茜(qian)草PCR鑒(jian)定(ding)試劑(ji)盒(he)說明書

實(shi)時熒光定(ding)量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指(zhi)在(zai)PCR反(fan)應(ying)體系中(zhong)加(jia)入熒光基(ji)團(tuan)，利用(yong)熒光信號積累(lei)實(shi)時監測(ce)整(zheng)個PCR進(jin)程(cheng)，通(tong)過(guo)標(biao)準(zhun)曲線(xian)對(dui)未知(zhi)模板(ban)進(jin)行定量分析(xi)的(de)方(fang)法。實(shi)時熒光定(ding)量PCR的(de)化(hua)學(xue)原(yuan)理(li)包(bao)括(kuo)探(tan)針類和非探(tan)針類兩(liang)類，探(tan)針類是利用(yong)與靶(ba)細胞序(xu)列(lie)特異性雜(za)交的(de)探(tan)針來(lai)指(zhi)示(shi)擴增(zeng)產(chan)物的(de)增(zeng)加(jia)，非(fei)探(tan)針類是利用(yong)熒光染(ran)料(liao)或者(zhe)特異性設計的(de)引物來(lai)指(zhi)示(shi)擴增(zeng)的(de)增(zeng)加(jia)。運用(yong)該技(ji)術(shu)可以對(dui)DNA、RNA樣品(pin)進(jin)行(xing)定(ding)量（包(bao)括(kuo)定量和相(xiang)對(dui)定(ding)量）和定性(xing)分析(xi)。
主要(yao)服(fu)務：DNA或RNA的(de)定(ding)量分析(xi)、基(ji)因表(biao)達(da)差異分析(xi)、基(ji)因分(fen)型。
主要(yao)技(ji)術(shu)：引物設計、RNA提取(qu)、cDNA合成、qPCR

產(chan)品(pin)及(ji)特點：
本(ben)產(chan)品(pin)包(bao)含(han)Taq DNA聚(ju)合酶(mei)、dNTPs、MgCl2、反(fan)應(ying)緩(huan)沖液(ye)，濃(nong)度為2×。具有(you)快速簡便(bian)、靈(ling)敏度高、特異性強(qiang)、穩定(ding)性(xing)好(hao)等優點，可大(da)限(xian)度的(de)減(jian)少人(ren)為誤差。使(shi)用(yong)時只(zhi)需加入DNA模板(ban)和引物既(ji)可。使用(yong)方便(bian)快(kuai)捷(jie)，能避免(mian)PCR操(cao)作(zuo)過(guo)程中(zhong)的(de)汙(wu)染(ran)，使(shi)用(yong)時只(zhi)需取適(shi)量2×TaqPCR MasterMix溶(rong)液，加(jia)入模板(ban)和引物，並(bing)加(jia)入去(qu)離(li)子(zi)水(shui)補足(zu)體(ti)積，使(shi)MasterMix溶(rong)液濃(nong)度為1×即可進行反(fan)應(ying)。使用(yong)前請(qing)保證充(chong)分(fen)溶(rong)解(jie)並(bing)混(hun)勻(yun)，操作(zuo)需在冰上進(jin)行。本產(chan)品(pin)就(jiu)是為此(ci)目的(de)根(gen)據(ju) PCR 原(yuan)理(li)開(kai)發的(de)試劑(ji)盒(he)。
具有(you)高靈(ling)敏度、高特異性、高穩定(ding)性(xing)
可在同壹個管(guan)子(zi)中(zhong)高特異性的(de)執(zhi)行(xing)cDNA合成與基(ji)於探(tan)針的(de)qPCR反(fan)應(ying)。更多(duo)優點如1.的(de)特異性；2.多(duo)重(zhong)反(fan)應(ying)（高通(tong)量）；3.反(fan)應(ying)體系配(pei)置，無需冰塊(kuai)；4.無(wu)懼高GC含(han)量PCR；5.預防交叉(cha)汙(wu)染(ran)；6.廣(guang)泛(fan)的(de)設備兼容性。
PCR反(fan)應(ying)的(de)特異性決定(ding)因(yin)素(su)為：
①引物與模板(ban)DNA特異正(zheng)確的(de)結(jie)合；
②堿(jian)基(ji)配對(dui)原(yuan)則(ze)；
③Taq DNA聚(ju)合酶(mei)合成反(fan)應(ying)的(de)忠(zhong)實性(xing)；
④靶(ba)基(ji)因的(de)特異性與保守(shou)性。
其中(zhong)引物與模板(ban)的(de)正(zheng)確結(jie)合是關鍵。引物與模板(ban)的(de)結(jie)合及(ji)引物鏈的(de)延(yan)伸(shen)是遵循(xun)堿(jian)基(ji)配對(dui)原(yuan)則(ze)的(de)。聚(ju)合酶(mei)合成反(fan)應(ying)的(de)忠(zhong)實性(xing)及(ji)Taq DNA聚(ju)合酶(mei)耐高溫(wen)性(xing)，使(shi)反(fan)應(ying)中(zhong)模板(ban)與引物的(de)結(jie)合(復(fu)性(xing))可以在較高的(de)溫(wen)度下(xia)進(jin)行(xing)，結合的(de)特異性大(da)大(da)增加，被擴增(zeng)的(de)靶(ba)基(ji)因片(pian)段也就(jiu)能保持很高的(de)正(zheng)確度。再(zai)通(tong)過(guo)選擇特異性和保守(shou)性高的(de)靶(ba)基(ji)因區(qu)，其特異性程(cheng)度就(jiu)更高。
(2) 靈(ling)敏度高
PCR產(chan)物的(de)生(sheng)成(cheng)量是以指(zhi)數(shu)方式(shi)增加(jia)的(de)，能將皮克(ke)(pg=10-12g)量級的(de)起(qi)始待測(ce)模板(ban)擴(kuo)增到(dao)微(wei)克(ke)(ug=10-6g)水(shui)平(ping)。能從(cong)100萬個細胞中(zhong)檢出(chu)壹(yi)個靶(ba)細胞；在病毒的(de)檢測(ce)中(zhong)，PCR的(de)靈(ling)敏度可達3個RFU(空(kong)斑(ban)形成(cheng)單位(wei))；在(zai)細菌學(xue)中(zhong)zui小檢出(chu)率(lv)為3個細菌。
(3) 簡(jian)便(bian)、快(kuai)速
PCR反(fan)應(ying)用(yong)耐高溫(wen)的(de)Taq DNA聚(ju)合酶(mei)，壹次(ci)性地將反(fan)應(ying)液加(jia)好(hao)後(hou)，即(ji)在DNA擴增液(ye)和水(shui)浴鍋上進(jin)行變(bian)性-退(tui)火-延伸(shen)反(fan)應(ying)，壹般(ban)在(zai)2～4 小時完成(cheng)擴增反(fan)應(ying)。擴增(zeng)產(chan)物壹般(ban)用(yong)電泳分析(xi)，不壹定(ding)要(yao)用(yong)同位(wei)素(su)，無(wu)放(fang)射(she)性汙(wu)染(ran)、易(yi)推(tui)廣(guang)。
(4) 對(dui)標(biao)本(ben)的(de)純(chun)度要(yao)求低
不需要(yao)分離(li)病毒或細菌及(ji)培(pei)養(yang)細胞，DNA 粗(cu)制品(pin)及(ji)總(zong)RNA均(jun)可作為擴(kuo)增模板(ban)。可直接(jie)用(yong)臨床(chuang)標(biao)本(ben)如(ru)血(xue)液(ye)、體腔液、洗嗽液、毛發(fa)、細胞、活PCR技(ji)術(shu)概論(lun)。
實(shi)驗(yan)註(zhu)意(yi)事項(xiang)：
1）RT-PCR可以檢測(ce)組(zu)織、細胞、血(xue)液(ye)、細菌等很多(duo)材料(liao)，不同的(de)樣(yang)本(ben)有(you)不同要(yao)求，實(shi)驗(yan)前(qian)請充(chong)分(fen)溝(gou)通(tong)確(que)認實驗(yan)方(fang)案和樣本(ben)情況(kuang)；
2）客(ke)戶(hu)盡可能提供(gong)實(shi)驗的(de)背(bei)景(jing)信息、物種、基(ji)因準(zhun)確的(de)名(ming)稱和ID號；
3）客(ke)戶(hu)盡量不要(yao)提供(gong)DNA或RNA樣(yang)品(pin)。
4）樣(yang)本保存(cun)於液(ye)氮(dan)或幹(gan)冰，也可以保存(cun)於Trizol液(ye)中(zhong)。
人(ren)表(biao)皮色(se)素(su)細胞-淺(qian)色(se)素(su)(HEM)( 5×105 )1酸二氫鈉壹(yi)水(shui)(ACS級(ji)) phosphate, mobasic, mohydrate質(zhi)量規格(ge)：ACS級(ji),>98.5%

人(ren)絨(rong)毛間(jian)充(chong)質(zhi)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞Calcium gluconate, hydrate質(zhi)量規格(ge)：>99%

人(ren)胎(tai)盤(pan)絨(rong)膜癌(ai)細胞;BeWo 大(da)鼠膀胱成纖維(wei)細胞*培(pei)養(yang)基(ji) 100mL十(shi)二烷基(ji)-β-D-麥芽糖苷;月(yue)桂(gui)酰基(ji)麥芽糖苷N-Dodecyl-b-maltoside質(zhi)量規格(ge)：>99%,分(fen)子(zi)生(sheng)物學(xue)級(ji)

N-H 小鼠(shu)骨髓(sui)瘤細胞鹽(yan)酸氨基(ji)脲Amiurea 質(zhi)量規格(ge)：>98%,BR

TNFSF13B Others Human 人(ren) BAFF / TNFSF13B 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照) 滅(mie)菌溶(rong)液，30 mg/mlStreptomycin sulfate solution, 30 mg/ml質(zhi)量規格(ge)：Sterile滅(mie)菌溶(rong)液,30mg/ml
人(ren)脈(mai)絡(luo)絲成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞 (HCPF)( 5×105 )鹽(yan)酸/鹽(yan)酸質(zhi)量規格(ge)：>98%,BRDoxorubicin HCl/Adriamycin

腸(chang)平(ping)滑肌細胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)鹽(yan)酸/鹽(yan)酸(標(biao)準(zhun)品(pin))質(zhi)量規格(ge)：HPLC>98%,標(biao)準(zhun)品(pin)Doxorubicin HCl/Adriamycin

人(ren)色(se)素(su)瘤細胞;A875 大(da)鼠腸(chang)上皮細胞*培(pei)養(yang)基(ji) 100mL（標(biao)準(zhun)品(pin)）質(zhi)量規格(ge)：HPLC法含(han)量測(ce)定(ding)Tetracaine HCl

DH82 狗(gou)腎惡(e)性(xing)組(zu)織細胞增生(sheng)癥(zheng)細胞苯(ben)甲唑啉鹽(yan)酸鹽(yan)/鹽(yan)酸妥(tuo)拉(la)唑林質(zhi)量規格(ge)：>98%,進(jin)口原(yuan)裝Tolazoline HCl

CD19 Others Human 人(ren) CD19 / Leu-12 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照) 1酸托(tuo)特羅(luo)定(ding)質(zhi)量規格(ge)：>98.5%,M受(shou)體(毒蕈(xun)堿(jian)型(xing)乙(yi)酰受(shou)體)拮抗劑(ji)Tolterodine Tartrate
HA Others H5N1 甲型(xing)流(liu)感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血(xue)凝素(su) (Hemagglutinin / HA) 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照) 利格列汀(ting);利拉(la)利汀(ting)質(zhi)量規格(ge)：>99%,二肽(tai)肽(tai)酶(mei)-4(DPP-4)抑(yi)制劑(ji)Linagliptin

CL-0329Chang liver (CCL13) (人(ren)張(zhang)氏(shi)肝(gan)細胞)5×106cells/瓶×2L--α-芐(bian)酯(zhi)質(zhi)量規格(ge)：>98%,BRL-Glutamic Acid 1-Benzyl Ester

CNDP1 Others Mouse 小(xiao)鼠 CNDP1 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照) L-乙(yi)酯(zhi)鹽(yan)酸鹽(yan)質(zhi)量規格(ge)：>98%H-Leu-OEt·HCl

小鼠(shu)肺(fei)動(dong)脈(mai)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞*培(pei)養(yang)基(ji) 100mLL-苯(ben)質(zhi)量規格(ge)：>99%,BRL-Phenylalanine

Psi2 DAP小(xiao)鼠胚胎(tai)成纖(xian)維(wei)細胞 Psi2 DAP mouse embryo fibroblasts DMEM培(pei)養(yang)基(ji)+10%FBSL-天冬(dong)酰胺(an);L-天冬(dong)酰壹(yi)水(shui)  質(zhi)量規格(ge)：>99%,BR,壹(yi)水(shui)L-Asparagine Mohydrate
茜(qian)草PCR鑒定試劑(ji)盒(he)說明書人(ren)小(xiao)梁(liang)網細胞HTMC2-(羥(qiang)甲(jia)基(ji))-15-冠5-(>96.0%(GC))質(zhi)量規格(ge)：>96.0%(GC)2-(Hydroxymethyl)-15-crown 5-Ether

CRP Others Rat 大(da)鼠 CRP / C-reactive 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照) 2-(羥甲(jia)基(ji))-18-冠6-(>93.0%(GC))質(zhi)量規格(ge)：>93.0%(GC)2-(Hydroxymethyl)-18-crown 6-Ether

HMF 人(ren)肌(ji)肉(rou)組(zu)織來(lai)源(yuan)細胞1,4,8,11-四(si)氮(dan)雜(za)環十(shi)四(si)烷(>98.0%(T))質(zhi)量規格(ge)