浮萍(ping)探針法PCR鑒定(ding)試(shi)劑(ji)盒保(bao)存(cun)

實驗(yan)流(liu)程(cheng)：
1. 整個(ge)檢(jian)測過(guo)程(cheng)應嚴格(ge)按(an)照(zhao)本說(shuo)明書要求(qiu)分(fen)別在試(shi)劑(ji)準(zhun)備(bei)區(qu)、樣本處(chu)理(li)區(qu)和(he)PCR擴(kuo)增(zeng)區(qu)進行操(cao)作(zuo)，各(ge)區(qu)實驗(yan)服(fu)、儀(yi)器 、耗材(cai)應(ying)獨立使用，不能混用；實驗(yan)用吸頭采用帶(dai)濾(lv)芯吸(xi)頭；樣本處(chu)理(li)區(qu)應配有(you)生物安全櫃，樣本處(chu)理(li)在生物安全櫃中進行操(cao)作(zuo)；三(san)個(ge)區(qu)應該(gai)配有(you)紫外(wai)線(xian)殺菌裝(zhuang)置(zhi)。
2. 為避免(mian)RNA降解(jie)，樣本處(chu)理(li)過程(cheng)應(ying)在0-4℃條件下操(cao)作(zuo)，且(qie)完(wan)成實驗(yan)後立即(ji)上機(ji)檢(jian)測；樣本處(chu)理(li)過程(cheng)中使用的(de)器具耗材(cai)應(ying)經(jing)過無核(he)酶(mei)處(chu)理(li)。
3. 每次(ci)實驗(yan)應該(gai)設置(zhi)陰、陽性(xing)對(dui)照(zhao)。
4. 試劑(ji)盒所(suo)有(you)試劑(ji)在使用前應該(gai)在常溫(wen)下充分(fen)融化混勻(yun)，並應(ying)瞬時離(li)心。
5. 試劑(ji)盒內(nei)所(suo)配陰性(xing)和(he)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)在(zai)壹次(ci)使用前應全部轉(zhuan)移至(zhi)標本準(zhun)備(bei)區(qu)，並單獨存(cun)放(fang)。
6. 為防(fang)止(zhi)熒(ying)光(guang)幹(gan)擾，應避免(mian)裸(luo)手(shou)直(zhi)接接觸PCR反應(ying)管(guan)，並應(ying)避免(mian)在(zai)PCR反應(ying)管(guan)上進行任(ren)何標記(ji)。
7. 儀(yi)器 擴(kuo)增(zeng)相關參(can)數(shu)應按(an)照(zhao)本說(shuo)明書相關(guan)要(yao)求進行設(she)置(zhi)；不同批號試(shi)劑(ji)不能混用。
8. ABI系列(lie)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀(yi)參(can)數(shu)設置(zhi)中不選ROX校(xiao)正，淬滅(mie)基因(yin)選擇(ze)None。
9. 實驗(yan)過程(cheng)中產品的(de)廢(fei)棄(qi)物應(ying)該(gai)進行無(wu)害化處(chu)理(li)後方(fang)可(ke)丟(diu)棄。

特點：
1. 即(ji)開(kai)即(ji)用，用戶只需要(yao)提(ti)供病毒樣品。
2. 根(gen)據(ju)地(di)黃(huang)保守(shou)序(xu)列(lie)設(she)計的(de)專(zhuan)壹性(xing)引(yin)物，與(yu)相關(guan)病毒無交(jiao)叉反應(ying)。
3. 靈敏度可(ke)以(yi)達(da)到(dao)幾(ji)百(bai)拷(kao)貝/反應(ying)。
4. 壹管式熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR 檢測(ce)，避免(mian)後(hou)續(xu)汙染(ran)。
5. 本試劑(ji)盒足夠(gou) 50 次(ci) 20μL 反應(ying)體系的(de)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR。
6. 本產品只適用於科研，不能用於臨床診(zhen)斷。
使用方法：
壹、樣品采集(ji)：
1、食品樣品：樣品的(de)采(cai)集(ji)與預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照(zhao)樣品的(de)采(cai)集(ji)與預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照(zhao)《食(shi)品衛生微生物學(xue)檢驗(yan)阪崎腸桿菌檢(jian)驗(yan)要求(qiu)進行。
2、血液樣品：用無菌註(zhu)射(she)器抽(chou)取受檢(jian)者靜(jing)脈(mai)血2mL，註入(ru)無菌EDTA2Na(或檸(ning)檬(meng)酸鈉)抗凝管(guan)，立即(ji)混勻(yun)。
3、糞便(bian)樣品：取糞便(bian)置於(yu)滅(mie)菌的(de)收(shou)集(ji)管中送檢。
4、病竈部位(wei)樣品：取發病部(bu)位(wei)新(xin)鮮(xian)滲(shen)出(chu)物、粘(zhan)液膿(nong)血送檢。
壹、稀(xi)釋 PCR 陽性(xing)對(dui)照(zhao)（以(yi) 10E2-10E7 拷(kao)貝/μL 這 6 個 10 倍稀(xi)釋度為(wei)例(li)）
1. 註意(yi)：由(you)於標(biao)準(zhun)品濃度非(fei)常高(gao)，因此(ci)下列(lie)稀(xi)釋操(cao)作(zuo)壹定(ding)要(yao)在(zai)獨立的(de)區(qu)域進行，千(qian)萬不能汙染(ran)樣品或本試劑(ji)盒的(de)其(qi)他(ta)成(cheng)分(fen)）。為(wei)增(zeng)加產品穩定(ding)性(xing)和(he)避免(mian)擴(kuo)散傳(chuan)染(ran)性(xing)病原(yuan)，本產品不提(ti)供活體樣品做陽性(xing)對(dui)照(zhao)，只提(ti)供可以(yi)直(zhi)接使用的(de) DNA段作(zuo)為(wei)陽性(xing)對(dui)照(zhao)。
2. 標記(ji) 6 個離(li)心管(guan)，分別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯槍(qiang)頭分(fen)別加入(ru) 45 μL 熒(ying)光(guang) PCR 模(mo)板稀(xi)釋液（用帶(dai)芯槍(qiang)頭，下同）。
4. 在 7 號管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)，充分(fen)震蕩 1 分鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待(dai)用。
5. 換槍(qiang)頭(tou)，在 6 號管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)(上步稀(xi)釋所(suo)得)，充分(fen)震蕩 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待(dai)用。
6. 換槍(qiang)頭(tou)，在 5 號管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)到(dao) 5 號管(guan)中，充分(fen)震蕩 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待(dai)用。
7. 重復(fu)上面(mian)的(de)操(cao)作(zuo)直(zhi)到得到 6 個稀(xi)釋度的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待(dai)用。
註：上述(shu)樣品建議經(jing)過增(zeng)菌後(hou)，收(shou)集(ji)培養(yang)物用於檢測。 
二、DNA提(ti)取：
可采(cai)用PCR試劑(ji)盒配(pei)備(bei)的(de)DNA抽提(ti)液，按(an)以(yi)下說(shuo)明進行DNA核酸的(de)粗提(ti)。也(ye)可(ke)采(cai)購上海(hai)澤(ze)葉(ye)生物科(ke)技(ji)有(you)限公司生產的(de)DNA提(ti)取試劑(ji)盒(過柱(zhu)法-熒(ying)光(guang)配(pei)套(tao))或其(qi)他(ta)合適的(de)商(shang)業(ye)化(hua)產品，並按(an)照(zhao)相(xiang)應(ying)試(shi)劑(ji)盒說(shuo)明進行操(cao)作(zuo)。
1、液體培養(yang)物：取(qu)液體培養(yang)物100μL加到(dao)1.5mL無菌離(li)心管(guan)中，8000rpm離(li)心3min，盡(jin)量(liang)吸(xi)棄上清(qing)，加(jia)入(ru)50μL DNA抽提(ti)液充分(fen)混勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min，取上清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
2、固體培養(yang)物：挑(tiao)取(qu)單克隆菌落(luo)與50μL DNA抽提(ti)液充分(fen)混勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min，取上清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
3、糞便(bian)樣品：挑(tiao)取(qu)米粒大小(xiao)糞便(bian)於滅(mie)菌離(li)心管(guan)中，加入(ru)0.5mL生理(li)鹽水，振(zhen)蕩混勻(yun)，13000rpm離(li)心3分鐘(zhong)，棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱(dian)中加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液充分(fen)混勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min取上清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
4、其(qi)他(ta)液(ye)體標本：取標(biao)本2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄上清(qing)，沈(chen)澱(dian)中加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液充分(fen)混勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min取上清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
註：陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)和(he)陰性(xing)對(dui)照(zhao)為(wei)已(yi)經(jing)抽提(ti)好(hao)的(de)核(he)酸(無需(xu)提(ti)取)，直(zhi)接取5μL加入(ru)到反應體系中即(ji)可(ke)。由(you)於陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)濃(nong)度較(jiao)高(gao)，建議在(zai)樣品制備(bei)區(qu)域加入(ru)陽性(xing)對(dui)照(zhao)。 
大鼠腎動脈(mai)平滑肌細(xi)胞*培(pei)養(yang)基 100mL舒巴(ba)坦鈉(標準(zhun)品)Sulbactam 質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC>98%,標準(zhun)品

H9c2(2-1)大鼠心肌細胞 H9c2 (2-1) in myocardial cells of rats DMEM+10%FBS+1%P/S甘草(cao)酸(β型),18beta-甘草(cao)酸18-beta-glycyrrheticacid質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>98%

IGF1 Protein Human 重組人 IGF1 / IGF-I 蛋白(bai)甘(gan)草(cao)酸(β型),18beta-甘草(cao)酸(標準(zhun)品)18-beta-glycyrrheticacid質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC>98%,標準(zhun)品

H4-II-E-C3(大鼠肝癌細胞 ) 5×106cells/瓶×2 小(xiao)鼠腎小(xiao)管上皮(pi)細(xi)胞MREpiCOXOID胰蛋白(bai)腖(dong)Tryptone 質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：BR，進口

視網(wang)膜(mo)色(se)素(su)上皮(pi)細(xi)胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105方(1ml)β-萘黃(huang)酮β-Naphthoflavone質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>99%,進分
人胃(wei)腺(xian)癌細胞;SGC-7901 [SGC7901]3'-Epi 吉(ji)西(xi)他濱(bin)3'-Epi Gemcitabine (Gemcitabine Impurity)質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進口

倉鼠腎細胞;HL-1 骨(gu)髓瘤細胞，P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細胞 3T3/Fas/com細胞，轉(zhuan)基因(yin)細(xi)胞1'-Epi 1'-Epi Gemcitabine 質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進口

人胚(pei)腎細胞;293 [HEK-293]4-羥基雌激素(su)酮4-Hydroxy Estrone質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進口

ACPL2 Others Human 人 ACPL2 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 雌激素(su)酮 β-D-葡萄(tao)糖(tang)苷(gan)酸鈉鹽Estrone β-D-Glucuronide  Salt質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進口

家豬(zhu)皮(pi)膚(fu)細胞;SSC-S1∆8,9-脫(tuo)氫雌激素(su)酮 3-硫(liu)酸鈉鹽∆8,9-Dehydro Estrone 3-Sulfate  Salt質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進口
PILRB Others Mouse 小(xiao)鼠 PILRB1 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 4-氧(yang)質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進口4-Oxo Etodolac

小(xiao)鼠內(nei)膜上皮(pi)細(xi)胞*培(pei)養(yang)基 100mLN-甲基質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進口N-Methyl Etodolac

H1650-M3人非(fei)小(xiao)細胞肺(fei)癌細胞 H1650-M3 cells in human n small cell lung cancer 1640+10%FBS依維莫(mo)司-d4質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進口Everolimus-d4

IL10 Protein Human 重組人 IL10 / Ierleukin-10 蛋白(bai)D 13223-d4 (氟吡汀(ting)代(dai)謝(xie)產物) 質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進口D 13223-d4 (Flupirtine Metabolite)

SK-N-BE(2) (人神(shen)經(jing)母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 U937(組織細(xi)胞瘤)依匹斯(si)汀(ting)質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進口Epinastine
浮萍(ping)探針法PCR鑒定(ding)試(shi)劑(ji)盒保(bao)存(cun)大鼠食管上皮(pi)細(xi)胞*培(pei)養(yang)基 100mL草(cao)酸氫鉀(jia)shēng huà shì jì容量(liang)：250克

OVCAR-3人卵(luan)巢癌細胞 Human ovarian cancer cell line OVCAR-3 1640+10%FBS2,2,2-三(san)錄(lu)基錄(lu)加(jia)醋酯(zhi) 2,2,2-Trichloroqthyl xlofonmctq 17341-93-4

EREG Protein Mouse 重組小(xiao)鼠 Epiregulin / EREG 蛋白(bai) (Fc 標簽(qian))鉬(mu)粉(fen)shēng huà shì jì容量(liang)：250克

MC3T3-E1(
儲存(cun)條件：
14℃或－20℃樣品收(shou)集(ji)、處(chu)理(li)及(ji)保(bao)存(cun)方法(fa)
1. 血清：使用不含(han)熱(re)原(yuan)和(he)內(nei)毒素(su)的(de)試(shi)管(guan)，操(cao)作(zuo)過(guo)程(cheng)中避免(mian)任(ren)何細胞刺(ci)激，收(shou)集(ji)血液後(hou)，3000 轉(zhuan)離(li)心10 分鐘(zhong)將血清和(he)紅(hong)細胞迅(xun)速(su)小(xiao)心地(di)分離(li)。
2. 血漿：EDTA、檸(ning)檬(meng)酸鹽或肝(gan)素(su)抗凝。3000 轉(zhuan)離(li)心30 分鐘(zhong)取(qu)上清(qing)。
3. 細胞上清(qing)液(ye)：3000 轉(zhuan)離(li)心10 分鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆(ke)粒和(he)聚合物。
4. 組織勻(yun)漿：將組織加(jia)入(ru)適量(liang)生理(li)鹽水搗(dao)碎(sui)。3000 轉(zhuan)離(li)心10 分鐘(zhong)取(qu)上清(qing)。
5. 保存(cun)：如果(guo)樣本收(shou)集(ji)後不及(ji)時(shi)檢測(ce)，請(qing)按(an)壹次(ci)用量(liang)分(fen)裝，凍存(cun)於-20℃，避免(mian)反(fan)復(fu)凍融，在室(shi)溫(wen)下解(jie)凍(dong)並(bing)確(que)保樣品均勻(yun)地(di)充分(fen)解(jie)凍(dong)。