玉(yu)竹(zhu)PCR鑒定試(shi)劑盒(he)說明(ming)書(shu)

實(shi)驗(yan)流程：
1. 整(zheng)個檢測過程應嚴(yan)格(ge)按(an)照本(ben)說明(ming)書(shu)要(yao)求(qiu)分別在試(shi)劑準(zhun)備區、樣本處(chu)理(li)區和(he)PCR擴(kuo)增區進(jin)行操作(zuo)，各區實(shi)驗(yan)服(fu)、儀(yi)器(qi) 、耗材應獨(du)立使(shi)用，不(bu)能(neng)混(hun)用；實(shi)驗(yan)用吸頭采用帶濾(lv)芯(xin)吸頭；樣本處(chu)理(li)區應(ying)配(pei)有生物安(an)全櫃(gui)，樣本處(chu)理(li)在生物安(an)全櫃(gui)中(zhong)進(jin)行操作(zuo)；三(san)個區應(ying)該(gai)配(pei)有紫外(wai)線殺菌裝置。
2. 為避(bi)免RNA降解(jie)，樣本處(chu)理(li)過程應(ying)在0-4℃條(tiao)件下操作(zuo)，且完(wan)成(cheng)實驗(yan)後立即上(shang)機檢(jian)測；樣本處(chu)理(li)過程中(zhong)使(shi)用的(de)器(qi)具(ju)耗材應經(jing)過(guo)無核酶(mei)處(chu)理(li)。
3. 每次(ci)實(shi)驗(yan)應(ying)該(gai)設置(zhi)陰、陽性對照。
4. 試(shi)劑盒(he)所有(you)試(shi)劑在使(shi)用前應(ying)該(gai)在常溫下充分(fen)融(rong)化(hua)混(hun)勻(yun)，並(bing)應(ying)瞬(shun)時離心。
5. 試(shi)劑盒(he)內所(suo)配(pei)陰性和(he)陽(yang)性對(dui)照在壹次(ci)使(shi)用前應(ying)全部(bu)轉移至標(biao)本(ben)準備區，並(bing)單(dan)獨(du)存(cun)放。
6. 為防(fang)止(zhi)熒(ying)光(guang)幹(gan)擾，應避免裸(luo)手直(zhi)接(jie)接觸PCR反應管(guan)，並(bing)應避免在PCR反應管(guan)上(shang)進行任(ren)何(he)標(biao)記。
7. 儀器(qi) 擴增相(xiang)關(guan)參數(shu)應(ying)按(an)照本(ben)說明(ming)書(shu)相(xiang)關(guan)要求(qiu)進(jin)行設(she)置(zhi)；不同批(pi)號試(shi)劑不(bu)能混(hun)用。
8. ABI系列(lie)熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR儀參數(shu)設(she)置(zhi)中(zhong)不(bu)選(xuan)ROX校正，淬滅(mie)基因選(xuan)擇(ze)None。
9. 實驗過(guo)程中(zhong)產品(pin)的(de)廢棄物應(ying)該(gai)進行無(wu)害化(hua)處(chu)理(li)後方可(ke)丟棄。

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特點(dian)：
1. 即(ji)開(kai)即(ji)用，用戶(hu)只(zhi)需要提供(gong)病(bing)毒(du)樣品(pin)。
2. 根據(ju)地黃(huang)保守(shou)序(xu)列(lie)設(she)計的(de)專壹性(xing)引物，與相(xiang)關(guan)病毒(du)無(wu)交叉(cha)反應。
3. 靈敏(min)度可(ke)以達(da)到幾(ji)百(bai)拷貝(bei)/反應。
4. 壹管(guan)式(shi)熒(ying)光(guang)定量(liang) PCR 檢測，避免後(hou)續汙染。
5. 本(ben)試(shi)劑盒(he)足夠(gou) 50 次(ci) 20μL 反應體(ti)系的(de)熒(ying)光(guang)定量(liang) PCR。
6. 本產品(pin)只(zhi)適(shi)用於(yu)科研(yan)，不能(neng)用於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)。
使(shi)用方(fang)法：
壹、樣品(pin)采(cai)集：
1、食品(pin)樣品(pin)：樣品(pin)的(de)采集與預(yu)培養按照樣品(pin)的(de)采集與預(yu)培養按照《食品(pin)衛(wei)生微(wei)生物學(xue)檢驗(yan)阪(ban)崎(qi)腸(chang)桿菌檢驗(yan)要求進(jin)行。
2、血液樣品(pin)：用無(wu)菌(jun)註射器(qi)抽取(qu)受檢(jian)者(zhe)靜(jing)脈血(xue)2mL，註入無(wu)菌EDTA2Na(或檸(ning)檬酸鈉)抗凝管(guan)，立即混(hun)勻(yun)。
3、糞(fen)便樣品(pin)：取(qu)糞便(bian)置(zhi)於(yu)滅菌的(de)收(shou)集管(guan)中(zhong)送檢。
4、病竈部(bu)位樣品(pin)：取(qu)發病(bing)部(bu)位新鮮滲(shen)出(chu)物、粘(zhan)液膿血送檢。
壹、稀釋 PCR 陽(yang)性對照（以 10E2-10E7 拷(kao)貝/μL 這(zhe) 6 個 10 倍(bei)稀釋度為例）
1. 註意：由於(yu)標(biao)準(zhun)品(pin)濃(nong)度非(fei)常(chang)高(gao)，因此下列(lie)稀釋操作(zuo)壹定要(yao)在獨立的(de)區域進(jin)行，千(qian)萬(wan)不能汙(wu)染(ran)樣品(pin)或(huo)本試(shi)劑盒(he)的(de)其他(ta)成(cheng)分）。為增加(jia)產品(pin)穩(wen)定性(xing)和(he)避(bi)免擴(kuo)散傳(chuan)染性(xing)病原，本(ben)產品(pin)不(bu)提供(gong)活體樣品(pin)做陽性對(dui)照，只(zhi)提供(gong)可(ke)以直接使(shi)用的(de) DNA段(duan)作(zuo)為陽(yang)性(xing)對照。
2. 標(biao)記 6 個離(li)心管，分(fen)別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯(xin)槍頭(tou)分(fen)別加(jia)入 45 μL 熒(ying)光(guang) PCR 模(mo)板(ban)稀釋液(ye)（用帶芯(xin)槍頭(tou)，下同）。
4. 在 7 號管中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的(de)陽性對(dui)照，充(chong)分震(zhen)蕩 1 分鐘，得(de)1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對(dui)照。放冰(bing)上(shang)待(dai)用。
5. 換槍頭，在 6 號管中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的(de)陽性對(dui)照(上(shang)步稀釋所(suo)得(de))，充(chong)分震蕩 1 分鐘，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對(dui)照。放冰(bing)上(shang)待(dai)用。
6. 換槍頭，在 5 號管中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的(de)陽性對(dui)照到 5 號管中(zhong)，充(chong)分(fen)震(zhen)蕩 1 分鐘，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對(dui)照。放冰(bing)上(shang)待(dai)用。
7. 重復上(shang)面的(de)操作(zuo)直到得(de)到 6 個稀釋度的(de)陽性對(dui)照。放冰(bing)上(shang)待(dai)用。
註：上(shang)述樣品(pin)建(jian)議(yi)經(jing)過(guo)增菌後，收(shou)集培養物用於(yu)檢測。 
二、DNA提取(qu)：
可(ke)采用PCR試(shi)劑盒(he)配(pei)備的(de)DNA抽提液(ye)，按(an)以下說明(ming)進(jin)行DNA核酸的(de)粗提。也(ye)可(ke)采購(gou)上(shang)海澤(ze)葉(ye)生物科(ke)技(ji)有限(xian)公(gong)司生產的(de)DNA提取(qu)試(shi)劑盒(he)(過(guo)柱(zhu)法-熒(ying)光(guang)配(pei)套)或(huo)其他(ta)合(he)適(shi)的(de)商(shang)業化(hua)產品(pin)，並(bing)按照相(xiang)應試(shi)劑盒(he)說明(ming)進(jin)行操作(zuo)。
1、液體(ti)培養物：取(qu)液體(ti)培養物100μL加(jia)到1.5mL無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，8000rpm離(li)心3min，盡(jin)量(liang)吸棄上(shang)清，加(jia)入50μL DNA抽提液(ye)充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min，取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行PCR反應。
2、固(gu)體(ti)培養物：挑取(qu)單(dan)克(ke)隆(long)菌落與50μL DNA抽提液(ye)充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min，取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行PCR反應。
3、糞便樣品(pin)：挑取(qu)米(mi)粒大小(xiao)糞便(bian)於(yu)滅菌離心管(guan)中(zhong)，加(jia)入0.5mL生理(li)鹽水(shui)，振(zhen)蕩混(hun)勻(yun)，13000rpm離(li)心3分(fen)鐘，棄上(shang)清，沈(chen)澱中(zhong)加(jia)入50μL DNA抽提液(ye)充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行PCR反應。
4、其他(ta)液(ye)體(ti)標(biao)本(ben)：取(qu)標(biao)本(ben)2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄上(shang)清，沈(chen)澱中(zhong)加(jia)入50μL DNA抽提液(ye)充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行PCR反應。
註：陽性(xing)對照和(he)陰(yin)性對(dui)照為已(yi)經(jing)抽提好(hao)的(de)核酸(無需提取(qu))，直(zhi)接(jie)取(qu)5μL加(jia)入到反應體(ti)系中(zhong)即(ji)可(ke)。由於(yu)陽性對照濃(nong)度較(jiao)高(gao)，建議(yi)在樣品(pin)制(zhi)備區域加(jia)入陽(yang)性對照。 
F7 Others Human 人(ren) F7 / Coagulation Factor VII 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對照) 肉豆蔻(標(biao)準(zhun)品(pin))Myristicin質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥95%，標(biao)準(zhun)品(pin)

NIH3T3 小(xiao)鼠胚胎(tai)成(cheng)纖維細(xi)胞卡枯醇(chun)Kakuol質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)

猴(hou)脈絡膜(mo)-視網膜(mo)(內皮)細(xi)胞;RF/6AL-細(xi)辛脂(zhi)素(su)(標(biao)準(zhun)品(pin))L-Asarinin質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)

HNE2, 人鼻咽癌(ai)細(xi)胞系吉托皂苷(gan)元(yuan)(標(biao)準(zhun)品(pin))Gitogenin質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)

人Butt瘤(liu)細(xi)胞;RAJI 大(da)鼠氣管和(he)支(zhi)氣管上(shang)皮細(xi)胞*培養基 100mL異(yi)甘(gan)草素(su)Isoliquiritigenin質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：≥98%,甘草提取(qu)
IGFBP7 Others Human 人(ren) IGFBP7 / IBP-7 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對照) 檸(ning)檬酸莫沙必利酰胺(an)Mosapride Citric Amide質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進口

MA-891 小(xiao)鼠癌(ai)高(gao)轉移細(xi)胞去(qu)-4-氟(fu)代芐基莫沙必利Des-4-fluorobenzyl Mosapride質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進口

BT-474 [BT474]人(ren)導管癌(ai)細(xi)胞 BT-474 [BT474] human breast ductal carcinoma cells 1640+10% FBS8-(4-氯(lv)化(hua)苯(ben)基硫代(dai))腺(xian)嘌呤(ling)8-(4-Chlorophenylthio)adenine質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進口

VSTM1 Protein Human 重(zhong)組(zu)人 VSTM1 蛋白 (Fc 標(biao)簽(qian))β-腺(xian)嘌呤(ling)二核(he)苷(gan)酸 3'-1酸鈉鹽水(shui)合(he)物β-Nicotinamide adenine dinucleotide 3'-phosphate  salt hydrate質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進口

人(ren)胚胎(tai)眼Tenon's囊成(cheng)纖維細(xi)胞;HFTF 人(ren)肺(fei)大(da)動脈平(ping)滑(hua)肌細(xi)胞*培養基 100mL腺(xian)嘌(piao)呤(ling)鹽酸鹽(yan)Adenine 質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進口
SK-BR-3(人(ren)癌(ai)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2雷諾嗪(qin)-d3質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進口Ranolazine-d3

HUAEC-c 人(ren)臍動脈內(nei)皮(pi)細(xi)胞(HUAEC) 500,000cells 腸(chang)靜脈內(nei)皮(pi)細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(1ml)雷諾嗪(qin)質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進口Ranolazine

原代(dai)神(shen)經(jing)元(yuan)細(xi)胞特制(zhi)基礎無血(xue)清培養基Many types of cells包(bao)裝：500/100ml去(qu)甲基雷諾嗪(qin)β-D-葡(pu)萄(tao)糖(tang)苷酸(suan)質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進口Desmethyl Ranolazine β-D-Glucuronide

SEMA4D Others Cynomolgus 食蟹猴(hou) Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對照) (R)-鹽(yan)酸(suan)樂卡地(di)平(ping)質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進口(R)-Lercanidipine

EB病(bing)毒(du)轉化(hua)的(de)人B細(xi)胞;KMY0926（標(biao)準(zhun)品(pin)）質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：含(han)量測定Troxipide
玉(yu)竹(zhu)PCR鑒定試(shi)劑盒(he)說明(ming)書(shu)人結直(zhi)腸(chang)腺癌(ai)細(xi)胞;HCT 116 [HCT116]二錄(lu)化(hua)銅(tong)，英(ying)文(wen)名(ming)或(huo)英(ying)文(wen)縮寫：Copric chloride dihydrate，級(ji)別：CP，98.5%，規(gui)格(ge)：1克(ke)

人(ren)成(cheng)纖維母(mu)細(xi)胞-胎(tai)兒(HDF-f)( 5×105 )溴化(hua)鱗(III) tribromidq 7789-60-8

RN-s, 大鼠紋狀體(ti)神(shen)經元(yuan)錄(lu)雷他(ta)定 Lorctcdinq; 79794-72-2

人(ren)T瘤細(xi)胞Jurkat亞(ya)系;Jurkat77 大鼠(shu)腎(shen)成(cheng)纖維細(xi)胞*培養基 100mLCASPASE-3INHIBITORVIICASPASE-3 抑(yi)
儲(chu)存(cun)條(tiao)件：
14℃或(huo)－20℃樣品(pin)收(shou)集、處(chu)理(li)及保存(cun)方法
1. 血清(qing)：使(shi)用不(bu)含(han)熱原和(he)內(nei)毒素(su)的(de)試(shi)管，操作(zuo)過程(cheng)中(zhong)避(bi)免任(ren)何細(xi)胞刺(ci)激(ji)，收(shou)集血(xue)液(ye)後(hou)，3000 轉離心10 分鐘將血清(qing)和(he)紅(hong)細(xi)胞迅(xun)速(su)小(xiao)心地(di)分(fen)離(li)。
2. 血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬酸鹽或肝(gan)素(su)抗(kang)凝。3000 轉(zhuan)離(li)心30 分(fen)鐘取(qu)上(shang)清。
3. 細(xi)胞上(shang)清液(ye)：3000 轉離(li)心(xin)10 分(fen)鐘去除顆(ke)粒和(he)聚(ju)合(he)物。
4. 組(zu)織勻漿(jiang)：將組(zu)織加(jia)入適(shi)量(liang)生理(li)鹽水(shui)搗碎(sui)。3000 轉(zhuan)離(li)心10 分鐘取(qu)上(shang)清。
5. 保(bao)存：如果(guo)樣本收(shou)集後(hou)不(bu)及時檢(jian)測，請按壹次(ci)用量(liang)分(fen)裝，凍存於(yu)-20℃，避免反復凍(dong)融(rong)，在室(shi)溫下解凍(dong)並(bing)確保(bao)樣品(pin)均勻地(di)充分(fen)解(jie)凍(dong)。