羌活(huo)染料(liao)法PCR鑒定試(shi)劑盒保(bao)存

特點(dian)：
1. 即開即用，用(yong)戶只需(xu)要(yao)提(ti)供(gong)病(bing)毒樣(yang)品(pin)。
2. 根據(ju)地黃保(bao)守(shou)序列設(she)計(ji)的(de)專壹(yi)性引物，與相(xiang)關病(bing)毒無(wu)交(jiao)叉反應。
3. 靈(ling)敏(min)度(du)可以達到幾百(bai)拷(kao)貝(bei)/反應。
4. 壹管(guan)式(shi)熒光(guang)定量(liang) PCR 檢測，避免(mian)後(hou)續(xu)汙染。
5. 本試(shi)劑盒足夠 50 次 20μL 反應體(ti)系(xi)的(de)熒光(guang)定量(liang) PCR。
6. 本產(chan)品(pin)只適(shi)用(yong)於(yu)科(ke)研(yan)，不(bu)能(neng)用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)。

使用(yong)方(fang)法：
壹、樣(yang)品(pin)采(cai)集(ji)：
1、食品(pin)樣品(pin)：樣品(pin)的(de)采(cai)集(ji)與(yu)預培(pei)養(yang)按照樣品(pin)的(de)采(cai)集(ji)與(yu)預培(pei)養(yang)按照《食品(pin)衛生(sheng)微(wei)生(sheng)物學檢驗阪崎(qi)腸(chang)桿(gan)菌檢驗要求(qiu)進行(xing)。
2、血液樣品(pin)：用無(wu)菌(jun)註(zhu)射器(qi)抽取(qu)受(shou)檢者靜脈(mai)血2mL，註(zhu)入(ru)無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝(ning)管(guan)，立即混勻。
3、糞便(bian)樣(yang)品(pin)：取糞(fen)便(bian)置(zhi)於(yu)滅(mie)菌的(de)收(shou)集(ji)管(guan)中送檢。
4、病(bing)竈(zao)部(bu)位樣品(pin)：取發(fa)病(bing)部(bu)位新(xin)鮮(xian)滲(shen)出物、粘液(ye)膿血送檢。
壹、稀(xi)釋(shi) PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 這 6 個 10 倍(bei)稀(xi)釋度(du)為例）
1. 註(zhu)意：由於(yu)標準(zhun)品(pin)濃度(du)非(fei)常高，因此(ci)下(xia)列稀(xi)釋(shi)操(cao)作壹(yi)定要在(zai)獨(du)立的(de)區(qu)域(yu)進行(xing)，千(qian)萬(wan)不(bu)能(neng)汙染樣(yang)品(pin)或本(ben)試(shi)劑盒的(de)其他成分(fen)）。為增(zeng)加產品(pin)穩定(ding)性和(he)避免(mian)擴散(san)傳染性病(bing)原，本(ben)產(chan)品(pin)不(bu)提(ti)供(gong)活(huo)體(ti)樣品(pin)做(zuo)陽性對照，只提(ti)供(gong)可(ke)以直接使用(yong)的(de) DNA段作為陽性對照。
2. 標記(ji) 6 個離(li)心(xin)管(guan)，分(fen)別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍(qiang)頭分別(bie)加(jia)入(ru) 45 μL 熒光(guang) PCR 模板稀(xi)釋液(ye)（用帶芯槍(qiang)頭，下(xia)同）。
4. 在(zai) 7 號管中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽性對照，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽性對照。放(fang)冰上待用(yong)。
5. 換(huan)槍頭，在(zai) 6 號管中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽性對照(上步(bu)稀(xi)釋所得(de))，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽性對照。放(fang)冰上待用(yong)。
6. 換(huan)槍頭，在(zai) 5 號管中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽性對照到 5 號管中(zhong)，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽性對照。放(fang)冰上待用(yong)。
7. 重復上面的(de)操(cao)作直到得(de)到 6 個稀(xi)釋(shi)度的(de)陽性對照。放(fang)冰上待用(yong)。
註(zhu)：上述(shu)樣品(pin)建議(yi)經過(guo)增(zeng)菌後(hou)，收(shou)集(ji)培(pei)養(yang)物用於(yu)檢測。 
二(er)、DNA提(ti)取(qu)：
可采(cai)用PCR試劑盒配備(bei)的(de)DNA抽提(ti)液(ye)，按以下(xia)說明進行(xing)DNA核酸的(de)粗提(ti)。也(ye)可(ke)采(cai)購上(shang)海澤葉(ye)生(sheng)物科技有限(xian)公(gong)司(si)生(sheng)產(chan)的(de)DNA提(ti)取(qu)試(shi)劑盒(過柱(zhu)法(fa)-熒光(guang)配套(tao))或其他合(he)適的(de)商(shang)業(ye)化(hua)產(chan)品(pin)，並(bing)按照相(xiang)應試劑盒說明進行(xing)操(cao)作。
1、液體(ti)培(pei)養(yang)物：取液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)物100μL加到(dao)1.5mL無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，8000rpm離心(xin)3min，盡(jin)量(liang)吸棄(qi)上清，加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液(ye)充分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心(xin)3min，取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應。
2、固體(ti)培(pei)養(yang)物：挑取(qu)單克(ke)隆菌(jun)落與50μL DNA抽提(ti)液(ye)充分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心(xin)3min，取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應。
3、糞便(bian)樣(yang)品(pin)：挑取(qu)米粒大(da)小(xiao)糞(fen)便於(yu)滅(mie)菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，加(jia)入(ru)0.5mL生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)，振蕩混勻，13000rpm離心(xin)3分鐘(zhong)，棄(qi)上清，沈澱(dian)中(zhong)加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液(ye)充分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心(xin)3min取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應。
4、其他液(ye)體(ti)標本(ben)：取(qu)標本(ben)2-3mL，13000rpm離心(xin)3min，棄(qi)上清，沈澱(dian)中(zhong)加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液(ye)充分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心(xin)3min取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應。
註(zhu)：陽性對照和(he)陰(yin)性對照為已經抽(chou)提(ti)好的(de)核(he)酸(無需(xu)提(ti)取(qu))，直接取(qu)5μL加入(ru)到反應體(ti)系(xi)中(zhong)即可。由(you)於(yu)陽性對照濃度(du)較(jiao)高，建議(yi)在(zai)樣(yang)品(pin)制(zhi)備(bei)區(qu)域(yu)加入(ru)陽性對照。 
實驗(yan)流(liu)程(cheng)：
1. 整個檢測過程(cheng)應嚴格按照本說明書(shu)要求(qiu)分別(bie)在(zai)試(shi)劑準備(bei)區(qu)、樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)區(qu)和(he)PCR擴增(zeng)區(qu)進(jin)行(xing)操(cao)作，各區(qu)實(shi)驗(yan)服、儀(yi)器(qi) 、耗材應獨立使用(yong)，不(bu)能(neng)混用；實(shi)驗(yan)用吸頭采(cai)用帶濾芯吸頭；樣本(ben)處(chu)理(li)區(qu)應配有(you)生(sheng)物安(an)全櫃，樣本(ben)處(chu)理(li)在(zai)生(sheng)物安(an)全櫃中進(jin)行(xing)操(cao)作；三個區(qu)應該(gai)配有(you)紫(zi)外(wai)線(xian)殺菌(jun)裝置。
2. 為避免(mian)RNA降(jiang)解，樣本處理(li)過(guo)程(cheng)應在(zai)0-4℃條件(jian)下(xia)操(cao)作，且(qie)完(wan)成實(shi)驗(yan)後(hou)立即上機(ji)檢測；樣本處(chu)理(li)過(guo)程(cheng)中使用(yong)的(de)器(qi)具(ju)耗材應經過無(wu)核(he)酶(mei)處(chu)理。
3. 每次實驗(yan)應該(gai)設(she)置(zhi)陰(yin)、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在(zai)使用(yong)前(qian)應該(gai)在(zai)常(chang)溫(wen)下(xia)充分(fen)融(rong)化(hua)混勻，並(bing)應瞬時離(li)心(xin)。
5. 試劑盒內所配陰(yin)性和(he)陽性對照在(zai)壹(yi)次使用(yong)前(qian)應全部(bu)轉移(yi)至(zhi)標本(ben)準(zhun)備(bei)區(qu)，並(bing)單(dan)獨(du)存放(fang)。
6. 為防(fang)止熒光(guang)幹(gan)擾(rao)，應避免(mian)裸手直接接(jie)觸(chu)PCR反應管，並(bing)應避免(mian)在(zai)PCR反應管上進(jin)行(xing)任何(he)標記(ji)。
7. 儀器(qi) 擴增(zeng)相(xiang)關參(can)數(shu)應按照本說明書(shu)相(xiang)關要(yao)求(qiu)進行(xing)設(she)置(zhi)；不(bu)同批(pi)號試劑不(bu)能(neng)混用。
8. ABI系(xi)列(lie)熒光(guang)定量(liang)PCR儀參(can)數(shu)設(she)置(zhi)中(zhong)不(bu)選(xuan)ROX校正(zheng)，淬(cui)滅(mie)基因選(xuan)擇None。
9. 實驗(yan)過(guo)程(cheng)中產(chan)品(pin)的(de)廢(fei)棄(qi)物應該(gai)進行(xing)無(wu)害(hai)化(hua)處(chu)理後(hou)方(fang)可(ke)丟棄(qi)。
儲(chu)存條件(jian)：
14℃或－20℃樣品(pin)收集(ji)、處(chu)理及保(bao)存方(fang)法(fa)
1. 血清：使用(yong)不(bu)含(han)熱(re)原和(he)內毒素(su)的(de)試(shi)管，操(cao)作過(guo)程(cheng)中避免(mian)任何(he)細胞(bao)刺激，收集(ji)血液後(hou)，3000 轉離(li)心(xin)10 分鐘(zhong)將(jiang)血清和(he)紅細(xi)胞(bao)迅(xun)速(su)小(xiao)心(xin)地分(fen)離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽(yan)或肝(gan)素(su)抗(kang)凝。3000 轉離(li)心(xin)30 分鐘(zhong)取(qu)上(shang)清。
3. 細胞(bao)上(shang)清液：3000 轉離(li)心(xin)10 分鐘(zhong)去除顆(ke)粒(li)和(he)聚合物。
4. 組織勻漿：將(jiang)組(zu)織加(jia)入(ru)適量(liang)生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)搗(dao)碎(sui)。3000 轉離(li)心(xin)10 分鐘(zhong)取(qu)上(shang)清。
5. 保(bao)存：如果(guo)樣(yang)本收集(ji)後(hou)不(bu)及時檢測，請按壹次用量(liang)分裝，凍存於(yu)-20℃，避免(mian)反復凍(dong)融(rong)，在(zai)室(shi)溫(wen)下(xia)解凍(dong)並(bing)確(que)保(bao)樣(yang)品(pin)均(jun)勻地充分(fen)解(jie)凍。
DU 145(人(ren)前(qian)列腺癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 CL-0230Tca-8113(人(ren)舌(she)鱗癌(ai)細胞(bao))5×106cells/瓶×2 敘利(li)亞(ya)倉鼠(shu)細胞(bao)系(xi);Syrian Hamster AV12十(shi)九(jiu)酸甲酯(zhi)(標準(zhun)品(pin))Methyl nonadecanoate質量(liang)規(gui)格：分(fen)析(xi)標準(zhun)品(pin)

小(xiao)鼠(shu)胰腺癌(ai)細(xi)胞(bao)(B類(lei));Pan02丙二(er)酸(標準(zhun)品(pin)) Malonate質量(liang)規(gui)格：分(fen)析(xi)標準(zhun)品(pin)

15. 視覺(jiao)細(xi)胞(bao)系(xi)統(tong)D-異抗壞(huai)血酸(標準(zhun)品(pin))D-(−)-Isoascorbic acid質量(liang)規(gui)格：分(fen)析(xi)標準(zhun)品(pin)

CM-M098小(xiao)鼠(shu)內臟脂(zhi)肪(fang)細胞(bao)*培(pei)養(yang)基100mL*(分析(xi)標準(zhun)品(pin),≥99.0%(GC))Linoleic acid質量(liang)規(gui)格：分(fen)析(xi)標準(zhun)品(pin),≥99.0%(GC)

小(xiao)鼠(shu)原B細胞(bao)株;BaF3 小(xiao)鼠(shu)肺大(da)靜脈(mai)內(nei)皮(pi)細胞(bao)*培(pei)養(yang)基 100mL隱色(se)結(jie)晶紫(標準(zhun)品(pin))Leucocrystal Violet質量(liang)規(gui)格：分(fen)析(xi)標準(zhun)品(pin)
EFNA4 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) EFNA4 / Ephrin-A4 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性對照) 1-氧*(*雜質(zhi)C)1-Oxo Mirtazapine (Mirtazapine Impurity C)質量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)

人(ren)表(biao)皮(pi)色素(su)細(xi)胞(bao)-深(shen)色(se)素(su)cDNAHEM-d cDNAN-去甲基洛哌(pai)丁(ding)胺(an)-d3N-Desmethyl Loperamide-d3質量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)

IFNG Others Ferret 雪貂(diao) IFNG / Ierferon Gamma 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性對照) (S)-酮咯(ge)酸(S)-Ketorolac質量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)

小(xiao)鼠(shu)胚(pei)胎(tai)成纖維細(xi)胞(bao)(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)(R)-酮咯(ge)酸(R)-Ketorolac質量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)

Bel-7405細胞(bao)，人(ren)肝(gan)癌細胞(bao) 逆(ni)轉錄病(bing)毒包(bao)裝用的(de)人(ren)胚(pei)胎(tai)成纖維細(xi)胞(bao),PA317細胞(bao) 敘利(li)亞(ya)倉鼠(shu)腎細(xi)胞(bao);BHK-21(S)-*(S)-Lansoprazole質量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)
人(ren)成骨(gu)肉瘤(liu)細胞(bao);MG-63(R)-(+)-*質量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)(R)-(+)-Felodipine

GP120 Others HIV 人(ren)類(lei)缺陷(xian)病(bing)毒Ⅰ型(xing) HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp120 / SU 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性對照) (S)-(-)-*質量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)(S)-(-)-Felodipine

中國(guo)倉鼠(shu)卵(luan)巢(chao)細胞(bao);CTLA4 Ig-248-羥基*鹽(yan)酸鹽(yan)質量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)8-hydroxy Guanine

EDAR Others Cynomolgus 食蟹(xie)猴 EDAR 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性對照) **二(er)核苷酸鈉鹽(yan)質量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)Nicotinamide guanine dinucleotide  salt

頜(he)下(xia)腺上(shang)皮(pi)細胞(bao)Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)脫氫(qing)*鹽(yan)酸鹽(yan)質量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)Dehydro Aripiprazole
羌活(huo)染料(liao)法PCR鑒定試(shi)劑盒保(bao)存人(ren)內(nei)根鞘(qiao)細胞(bao)HHIRSC碳(tan)化(hua)矽(gui)shēng huà shì jì容量(liang)：RT1克(ke)

RHOA Others Human 人(ren) RhoA 桿狀(zhuang)病(bing)毒-昆(kun)蟲(chong)細胞(bao)裂解液 (陽性對照) α-甘(gan)油1酸脫氫(qing)酶(mei) α-Glycerophosphate dehydrogenase 9075-65-4 200UN 通(tong)用(yong)試(shi)劑

家兔(tu)皮(pi)膚細胞(bao);DR-S12-安(an)基-5-酚-7-磺(huang)醋(又名J醋) J ccid 1987--2

L929細胞(bao)，成纖維細(xi)胞(bao) 人(ren)胰(yi)腺細(xi)胞(bao),AR42J細胞(bao) CM-R125大(da)鼠(shu)牙(ya)細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基100mL粉shēng huà