半夏染料(liao)法(fa)PCR鑒定(ding)試(shi)劑盒直(zhi)銷(xiao)

特點(dian)：
1. 即開(kai)即用，用戶(hu)只(zhi)需(xu)要提(ti)供病(bing)毒樣品。
2. 根據地(di)黃(huang)保守(shou)序(xu)列(lie)設計的專(zhuan)壹性引(yin)物，與(yu)相關病(bing)毒無交叉反(fan)應。
3. 靈敏度(du)可(ke)以達(da)到(dao)幾(ji)百拷(kao)貝(bei)/反(fan)應。
4. 壹管(guan)式(shi)熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR 檢(jian)測，避(bi)免(mian)後(hou)續(xu)汙(wu)染。
5. 本(ben)試(shi)劑盒足(zu)夠 50 次(ci) 20μL 反(fan)應體(ti)系(xi)的(de)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR。
6. 本(ben)產品只適用於科研(yan)，不(bu)能(neng)用於臨床(chuang)診(zhen)斷。

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使用方(fang)法(fa)：
壹、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與(yu)預培(pei)養(yang)按照樣品的采集與(yu)預培(pei)養(yang)按照《食品衛生(sheng)微生(sheng)物學(xue)檢(jian)驗阪(ban)崎(qi)腸桿(gan)菌檢(jian)驗要(yao)求(qiu)進(jin)行。
2、血液樣品：用無菌註射(she)器抽(chou)取受檢(jian)者靜脈血2mL，註入(ru)無菌EDTA2Na(或檸(ning)檬酸(suan)鈉(na))抗(kang)凝(ning)管(guan)，立(li)即(ji)混(hun)勻。
3、糞便(bian)樣品：取糞便(bian)置(zhi)於滅菌(jun)的(de)收集管(guan)中(zhong)送檢(jian)。
4、病竈(zao)部位樣品：取發病(bing)部位新(xin)鮮滲出物、粘液膿血送檢(jian)。
壹、稀(xi)釋(shi) PCR 陽性對(dui)照（以 10E2-10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 這 6 個 10 倍稀(xi)釋(shi)度(du)為(wei)例）
1. 註意(yi)：由於標準(zhun)品濃度(du)非常高(gao)，因此下列(lie)稀(xi)釋(shi)操作壹定(ding)要(yao)在獨立(li)的(de)區(qu)域(yu)進(jin)行，千萬不能(neng)汙(wu)染樣品或本(ben)試(shi)劑盒的(de)其他成分(fen)）。為(wei)增(zeng)加(jia)產品穩定(ding)性和(he)避(bi)免(mian)擴散傳(chuan)染性病(bing)原(yuan)，本(ben)產品不提(ti)供活(huo)體(ti)樣品做陽性對(dui)照，只提(ti)供可(ke)以直接(jie)使用的(de) DNA段作(zuo)為陽(yang)性對(dui)照。
2. 標記 6 個離(li)心管，分(fen)別(bie)為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭(tou)分(fen)別(bie)加(jia)入(ru) 45 μL 熒光(guang) PCR 模(mo)板(ban)稀(xi)釋(shi)液（用帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭(tou)，下(xia)同）。
4. 在 7 號管中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽(yang)性對(dui)照，充分(fen)震蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽(yang)性對(dui)照。放冰上待用。
5. 換(huan)槍頭(tou)，在(zai) 6 號管中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽(yang)性對(dui)照(上步(bu)稀(xi)釋(shi)所(suo)得(de))，充分(fen)震蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽(yang)性對(dui)照。放冰上待用。
6. 換(huan)槍頭(tou)，在(zai) 5 號管中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽(yang)性對(dui)照到(dao) 5 號管中(zhong)，充分(fen)震蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽(yang)性對(dui)照。放冰上待用。
7. 重復(fu)上(shang)面的操(cao)作直(zhi)到(dao)得(de)到(dao) 6 個稀(xi)釋(shi)度(du)的(de)陽(yang)性對(dui)照。放冰上待用。
註：上(shang)述樣品建議經過增菌(jun)後(hou)，收集培(pei)養(yang)物(wu)用於檢(jian)測。 
二、DNA提(ti)取：
可(ke)采用PCR試(shi)劑盒配(pei)備的DNA抽提(ti)液，按(an)以(yi)下說明進(jin)行DNA核酸(suan)的(de)粗(cu)提(ti)。也(ye)可(ke)采購(gou)上海(hai)澤(ze)葉(ye)生(sheng)物科(ke)技有(you)限(xian)公(gong)司生(sheng)產的DNA提(ti)取試(shi)劑盒(過柱(zhu)法(fa)-熒光(guang)配套(tao))或其他合適的(de)商業化(hua)產品，並(bing)按(an)照相應試(shi)劑盒說(shuo)明(ming)進(jin)行操(cao)作(zuo)。
1、液體(ti)培養(yang)物：取液體(ti)培養(yang)物100μL加到(dao)1.5mL無菌離心管中(zhong)，8000rpm離心3min，盡量(liang)吸(xi)棄(qi)上(shang)清，加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min，取上清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
2、固體(ti)培養(yang)物：挑取單克(ke)隆菌(jun)落與(yu)50μL DNA抽提(ti)液充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min，取上清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
3、糞便(bian)樣品：挑取米粒大(da)小糞便(bian)於滅菌(jun)離(li)心管中(zhong)，加入(ru)0.5mL生(sheng)理鹽(yan)水，振蕩混(hun)勻，13000rpm離心3分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上(shang)清，沈澱中(zhong)加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min取上清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
4、其他液體(ti)標本(ben)：取標本(ben)2-3mL，13000rpm離心3min，棄(qi)上(shang)清，沈澱中(zhong)加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min取上清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
註：陽(yang)性對(dui)照和陰性對(dui)照為已經(jing)抽(chou)提(ti)好的(de)核酸(suan)(無需(xu)提(ti)取)，直接(jie)取5μL加入(ru)到(dao)反(fan)應體(ti)系(xi)中(zhong)即可(ke)。由於陽性對(dui)照濃度(du)較(jiao)高(gao)，建議在樣品制備區域(yu)加(jia)入(ru)陽性對(dui)照。 
實(shi)驗流(liu)程：
1. 整個(ge)檢(jian)測過程應嚴(yan)格(ge)按照本(ben)說(shuo)明(ming)書要求(qiu)分(fen)別(bie)在(zai)試(shi)劑準(zhun)備區、樣本(ben)處理區和PCR擴增區(qu)進(jin)行操(cao)作(zuo)，各區實(shi)驗服(fu)、儀(yi)器 、耗(hao)材應獨(du)立(li)使用，不(bu)能(neng)混(hun)用；實(shi)驗用吸(xi)頭(tou)采用帶(dai)濾(lv)芯(xin)吸(xi)頭(tou)；樣本(ben)處理區應配(pei)有(you)生(sheng)物安(an)全(quan)櫃，樣本(ben)處理在生(sheng)物安(an)全(quan)櫃中(zhong)進(jin)行操(cao)作(zuo)；三個區(qu)應該(gai)配(pei)有(you)紫外(wai)線殺菌(jun)裝(zhuang)置。
2. 為避(bi)免(mian)RNA降(jiang)解，樣本(ben)處理過程應在(zai)0-4℃條件下操(cao)作(zuo)，且(qie)完(wan)成實(shi)驗後(hou)立(li)即(ji)上(shang)機檢(jian)測；樣本(ben)處理過程中(zhong)使用的(de)器(qi)具(ju)耗(hao)材應經(jing)過無核酶處理。
3. 每(mei)次(ci)實(shi)驗應該(gai)設置陰、陽(yang)性對(dui)照。
4. 試(shi)劑盒所(suo)有(you)試(shi)劑在(zai)使用前(qian)應該(gai)在(zai)常溫(wen)下(xia)充(chong)分(fen)融(rong)化(hua)混(hun)勻，並(bing)應瞬(shun)時(shi)離心。
5. 試(shi)劑盒內所(suo)配(pei)陰性和(he)陽性對(dui)照在壹次(ci)使用前(qian)應全(quan)部轉移至標本(ben)準(zhun)備區，並(bing)單(dan)獨存放(fang)。
6. 為防(fang)止熒(ying)光(guang)幹擾(rao)，應避(bi)免(mian)裸(luo)手(shou)直(zhi)接接(jie)觸(chu)PCR反(fan)應管(guan)，並(bing)應避(bi)免(mian)在(zai)PCR反(fan)應管(guan)上(shang)進(jin)行任(ren)何標(biao)記。
7. 儀器(qi) 擴增相關參(can)數應按(an)照本(ben)說(shuo)明(ming)書相關要(yao)求進(jin)行設置；不同批(pi)號試(shi)劑不(bu)能(neng)混(hun)用。
8. ABI系(xi)列(lie)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀參(can)數設置中(zhong)不選ROX校正，淬(cui)滅(mie)基(ji)因選擇(ze)None。
9. 實(shi)驗過程中(zhong)產品的廢(fei)棄(qi)物(wu)應該(gai)進(jin)行無害(hai)化(hua)處理後方可(ke)丟棄(qi)。
儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及(ji)保(bao)存方(fang)法
1. 血清(qing)：使用不(bu)含熱原(yuan)和內毒素(su)的試(shi)管，操(cao)作過程中(zhong)避(bi)免(mian)任(ren)何細(xi)胞刺激(ji)，收集血液後(hou)，3000 轉離心10 分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血清(qing)和紅(hong)細(xi)胞迅速小心地分(fen)離(li)。
2. 血漿(jiang)：EDTA、檸檬酸(suan)鹽(yan)或(huo)肝(gan)素(su)抗(kang)凝(ning)。3000 轉離心30 分(fen)鐘(zhong)取上清(qing)。
3. 細(xi)胞上清(qing)液：3000 轉離心10 分(fen)鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆粒和聚合物。
4. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿：將(jiang)組(zu)織(zhi)加(jia)入(ru)適量(liang)生(sheng)理鹽(yan)水搗碎。3000 轉離心10 分(fen)鐘(zhong)取上清(qing)。
5. 保存：如(ru)果(guo)樣本(ben)收集後(hou)不(bu)及(ji)時(shi)檢(jian)測，請按壹次(ci)用量(liang)分(fen)裝(zhuang)，凍(dong)存於-20℃，避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融，在(zai)室(shi)溫(wen)下(xia)解(jie)凍(dong)並(bing)確(que)保樣品均勻(yun)地(di)充(chong)分(fen)解(jie)凍(dong)。
ERBB4 Others Human 人 ErbB4 / HER4 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照) 鋅標(biao)準(zhun)溶(rong)液(1000μg/ml,基(ji)體(ti):1mol/L HNO3)Zinc standard質量(liang)規格(ge)：1000μg/ml,基(ji)體(ti):1mol/L HNO3

小鼠紋狀(zhuang)體(ti)神(shen)經(jing)元(yuan)MN-s鋅標(biao)準(zhun)溶(rong)液(100µg/ml,,基(ji)體(ti):1%HNO3)Zinc standard質量(liang)規格(ge)：100µg/ml,,基(ji)體(ti):1%HNO3

HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM3 / HAVCR2 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照) 蚜滅(mie)1標準(zhun)溶(rong)液(0.100mg/ml) Vamidothion standard solution質量(liang)規格(ge)：0.100mg/ml

人胚(pei)肺(fei)成纖(xian)維細(xi)胞;MRC-5優級(ji)真空(kong)泵(beng)油(Viscosity Grade 46)Vacuum pump oil質量(liang)規格(ge)：Viscosity Grade 46

DMS153細(xi)胞，人小細(xi)胞肺(fei)癌細(xi)胞 大(da)鼠腎上(shang)腺嗜(shi)鉻細(xi)胞瘤細(xi)胞,PC12細(xi)胞 CM-H127人晶狀(zhuang)體(ti)上皮(pi)細(xi)胞*培養(yang)基(ji)100mL優級(ji)真空(kong)泵(beng)油(Viscosity Grade 68)Vacuum pump oil質量(liang)規格(ge)：Viscosity Grade 68
293來源(yuan)病(bing)毒(du)包裝細(xi)胞;ΦA-GP 人成纖(xian)維細(xi)胞*培養(yang)基(ji) 100mL壬(ren)基(ji)-β-D-葡萄(tao)吡喃(nan)糖甙(dai)(>98%,BC)Nonyl β-D-glucopyranoside質量(liang)規格(ge)：>98%,BC

人癌細(xi)胞;MDA-MB-468N-芐(bian)氧(yang)羰(tang)基(ji)-L-Z-Gln-OH質量(liang)規格(ge)：>98%,BR

人脂肪(fang)細(xi)胞-皮下(xia)(HPA-s)(1×106 )N-CBZ-L-CBZ-L-Gly質量(liang)規格(ge)：>98%,BR

CM-R080大(da)鼠大(da)隱(yin)靜脈內皮細(xi)胞*培養(yang)基(ji)100mLProparacaine HCl質量(liang)規格(ge)：>98%,BR

C3H/An小鼠結(jie)締組(zu)織(zhi)細(xi)胞(L929-TK-);LTK- 小鼠腸平滑肌細(xi)胞*培養(yang)基(ji) 100mLN-芐(bian)氧(yang)羰(tang)基(ji)-L-Z-Ser-OH質量(liang)規格(ge)：>98.5%,BR
犬腎(shen)細(xi)胞;MDCK/IgRDL-;蛋(dan)氨酸(suan)質量(liang)規格(ge)：>99%,BRDL-Mine

RK3 Others Human 人 kC / RK3 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照) DL-天冬氨酸(suan)質量(liang)規格(ge)：0.98DL-Aspartic acid

CL-0264C918(人眼脈(mai)絡色(se)素(su)瘤細(xi)胞)5×106cells/瓶×2DL-質量(liang)規格(ge)：>98%,BRDL-Glutamine

HA Others H4N8 甲(jia)型(xing)流(liu)感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝(ning)素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照) DL-beta-苯(>98%，BR)質量(liang)規格(ge)：>98%，BRDL-beta-Phenylalanine

小鼠上皮(pi)細(xi)胞*培養(yang)基(ji) 100mLDL-肉(rou)堿(jian)鹽(yan)酸(suan)鹽(yan)質量(liang)規格(ge)：>98%,BRDL-Carnitine
半夏染料(liao)法(fa)PCR鑒定(ding)試(shi)劑盒直(zhi)銷(xiao)BT-20(人癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2 人肺(fei)動脈(mai)平滑肌細(xi)胞HPASMC(E/Z)-N,N-二去(qu)甲(jia)基(ji)-4-羥(qiang)基(ji)它莫西(xi)芬質量(liang)規格(ge)：美國(guo)進(jin)口(E/Z)-N,N-Didesmethyl-4-hydroxy Tamoxifen

人視網膜(mo)色(se)素(su)上(shang)皮(pi)細(xi)胞總(zong)RNAHRPEpiC NA4'-羥(qiang)基(ji)它莫西(xi)芬質量(liang)規格(ge)：美國(guo)進(jin)口4'-Hydroxy Tamoxifen

ARG1 Others Human 人 Arginase-1 / ARG1 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照) β-羥(qiang)基(ji)它莫西(xi)芬質量(liang)規格(ge)：美國(guo)進(jin)口β-Hydro