橘(ju)核(he)染料(liao)法PCR鑒(jian)定(ding)試劑盒(he)保(bao)存

特(te)點(dian)：
1. 即(ji)開即(ji)用，用(yong)戶只(zhi)需(xu)要提(ti)供病(bing)毒(du)樣(yang)品。
2. 根(gen)據(ju)地黃(huang)保(bao)守(shou)序列(lie)設計(ji)的專壹(yi)性引(yin)物(wu)，與(yu)相關(guan)病(bing)毒(du)無交叉反(fan)應(ying)。
3. 靈(ling)敏(min)度可以達(da)到(dao)幾(ji)百拷貝/反(fan)應(ying)。
4. 壹(yi)管(guan)式熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR 檢(jian)測(ce)，避(bi)免(mian)後(hou)續汙染。
5. 本(ben)試劑盒(he)足(zu)夠 50 次 20μL 反(fan)應(ying)體系(xi)的熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR。
6. 本(ben)產(chan)品(pin)只(zhi)適(shi)用(yong)於科(ke)研(yan)，不(bu)能(neng)用於(yu)臨床診斷(duan)。

使(shi)用(yong)方(fang)法：
壹、樣(yang)品采集：
1、食品(pin)樣(yang)品：樣(yang)品的采集與(yu)預(yu)培(pei)養(yang)按照樣(yang)品的采集與(yu)預(yu)培(pei)養(yang)按照《食品(pin)衛(wei)生(sheng)微(wei)生(sheng)物(wu)學檢驗(yan)阪崎腸桿(gan)菌檢(jian)驗(yan)要(yao)求進行。
2、血(xue)液(ye)樣(yang)品：用無菌註(zhu)射器抽(chou)取(qu)受(shou)檢(jian)者(zhe)靜(jing)脈(mai)血2mL，註(zhu)入(ru)無菌EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬(meng)酸鈉)抗(kang)凝管，立(li)即(ji)混勻。
3、糞(fen)便樣(yang)品：取糞(fen)便置於(yu)滅(mie)菌的收(shou)集管(guan)中(zhong)送(song)檢。
4、病(bing)竈(zao)部(bu)位樣(yang)品：取發病(bing)部(bu)位新(xin)鮮滲出(chu)物(wu)、粘液(ye)膿(nong)血送(song)檢。
壹、稀(xi)釋 PCR 陽(yang)性對照（以 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這(zhe) 6 個 10 倍稀(xi)釋度為(wei)例）
1. 註(zhu)意：由於標(biao)準(zhun)品(pin)濃(nong)度非(fei)常高(gao)，因(yin)此(ci)下列(lie)稀(xi)釋操作(zuo)壹(yi)定(ding)要(yao)在獨(du)立(li)的區(qu)域進行，千(qian)萬不(bu)能(neng)汙染樣(yang)品或本(ben)試劑盒(he)的其他(ta)成分(fen)）。為(wei)增加(jia)產品穩(wen)定(ding)性(xing)和避(bi)免(mian)擴(kuo)散(san)傳(chuan)染性病(bing)原，本(ben)產(chan)品(pin)不(bu)提(ti)供活體樣(yang)品做陽(yang)性對照，只(zhi)提(ti)供可以直(zhi)接(jie)使用的 DNA段(duan)作為(wei)陽(yang)性(xing)對照。
2. 標(biao)記(ji) 6 個離心管，分(fen)別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯(xin)槍頭分別加入(ru) 45 μL 熒光(guang) PCR 模板稀(xi)釋液(ye)（用(yong)帶(dai)芯(xin)槍頭，下同(tong)）。
4. 在 7 號(hao)管(guan)中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照，充分震蕩 1 分鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷貝/μL 的陽性(xing)對照。放(fang)冰上(shang)待用。
5. 換(huan)槍頭，在 6 號(hao)管(guan)中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照(上(shang)步(bu)稀(xi)釋所(suo)得)，充分震蕩 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷貝/μL 的陽性(xing)對照。放(fang)冰上(shang)待用。
6. 換(huan)槍頭，在 5 號(hao)管(guan)中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照到(dao) 5 號(hao)管(guan)中，充分震蕩 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷貝/μL 的陽性(xing)對照。放(fang)冰上(shang)待用。
7. 重(zhong)復(fu)上(shang)面的操作(zuo)直(zhi)到(dao)得到 6 個稀(xi)釋度的陽性(xing)對照。放(fang)冰上(shang)待用。
註(zhu)：上(shang)述(shu)樣(yang)品建(jian)議(yi)經(jing)過增菌後(hou)，收(shou)集培(pei)養(yang)物用(yong)於(yu)檢測(ce)。 
二、DNA提(ti)取：
可采用(yong)PCR試劑盒(he)配(pei)備的DNA抽(chou)提(ti)液(ye)，按以下說明進行DNA核(he)酸(suan)的粗(cu)提(ti)。也可(ke)采購上(shang)海澤葉生物(wu)科(ke)技(ji)有(you)限(xian)公司生產(chan)的DNA提(ti)取試劑盒(he)(過柱法-熒光(guang)配(pei)套)或(huo)其他(ta)合(he)適(shi)的商業化(hua)產(chan)品(pin)，並按照相應(ying)試劑盒(he)說明進行操(cao)作。
1、液(ye)體(ti)培養(yang)物：取(qu)液(ye)體(ti)培養(yang)物100μL加到(dao)1.5mL無菌離心管中(zhong)，8000rpm離心3min，盡(jin)量(liang)吸棄上(shang)清(qing)，加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min，取(qu)上(shang)清(qing)5μL進行PCR反(fan)應(ying)。
2、固(gu)體(ti)培養(yang)物：挑(tiao)取(qu)單(dan)克(ke)隆菌落(luo)與(yu)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min，取(qu)上(shang)清(qing)5μL進行PCR反(fan)應(ying)。
3、糞(fen)便樣(yang)品：挑(tiao)取(qu)米(mi)粒大(da)小(xiao)糞(fen)便於滅(mie)菌離心管中(zhong)，加(jia)入(ru)0.5mL生(sheng)理(li)鹽水，振蕩混勻，13000rpm離心3分(fen)鐘，棄上(shang)清(qing)，沈澱中加(jia)入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min取(qu)上(shang)清(qing)5μL進行PCR反(fan)應(ying)。
4、其他(ta)液(ye)體(ti)標(biao)本(ben)：取(qu)標(biao)本(ben)2-3mL，13000rpm離心3min，棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱中加(jia)入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min取(qu)上(shang)清(qing)5μL進行PCR反(fan)應(ying)。
註(zhu)：陽(yang)性對照和陰性對(dui)照為(wei)已(yi)經抽(chou)提(ti)好的核(he)酸(suan)(無需(xu)提(ti)取)，直(zhi)接(jie)取5μL加(jia)入(ru)到(dao)反(fan)應(ying)體系(xi)中(zhong)即(ji)可。由於陽性對(dui)照濃(nong)度(du)較(jiao)高，建(jian)議(yi)在樣(yang)品制備區(qu)域加入(ru)陽(yang)性(xing)對(dui)照。 
實(shi)驗(yan)流程：
1. 整個檢測(ce)過程應(ying)嚴(yan)格(ge)按照本(ben)說明書要(yao)求(qiu)分別在試劑準(zhun)備區(qu)、樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)區(qu)和PCR擴(kuo)增(zeng)區(qu)進行操(cao)作，各區(qu)實(shi)驗(yan)服、儀器 、耗(hao)材應(ying)獨(du)立(li)使用(yong)，不(bu)能(neng)混用(yong)；實(shi)驗(yan)用(yong)吸頭采用(yong)帶(dai)濾芯(xin)吸頭；樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)區(qu)應(ying)配(pei)有(you)生物安(an)全櫃，樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)在生物(wu)安(an)全櫃中進行操(cao)作；三(san)個區(qu)應(ying)該配(pei)有(you)紫外線殺菌裝(zhuang)置(zhi)。
2. 為(wei)避(bi)免(mian)RNA降(jiang)解，樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)過程應(ying)在0-4℃條(tiao)件下操(cao)作(zuo)，且(qie)完(wan)成實(shi)驗(yan)後(hou)立(li)即(ji)上(shang)機檢(jian)測(ce)；樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)過程中使(shi)用的器具耗(hao)材應(ying)經過無核(he)酶(mei)處理(li)。
3. 每次實(shi)驗(yan)應(ying)該設置(zhi)陰、陽性(xing)對(dui)照。
4. 試劑盒(he)所(suo)有(you)試劑在使用(yong)前應(ying)該在常溫(wen)下充分融(rong)化(hua)混(hun)勻，並應(ying)瞬(shun)時(shi)離心。
5. 試劑盒(he)內(nei)所(suo)配(pei)陰性和陽性(xing)對(dui)照在壹次使用前應(ying)全部(bu)轉(zhuan)移(yi)至標(biao)本(ben)準(zhun)備區(qu)，並單(dan)獨(du)存放(fang)。
6. 為(wei)防(fang)止熒光(guang)幹(gan)擾，應(ying)避(bi)免(mian)裸(luo)手(shou)直(zhi)接(jie)接觸(chu)PCR反(fan)應(ying)管，並應(ying)避(bi)免(mian)在PCR反(fan)應(ying)管上(shang)進行任何(he)標(biao)記(ji)。
7. 儀器 擴(kuo)增(zeng)相關(guan)參數應(ying)按照本(ben)說明書相關(guan)要求(qiu)進行設(she)置；不(bu)同(tong)批號(hao)試劑不(bu)能(neng)混用(yong)。
8. ABI系(xi)列(lie)熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀參數設置(zhi)中不(bu)選(xuan)ROX校(xiao)正(zheng)，淬(cui)滅(mie)基因(yin)選(xuan)擇None。
9. 實(shi)驗(yan)過程中產(chan)品的廢棄(qi)物應(ying)該進行無害化(hua)處(chu)理(li)後(hou)方(fang)可丟棄。
儲(chu)存條(tiao)件：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品收(shou)集、處(chu)理(li)及保(bao)存方(fang)法
1. 血清(qing)：使用(yong)不(bu)含熱(re)原和內毒(du)素(su)的試管，操(cao)作(zuo)過程中避(bi)免(mian)任何(he)細胞(bao)刺激，收(shou)集血(xue)液(ye)後(hou)，3000 轉(zhuan)離心10 分(fen)鐘將血清(qing)和紅細胞迅速(su)小(xiao)心地分離。
2. 血漿(jiang)：EDTA、檸檬(meng)酸鹽或肝素抗(kang)凝。3000 轉(zhuan)離心30 分(fen)鐘取上(shang)清(qing)。
3. 細(xi)胞(bao)上(shang)清(qing)液(ye)：3000 轉(zhuan)離心10 分(fen)鐘去除(chu)顆(ke)粒和聚(ju)合(he)物(wu)。
4. 組(zu)織(zhi)勻漿：將組(zu)織(zhi)加(jia)入(ru)適(shi)量(liang)生(sheng)理(li)鹽水搗碎。3000 轉(zhuan)離心10 分(fen)鐘取上(shang)清(qing)。
5. 保(bao)存：如(ru)果樣(yang)本(ben)收(shou)集後(hou)不(bu)及時(shi)檢(jian)測(ce)，請(qing)按壹次用量(liang)分(fen)裝(zhuang)，凍(dong)存於-20℃，避(bi)免(mian)反(fan)復凍(dong)融(rong)，在室溫(wen)下解(jie)凍(dong)並確(que)保(bao)樣(yang)品均(jun)勻地充分解(jie)凍(dong)。
IL18R1 Others Rat 大(da)鼠 IL18R1 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 蛻(tui)皮(pi)激素(su)（標(biao)準(zhun)品(pin)）Ecdysterone質量(liang)規格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)

膀胱癌組(zu)織(zhi)源(yuan)性(xing)原代(dai)細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(fang)(1ml)/1ml脫水內酯(zhi)(標(biao)準(zhun)品(pin))Dehydroandrographolide質量(liang)規格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)

PAN-1細胞，胰(yi)腺(xian)導管上(shang)皮癌細(xi)胞(bao) 人細胞(bao),HeLa-S3細(xi)胞 人小(xiao)腦(nao)顆(ke)粒細胞(bao)總RNAHCGC NA脫(tuo)水內(nei)酯琥珀(po)酸半(ban)酯(標(biao)準(zhun)品(pin))Dehydroandrographolide succinate質量(liang)規格(ge)：HPLC≥99%，標(biao)準(zhun)品(pin)

SV40轉(zhuan)化(hua)的非(fei)洲(zhou)綠(lv)猴腎細胞;COS-7脫(tuo)水羊(yang)藿素(標(biao)準(zhun)品(pin))Anhydroicaritin質量(liang)規格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)

GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨(ju)細(xi)胞(bao)病(bing)毒(du) HCMV gB 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 脫(tuo)氧野尻黴(mei)素(su)(標(biao)準(zhun)品(pin))1-Deoxynojirimycin質量(liang)規格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)
ACVRL1 Others Canine 狗(gou) ALK1 / ACVRL1 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) O-芐(bian)基-L-O-Benzyl-L-tyrosine質(zhi)量(liang)規格(ge)：0.98

人(ren)APP-PS1(M146L)雙基因(yin)轉(zhuan)染CHO細胞株(zhu);7WML6.0N-乙(yi)酰(xian)-L-賴(lai)氨酸/N6-三氟(fu)乙(yi)酰(xian)基-L-賴氨(an)酸(suan)N-6-Trifluoroacetyl-L-lysine質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%,BR

CaPan-Ⅱ/Capan-2細胞，人胰(yi)腺(xian)癌細(xi)胞(bao) 人胸腺激酶(mei)缺(que)陷(xian)性細胞(bao)系(xi),143TK細(xi)胞(bao) C57BL/6小(xiao)鼠T細胞(bao)瘤(liu)細胞(bao);RMAO-芐(bian)基-L-O-Benzyl-L-serine質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%,BR

IBRS-2(豬(zhu)腎細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2O-叔(shu)丁(ding)基-L-O-tert-Butyl-L-serine 質(zhi)量(liang)規格(ge)：度(du)98%,BR

Promocell C-21010 Mammary Epithelial Cell GrowthMedium, 上(shang)皮細(xi)胞生長培養(yang)基(即(ji)用型(xing)) 500mlIdelalisib;CAL101CAL-101 (GS-1101)質(zhi)量(liang)規格(ge)：>99%,選(xuan)擇性(xing)p110δ抑(yi)制劑
人(ren)關(guan)節軟(ruan)骨(gu)細(xi)胞*培(pei)養(yang)基 100mL醋酸氟氫可的(標(biao)準(zhun)品(pin))Fludrocortisone acetate質量(liang)規格(ge)：含(han)量(liang)97%-103%,標(biao)準(zhun)品(pin)

Vero細胞，綠猴腎細胞 RSC96(大(da)鼠雪旺(wang)細胞(bao)) 小(xiao)鼠肉(rou)瘤(liu)瘤(liu)株(zhu);S180醋酸氟氫可的Fludrocortisone acetate質量(liang)規格(ge)：>97%

EFNB2 Protein Human 重(zhong)組(zu)人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋(dan)白(bai)Azelnidipine質(zhi)量(liang)規格(ge)：>99%,BR

U-937(人(ren)組(zu)織(zhi)細(xi)胞(bao)瘤(liu)細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 小(xiao)鼠瘤(liu)細胞(bao);EL4噻奈普(pu)汀(ting)酸;噻(sai)奈(nai)普(pu)汀(ting)Tianeptine質量(liang)規格(ge)：>98%,BR

人(ren)結腸(chang)平(ping)滑(hua)肌細胞(bao)裂(lie)解物HCSMCL噻奈(nai)普(pu)汀(ting)酸;噻(sai)奈(nai)普(pu)汀(ting)(標(biao)準(zhun)品(pin))Tianeptine質量(liang)規格(ge)：HPLC>99%,標(biao)準(zhun)品(pin)
橘(ju)核(he)染料(liao)法PCR鑒(jian)定(ding)試劑盒(he)保(bao)存腦(nao)微血(xue)管內(nei)皮細胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(fang)(1ml)甲基異(yi)丁(ding)希(xi)甲酮(tong)，英文(wen)名或英文(wen)縮寫(xie)：Mesityl oxide，級(ji)別：BR，98%，規格(ge)：100毫升(sheng)

FGFR4 Others Rat 大(da)鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 2-錄-5-肖(xiao)基三拂(fu)本(ben) 2-Chloro-5-nitnobqnzotrifluoridq 777-37-7

大(da)鼠心肌細胞(bao)*培(pei)養(yang)基 100mL三錄化(hua)釹(nv)，英文(wen)名或英文(wen)縮寫(xie)：Neodymium(III) chlor