)原和內(nei)毒素的(de)試(shi)管(guan)，操作過(guo)程(cheng)中(zhong)避免任(ren)何(he)細胞刺(ci)激，收(shou)集血(xue)液後，3000 轉離心(xin)10 分鐘將(jiang)血(xue)清(qing)和(he)紅細胞迅(xun)速(su)小(xiao)心(xin)地(di)分(fen)離。
2. 血(xue)漿：EDTA、檸檬(meng)酸鹽(yan)或肝(gan)素(su)抗(kang)凝。3000 轉(zhuan)離心(xin)30 分鐘取(qu)上(shang)清(qing)。
3. 細胞上(shang)清(qing)液(ye)：3000 轉離心(xin)10 分鐘去(qu)除(chu)顆(ke)粒(li)和(he)聚合物。
4. 組織(zhi)勻(yun)漿：將(jiang)組織(zhi)加入(ru)適(shi)量(liang)生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)搗碎。3000 轉(zhuan)離心(xin)10 分鐘取(qu)上(shang)清(qing)。
5. 保存(cun)：如果(guo)樣(yang)本收(shou)集後不(bu)及時(shi)檢(jian)測(ce)，請(qing)按壹(yi)次用量(liang)分(fen)裝(zhuang)，凍存(cun)於(yu)-20℃，避免反(fan)復凍融(rong)，在(zai)室(shi)溫(wen)下解(jie)凍(dong)並確保樣(yang)品(pin)均(jun)勻(yun)地充(chong)分解(jie)凍(dong)。
A9(小(xiao)鼠皮(pi)下結(jie)締(di)組織(zhi)細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2糖精(jing)鈉標(biao)準(zhun)溶液(ye)（1.00mg/mL,基(ji)體(ti)：水）Saccharin  salt solution質量規格(ge)：1.00mg/mL,基(ji)體(ti)：水

PVRL2 Others Human 人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照) 桃(tao)醛(quan)（標(biao)準(zhun)品(pin)）γ-Undecalactone質量規格(ge)：0.96

水(shui)牛(niu)皮(pi)膚(fu)成纖維樣(yang)細胞;WB-S5甲(jia)基(ji)壬(ren)基(ji)甲(jia)酮(tong)（標(biao)準(zhun)品(pin)）2-Undecane質量規格(ge)：分析標(biao)準(zhun)品(pin)

DKKL1 Others Human 人 DKKL1 / Soggy-1 / SGY-1 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照) 2′-脫氧胞苷(gan) 鹽(yan)酸鹽(yan)2′-Deoxycytidine 質量規格(ge)：0.99

膠(jiao)原酶(含(han)10mL酶解(jie)緩(huan)沖液) 1mL1酸氫二(er)銨Ammonium phosphatedi basic質量規格(ge)：SP
NRG1 Protein Canine 重(zhong)組狗(gou) NRG1-alpha 蛋(dan)白(bai) (EGF Domain, Fc 標(biao)簽(qian))2,9-二(er)氯-1,10-菲羅啉(>97.0%(GC)(T))2,9-Dichloro-1,10-phenanthroline質量規格(ge)：>97.0%(GC)(T)

MDA-MB-435(人癌(ai)高(gao)轉(zhuan)移(yi)細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 腦動脈血(xue)管(guan)平滑(hua)肌(ji)細胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)3,4,7,8-四(si)甲(jia)基(ji)-1,10-菲羅啉(>98.0%(HPLC)(T))3,4,7,8-Tetramethyl-1,10-phenanthroline質量規格(ge)：>98.0%(HPLC)(T)

間充(chong)質幹細胞生(sheng)長(chang)添(tian)加物-無血(xue)清(qing)MSCGS-25,5'-硫(liu)代(dai)雙(shuang)水(shui)楊(yang)酸(>98.0%(GC)(T))5,5'-Thiodisalicylic Acid質量規格(ge)：>98.0%(GC)(T)

NRXN3 Others Human 人 NRXN3 / Neurexin-3-beta 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照) 4,4'-二(er)氯二(er)苯(ben)碸(>98.0%(GC))4,4'-Dichlorodiphenyl Sulfone質量規格(ge)：>98.0%(GC)

COS-1 非洲綠(lv)猴SV40轉化的(de)腎(shen)細胞雙(shuang)[3,5-二(er)溴(xiu)-4-(2-羥(qiang)乙(yi)氧基(ji))苯(ben)基(ji)]碸(>96.0%(GC))Bis[3,5-dibromo-4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] Sulfone質量規格(ge)：>96.0%(GC)
PTX3 Others Human 人 PTX3 / TNFAIP5 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照) Fmoc-Tyr(tBu)-OHFmoc-O-叔(shu)丁基(ji)-L-酪酸500克(ke)特(te)，98.5%

BALB/C小(xiao)鼠肝(gan)瘤(liu)株;BNL 1ME A.7R.11,4-二(er)肖基(ji)本;隊二(er)肖基(ji)本 1,4-bqnzqnq 9-94-4

NCR1 Others Rat 大鼠 NCR1 / NK-p46 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照) 水(shui)合安(an)嘌(piao)呤(ling)(-20℃) Mqthotrqxctq 1929-2-

原代(dai)神(shen)經(jing)膠(jiao)質細胞特(te)制無血(xue)清(qing)添(tian)加劑(ji)Many types of cells包裝(zhuang)：1mlDodecane正(zheng)十(shi)二(er)烷20毫(hao)克(ke)AR，98%

ECV-304細胞，人臍(qi)靜脈內皮(pi)(具有(you)T24細胞特(te)性(xing)) 金(jin)黃(huang)色葡(pu)萄(tao)球菌(jun) 人牙齦成纖維細胞總(zong)RNAHGF NA13007-92-6六羰基(ji)ChroMiuM hexacarbonyl
荊芥(jie)PCR鑒(jian)定試(shi)劑(ji)盒*EB (NBL-4)細胞，牛(niu)胚(pei)氣(qi)管(guan)細胞 SW 1088[SW-1088; SW1088](人腦星型膠質瘤細胞) CM-H018人成纖維細胞*培(pei)養(yang)基(ji)100mL鎘黃(huang)，英(ying)文名或英(ying)文縮(suo)寫(xie)：Cadmium sulfide，級(ji)別：AR，99.5%，規格(ge)：10克(ke)

EGF Protein Mouse 重(zhong)組小(xiao)鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋(dan)白(bai)鱗(lin)鉬(mu)醋(cu)銨(an) cMMONIUM PHOSPHOMOLYBDcTq HYDRcTq 2473-94-3

MKN-28(人胃(wei)癌(ai)高(gao)轉(zhuan)移(yi)細胞) 5×106cel