槐角PCR鑒(jian)定(ding)試劑(ji)盒直(zhi)銷

儲(chu)存(cun)條(tiao)件(jian)：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品(pin)收(shou)集(ji)、處(chu)理及(ji)保(bao)存(cun)方法
1. 血清：使(shi)用不含(han)熱(re)原和(he)內毒(du)素的試管，操(cao)作過程(cheng)中避(bi)免任何細胞刺激，收(shou)集(ji)血液後，3000 轉(zhuan)離心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)將血清和(he)紅細(xi)胞迅速(su)小(xiao)心(xin)地分(fen)離。
2. 血漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬酸(suan)鹽(yan)或肝素抗凝。3000 轉(zhuan)離心(xin)30 分(fen)鐘(zhong)取上(shang)清(qing)。
3. 細(xi)胞上清(qing)液(ye)：3000 轉(zhuan)離心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)去除(chu)顆(ke)粒和(he)聚合(he)物(wu)。
4. 組(zu)織勻(yun)漿(jiang)：將組(zu)織加入(ru)適(shi)量(liang)生(sheng)理鹽水搗碎。3000 轉(zhuan)離心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)取上(shang)清(qing)。
5. 保(bao)存(cun)：如果(guo)樣(yang)本(ben)收(shou)集(ji)後不(bu)及(ji)時檢(jian)測(ce)，請(qing)按(an)壹次(ci)用量分(fen)裝，凍(dong)存(cun)於-20℃，避(bi)免反復(fu)凍融(rong)，在(zai)室溫(wen)下解(jie)凍並確保(bao)樣(yang)品(pin)均(jun)勻(yun)地充(chong)分(fen)解凍(dong)。

特(te)點：
1. 即(ji)開即(ji)用，用戶只(zhi)需(xu)要提(ti)供(gong)病毒樣(yang)品(pin)。
2. 根(gen)據地黃(huang)保(bao)守(shou)序列(lie)設(she)計的(de)專(zhuan)壹(yi)性引物(wu)，與(yu)相關(guan)病(bing)毒無交(jiao)叉反應(ying)。
3. 靈(ling)敏(min)度可(ke)以達(da)到幾百(bai)拷(kao)貝/反應(ying)。
4. 壹(yi)管式(shi)熒光定(ding)量(liang) PCR 檢(jian)測(ce)，避(bi)免後續(xu)汙(wu)染(ran)。
5. 本(ben)試劑(ji)盒足(zu)夠 50 次(ci) 20μL 反應(ying)體系(xi)的(de)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR。
6. 本(ben)產品(pin)只(zhi)適(shi)用於科研，不能(neng)用於臨(lin)床診斷(duan)。

使(shi)用方法：
壹(yi)、樣(yang)品(pin)采(cai)集(ji)：
1、食(shi)品樣(yang)品(pin)：樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集(ji)與預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照(zhao)樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集(ji)與預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照(zhao)《食(shi)品衛生(sheng)微生(sheng)物(wu)學(xue)檢(jian)驗阪崎(qi)腸桿(gan)菌檢(jian)驗(yan)要求(qiu)進(jin)行(xing)。
2、血液樣(yang)品(pin)：用無菌(jun)註射(she)器(qi)抽(chou)取受(shou)檢者靜(jing)脈血2mL，註(zhu)入(ru)無菌(jun)EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬酸(suan)鈉(na))抗(kang)凝管(guan)，立(li)即混(hun)勻(yun)。
3、糞(fen)便樣(yang)品(pin)：取糞(fen)便置於滅菌的(de)收(shou)集(ji)管中(zhong)送(song)檢(jian)。
4、病(bing)竈部位(wei)樣(yang)品(pin)：取發(fa)病部位(wei)新(xin)鮮(xian)滲(shen)出(chu)物(wu)、粘(zhan)液(ye)膿(nong)血送檢。
壹(yi)、稀釋 PCR 陽(yang)性對照(zhao)（以 10E2-10E7 拷(kao)貝/μL 這(zhe) 6 個 10 倍稀釋度為例(li)）
1. 註(zhu)意：由於標(biao)準(zhun)品濃(nong)度非(fei)常(chang)高(gao)，因此(ci)下列(lie)稀釋操(cao)作壹定(ding)要在(zai)獨(du)立(li)的區域(yu)進行(xing)，千萬不能(neng)汙(wu)染(ran)樣(yang)品(pin)或(huo)本(ben)試劑(ji)盒的(de)其(qi)他成(cheng)分(fen)）。為增(zeng)加產(chan)品(pin)穩(wen)定(ding)性和(he)避(bi)免擴(kuo)散(san)傳(chuan)染(ran)性病原，本產(chan)品不提供(gong)活體樣(yang)品(pin)做陽性對照(zhao)，只(zhi)提(ti)供(gong)可(ke)以直(zhi)接(jie)使(shi)用的 DNA段作為陽(yang)性對照(zhao)。
2. 標(biao)記(ji) 6 個離心(xin)管(guan)，分(fen)別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯(xin)槍頭分(fen)別加入(ru) 45 μL 熒(ying)光 PCR 模板(ban)稀釋液（用帶芯(xin)槍頭，下同(tong)）。
4. 在(zai) 7 號(hao)管中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對照(zhao)，充(chong)分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對照(zhao)。放(fang)冰上待用。
5. 換(huan)槍頭，在(zai) 6 號(hao)管中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對照(zhao)(上(shang)步(bu)稀釋所得(de))，充(chong)分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對照(zhao)。放(fang)冰上待用。
6. 換(huan)槍頭，在(zai) 5 號(hao)管中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對照(zhao)到 5 號(hao)管中(zhong)，充(chong)分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對照(zhao)。放(fang)冰上待用。
7. 重(zhong)復(fu)上面(mian)的操(cao)作直到得(de)到 6 個稀釋度的陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰上待用。
註(zhu)：上述樣(yang)品(pin)建(jian)議(yi)經(jing)過(guo)增(zeng)菌(jun)後，收(shou)集(ji)培養(yang)物(wu)用於檢測(ce)。 
二、DNA提(ti)取：
可(ke)采(cai)用PCR試劑(ji)盒配(pei)備的DNA抽(chou)提液(ye)，按(an)以下說明進(jin)行(xing)DNA核(he)酸(suan)的(de)粗(cu)提(ti)。也(ye)可(ke)采(cai)購上(shang)海(hai)澤葉(ye)生(sheng)物(wu)科技有(you)限(xian)公(gong)司生(sheng)產(chan)的(de)DNA提(ti)取試劑(ji)盒(過(guo)柱法-熒(ying)光配(pei)套)或(huo)其(qi)他合(he)適(shi)的(de)商(shang)業(ye)化產品，並按(an)照(zhao)相應(ying)試劑(ji)盒說明進(jin)行(xing)操(cao)作。
1、液(ye)體培(pei)養物(wu)：取液(ye)體(ti)培養(yang)物(wu)100μL加到1.5mL無菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)，8000rpm離心(xin)3min，盡量(liang)吸棄(qi)上清(qing)，加入(ru)50μL DNA抽(chou)提液(ye)充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心(xin)3min，取上(shang)清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反應(ying)。
2、固(gu)體培(pei)養物(wu)：挑取單(dan)克(ke)隆菌(jun)落與(yu)50μL DNA抽(chou)提液(ye)充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心(xin)3min，取上(shang)清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反應(ying)。
3、糞(fen)便樣(yang)品(pin)：挑取米(mi)粒大小糞(fen)便於滅菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，加入(ru)0.5mL生(sheng)理鹽水，振蕩(dang)混(hun)勻(yun)，13000rpm離心(xin)3分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上清(qing)，沈澱中加入(ru)50μL DNA抽(chou)提液(ye)充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心(xin)3min取上(shang)清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反應(ying)。
4、其(qi)他液(ye)體(ti)標(biao)本(ben)：取標(biao)本(ben)2-3mL，13000rpm離心(xin)3min，棄(qi)上清(qing)，沈澱中加入(ru)50μL DNA抽(chou)提液(ye)充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心(xin)3min取上(shang)清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反應(ying)。
註(zhu)：陽性對照(zhao)和(he)陰(yin)性對照(zhao)為(wei)已(yi)經(jing)抽(chou)提(ti)好的核(he)酸(suan)(無需(xu)提取)，直(zhi)接取5μL加入(ru)到反應(ying)體系(xi)中(zhong)即(ji)可(ke)。由於陽性對照(zhao)濃(nong)度較高，建(jian)議(yi)在(zai)樣(yang)品(pin)制(zhi)備區域(yu)加入(ru)陽性對照(zhao)。 
2. 皮(pi)膚細(xi)胞系(xi)統(tong)三(san)糖Melezitose hydrate質量(liang)規格：>98%,進(jin)分(fen)

U251人(ren)膠(jiao)質瘤細(xi)胞聚乙(yi)二醇(chun)20000PEG 20000質量(liang)規格：BR

人(ren)結(jie)直(zhi)腸(chang)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞;COLO 205 大鼠腎(shen)動(dong)脈(mai)平(ping)滑肌細胞*培養(yang)基(ji) 100mL2-氨(an)基(ji)噻唑(zuo)(>98%，BR)2-Amithiazole質量(liang)規格：>98%，BR

MLA144 MLA144長臂猿(yuan)瘤細(xi)胞氯化鈰七水Cerium (III) chloride, heptahydrate質量(liang)規格：>99.9%

CHI3L2 Others Human 人(ren) CHI3L2 / YKL-39 人(ren)細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對照(zhao)) D-阿拉伯(bo)糖醇(chun)(標(biao)準(zhun)品)D(+)-Arabitol質量(liang)規格：分(fen)析(xi)標(biao)準(zhun)品
PRKD3 Others Human 人(ren) PKC nu / PRKD3 桿(gan)狀病(bing)毒(du)-昆蟲(chong)細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對照(zhao)) 地塞(sai)米(mi)1酸(suan)鈉(na)（標(biao)準(zhun)品）Dexamethasone  Phosphate質量(liang)規格：HPLC>98%,標(biao)準(zhun)品

小(xiao)鼠B細(xi)胞雜(za)交(jiao)瘤細(xi)胞;SH3D-蛋(dan)氨酸(suan)D-Mine質量(liang)規格：>98%,BR

RSC96細(xi)胞，大鼠雪(xue)旺細胞 人(ren)肝(gan)癌(ai)細(xi)胞,9204細(xi)胞 CL-0136L6(大鼠成(cheng)肌細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2索(suo)非(fei)布韋(wei)Sofosbuvir (GS-7977)質量(liang)規格：>99%,BR

中(zhong)國倉鼠肺細胞;R 1610 [R1610]D-鹽(yan)酸(suan)鹽(yan)D-Ornithine mo質量(liang)規格：>98%,BR

ACVR2B Others Mouse 小(xiao)鼠 ACVR2B 人(ren)細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對照(zhao)) D-苯叔丁酯鹽酸(suan)鹽(yan)H-D-Phe-OtBu.HCI質量(liang)規格：0.98
YAC-1細(xi)胞，瘤細(xi)胞 人(ren)結(jie)腸(chang)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞,HT-29細(xi)胞 CM-H021人(ren)前列(lie)腺(xian)平滑肌細胞*培養(yang)基(ji)100mL甾醇(chun)；(標(biao)準(zhun)品)質量(liang)規格：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品Ergosterol

大鼠嗜(shi)堿(jian)性粒細胞性白血病細胞;RBL-1甾醇(chun)(90%)質量(liang)規格：>90%,BRErgosterol

GFRA1 Others Mouse 小(xiao)鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人(ren)細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對照(zhao)) 蔓(man)荊子(zi)黃(huang)素（標(biao)準(zhun)品）質量(liang)規格：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品Vitexicarpin

雪(xue)旺氏細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(1ml)芒(mang)果苷(gan)(標(biao)準(zhun)品)質量(liang)規格：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品Mangiferin

ICAM1 Others Rat 大鼠 ICAM1 / CD54 人(ren)細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對照(zhao)) 嗎(ma)替麥(mai)考(kao)酚酯-d4質量(liang)規格：美(mei)國進(jin)口(kou)Mycophelate Mofetil-d4
槐(huai)角PCR鑒(jian)定(ding)試劑(ji)盒直(zhi)銷ECM1 Others Mouse 小(xiao)鼠 ECM1 人(ren)細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對照(zhao)) L-α-基(ji)-β-羥(qiang)基(ji)，英文(wen)名或英文(wen)縮寫：L-Threonine，級別(bie)：BR，99%，規格：10克(ke)

人(ren)色(se)素瘤細(xi)胞;A875BOC-L-天門冬(dong)酸(suan)β... Boc-Asp(OBzl)-OH (HPLC,≥99.0) 7536-58-5 5G 通(tong)用試劑(ji)

IL18RAP Others Cymolgus 食(shi)蟹猴(hou) IL18RAP 人(ren)細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對照(zhao)) 流(liu)醋亞(ya)鐵(tie)銨;馬(ma)爾(er)氏鹽(yan);低鐵礬;亞(ya)鐵(tie)銨礬;流(liu)醋低鐵銨(an);六(liu)水合(he)流(liu)醋亞(ya)鐵(tie)銨;流(liu)醋亞(ya)鐵(tie)銨;六(liu)
實驗流程(cheng)：
1. 整(zheng)個檢測(ce)過程(cheng)應(ying)嚴(yan)格按(an)照(zhao)本(ben)說明書要求(qiu)分(fen)別在(zai)試劑(ji)準(zhun)備區、樣(yang)本(ben)處(chu)理區和(he)PCR擴(kuo)增(zeng)區進行(xing)操(cao)作，各(ge)區實驗服(fu)、儀器(qi) 、耗(hao)材應(ying)獨立(li)使(shi)用，不能(neng)混(hun)用；實驗用吸頭采(cai)用帶濾芯(xin)吸頭；樣(yang)本(ben)處(chu)理區應(ying)配有(you)生(sheng)物(wu)安(an)全櫃(gui)，樣(yang)本(ben)處(chu)理在生(sheng)物(wu)安(an)全櫃(gui)中(zhong)進行(xing)操(cao)作；三(san)個區應(ying)該(gai)配(pei)有(you)紫外線殺菌裝(zhuang)置。
2. 為(wei)避(bi)免RNA降(jiang)解，樣(yang)本(ben)處(chu)理過程(cheng)應(ying)在0-4℃條(tiao)件(jian)下操(cao)作，且(qie)完(wan)成(cheng)實驗後立(li)即上(shang)機(ji)檢(jian)測(ce)；樣(yang)本(ben)處(chu)理過程(cheng)中使(shi)用的器(qi)具(ju)耗材應(ying)經過無核(he)酶處(chu)理。

3. 每次(ci)實驗應(ying)該(gai)設(she)置陰(yin)、陽(yang)性對照(zhao)。
4. 試劑(ji)盒所(suo)有(you)試劑(ji)在使(shi)用前應(ying)該(gai)在(zai)常(chang)溫(wen)下充(chong)分(fen)融(rong)化混(hun)勻(yun)，並應(ying)瞬時離心(xin)。
5. 試劑(ji)盒內(nei)所配(pei)陰(yin)性和(he)陽性對照(zhao)在(zai)壹次使(shi)用前應(ying)全部轉(zhuan)移(yi)至標(biao)本(ben)準(zhun)備區，並單獨(du)存(cun)放(fang)。
6. 為(wei)防(fang)止(zhi)熒(ying)光(guang)幹擾，應(ying)避(bi)免裸(luo)手(shou)直接接(jie)觸PCR反應(ying)管，並應(ying)避(bi)免在PCR反應(ying)管上進(jin)行(xing)任何標(biao)記(ji)。
7. 儀(yi)器 擴(kuo)增(zeng)相關(guan)參(can)數(shu)應(ying)按(an)照(zhao)本(ben)說明書相關(guan)要求(qiu)進(jin)行(xing)設置；不同(tong)批(pi)號試劑(ji)不能(neng)混(hun)用。
8. ABI系(xi)列(lie)熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR儀(yi)參數(shu)設置中不(bu)選ROX校(xiao)正，淬(cui)滅基(ji)因選擇None。
9. 實驗過程(cheng)中產品的廢(fei)棄(qi)物(wu)應(ying)該(gai)進(jin)行(xing)無害(hai)化處(chu)理後方可(ke)丟(diu)棄(qi)。