地(di)黃(huang)PCR鑒定(ding)試劑盒(he)直(zhi)銷

儲(chu)存條(tiao)件：
14℃或－20℃樣(yang)品(pin)收集、處理(li)及保存方(fang)法
1. 血清：使用(yong)不(bu)含熱原(yuan)和內(nei)毒(du)素(su)的(de)試管(guan)，操作過(guo)程中(zhong)避免(mian)任(ren)何(he)細(xi)胞刺激(ji)，收集血液後，3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)將血清和紅細(xi)胞迅速小心地(di)分(fen)離(li)。
2. 血漿：EDTA、檸(ning)檬(meng)酸鹽或肝素(su)抗(kang)凝。3000 轉離(li)心30 分(fen)鐘(zhong)取上(shang)清。
3. 細(xi)胞上(shang)清液：3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)去除顆(ke)粒(li)和聚合(he)物(wu)。
4. 組織(zhi)勻(yun)漿(jiang)：將組織(zhi)加(jia)入(ru)適量(liang)生(sheng)理(li)鹽水(shui)搗(dao)碎(sui)。3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)取上(shang)清。
5. 保存：如(ru)果(guo)樣(yang)本(ben)收集後不(bu)及時(shi)檢(jian)測(ce)，請按壹次(ci)用量(liang)分(fen)裝，凍(dong)存(cun)於-20℃，避免(mian)反復(fu)凍融(rong)，在(zai)室(shi)溫(wen)下(xia)解凍(dong)並確(que)保樣(yang)品(pin)均(jun)勻(yun)地(di)充(chong)分(fen)解(jie)凍。

特點：
1. 即(ji)開(kai)即(ji)用(yong)，用戶只(zhi)需(xu)要提供病毒(du)樣(yang)品(pin)。
2. 根(gen)據地(di)黃保守序(xu)列設(she)計(ji)的(de)專(zhuan)壹性引物(wu)，與(yu)相關(guan)病毒(du)無交叉反應(ying)。
3. 靈敏度(du)可(ke)以達到幾(ji)百(bai)拷(kao)貝/反應。
4. 壹管式(shi)熒光定(ding)量(liang) PCR 檢(jian)測(ce)，避免(mian)後續汙染(ran)。
5. 本(ben)試(shi)劑盒(he)足夠(gou) 50 次(ci) 20μL 反應體(ti)系(xi)的(de)熒光定(ding)量(liang) PCR。
6. 本(ben)產(chan)品(pin)只(zhi)適用(yong)於科(ke)研(yan)，不(bu)能用於(yu)臨(lin)床診斷。

使用(yong)方(fang)法：
壹、樣(yang)品(pin)采集：
1、食品(pin)樣(yang)品(pin)：樣(yang)品(pin)的(de)采集與(yu)預培(pei)養按(an)照(zhao)樣(yang)品(pin)的(de)采集與(yu)預培(pei)養按(an)照(zhao)《食(shi)品(pin)衛生(sheng)微生(sheng)物(wu)學檢(jian)驗阪(ban)崎(qi)腸桿(gan)菌(jun)檢(jian)驗要求進(jin)行。
2、血液樣(yang)品(pin)：用無(wu)菌(jun)註射(she)器(qi)抽(chou)取受檢(jian)者(zhe)靜脈血2mL，註入(ru)無(wu)菌(jun)EDTA2Na(或檸(ning)檬(meng)酸鈉)抗凝管，立(li)即(ji)混(hun)勻(yun)。
3、糞便(bian)樣(yang)品(pin)：取糞便(bian)置(zhi)於(yu)滅(mie)菌(jun)的(de)收集管中(zhong)送(song)檢(jian)。
4、病竈部位樣(yang)品(pin)：取發病部位新鮮(xian)滲(shen)出(chu)物(wu)、粘液膿(nong)血送檢(jian)。
壹、稀釋(shi) PCR 陽性對(dui)照(zhao)（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這(zhe) 6 個 10 倍稀(xi)釋(shi)度為(wei)例）
1. 註意(yi)：由(you)於標(biao)準(zhun)品(pin)濃度(du)非常(chang)高(gao)，因此(ci)下(xia)列稀(xi)釋(shi)操作壹定要在獨(du)立的(de)區(qu)域(yu)進(jin)行(xing)，千(qian)萬不(bu)能汙染(ran)樣(yang)品(pin)或本(ben)試(shi)劑盒(he)的(de)其他(ta)成(cheng)分(fen)）。為(wei)增加產品(pin)穩定(ding)性和避免(mian)擴散(san)傳(chuan)染性病原，本(ben)產(chan)品(pin)不(bu)提供活體(ti)樣(yang)品(pin)做陽(yang)性對(dui)照(zhao)，只(zhi)提供可以直接(jie)使用(yong)的(de) DNA段作為(wei)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。
2. 標(biao)記 6 個離(li)心管(guan)，分(fen)別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分(fen)別(bie)加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋(shi)液（用帶芯槍頭，下(xia)同）。
4. 在 7 號管中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的(de)陽性對(dui)照(zhao)，充(chong)分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得1×10E7 拷貝/μL 的(de)陽性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的(de)陽性對(dui)照(zhao)(上(shang)步稀(xi)釋所(suo)得(de))，充分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得 1×10E6 拷貝/μL 的(de)陽性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用。
6. 換槍頭，在 5 號管中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的(de)陽性對(dui)照(zhao)到(dao) 5 號管中(zhong)，充(chong)分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得 1×10E5 拷貝/μL 的(de)陽性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用。
7. 重(zhong)復(fu)上(shang)面(mian)的(de)操作直(zhi)到得(de)到(dao) 6 個稀(xi)釋度的(de)陽性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用。
註：上(shang)述(shu)樣(yang)品(pin)建(jian)議經過增(zeng)菌(jun)後(hou)，收集培養物(wu)用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)。 
二、DNA提取：
可采用PCR試劑盒(he)配(pei)備(bei)的(de)DNA抽提液，按以下(xia)說(shuo)明(ming)進(jin)行DNA核酸的(de)粗提。也可(ke)采購上(shang)海(hai)澤(ze)葉生(sheng)物(wu)科(ke)技有(you)限(xian)公(gong)司(si)生(sheng)產的(de)DNA提取試劑盒(he)(過柱法-熒光配(pei)套(tao))或其他(ta)合(he)適的(de)商業化(hua)產品(pin)，並按(an)照(zhao)相(xiang)應(ying)試劑盒(he)說(shuo)明(ming)進(jin)行操作。
1、液體培養物(wu)：取液體培養物(wu)100μL加到1.5mL無菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，8000rpm離(li)心3min，盡量(liang)吸(xi)棄上(shang)清，加(jia)入50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min，取上(shang)清5μL進行PCR反應。
2、固體培(pei)養物(wu)：挑(tiao)取單(dan)克(ke)隆(long)菌(jun)落(luo)與(yu)50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min，取上(shang)清5μL進行PCR反應。
3、糞便(bian)樣(yang)品(pin)：挑(tiao)取米粒大(da)小糞便(bian)於滅(mie)菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，加(jia)入0.5mL生(sheng)理(li)鹽水(shui)，振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)，13000rpm離(li)心3分(fen)鐘(zhong)，棄上(shang)清，沈(chen)澱(dian)中(zhong)加(jia)入50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min取上(shang)清5μL進行PCR反應。
4、其他液體標(biao)本(ben)：取標(biao)本(ben)2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄上(shang)清，沈(chen)澱(dian)中(zhong)加(jia)入50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min取上(shang)清5μL進行PCR反應。
註：陽(yang)性對(dui)照(zhao)和陰性對(dui)照(zhao)為(wei)已(yi)經抽提好的(de)核酸(suan)(無需(xu)提取)，直接(jie)取5μL加入到(dao)反(fan)應(ying)體系(xi)中(zhong)即(ji)可(ke)。由(you)於陽性對(dui)照(zhao)濃(nong)度(du)較(jiao)高(gao)，建(jian)議在樣(yang)品(pin)制(zhi)備區(qu)域(yu)加(jia)入(ru)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。 
CD1D & B2M Others Human 人 CD1D & B2M Heterodimer 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照(zhao)) 1酸鋅四(si)水(shui)(>98%,BR)Zinc phosphate tetrahydrate質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98%,BR

非洲(zhou)綠(lv)猴(hou)腎細(xi)胞系(xi)/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3硫化鋅(xin)(>98%, Ind Grade)Zinc sulfide質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98%, Ind Grade

大鼠(shu)癌細(xi)胞;SHZ-88 肝癌(ai)細(xi)胞，BEL-7405細(xi)胞 MEF細(xi)胞，早代小鼠(shu)胚胎成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞氧化(hua)鋯(gao)(>98%,BC)Zirconium (IV) oxide質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98%,BC

MG-63, 人骨肉(rou)瘤(liu)細(xi)胞 Human氯氧化(hua)鋯(gao)八水(shui)(>98%,BC)Zirconium (IV) oxide chloride octahydrate質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98%,BC

CEACAM5 Others Human 人 CEACAM5 / CD66e 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照(zhao)) 氫(qing)氧化(hua)鋯(gao)Zirconium hydroxide hydrate質(zhi)量(liang)規(gui)格：BR
PGC Others Rat 大鼠(shu) Pepsigen C / PGC 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照(zhao)) 苯(ben)磺酸鈉(>98%，BR)質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98%，BR benzenesulfonate

B16瘤 色(se)素(su)瘤(liu)過(guo)氧化(hua)物(wu)歧(qi)化(hua)酶(SOD)質(zhi)量(liang)規(gui)格：比活度(du)：>5000 U/mg,BCSuperoxide dismutase from Bovine Erythrocytes(SOD)

A549-EGFP-puro(慢(man)病毒(du)構建(jian)穩(wen)定株)人肺癌(ai)細(xi)胞 A549-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human lung cancer cells F-12K+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin鹽酸(標(biao)準(zhun)品(pin))質(zhi)量(liang)規(gui)格：>800μg/mg,含量(liang)測(ce)定Clindamycin HCl

GDNF Protein Rat 重(zhong)組(zu)大鼠(shu) GDNF 蛋白 (His 標(biao)簽(qian))質(zhi)量(liang)規(gui)格：>99%,USP32,BR,可用於(yu)細(xi)胞培養Verapamil HCl

人腎系(xi)膜(mo)細(xi)胞 (HRMC)(1×106 ) 細(xi)胞名(ming)稱(cheng) 種屬（標(biao)準(zhun)品(pin)）質(zhi)量(liang)規(gui)格：HPLC>98%,標(biao)準(zhun)品(pin)Verapamil HCl
HA Others H5N1 甲(jia)型(xing)流(liu)感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素(su)HA1 (Hemagglutinin) 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照(zhao)) 鹽酸鹽質(zhi)量(liang)規(gui)格：含量(liang)大於(yu)98.5%rfloxacin HCl

(含10mL 酶解緩(huan)沖液) 1mL鹽酸鹽（標(biao)準(zhun)品(pin)）質(zhi)量(liang)規(gui)格：HPLC>98%,標(biao)準(zhun)品(pin)rfloxacin HCl

U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7](慢(man)病毒(du)構建(jian)穩(wen)定株)人腦神經膠質(zhi)瘤細(xi)胞 U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7] (leiviral consuct stable sain) of human brain glioma cells 1640+10%Hyclone 滅活血清+2μg/ml puromycin丙(bing)谷二肽(tai),L-丙(bing)-谷二肽(tai),力(li)肽(tai)質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98%,BRAla-Gln

IL21 Protein Rat 重(zhong)組(zu)大鼠(shu) IL21 / Ierleukin 21 蛋白 (His 標(biao)簽(qian))L-甲(jia)酯(zhi)二(er)鹽酸質(zhi)量(liang)規(gui)格：>99%,BRH-Arg-OMe·2HCl

人表皮角質(zhi)細(xi)胞-新生(sheng)兒(HEK-n)( 5×105 ) 細(xi)胞名(ming)稱(cheng) 種屬D-丙(bing)氨(an)酰胺(an)鹽酸鹽質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98%,BRD-Alaninamide
地黃PCR鑒定試(shi)劑(ji)盒(he)直(zhi)銷KM小鼠(shu)未分(fen)化(hua)神經膠質(zhi)瘤瘤株(zhu);B222',3'-雙脫氧腺(xian)苷(gan)(ddA)質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98%,BRDideoxyadesine

ZR-75-30細(xi)胞，癌細(xi)胞 人食管(guan)癌(ai)細(xi)胞,TE-11細(xi)胞 中(zhong)國(guo)倉鼠(shu)卵巢(chao)細(xi)胞K1(亞系(xi)克(ke)隆(long));CHO-K1質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98.5%,ARXylitol

小鼠(shu)誘導性多(duo)潛能(neng)幹(gan)細(xi)胞;PUMC-mips-B6(標(biao)準(zhun)品(pin))質(zhi)量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)Xylitol

ERBB2 Others Human 人 ErbB2 / HER2 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照(zhao)) 2',3'-二脫氧(yang)胸(xiong)苷(gan)
實(shi)驗流(liu)程(cheng)：
1. 整(zheng)個檢(jian)測(ce)過程應(ying)嚴(yan)格按照(zhao)本(ben)說(shuo)明(ming)書(shu)要求分(fen)別(bie)在試劑準(zhun)備(bei)區(qu)、樣(yang)本(ben)處理(li)區(qu)和PCR擴增區(qu)進(jin)行操作，各(ge)區(qu)實(shi)驗服(fu)、儀器(qi) 、耗材(cai)應(ying)獨(du)立(li)使用(yong)，不(bu)能混(hun)用(yong)；實(shi)驗用(yong)吸(xi)頭采用帶(dai)濾(lv)芯吸(xi)頭；樣(yang)本(ben)處理(li)區(qu)應(ying)配(pei)有(you)生(sheng)物(wu)安(an)全櫃(gui)，樣(yang)本(ben)處理(li)在生(sheng)物(wu)安(an)全櫃(gui)中(zhong)進(jin)行操作；三(san)個區(qu)應(ying)該配(pei)有(you)紫外(wai)線(xian)殺(sha)菌(jun)裝置(zhi)。
2. 為避免(mian)RNA降解，樣(yang)本(ben)處理(li)過程(cheng)應在(zai)0-4℃條件下(xia)操作，且(qie)完(wan)成(cheng)實(shi)驗後(hou)立(li)即(ji)上(shang)機檢(jian)測(ce)；樣(yang)本(ben)處理(li)過程(cheng)中(zhong)使用(yong)的(de)器具(ju)耗材(cai)應(ying)經過無(wu)核(he)酶處理(li)。

3. 每次(ci)實(shi)驗應(ying)該(gai)設置(zhi)陰、陽性對(dui)照(zhao)。
4. 試劑盒(he)所(suo)有(you)試劑(ji)在使用(yong)前(qian)應(ying)該(gai)在常(chang)溫(wen)下(xia)充分(fen)融(rong)化(hua)混(hun)勻(yun)，並應(ying)瞬(shun)時離(li)心。
5. 試劑盒(he)內(nei)所(suo)配(pei)陰性和陽(yang)性對(dui)照(zhao)在(zai)壹次(ci)使用(yong)前(qian)應(ying)全部轉移(yi)至標(biao)本(ben)準(zhun)備區(qu)，並單(dan)獨存(cun)放。
6. 為防(fang)止(zhi)熒(ying)光幹(gan)擾(rao)，應(ying)避免(mian)裸(luo)手(shou)直接(jie)接(jie)觸(chu)PCR反應管(guan)，並應(ying)避免(mian)在PCR反應管(guan)上(shang)進行(xing)任(ren)何(he)標(biao)記。
7. 儀器(qi) 擴增相(xiang)關(guan)參(can)數(shu)應(ying)按(an)照(zhao)本(ben)說(shuo)明(ming)書(shu)相(xiang)關(guan)要求進(jin)行設置(zhi)；不(bu)同批(pi)號試(shi)劑(ji)不(bu)能混(hun)用(yong)。
8. ABI系(xi)列(lie)熒光定(ding)量(liang)PCR儀參(can)數(shu)設(she)置(zhi)中(zhong)不(bu)選ROX校正(zheng)，淬滅(mie)基(ji)因選擇None。
9. 實(shi)驗過(guo)程(cheng)中(zhong)產(chan)品(pin)的(de)廢棄物(wu)應(ying)該(gai)進行(xing)無害化(hua)處理(li)後方(fang)可丟(diu)棄。