漏(lou)蘆探(tan)針法(fa)PCR鑒定試(shi)劑盒(he)保存

實(shi)時熒(ying)光定(ding)量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在(zai)PCR反(fan)應體(ti)系中加(jia)入熒(ying)光基團，利(li)用熒(ying)光信(xin)號(hao)積累(lei)實(shi)時監測(ce)整個PCR進(jin)程，通過(guo)標準曲(qu)線(xian)對(dui)未知(zhi)模(mo)板(ban)進行定量分析的方法。實(shi)時熒(ying)光定(ding)量PCR的(de)化學原(yuan)理包(bao)括(kuo)探針類和(he)非探(tan)針類兩(liang)類，探(tan)針類是利(li)用與靶細(xi)胞(bao)序列(lie)特(te)異性(xing)雜交的(de)探(tan)針來指(zhi)示(shi)擴(kuo)增(zeng)產物的(de)增(zeng)加(jia)，非探(tan)針類是利(li)用熒(ying)光染(ran)料或(huo)者(zhe)特(te)異性(xing)設計的引(yin)物來指(zhi)示(shi)擴(kuo)增(zeng)的增(zeng)加(jia)。運用該技(ji)術(shu)可以對(dui)DNA、RNA樣品(pin)進(jin)行(xing)定(ding)量(liang)（包(bao)括(kuo)定量和相(xiang)對(dui)定(ding)量）和(he)定性(xing)分析。
主(zhu)要服務：DNA或(huo)RNA的(de)定量分(fen)析、基因表(biao)達差異分析、基因分型。
主(zhu)要技(ji)術(shu)：引(yin)物設計、RNA提(ti)取、cDNA合成、qPCR

產(chan)品及特(te)點：
本(ben)產(chan)品(pin)包(bao)含(han)Taq DNA聚(ju)合酶(mei)、dNTPs、MgCl2、反(fan)應緩沖(chong)液(ye)，濃(nong)度為2×。具有(you)快(kuai)速(su)簡(jian)便、靈敏(min)度高、特(te)異性(xing)強、穩定性(xing)好等(deng)優(you)點，可大(da)限度(du)的(de)減(jian)少(shao)人為誤差(cha)。使(shi)用時只(zhi)需(xu)加(jia)入DNA模(mo)板(ban)和引(yin)物既(ji)可。使(shi)用方便快(kuai)捷(jie)，能(neng)避(bi)免(mian)PCR操(cao)作過(guo)程(cheng)中(zhong)的(de)汙染(ran)，使(shi)用時只(zhi)需(xu)取適量(liang)2×TaqPCR MasterMix溶(rong)液(ye)，加(jia)入模(mo)板(ban)和引(yin)物，並加(jia)入去(qu)離(li)子水補(bu)足體積，使(shi)MasterMix溶(rong)液(ye)濃(nong)度為1×即(ji)可進行(xing)反(fan)應。使(shi)用前請(qing)保(bao)證(zheng)充(chong)分溶(rong)解(jie)並混勻，操作需(xu)在冰(bing)上進行。本(ben)產(chan)品(pin)就是為此(ci)目(mu)的根據(ju) PCR 原(yuan)理開(kai)發的(de)試(shi)劑盒(he)。
具有(you)高靈敏(min)度、高特(te)異性(xing)、高穩定性(xing)
可(ke)在同(tong)壹(yi)個(ge)管子中高特(te)異性(xing)的執行(xing)cDNA合成與基於(yu)探針(zhen)的(de)qPCR反(fan)應。更多優(you)點如1.的(de)特(te)異性(xing)；2.多重反(fan)應（高通量(liang)）；3.反(fan)應體(ti)系配(pei)置(zhi)，無(wu)需(xu)冰塊；4.無(wu)懼高GC含(han)量(liang)PCR；5.預(yu)防交叉(cha)汙染(ran)；6.廣(guang)泛(fan)的(de)設備兼容(rong)性(xing)。
PCR反(fan)應的(de)特(te)異性(xing)決定因素為：
①引(yin)物與模(mo)板(ban)DNA特(te)異正(zheng)確(que)的(de)結合；
②堿(jian)基配(pei)對(dui)原(yuan)則；
③Taq DNA聚(ju)合酶(mei)合成反(fan)應的(de)忠(zhong)實(shi)性(xing)；
④靶(ba)基因的特(te)異性(xing)與保守(shou)性(xing)。
其(qi)中引(yin)物與模(mo)板(ban)的正(zheng)確(que)結(jie)合是關(guan)鍵。引(yin)物與模(mo)板(ban)的結合及(ji)引(yin)物鏈(lian)的延(yan)伸(shen)是遵循堿(jian)基配(pei)對(dui)原(yuan)則的(de)。聚合酶(mei)合成反(fan)應的(de)忠(zhong)實(shi)性(xing)及Taq DNA聚(ju)合酶(mei)耐(nai)高溫(wen)性(xing)，使(shi)反(fan)應中(zhong)模(mo)板(ban)與引(yin)物的(de)結合(復性(xing))可(ke)以在(zai)較高的(de)溫度(du)下(xia)進(jin)行，結合的(de)特(te)異性(xing)大大增(zeng)加(jia)，被擴(kuo)增(zeng)的靶(ba)基因片段也就能(neng)保持(chi)很高的(de)正(zheng)確(que)度(du)。再(zai)通過(guo)選擇(ze)特(te)異性(xing)和保守(shou)性(xing)高的(de)靶基因區，其(qi)特(te)異性(xing)程度就更高。
(2) 靈敏(min)度高
PCR產(chan)物的(de)生成量是以指(zhi)數方式(shi)增(zeng)加(jia)的，能(neng)將(jiang)皮(pi)克(ke)(pg=10-12g)量(liang)級的起(qi)始(shi)待測(ce)模(mo)板(ban)擴(kuo)增(zeng)到微(wei)克(ke)(ug=10-6g)水平。能(neng)從100萬(wan)個細(xi)胞(bao)中檢(jian)出(chu)壹(yi)個(ge)靶(ba)細(xi)胞(bao)；在病毒的檢測(ce)中(zhong)，PCR的(de)靈敏(min)度可達3個(ge)RFU(空(kong)斑(ban)形(xing)成單位)；在(zai)細(xi)菌學中zui小(xiao)檢出(chu)率為3個(ge)細(xi)菌。
(3) 簡(jian)便、快(kuai)速(su)
PCR反(fan)應用耐高溫(wen)的Taq DNA聚(ju)合酶(mei)，壹(yi)次性(xing)地將(jiang)反(fan)應液(ye)加(jia)好後，即(ji)在(zai)DNA擴(kuo)增(zeng)液(ye)和(he)水浴(yu)鍋(guo)上(shang)進(jin)行變性(xing)-退(tui)火-延(yan)伸(shen)反(fan)應，壹(yi)般在(zai)2～4 小(xiao)時完成擴(kuo)增(zeng)反(fan)應。擴(kuo)增(zeng)產物壹(yi)般用電泳分析，不壹(yi)定(ding)要(yao)用同(tong)位素，無(wu)放射(she)性(xing)汙染(ran)、易(yi)推(tui)廣(guang)。
(4) 對(dui)標本(ben)的(de)純(chun)度(du)要求低
不(bu)需(xu)要分(fen)離(li)病毒或(huo)細(xi)菌及(ji)培養細(xi)胞(bao)，DNA 粗(cu)制品及(ji)總(zong)RNA均可(ke)作為(wei)擴(kuo)增(zeng)模(mo)板(ban)。可直接用臨床(chuang)標本(ben)如(ru)血液(ye)、體(ti)腔(qiang)液(ye)、洗(xi)嗽液(ye)、毛(mao)發(fa)、細(xi)胞(bao)、活(huo)PCR技(ji)術(shu)概論。
實(shi)驗(yan)註意(yi)事項(xiang)：
1）RT-PCR可(ke)以檢(jian)測(ce)組(zu)織、細(xi)胞(bao)、血液(ye)、細(xi)菌等(deng)很(hen)多材料，不同(tong)的樣本(ben)有(you)不(bu)同(tong)要求(qiu)，實(shi)驗(yan)前請(qing)充(chong)分溝(gou)通確(que)認(ren)實(shi)驗(yan)方案(an)和(he)樣本(ben)情(qing)況；
2）客(ke)戶(hu)盡(jin)可(ke)能(neng)提(ti)供實(shi)驗(yan)的背景(jing)信(xin)息(xi)、物種、基因準確(que)的(de)名稱(cheng)和ID號(hao)；
3）客(ke)戶(hu)盡(jin)量(liang)不要提(ti)供DNA或(huo)RNA樣品(pin)。
4）樣本(ben)保(bao)存於(yu)液(ye)氮(dan)或(huo)幹冰，也可以保(bao)存於(yu)Trizol液(ye)中(zhong)。
SV40轉(zhuan)化的(de)非洲綠(lv)猴腎(shen)細(xi)胞(bao);COS-71酸(suan)氫二鈉七(qi)水 phosphate, dibasic, heptahydrate質量(liang)規格(ge)：>98%,BR

SW-13細(xi)胞(bao)，腎(shen)上(shang)腺皮(pi)質腺癌(ai)細(xi)胞(bao) 色(se)素瘤,Bowes Melama細(xi)胞(bao) 人肺(fei)癌(ai)細(xi)胞(bao);A549 [A-549]dATP溶(rong)液(ye)(100 mM)dATP 100 mM solution質量(liang)規格(ge)：>97%,BR

小(xiao)鼠(shu)肝癌(ai)瘤株(zhu);H22癸酸(suan)鈉 decaate質量(liang)規格(ge)：>99%,進(jin)分

SPARC Others Human 人 SPARC / Osteonectin 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 瓊(qiong)脂糖(美侖(lun)電(dian)泳級)Agarose質量(liang)規格(ge)：美侖(lun)，電(dian)泳級

人髓母細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao);Daoy瓊(qiong)脂糖(Sigma)Agarose質量(liang)規格(ge)：Sigma原(yuan)裝(zhuang)
腸(chang)平滑(hua)肌細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)福(fu)美斯(si)坦質量(liang)規格(ge)：>99%Formestane

Hep3B細(xi)胞(bao)，肝癌(ai)細(xi)胞(bao) 人Hela細(xi)胞(bao)耐藥(yao)亞(ya)株(zhu)(Hela/DDP),Hela細(xi)胞(bao) 人羊膜上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)cDNAHAmEpiC cDNA福(fu)美斯(si)坦(標準品(pin))質量(liang)規格(ge)：HPLC≥98.0%,標準品(pin)Formestane

恒河(he)猴胚腎(shen)細(xi)胞(bao);FRhK-4 [FRhK4]鹽(yan)酸(suan)多佐胺；鹽(yan)酸(suan)杜(du)塞酰(xian)胺(an)（標準品(pin)）質量(liang)規格(ge)：HPLC>98%,標準品(pin)Dorzolamide HCl

CSF3R Others Human 人 CD114 / G-CSFR / GCSFR 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 質量(liang)規格(ge)：>99%,BRDoxazosin Mesylate

大(da)鼠(shu)垂體瘤(liu)細(xi)胞(bao);GH3（標準品(pin)）質量(liang)規格(ge)：HPLC>98%,標準品(pin)Doxazosin Mesylate
HA Others H5N1 甲(jia)型流(liu)感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素(su)HA1 (Hemagglutinin) 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) L-（標準品(pin)）質量(liang)規格(ge)：HPLC>98%,標準品(pin),還(hai)原(yuan)型(xing)Glutathione (Reduced)

CL-0338G1(發(fa)綠(lv)色(se)熒(ying)光的(de)小鼠(shu)胚胎(tai)幹細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2（氧化型(xing)）質量(liang)規格(ge)：度大(da)於(yu)98%,BRGlutathione(Oxidized)

ESAM Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) DL-異質量(liang)規格(ge)：>99%,BRDL-Isoleucine

小(xiao)鼠(shu)肺(fei)大(da)動(dong)脈(mai)內皮(pi)細(xi)胞(bao)*培養基 100mLL--γ-芐酯(zhi)質量(liang)規格(ge)：0.98L-Glutamic acid γ-benzyl ester

Eca-109人食管癌(ai)細(xi)胞(bao) Human esophageal cancer cell line Eca-109. 1640+10% FBSL-苯(ben)芐酯(zhi)鹽(yan)酸(suan)鹽(yan)質量(liang)規格(ge)：0.98L-Phenylalanine benzyl ester
漏(lou)蘆探(tan)針法(fa)PCR鑒定試(shi)劑盒(he)保存人小腦顆粒細(xi)胞(bao)HCGC2-(2-羥(qiang)苯(ben)基)苯(ben)並惡唑(>98.0%(GC)(T))質量(liang)規格(ge)：>98.0%(GC)(T)2-(2-Hydroxyphenyl)benzoxazole

CD276 Others Human 人 CD276 / B7-H3 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 5,6-二溴-2,1,3-苯(ben)並噻(sai)二唑(zuo)(>98.0%(GC))質量(liang)規格(ge)：>98.0%(GC)5,6-Dibromo-2,1,3-benzothiadiazole

L929 小(xiao)鼠(shu)成纖維細(xi)胞(bao)2-(2-羥(qiang)苯(ben)基)苯(ben)並噻(sai)唑(zuo)(>98.0%(HPLC)