牛(niu)蒡子(zi)探(tan)針法PCR鑒(jian)定(ding)試(shi)劑盒*

特(te)點：
1. 即開(kai)即用(yong)，用(yong)戶只(zhi)需要(yao)提供病(bing)毒(du)樣(yang)品(pin)。
2. 根據(ju)地(di)黃(huang)保守(shou)序(xu)列設(she)計的(de)專(zhuan)壹(yi)性引物(wu)，與(yu)相(xiang)關病(bing)毒(du)無(wu)交(jiao)叉(cha)反應(ying)。
3. 靈敏(min)度可以(yi)達(da)到幾百拷(kao)貝(bei)/反應(ying)。
4. 壹(yi)管式熒(ying)光(guang)定量(liang) PCR 檢測，避免(mian)後(hou)續(xu)汙(wu)染(ran)。
5. 本試(shi)劑盒足(zu)夠(gou) 50 次 20μL 反應(ying)體(ti)系的(de)熒(ying)光定量(liang) PCR。
6. 本產品(pin)只(zhi)適(shi)用於科(ke)研(yan)，不能(neng)用於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)。

使用(yong)方(fang)法：
壹(yi)、樣品(pin)采集：
1、食品(pin)樣品(pin)：樣品(pin)的(de)采(cai)集與預(yu)培(pei)養按(an)照(zhao)樣品(pin)的(de)采(cai)集與預(yu)培(pei)養按(an)照(zhao)《食品(pin)衛(wei)生微(wei)生物(wu)學(xue)檢驗(yan)阪(ban)崎腸桿(gan)菌(jun)檢驗要求進(jin)行(xing)。
2、血液(ye)樣品(pin)：用無菌(jun)註(zhu)射(she)器抽取受(shou)檢者(zhe)靜脈(mai)血2mL，註入(ru)無菌EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬(meng)酸(suan)鈉(na))抗(kang)凝(ning)管，立(li)即混(hun)勻。
3、糞(fen)便樣品(pin)：取糞(fen)便置於(yu)滅(mie)菌的(de)收(shou)集管中(zhong)送檢。
4、病(bing)竈部位樣(yang)品(pin)：取發(fa)病(bing)部位新鮮(xian)滲(shen)出(chu)物(wu)、粘(zhan)液膿血送檢。
壹(yi)、稀釋 PCR 陽(yang)性對照(zhao)（以(yi) 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這 6 個(ge) 10 倍稀釋度為(wei)例(li)）
1. 註意：由於(yu)標準(zhun)品(pin)濃度非(fei)常(chang)高(gao)，因此(ci)下(xia)列稀(xi)釋操作(zuo)壹(yi)定要在(zai)獨立(li)的(de)區(qu)域進行(xing)，千(qian)萬(wan)不能(neng)汙(wu)染(ran)樣(yang)品(pin)或(huo)本試(shi)劑盒的(de)其(qi)他成分）。為(wei)增(zeng)加產品(pin)穩定性和避(bi)免(mian)擴散(san)傳染(ran)性病(bing)原，本產品(pin)不提(ti)供(gong)活體(ti)樣品(pin)做陽(yang)性對照(zhao)，只(zhi)提(ti)供可以(yi)直(zhi)接使用(yong)的(de) DNA段作(zuo)為(wei)陽(yang)性對照(zhao)。
2. 標記(ji) 6 個(ge)離(li)心(xin)管(guan)，分別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯(xin)槍(qiang)頭(tou)分別加入(ru) 45 μL 熒光(guang) PCR 模板稀(xi)釋液(ye)（用(yong)帶芯(xin)槍(qiang)頭(tou)，下(xia)同）。
4. 在 7 號(hao)管中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)，充分震(zhen)蕩 1 分鐘，得(de)1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用。
5. 換槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 6 號(hao)管中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)(上(shang)步(bu)稀(xi)釋所(suo)得(de))，充分震(zhen)蕩 1 分鐘，得(de) 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用。
6. 換槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 5 號(hao)管中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)到 5 號(hao)管中(zhong)，充(chong)分震(zhen)蕩 1 分鐘，得(de) 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用。
7. 重(zhong)復上(shang)面的(de)操作(zuo)直(zhi)到得(de)到 6 個(ge)稀(xi)釋度的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用。
註：上(shang)述樣(yang)品(pin)建(jian)議(yi)經(jing)過(guo)增(zeng)菌後(hou)，收集(ji)培(pei)養物(wu)用(yong)於檢測。 
二、DNA提取(qu)：
可采(cai)用(yong)PCR試(shi)劑盒配(pei)備(bei)的(de)DNA抽提(ti)液，按(an)以(yi)下(xia)說明(ming)進行(xing)DNA核酸(suan)的(de)粗(cu)提。也(ye)可采(cai)購(gou)上(shang)海(hai)澤葉(ye)生物(wu)科(ke)技(ji)有(you)限(xian)公(gong)司生產的(de)DNA提取(qu)試(shi)劑盒(過(guo)柱法-熒光(guang)配套)或(huo)其(qi)他合(he)適的(de)商(shang)業(ye)化產品(pin)，並(bing)按(an)照(zhao)相(xiang)應(ying)試(shi)劑盒說(shuo)明(ming)進行(xing)操作(zuo)。
1、液體(ti)培(pei)養物(wu)：取(qu)液體(ti)培(pei)養物(wu)100μL加到1.5mL無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，8000rpm離(li)心(xin)3min，盡量(liang)吸(xi)棄上(shang)清，加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液充分混(hun)勻，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
2、固(gu)體(ti)培(pei)養物(wu)：挑(tiao)取單克隆菌(jun)落(luo)與(yu)50μL DNA抽提(ti)液充分混(hun)勻，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
3、糞(fen)便樣品(pin)：挑取米(mi)粒大(da)小(xiao)糞(fen)便於滅(mie)菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，加入(ru)0.5mL生理鹽水(shui)，振(zhen)蕩混(hun)勻，13000rpm離(li)心(xin)3分鐘，棄上(shang)清，沈澱中加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液充分混(hun)勻，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
4、其他液體(ti)標本：取標本2-3mL，13000rpm離(li)心(xin)3min，棄上(shang)清，沈澱中加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液充分混(hun)勻，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
註：陽(yang)性對照(zhao)和陰性對照(zhao)為(wei)已(yi)經抽提(ti)好(hao)的(de)核(he)酸(suan)(無需提(ti)取)，直(zhi)接取(qu)5μL加入(ru)到反應(ying)體(ti)系中(zhong)即可。由(you)於(yu)陽(yang)性對照(zhao)濃度較(jiao)高，建(jian)議(yi)在(zai)樣(yang)品(pin)制備(bei)區域(yu)加入(ru)陽(yang)性對照(zhao)。 
實驗(yan)流程：
1. 整個(ge)檢(jian)測過(guo)程應(ying)嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)本說明(ming)書(shu)要(yao)求(qiu)分別在試(shi)劑準(zhun)備(bei)區(qu)、樣本處理區和PCR擴增(zeng)區進(jin)行(xing)操作(zuo)，各區(qu)實驗(yan)服(fu)、儀(yi)器 、耗材應(ying)獨立(li)使用(yong)，不能(neng)混(hun)用；實驗(yan)用吸(xi)頭(tou)采(cai)用帶濾(lv)芯(xin)吸(xi)頭(tou)；樣(yang)本處理區應(ying)配有生物(wu)安(an)全(quan)櫃，樣(yang)本處理在生物(wu)安(an)全(quan)櫃中(zhong)進行(xing)操作(zuo)；三(san)個(ge)區(qu)應(ying)該配有(you)紫(zi)外線(xian)殺菌(jun)裝(zhuang)置。
2. 為(wei)避免RNA降解，樣本處理過(guo)程應(ying)在0-4℃條件下操作(zuo)，且完(wan)成實驗(yan)後(hou)立(li)即上(shang)機(ji)檢(jian)測；樣本處理過(guo)程中(zhong)使用(yong)的(de)器具耗材應(ying)經過(guo)無(wu)核(he)酶處(chu)理。
3. 每次實驗(yan)應(ying)該設置(zhi)陰、陽(yang)性對照(zhao)。
4. 試(shi)劑盒所(suo)有(you)試(shi)劑在使用(yong)前應(ying)該在常(chang)溫下充分融化混(hun)勻，並(bing)應(ying)瞬時離(li)心(xin)。
5. 試(shi)劑盒內所配(pei)陰性和陽(yang)性對照(zhao)在壹(yi)次使用(yong)前應(ying)全部轉(zhuan)移至標本準(zhun)備(bei)區(qu)，並(bing)單獨存(cun)放(fang)。
6. 為(wei)防止熒光幹(gan)擾(rao)，應(ying)避免裸手直(zhi)接接(jie)觸(chu)PCR反應(ying)管，並(bing)應(ying)避免在(zai)PCR反應(ying)管上(shang)進行(xing)任(ren)何標記(ji)。
7. 儀器 擴增(zeng)相(xiang)關參數應(ying)按(an)照(zhao)本說明(ming)書(shu)相(xiang)關要求(qiu)進行(xing)設(she)置(zhi)；不同(tong)批(pi)號(hao)試(shi)劑不能(neng)混(hun)用。
8. ABI系列熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR儀參(can)數設置(zhi)中(zhong)不選(xuan)ROX校(xiao)正(zheng)，淬(cui)滅(mie)基(ji)因(yin)選(xuan)擇(ze)ne。
9. 實驗(yan)過(guo)程中(zhong)產品(pin)的(de)廢棄物(wu)應(ying)該進行(xing)無(wu)害(hai)化處(chu)理後(hou)方(fang)可丟棄。
儲(chu)存(cun)條(tiao)件：
14℃或(huo)－20℃樣品(pin)收集、處(chu)理及保存(cun)方(fang)法
1. 血清：使用(yong)不含(han)熱(re)原和內毒(du)素的(de)試(shi)管(guan)，操作(zuo)過(guo)程中(zhong)避免任(ren)何細(xi)胞刺(ci)激，收集血液(ye)後(hou)，3000 轉離(li)心(xin)10 分鐘將(jiang)血清和紅細(xi)胞迅(xun)速小心(xin)地(di)分離(li)。
2. 血漿(jiang)：EDTA、檸檬(meng)酸(suan)鹽(yan)或(huo)肝(gan)素抗(kang)凝(ning)。3000 轉離(li)心(xin)30 分鐘取(qu)上(shang)清。
3. 細(xi)胞上(shang)清液：3000 轉離(li)心(xin)10 分鐘去除顆(ke)粒和聚(ju)合(he)物(wu)。
4. 組織(zhi)勻(yun)漿：將組織(zhi)加入(ru)適量(liang)生理鹽水(shui)搗(dao)碎。3000 轉離(li)心(xin)10 分鐘取(qu)上(shang)清。
5. 保存(cun)：如(ru)果樣(yang)本收集(ji)後(hou)不及(ji)時檢測，請按(an)壹(yi)次用量(liang)分裝，凍存(cun)於(yu)-20℃，避免(mian)反復凍融，在室溫下解凍並(bing)確保(bao)樣品(pin)均(jun)勻地(di)充分解凍。
氫二(er)鈉七水(shui)   phosphate, dibasic, heptahydrate  質量(liang)規格(ge)：>98%,BR MouseMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISA試(shi)劑盒小(xiao)鼠粘蛋(dan)白(bai)/粘液(ye)素5AC(MUC5AC)ELISA試(shi)劑盒規格(ge)：96T/48T

dATP溶(rong)液(ye)(100 mM)  dATP 100 mM solution  質量(liang)規格(ge)：>97%,BR 小鼠破(po)骨(gu)細(xi)胞分化因(yin)子(ODF)ELISA 試(shi)劑盒

癸酸(suan)鈉(na)   decaate  質量(liang)規格(ge)：>99%,進分 Rat somal cell derived factor 1 beta (SDF-1 beta /CXCL12) ELISA Kit 大(da)鼠基(ji)質(zhi)細(xi)胞衍(yan)生因(yin)子(zi)1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試(shi)劑盒

瓊脂糖(tang)(美侖(lun)電泳級(ji))  Agarose  質量(liang)規格(ge)：美(mei)侖，電泳級(ji) Humanai-filaggrinaibody,AFAELISAKit 人抗(kang)角(jiao)蛋白(bai)絲(si)聚(ju)集(ji)素/絲(si)集蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti)(AFA)ELISA試(shi)劑盒 96T/48T 進口(kou)分裝

瓊脂糖(tang)(Sigma)  Agarose  質量(liang)規格(ge)：Sigma原裝 Human1,25-dihydroxyvitaminD3,DVD/DHVD3ELISA試(shi)劑盒人1,25二羥(qiang)基(ji)維生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD3)ELISA試(shi)劑盒規格(ge)：96T/48T

植物(wu)血(xue)凝(ning)素  Phytohemagglutinin  質量(liang)規格(ge)：BR 真菌/酵母(mu)細(xi)胞線(xian)粒體(ti)DNA萃(cui)取試(shi)劑盒10/20

6-糠(kang)基(ji)氨(an)基(ji)嘌(piao)呤(ling),激動(dong)素  Kinetin,6-Furfurylamipurine  質量(liang)規格(ge)：>98%,BR MouseB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit小鼠B細(xi)胞瘤(liu)因子2(Bcl-2)ELISA試(shi)劑盒規格(ge)：96T/48T

乙二醇雙(2-氨基(ji)乙基(ji)醚(mi))四乙酸(suan)  EGTA, egtazic acid  質量(liang)規格(ge)：>98%,分子生物(wu)學(xue)級 小鼠蘋(ping)果酸(suan)脫氫酶(MDH)ELISA試(shi)劑盒 ，英文(wen)名： MDH ELISA Kit

無水(shui)二(er)氫鈉(na)(分子生物(wu)學(xue)級)   phosphate, mobasic, anhydrous  質量(liang)規格(ge)：>98.5%,分子生物(wu)學(xue)級 小鼠白介(jie)素1(IL-1)ELISA檢測試(shi)劑盒MouseIerleukin1,IL-1ELISAKit 96T/48T

月(yue)桂(gui)酰基(ji)肌(ji)氨(an)酸(suan)鈉(na)(分子生物(wu)學(xue)級)   lauroyl sarcosine  質量(liang)規格(ge)：>95%,分子生物(wu)學(xue)級 人分泌粒蛋白(bai)1(嗜鉻(ge)粒蛋白(bai)B)(CHGB/SCG1)試(shi)劑盒 Human CHGB/SCG1 ELISA kit
Betamipron  中文(wen)名：倍他米隆  分子式：C10H113    轉基(ji)因(yin)植物(wu)Bar基(ji)因(yin)核酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑盒(PCR-熒光(guang)探針法)   48T

Betamethasone  中文(wen)名：  分子式：C22H29FO5    轉基(ji)因(yin)植物(wu)Bar基(ji)因(yin)核酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑盒   48T

Benzyl nicotinate  中文(wen)名：芐(bian)酯(zhi)  分子式：C13H112    轉基(ji)因(yin)植物(wu)TE基(ji)因(yin)核酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑盒(PCR-熒光(guang)探針法)   48T              

Benzyl L-(+)-mandelate  中文(wen)名：L-(+)-扁(bian)桃酸(suan)芐(bian)酯(zhi)  分子式：C15H14O3    轉基(ji)因(yin)植物(wu)PRSV基(ji)因(yin)核酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑盒(PCR-熒光(guang)探針法)   48T

Benzyl cinnamate  中文(wen)名：肉桂(gui)酸(suan)苯(ben)甲(jia)酯  分子式：C16H14O2    轉基(ji)因(yin)植物(wu)PRSV基(ji)因(yin)核酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑盒   48T
硫(liu)酸(suan)鋇(>98%,BR)  Barium sulfate  質量(liang)規格(ge)：>98%,BR 化妝(zhuang)品(pin)糖精(saccharin)含(han)量(liang)比色法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測試(shi)劑盒20

苯(ben)磺(huang)酸(suan)(>98%,BR)  Benzenesulfonic acid  質量(liang)規格(ge)：>98%,BR 化妝(zhuang)品(pin)糖精(saccharin)含(han)量(liang)高(gao)效液(ye)相(xiang)色譜(pu)法定(ding)量(liang)檢(jian)測試(shi)劑盒20

安(an)息香(>98%,BR)  Benzoin  質量(liang)規格(ge)：>98%,BR 化妝(zhuang)品(pin)糖精(saccharin)含(han)量(liang)紅外光(guang)譜(pu)法定(ding)量(liang)檢(jian)測試(shi)劑盒20

二苯(ben)甲(jia)酮腙(>98%,BR)  Benzophene hydrazone  質量(liang)規格(ge)：>98%,BR 化妝(zhuang)品(pin)糖精(saccharin)含(han)量(liang)紫(zi)外光(guang)譜(pu)法定(ding)量(liang)檢(jian)測試(shi)劑盒20

氯化鉍(bi)(>98%,BR)  Bismuth (III) chloride  質量(liang)規格(ge)：>98%,BR 化妝(zhuang)品(pin)乙酰舒(shu)泛(fan)(acesulfameK)含(han)量(liang)高(gao)效液(ye)相(xiang)色譜(pu)法定(ding)量(liang)檢(jian)測試(shi)劑盒20

檸檬(meng)酸(suan)鉍(bi)  Bismuth (III)   質量(liang)規格(ge)：BR 環境副傷寒沙門(men)氏菌A(SalmonellaParatyphiA)定性試(shi)劑盒20

化鉍(bi)鉀(jia)  Bismuth (III) potassium iodide  質量(liang)規格(ge)：BR 環境副傷寒沙門(men)氏菌B(SalmonellaParatyphiB)定性試(shi)劑盒20

硫(liu)酸(suan)鉍(bi)(>98%,BR)  Bismuth (III) sulfate  質量(liang)規格(ge)：>98%,BR 環境鈣離(li)子(zi)濃度比色法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測試(shi)劑盒20

堿式(shi)  Bismuth(III) subcarbonate basic  質量(liang)規格(ge)：BR 環境鈣離(li)子(zi)濃度比色法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測試(shi)劑盒20

水(shui)楊(yang)酸(suan)鉍(bi)  Bismuth(III) subsalicylate  質量(liang)規格(ge)：鉍(bi)含(han)量(liang)：>56%,BR 環境鈣離(li)子(zi)濃度熒(ying)光(guang)定量(liang)檢(jian)測試(shi)劑盒20
牛蒡子(zi)探(tan)針法PCR鑒定(ding)試(shi)劑盒*PCB . 35，certified 標準(zhun)品(pin) m-Tolualdehyde 37680-69-6 純品(pin)型(xing)，5MG 特(te)征(zheng)形(xing)態 固(gu)態

PCB . 34，certified 標準(zhun)品(pin) 2,6-Dichlorophel 37680-68-5 純品(pin)型(xing)，5MG 特(te)征(zheng)形(xing)態 固(gu)態

PCB . 20，certified 標準(zhun)品(pin) Tri-allate 38444-84-7 純品(pin)型(xing)，10MG 特(te)征(zheng)形(xing)態 固(gu)態