半(ban)枝蓮(lian)染(ran)料法(fa)PCR鑒(jian)定(ding)試(shi)劑盒*

儲(chu)存條件(jian)：
14℃或－20℃樣(yang)品(pin)收集(ji)、處(chu)理(li)及(ji)保(bao)存方法(fa)
1. 血清：使用不含熱原和(he)內毒素(su)的試(shi)管，操作(zuo)過(guo)程中(zhong)避免(mian)任(ren)何細胞刺(ci)激(ji)，收集(ji)血液後(hou)，3000 轉離心10 分鐘(zhong)將(jiang)血清和(he)紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬(meng)酸(suan)鹽或肝素抗(kang)凝。3000 轉離心30 分鐘(zhong)取上(shang)清。
3. 細胞上清液(ye)：3000 轉離心10 分鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆粒(li)和(he)聚合物(wu)。
4. 組織勻漿：將組織加(jia)入適(shi)量生(sheng)理(li)鹽(yan)水搗碎(sui)。3000 轉離心10 分鐘(zhong)取上(shang)清。
5. 保(bao)存：如(ru)果樣(yang)本收集(ji)後(hou)不及(ji)時檢測，請按(an)壹(yi)次(ci)用量分裝，凍存於-20℃，避免(mian)反(fan)復(fu)凍融，在(zai)室(shi)溫下(xia)解(jie)凍並確保(bao)樣(yang)品(pin)均(jun)勻(yun)地充分解(jie)凍。

特(te)點(dian)：
1. 即開即(ji)用，用戶(hu)只需要(yao)提供病毒樣(yang)品(pin)。
2. 根(gen)據(ju)地黃保(bao)守序列(lie)設計的(de)專壹性(xing)引物，與(yu)相(xiang)關(guan)病毒無(wu)交叉(cha)反應(ying)。
3. 靈敏度可(ke)以達到幾(ji)百(bai)拷貝(bei)/反應(ying)。
4. 壹管式熒(ying)光(guang)定(ding)量 PCR 檢測，避免(mian)後(hou)續(xu)汙染(ran)。
5. 本試劑盒足(zu)夠 50 次(ci) 20μL 反應(ying)體(ti)系的熒(ying)光(guang)定(ding)量 PCR。
6. 本產品只(zhi)適(shi)用於科研，不能(neng)用於臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)。

使用方(fang)法(fa)：
壹、樣(yang)品(pin)采(cai)集(ji)：
1、食品樣(yang)品(pin)：樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集與(yu)預培(pei)養按(an)照樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集與(yu)預培(pei)養按(an)照《食(shi)品衛生(sheng)微生(sheng)物學檢驗(yan)阪崎(qi)腸桿菌(jun)檢驗(yan)要(yao)求進(jin)行(xing)。
2、血液樣(yang)品(pin)：用無(wu)菌(jun)註(zhu)射(she)器抽取受(shou)檢者(zhe)靜(jing)脈(mai)血2mL，註入無(wu)菌(jun)EDTA2Na(或檸檬(meng)酸(suan)鈉)抗凝管，立即(ji)混勻。
3、糞便樣(yang)品(pin)：取糞便置於滅菌(jun)的(de)收集(ji)管中送檢。
4、病竈部(bu)位樣(yang)品(pin)：取發(fa)病部位新鮮(xian)滲(shen)出(chu)物、粘液膿血送檢。
壹、稀釋(shi) PCR 陽性對(dui)照（以 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這 6 個 10 倍(bei)稀釋度為(wei)例(li)）
1. 註意(yi)：由(you)於標(biao)準(zhun)品(pin)濃度非(fei)常(chang)高(gao)，因(yin)此(ci)下(xia)列稀(xi)釋操(cao)作壹定(ding)要(yao)在獨(du)立(li)的區域進(jin)行(xing)，千萬(wan)不能(neng)汙染(ran)樣(yang)品(pin)或本試劑盒的(de)其(qi)他(ta)成(cheng)分）。為(wei)增加(jia)產品穩(wen)定(ding)性(xing)和(he)避免(mian)擴(kuo)散傳染(ran)性病原，本產品不提供活(huo)體(ti)樣(yang)品(pin)做(zuo)陽性對(dui)照，只(zhi)提供可(ke)以直(zhi)接使用的(de) DNA段作為(wei)陽(yang)性對(dui)照。
2. 標記 6 個離(li)心管，分別(bie)為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭(tou)分(fen)別(bie)加(jia)入 45 μL 熒(ying)光(guang) PCR 模(mo)板(ban)稀釋液（用帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭(tou)，下(xia)同(tong)）。
4. 在 7 號管中加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照，充(chong)分震蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照。放冰上(shang)待用。
5. 換槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 6 號管中加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照(上步(bu)稀(xi)釋(shi)所得)，充分震蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照。放冰上(shang)待用。
6. 換槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 5 號管中加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照到 5 號管中，充(chong)分震蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照。放冰上(shang)待用。
7. 重復上(shang)面(mian)的操(cao)作(zuo)直(zhi)到得(de)到 6 個稀(xi)釋(shi)度的(de)陽(yang)性(xing)對照。放冰上(shang)待用。
註：上述(shu)樣(yang)品(pin)建議經過(guo)增菌(jun)後(hou)，收集(ji)培(pei)養(yang)物用於檢測。 
二、DNA提取：
可(ke)采用PCR試劑盒配(pei)備的(de)DNA抽提液，按(an)以下(xia)說明(ming)進行(xing)DNA核(he)酸(suan)的(de)粗(cu)提。也(ye)可(ke)采購(gou)上(shang)海(hai)澤(ze)葉(ye)生(sheng)物科技有(you)限公(gong)司(si)生(sheng)產的DNA提取試(shi)劑盒(過(guo)柱法(fa)-熒(ying)光(guang)配(pei)套)或其(qi)他(ta)合適(shi)的(de)商業化(hua)產品，並按(an)照相(xiang)應(ying)試(shi)劑盒說(shuo)明(ming)進(jin)行(xing)操作(zuo)。
1、液體(ti)培養物(wu)：取液(ye)體(ti)培養物(wu)100μL加(jia)到1.5mL無菌(jun)離(li)心管中，8000rpm離心3min，盡量吸(xi)棄(qi)上(shang)清，加(jia)入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
2、固體(ti)培養物(wu)：挑取單(dan)克(ke)隆(long)菌(jun)落(luo)與(yu)50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
3、糞便樣(yang)品(pin)：挑取米(mi)粒(li)大小(xiao)糞便於滅菌(jun)離(li)心管中，加(jia)入0.5mL生(sheng)理(li)鹽(yan)水，振(zhen)蕩(dang)混勻，13000rpm離心3分鐘(zhong)，棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱(dian)中(zhong)加(jia)入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
4、其(qi)他(ta)液(ye)體(ti)標本：取標(biao)本2-3mL，13000rpm離心3min，棄上清，沈(chen)澱(dian)中(zhong)加(jia)入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
註：陽性(xing)對照和(he)陰(yin)性對(dui)照為(wei)已(yi)經抽提好的核(he)酸(suan)(無需提取)，直(zhi)接取5μL加(jia)入到反(fan)應(ying)體(ti)系中即(ji)可(ke)。由(you)於陽(yang)性(xing)對(dui)照濃(nong)度較(jiao)高(gao)，建議在樣(yang)品(pin)制備(bei)區域加(jia)入陽(yang)性(xing)對(dui)照。 
水牛皮(pi)膚(fu)成(cheng)纖(xian)維樣(yang)細胞;WB-S2酞菁(jing)(以升華(hua)法(fa)化(hua))Phthalocyanine (purified by sublimation)質(zhi)量規格：>98.0%(N)

TF Others Mouse 小鼠(shu) ansferrin / CD176 / Seroansferrin 人細胞裂(lie)解(jie)液 (陽性對(dui)照) 苉(升華(hua)提)Picene (purified by sublimation)質(zhi)量規格：>99.5%(GC)

視(shi)網(wang)膜muller細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)5,6,11,12-四(si)苯基並四(si)苯(升華(hua)提)5,6,11,12-Tetraphenylnaphthacene (purified by sublimation)質(zhi)量規格：>99.0%(GC)

KU812細胞，人外周血嗜(shi)堿(jian)性(xing)白細胞 615小鼠(shu)癌(ai)瘤(liu)株(zhu),Ca763細胞 MTT細胞活(huo)力(li)和(he)增殖(zhi)檢測試劑盒MTT1,2,3,4,8,9,10,11,15,16,17,18,22,23,24,25-十(shi)六氟酞菁(jing)銅(tong)(II)(以升華(hua)法(fa)化(hua))1,2,3,4,8,9,10,11,15,16,17,18,22,23,24,25-Hexadecafluorophthalocyanine Copper(II) (purified by sublimation)質(zhi)量規格：>98.0%(N)(T)

NCI-H446(人小細胞肺(fei)癌細胞) 5×106cells/瓶×23,4,9,10-苝四(si)羧酸二酐(gan)(>98.0%(T))3,4,9,10-Perylenetetracarboxylic Dianhydride質(zhi)量規格：>98.0%(T)
間(jian)充質(zhi)幹(gan)細胞培養基MSCM-sf右(you)*(標準品(pin))Es質(zhi)量規格：>99%,標準品(pin)

GST Others Schistosoma japonicum 日本血吸(xi)蟲 Glutathione S-ansferase / GST 桿狀病毒-昆蟲細胞裂(lie)解(jie)液 (陽性對(dui)照) 醋(cu)酸(suan)*Triamcilone Acetonide Acetate質(zhi)量規格：>97%,BR

人胚(pei)腎二(er)倍(bei)體(ti)細胞;HEK-25-(4-甲氧(yang)羰(tang)基(ji)苯基)-10,15,2-三(san)苯基卟吩(fen)(>90.0%(HPLC))5-(4-Methoxycarbonylphenyl)-10,15,20-triphenylporphyrin質(zhi)量規格：>90.0%(HPLC)

EL4. IL-2細胞，瘤(liu)細胞 人結腸(chang)癌細胞,Loo細胞 CM-H037人結腸(chang)平滑(hua)肌(ji)細胞*培養基100mL2-萘甲酰氯(lv)(>98.0%(GC)(T))2-Naphthoyl Chloride質(zhi)量規格：>98.0%(GC)(T)

大鼠(shu)骨(gu)髓(sui)瘤(liu)細胞;IR983F4-二甲基氨基肉(rou)桂(gui)醛(quan)(>98.0%(T))4-Dimethylamicinnamaldehyde質(zhi)量規格：>98.0%(T)
Promocell C-28015 Mesenchymal Stem CellNeurogenic Differe. Medium, 間(jian)充質(zhi)幹(gan)細胞神(shen)經性(xing)分(fen)化(hua)培養(yang)基(即用型) 100ml*(標準品(pin))Piroxicam質(zhi)量規格：HPLC>98%,標準品(pin)

人冠狀(zhuang)動脈(mai)內(nei)皮(pi)細胞HCAEC*Posaconazole質(zhi)量規格：>99%

SERPINE1 Others Rat 大鼠(shu) SerpinE1 / PAI-1 人細胞裂(lie)解(jie)液 (陽性對(dui)照) *(標準品(pin))Posaconazole質(zhi)量規格：HPLC>98%,標準品(pin)

非洲(zhou)綠猴腎細胞;CV-1*Riimin質(zhi)量規格：>98.0%,可(ke)用於細胞培養

大鼠(shu)骨(gu)髓(sui)瘤(liu)細胞;Y3-Ag 1.2.3 肺(fei)腺癌細胞，SPC-A-1細胞 B/c-ES細胞，BALB/c小鼠(shu)ES細胞*(標準品(pin))Riimin質(zhi)量規格：>98%,標準品(pin)
半枝蓮(lian)染(ran)料法(fa)PCR鑒定(ding)試(shi)劑盒*GLA Others Mouse 小鼠(shu) alpha-Galactosidase A / GLA 人細胞裂(lie)解(jie)液 (陽性對(dui)照) 無水shēng huà shì jì容量：100克(ke)

大鼠(shu)大(da)隱(yin)靜(jing)脈(mai)平滑(hua)肌(ji)細胞*培養基 100mLDL-天冬(dong)酰(xian)胺壹(yi)水物(wu) DL-Asparagine mohydrate,≥99.0% 3130-87-8 25G 通用試(shi)劑

GP-293人胚(pei)腎細胞 Human embryonic kidney cell line GP-293 DMEM+10% FBS同(tong)基* Kqtoprofqn 071
實驗(yan)流程(cheng)：
1. 整(zheng)個檢測過(guo)程應(ying)嚴(yan)格(ge)按(an)照本說明書要(yao)求分(fen)別(bie)在試(shi)劑準備區、樣(yang)本處(chu)理(li)區和(he)PCR擴(kuo)增區進行(xing)操作(zuo)，各區實驗(yan)服、儀(yi)器 、耗材應(ying)獨(du)立(li)使用，不能(neng)混用；實驗(yan)用吸(xi)頭(tou)采(cai)用帶(dai)濾(lv)芯(xin)吸(xi)頭(tou)；樣(yang)本處(chu)理(li)區應(ying)配(pei)有生(sheng)物安(an)全(quan)櫃(gui)，樣(yang)本處(chu)理(li)在(zai)生(sheng)物安(an)全(quan)櫃(gui)中進行(xing)操作(zuo)；三(san)個區應(ying)該(gai)配(pei)有紫外(wai)線(xian)殺菌(jun)裝置。
2. 為(wei)避免(mian)RNA降解(jie)，樣(yang)本處(chu)理(li)過(guo)程應(ying)在(zai)0-4℃條件(jian)下(xia)操作(zuo)，且完(wan)成實驗(yan)後立(li)即上機檢測；樣(yang)本處(chu)理(li)過(guo)程中(zhong)使用的(de)器(qi)具耗(hao)材(cai)應(ying)經過(guo)無核(he)酶(mei)處(chu)理(li)。

3. 每次(ci)實驗(yan)應(ying)該(gai)設(she)置(zhi)陰(yin)、陽性(xing)對照。
4. 試劑盒所(suo)有(you)試(shi)劑在使用前(qian)應(ying)該(gai)在(zai)常(chang)溫(wen)下(xia)充分(fen)融化(hua)混勻，並應(ying)瞬(shun)時離心。
5. 試劑盒內(nei)所(suo)配(pei)陰(yin)性和(he)陽性(xing)對(dui)照在(zai)壹次(ci)使用前(qian)應(ying)全(quan)部(bu)轉移至標本準備區，並單(dan)獨(du)存放。
6. 為(wei)防(fang)止(zhi)熒(ying)光(guang)幹(gan)擾，應(ying)避免(mian)裸(luo)手直(zhi)接接觸PCR反應(ying)管，並應(ying)避免(mian)在(zai)PCR反應(ying)管上進(jin)行(xing)任何標記。
7. 儀器 擴(kuo)增相(xiang)關(guan)參數(shu)應(ying)按(an)照本說明書相關(guan)要(yao)求進(jin)行(xing)設置(zhi)；不同(tong)批號試(shi)劑不能(neng)混用。
8. ABI系列熒(ying)光(guang)定(ding)量PCR儀參數(shu)設置中(zhong)不選ROX校正，淬(cui)滅基因(yin)選擇(ze)None。
9. 實驗(yan)過(guo)程中(zhong)產品的(de)廢棄(qi)物應(ying)該(gai)進(jin)行(xing)無害(hai)化(hua)處(chu)理(li)後(hou)方可(ke)丟棄。