白頭翁(weng)染(ran)料法PCR鑒定(ding)試(shi)劑(ji)盒(he)*

儲存(cun)條件(jian)：
14℃或(huo)－20℃樣品收(shou)集、處理及保(bao)存(cun)方法
1. 血清：使用不含(han)熱原和(he)內毒(du)素的試(shi)管，操作(zuo)過程中(zhong)避(bi)免任何細(xi)胞(bao)刺(ci)激(ji)，收(shou)集血液後(hou)，3000 轉離(li)心(xin)10 分鐘將血(xue)清(qing)和(he)紅(hong)細(xi)胞(bao)迅(xun)速小心(xin)地(di)分(fen)離(li)。
2. 血漿：EDTA、檸(ning)檬酸(suan)鹽(yan)或(huo)肝素抗(kang)凝。3000 轉離(li)心(xin)30 分鐘取(qu)上清(qing)。
3. 細(xi)胞(bao)上清(qing)液(ye)：3000 轉離(li)心(xin)10 分鐘去除顆粒(li)和(he)聚合(he)物(wu)。
4. 組(zu)織勻漿：將組(zu)織加入適(shi)量生理鹽(yan)水(shui)搗(dao)碎。3000 轉離(li)心(xin)10 分鐘取(qu)上清(qing)。
5. 保存：如(ru)果樣(yang)本(ben)收(shou)集後(hou)不及時(shi)檢測，請按(an)壹次用量分裝(zhuang)，凍存(cun)於-20℃，避(bi)免反(fan)復(fu)凍融(rong)，在室(shi)溫下(xia)解凍並(bing)確保樣品均(jun)勻地(di)充(chong)分(fen)解凍。

特(te)點：
1. 即開即用，用戶只(zhi)需要提(ti)供(gong)病(bing)毒(du)樣(yang)品。
2. 根(gen)據地(di)黃保(bao)守序(xu)列(lie)設(she)計(ji)的專(zhuan)壹性引(yin)物(wu)，與相(xiang)關病(bing)毒無(wu)交(jiao)叉(cha)反(fan)應(ying)。
3. 靈敏(min)度(du)可(ke)以(yi)達(da)到(dao)幾(ji)百(bai)拷(kao)貝(bei)/反(fan)應(ying)。
4. 壹管式(shi)熒(ying)光定(ding)量 PCR 檢測，避(bi)免後(hou)續汙染(ran)。
5. 本試劑盒(he)足夠(gou) 50 次 20μL 反(fan)應(ying)體系的熒(ying)光(guang)定(ding)量 PCR。
6. 本產品只適(shi)用於科研，不能(neng)用於臨(lin)床診(zhen)斷(duan)。

使用方法：
壹、樣品采集：
1、食(shi)品樣品：樣品的采集與預(yu)培養(yang)按(an)照樣品的采集與預(yu)培養(yang)按(an)照《食(shi)品衛生微(wei)生物學(xue)檢驗(yan)阪崎腸(chang)桿(gan)菌檢驗(yan)要求(qiu)進(jin)行。
2、血液樣品：用無菌(jun)註射器(qi)抽(chou)取(qu)受檢者(zhe)靜脈血(xue)2mL，註入無菌(jun)EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬酸(suan)鈉)抗(kang)凝管，立即(ji)混(hun)勻。
3、糞便(bian)樣(yang)品：取(qu)糞便(bian)置於(yu)滅(mie)菌(jun)的收(shou)集管中(zhong)送檢。
4、病竈部位樣(yang)品：取(qu)發(fa)病(bing)部位新(xin)鮮(xian)滲出(chu)物、粘(zhan)液(ye)膿(nong)血(xue)送檢。
壹、稀(xi)釋 PCR 陽性對(dui)照(zhao)（以 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這 6 個 10 倍稀(xi)釋度(du)為(wei)例）
1. 註意(yi)：由(you)於(yu)標準品濃度(du)非常高(gao)，因此(ci)下(xia)列(lie)稀(xi)釋操作(zuo)壹定(ding)要在獨立的區域(yu)進(jin)行，千萬(wan)不能(neng)汙染(ran)樣品或(huo)本試(shi)劑(ji)盒(he)的其(qi)他(ta)成(cheng)分(fen)）。為(wei)增加(jia)產品穩定(ding)性和(he)避(bi)免擴散(san)傳染(ran)性病(bing)原(yuan)，本產品不提(ti)供(gong)活(huo)體樣品做(zuo)陽性對(dui)照(zhao)，只提(ti)供(gong)可(ke)以(yi)直(zhi)接使用的 DNA段(duan)作(zuo)為(wei)陽性對(dui)照(zhao)。
2. 標記 6 個離心管，分(fen)別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯(xin)槍頭分(fen)別加入 45 μL 熒光 PCR 模板(ban)稀(xi)釋液（用帶芯(xin)槍頭，下(xia)同）。
4. 在 7 號(hao)管中(zhong)加入 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的陽性對(dui)照(zhao)，充分震蕩(dang) 1 分鐘，得(de)1×10E7 拷貝(bei)/μL 的陽性對(dui)照(zhao)。放冰上待(dai)用。
5. 換(huan)槍頭，在(zai) 6 號(hao)管中(zhong)加入 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的陽性對(dui)照(zhao)(上步(bu)稀(xi)釋所(suo)得(de))，充分震蕩(dang) 1 分鐘，得(de) 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的陽性對(dui)照(zhao)。放冰上待(dai)用。
6. 換(huan)槍頭，在(zai) 5 號(hao)管中(zhong)加入 5 μL 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的陽性對(dui)照(zhao)到(dao) 5 號(hao)管中(zhong)，充分震蕩(dang) 1 分鐘，得(de) 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的陽性對(dui)照(zhao)。放冰上待(dai)用。
7. 重復(fu)上面(mian)的操作(zuo)直(zhi)到(dao)得(de)到(dao) 6 個稀(xi)釋度(du)的陽性對(dui)照(zhao)。放冰上待(dai)用。
註：上述(shu)樣品建(jian)議(yi)經(jing)過增菌(jun)後(hou)，收(shou)集培養(yang)物(wu)用於檢測。 
二、DNA提(ti)取(qu)：
可(ke)采用PCR試劑盒配(pei)備的DNA抽提(ti)液(ye)，按(an)以(yi)下(xia)說明進(jin)行DNA核(he)酸(suan)的粗(cu)提(ti)。也(ye)可(ke)采購(gou)上海(hai)澤(ze)葉(ye)生物(wu)科技有限(xian)公(gong)司(si)生(sheng)產的DNA提(ti)取(qu)試劑(ji)盒(過柱法-熒光配(pei)套)或(huo)其(qi)他(ta)合(he)適(shi)的商(shang)業化產品，並(bing)按(an)照相(xiang)應(ying)試(shi)劑(ji)盒說明進(jin)行操作(zuo)。
1、液體培養(yang)物(wu)：取(qu)液體培養(yang)物(wu)100μL加到(dao)1.5mL無菌離心(xin)管中(zhong)，8000rpm離心3min，盡(jin)量吸(xi)棄上清(qing)，加(jia)入50μL DNA抽提(ti)液(ye)充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取(qu)上清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
2、固(gu)體培養(yang)物(wu)：挑(tiao)取(qu)單克(ke)隆(long)菌(jun)落(luo)與50μL DNA抽提(ti)液(ye)充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取(qu)上清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
3、糞便(bian)樣(yang)品：挑(tiao)取(qu)米粒(li)大(da)小糞便(bian)於(yu)滅菌離心(xin)管中(zhong)，加入0.5mL生理鹽(yan)水(shui)，振(zhen)蕩(dang)混勻(yun)，13000rpm離心3分鐘，棄上清(qing)，沈澱(dian)中加(jia)入50μL DNA抽提(ti)液(ye)充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取(qu)上清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
4、其(qi)他(ta)液(ye)體標本：取(qu)標本2-3mL，13000rpm離心3min，棄上清(qing)，沈澱(dian)中加(jia)入50μL DNA抽提(ti)液(ye)充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取(qu)上清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
註：陽性對(dui)照(zhao)和陰(yin)性對(dui)照(zhao)為(wei)已(yi)經(jing)抽提(ti)好(hao)的核(he)酸(suan)(無需提(ti)取(qu))，直(zhi)接取(qu)5μL加入到(dao)反(fan)應(ying)體系中即可(ke)。由(you)於(yu)陽性對(dui)照(zhao)濃度(du)較高(gao)，建(jian)議(yi)在樣品制備區域(yu)加(jia)入陽性對(dui)照(zhao)。 
人胃(wei)腺癌(ai)細(xi)胞(bao);BGC-823硫代硫酸鉀(jia)(>98%,BR)Potassium thiosulfate質(zhi)量規格：>98%,BR

IL1R1 Others Cymolgus 食(shi)蟹猴(hou) IL1R1 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照(zhao)) 草酸(suan)鈦(tai)鉀(jia)二水(shui)(>98%,BC)Potassium titanyl oxalate ,dehydrate質(zhi)量規格：>98%,BC

CM-H130人視(shi)網膜微(wei)血管內皮細(xi)胞(bao)*培養(yang)基(ji)100mL對苯二(>98%,BR)p-Phthaldehyde質(zhi)量規格：>98%,BR

MKN-28細(xi)胞(bao)，人(ren)胃(wei)癌(ai)細(xi)胞(bao) 人骨肉(rou)瘤(liu)細(xi)胞(bao),U-2 OS細(xi)胞(bao) 幼(you)蚊細(xi)胞(bao);C6/36丙基(ji)紅(hong)(>80%,Ind Grade)Propyl red質(zhi)量規格：>80%,Ind Grade

DLD-1(人結(jie)腸(chang)腺癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2吡唑(zuo)(>98%，BR)Pyrazole質(zhi)量規格：>98%，BR
大鼠肝細(xi)胞(bao);BRL 3A氯(lv)替(ti)潑(po)諾(nuo)(標準品)質(zhi)量規格：HPLC>99.0%,標準品Lotepredl Etabonate

人腦(nao)血(xue)管周細(xi)胞(bao) (HBVP) ( 5×105 )質(zhi)量規格：>99%,BR,可(ke)用於細(xi)胞(bao)培養(yang)Lovastatin,Monacolin K

肺大動脈(mai)內皮細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105方(1ml)鹽(yan)酸(suan)羅沙替(ti)丁醋(cu)酸酯質(zhi)量規格：>98%Roxatidine acetate HCl

人肝癌細(xi)胞(bao);SMMC-7721 大鼠小腸(chang)平滑肌細(xi)胞(bao)*培養(yang)基(ji) 100mL酸質(zhi)量規格：>98%Pemetrexed

CBRH-7919 大鼠肝癌(ai)細(xi)胞(bao)酸(suan)(標準品)質(zhi)量規格：HPLC≥98%,標準品Pemetrexed
HA Others H7N9 甲型流感(gan) H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照(zhao)) N-三苯甲基(ji)羧(suo)酸洛(luo)沙坦質(zhi)量規格：美(mei)國(guo)進(jin)口N-Trityl Losartan Carboxylic Acid

CL-0270CRT(人神經(jing)膠(jiao)質(zhi)瘤(liu)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2O-乙酰洛(luo)沙坦質(zhi)量規格：美(mei)國(guo)進(jin)口O-Acetyl Losartan

KB-C1.5細(xi)胞(bao)，細(xi)胞(bao) 人T瘤(liu)轉基(ji)因細(xi)胞(bao),Jurkat D,E細(xi)胞(bao) 人喉(hou)癌上皮細(xi)胞(bao);Hep-2洛(luo)沙坦N2-葡萄糖苷(gan)酸質(zhi)量規格：美(mei)國(guo)進(jin)口Losartan N2-Glucuronide

769-P(人腎細(xi)胞(bao)腺癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2洛(luo)沙坦質(zhi)量規格：美(mei)國(guo)進(jin)口Losartan

ACVRL1 Others Rat 大鼠 ALK-1 / ACVRL1 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照(zhao)) 洛(luo)匹(pi)那(na)韋(wei)代(dai)謝(xie)產物M-3/M-4質(zhi)量規格：美(mei)國(guo)進(jin)口Lopinavir Metabolite M-3/M-4
白頭翁(weng)染(ran)料法PCR鑒定(ding)試(shi)劑(ji)盒(he)*MIApaca-2細(xi)胞(bao)，人(ren)胰(yi)腺癌(ai)細(xi)胞(bao) 人成纖(xian)維肉(rou)瘤(liu)細(xi)胞(bao),HT1080細(xi)胞(bao) 615小鼠肺癌(ai)瘤(liu)株;HP615DCCIN，N-二環己基(ji)碳1克AR，99%

HuH-6(人肝母(mu)細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2流醋(cu)鈰(shi);流醋(cu)鈰(shi)銨 CqRIUM(IV) SULFcTq TqTRcHYDRcTq 1094-4-2

Promocell C-22010 Endothelial Cell Growth Medium, 內皮細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)培養(yang)基(ji)(即用型) 500ml2,5-二本惡唑(zuo)shēng huà shì jì容量：500毫(hao)
實(shi)驗流程：
1. 整個檢測過程應(ying)嚴格(ge)按(an)照本(ben)說明書(shu)要求(qiu)分別(bie)在(zai)試(shi)劑準備區、樣本(ben)處理區和PCR擴增區進(jin)行操作(zuo)，各(ge)區實(shi)驗服、儀(yi)器(qi) 、耗材應(ying)獨立使用，不能(neng)混(hun)用；實(shi)驗用吸(xi)頭采用帶濾(lv)芯(xin)吸(xi)頭；樣(yang)本處理區應(ying)配(pei)有生(sheng)物安(an)全(quan)櫃，樣(yang)本處理在生(sheng)物安(an)全(quan)櫃中(zhong)進(jin)行操作(zuo)；三個區應(ying)該(gai)配(pei)有紫(zi)外線殺菌裝(zhuang)置。
2. 為(wei)避(bi)免RNA降(jiang)解，樣本處(chu)理過程應(ying)在(zai)0-4℃條件(jian)下(xia)操作(zuo)，且(qie)完成實(shi)驗後(hou)立即(ji)上機(ji)檢測；樣本(ben)處理過程中(zhong)使用的器(qi)具(ju)耗(hao)材應(ying)經(jing)過無核(he)酶(mei)處理。

3. 每次實(shi)驗應(ying)該(gai)設(she)置陰(yin)、陽性對(dui)照(zhao)。
4. 試劑盒所(suo)有(you)試(shi)劑(ji)在(zai)使用前(qian)應(ying)該(gai)在(zai)常(chang)溫下(xia)充(chong)分(fen)融(rong)化(hua)混勻，並(bing)應(ying)瞬時離心(xin)。
5. 試劑盒內所(suo)配(pei)陰(yin)性和(he)陽性對(dui)照(zhao)在壹次使用前(qian)應(ying)全(quan)部轉移(yi)至標本準(zhun)備區，並(bing)單(dan)獨存(cun)放。
6. 為(wei)防(fang)止(zhi)熒(ying)光幹(gan)擾，應(ying)避(bi)免裸手直(zhi)接接觸(chu)PCR反(fan)應(ying)管，並(bing)應(ying)避(bi)免在PCR反(fan)應(ying)管上進(jin)行任何標記。
7. 儀(yi)器(qi) 擴增相(xiang)關參數應(ying)按(an)照(zhao)本說明書(shu)相(xiang)關要求(qiu)進(jin)行設(she)置；不同批號(hao)試(shi)劑(ji)不能(neng)混(hun)用。
8. ABI系列(lie)熒(ying)光定(ding)量PCR儀(yi)參數設(she)置中(zhong)不選(xuan)ROX校(xiao)正(zheng)，淬滅基(ji)因選(xuan)擇(ze)None。
9. 實(shi)驗過程中(zhong)產品的廢(fei)棄(qi)物(wu)應(ying)該(gai)進(jin)行無害化處理後(hou)方可(ke)丟(diu)棄(qi)。