虎(hu)杖(zhang)PCR鑒定試劑盒(he)直(zhi)銷(xiao)

儲(chu)存條件(jian)：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品收(shou)集(ji)、處理(li)及(ji)保(bao)存(cun)方(fang)法(fa)
1. 血清：使用不(bu)含(han)熱(re)原和內(nei)毒素的(de)試(shi)管(guan)，操作過(guo)程中避(bi)免(mian)任何細(xi)胞刺激(ji)，收(shou)集(ji)血液後(hou)，3000 轉離心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血清和紅細(xi)胞迅(xun)速小(xiao)心(xin)地(di)分(fen)離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽(yan)或(huo)肝素抗凝。3000 轉離心(xin)30 分(fen)鐘(zhong)取(qu)上清。
3. 細(xi)胞上清液：3000 轉離心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)去(qu)除顆(ke)粒和聚合(he)物(wu)。
4. 組(zu)織勻(yun)漿：將組(zu)織加(jia)入適量生理(li)鹽(yan)水搗(dao)碎(sui)。3000 轉離心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)取(qu)上清。
5. 保(bao)存：如(ru)果(guo)樣(yang)本收(shou)集(ji)後(hou)不(bu)及(ji)時(shi)檢(jian)測(ce)，請按壹(yi)次(ci)用(yong)量分裝，凍存於(yu)-20℃，避(bi)免反(fan)復凍融(rong)，在(zai)室溫下(xia)解凍並確保(bao)樣(yang)品均(jun)勻(yun)地充(chong)分(fen)解(jie)凍。

特點(dian)：
1. 即(ji)開(kai)即(ji)用(yong)，用(yong)戶只(zhi)需(xu)要(yao)提(ti)供(gong)病毒樣(yang)品。
2. 根據地黃保守(shou)序列(lie)設(she)計(ji)的(de)專(zhuan)壹性(xing)引(yin)物(wu)，與相關病(bing)毒無交叉反(fan)應。
3. 靈敏(min)度(du)可(ke)以(yi)達到幾百拷貝(bei)/反(fan)應。
4. 壹(yi)管(guan)式(shi)熒(ying)光定量 PCR 檢(jian)測(ce)，避(bi)免(mian)後(hou)續(xu)汙染(ran)。
5. 本試劑盒(he)足(zu)夠(gou) 50 次(ci) 20μL 反(fan)應體(ti)系的(de)熒(ying)光定量 PCR。
6. 本產品只適用於科(ke)研(yan)，不(bu)能(neng)用於臨床診(zhen)斷。

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使(shi)用方法：
壹(yi)、樣(yang)品采集(ji)：
1、食(shi)品樣(yang)品：樣(yang)品的(de)采(cai)集(ji)與預(yu)培養按(an)照(zhao)樣(yang)品的(de)采(cai)集(ji)與預(yu)培養按(an)照(zhao)《食品衛生微(wei)生物(wu)學(xue)檢(jian)驗(yan)阪(ban)崎(qi)腸桿菌(jun)檢(jian)驗(yan)要(yao)求(qiu)進行。
2、血液樣(yang)品：用無菌(jun)註(zhu)射器(qi)抽取(qu)受檢(jian)者(zhe)靜脈血2mL，註(zhu)入無菌(jun)EDTA2Na(或(huo)檸檬酸鈉(na))抗(kang)凝管(guan)，立(li)即(ji)混勻(yun)。
3、糞(fen)便樣(yang)品：取(qu)糞(fen)便置於滅菌(jun)的(de)收(shou)集(ji)管(guan)中(zhong)送(song)檢(jian)。
4、病(bing)竈部位(wei)樣(yang)品：取(qu)發病(bing)部位新鮮(xian)滲(shen)出(chu)物(wu)、粘液(ye)膿(nong)血送檢(jian)。
壹(yi)、稀釋 PCR 陽(yang)性(xing)對照(zhao)（以(yi) 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這(zhe) 6 個(ge) 10 倍(bei)稀釋度為(wei)例）
1. 註(zhu)意：由於標(biao)準(zhun)品濃度非(fei)常高(gao)，因(yin)此下(xia)列(lie)稀(xi)釋(shi)操作壹定要(yao)在(zai)獨(du)立(li)的(de)區(qu)域(yu)進行，千萬(wan)不(bu)能(neng)汙染(ran)樣(yang)品或本試劑盒(he)的(de)其(qi)他(ta)成分）。為(wei)增(zeng)加(jia)產品穩(wen)定性(xing)和(he)避(bi)免擴散傳(chuan)染(ran)性(xing)病(bing)原，本產品不(bu)提(ti)供(gong)活體(ti)樣(yang)品做陽(yang)性(xing)對照(zhao)，只(zhi)提供(gong)可以(yi)直接(jie)使用(yong)的(de) DNA段(duan)作為陽(yang)性(xing)對照(zhao)。
2. 標(biao)記 6 個(ge)離心(xin)管(guan)，分(fen)別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯槍頭(tou)分別加(jia)入 45 μL 熒(ying)光 PCR 模板稀釋液（用帶(dai)芯槍頭(tou)，下(xia)同(tong)）。
4. 在(zai) 7 號管(guan)中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)，充(chong)分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用(yong)。
5. 換(huan)槍頭，在 6 號管(guan)中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)(上(shang)步稀釋所得(de))，充(chong)分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用(yong)。
6. 換(huan)槍頭，在 5 號管(guan)中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)到(dao) 5 號管(guan)中(zhong)，充(chong)分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用(yong)。
7. 重(zhong)復上(shang)面的(de)操作直到得到(dao) 6 個(ge)稀釋度的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用(yong)。
註(zhu)：上述樣(yang)品建(jian)議經(jing)過(guo)增菌(jun)後(hou)，收(shou)集(ji)培養(yang)物用於(yu)檢(jian)測(ce)。 
二、DNA提(ti)取(qu)：
可(ke)采用PCR試(shi)劑盒(he)配(pei)備(bei)的(de)DNA抽提液，按以(yi)下(xia)說明進(jin)行DNA核(he)酸(suan)的(de)粗(cu)提。也(ye)可采購上海澤葉(ye)生(sheng)物科技(ji)有(you)限公司生產的(de)DNA提(ti)取(qu)試劑(ji)盒(he)(過(guo)柱(zhu)法(fa)-熒(ying)光配(pei)套)或(huo)其(qi)他(ta)合(he)適的(de)商業(ye)化(hua)產品，並按照相應試(shi)劑(ji)盒(he)說明進(jin)行操作。
1、液(ye)體(ti)培(pei)養物：取(qu)液體(ti)培(pei)養物100μL加(jia)到(dao)1.5mL無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，8000rpm離(li)心(xin)3min，盡(jin)量吸棄上清，加(jia)入50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
2、固體(ti)培(pei)養物：挑取(qu)單克隆(long)菌(jun)落(luo)與50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
3、糞(fen)便樣(yang)品：挑取(qu)米(mi)粒大小(xiao)糞(fen)便於滅菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，加(jia)入0.5mL生(sheng)理(li)鹽(yan)水，振蕩混勻(yun)，13000rpm離(li)心(xin)3分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上(shang)清，沈澱中加(jia)入50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
4、其(qi)他(ta)液體(ti)標(biao)本：取(qu)標本2-3mL，13000rpm離(li)心(xin)3min，棄(qi)上清，沈澱中加(jia)入50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
註(zhu)：陽(yang)性(xing)對照(zhao)和(he)陰性(xing)對照(zhao)為(wei)已經(jing)抽提好的(de)核(he)酸(suan)(無需(xu)提(ti)取(qu))，直(zhi)接取(qu)5μL加(jia)入到(dao)反(fan)應體(ti)系中(zhong)即(ji)可(ke)。由於陽(yang)性(xing)對照(zhao)濃度較(jiao)高(gao)，建(jian)議在(zai)樣(yang)品制(zhi)備(bei)區(qu)域(yu)加(jia)入陽(yang)性(xing)對照(zhao)。 
FCGR1 Others Rat 大(da)鼠 CD64 / FCGR1A 人細(xi)胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 司班80;司盤80Span* 80質量規格(ge)：BR

NIH?3T3? 小(xiao)鼠(shu)成纖維(wei)細(xi)胞聚乙(yi)二醇1000PEG 1000質量規格(ge)：分子量1000

非(fei)洲(zhou)綠猴腎(shen)細(xi)胞(bao);BS-C-1胰(yi)蛋白腖(BD)Tryptone質量規格(ge)：BD 211705

Hela, 人細(xi)胞系丹(dan)磺酰(xian)氯DNSCl, Dansyl chloride質量規格(ge)：>98%

人小(xiao)細(xi)胞肺癌細(xi)胞(bao);NCI-H209 大(da)鼠肺大靜脈內(nei)皮細胞*培養(yang)基 100mLN-乙(yi)基順丁1二N-Ethylmaleimide質量規格(ge)：>98%,BR
IB2 Others Human 人 IB2 / B2 桿狀(zhuang)病毒-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 西(xi)洛多(duo)辛(xin)(標(biao)準(zhun)品)Silodosin質量規格(ge)：>98.5%，標(biao)準(zhun)品

小(xiao)鼠(shu)成肌細(xi)胞(bao);C2C121酸(suan)溴莫尼定Brimonidine tartrate 質量規格(ge)：>99%,BR

Lec1細(xi)胞，卵巢細胞(bao) 人肝癌(ai)細胞,FL62891細(xi)胞 CL-0152MDA-MB-453(人癌(ai)細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2Bacto酵(jiao)母浸粉(BD原裝)Yeast extract質量規格(ge)：Bacto;BD212750

中(zhong)國(guo)倉(cang)鼠卵(luan)巢細胞(bao)K1(亞(ya)系克隆(long));CHO-K1 carbonate anhydrous質量規格(ge)：AR,≥99.8%

POSTN Others Human 人 OSF2 / POSTN 人細(xi)胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) D-果(guo)糖(tang)D-Fructose質量規格(ge)：>99%,BR
T2細(xi)胞，轉HLA-2基因B細(xi)胞 小(xiao)鼠(shu)癌細胞,MA891細(xi)胞 人神(shen)經(jing)元cDNAHN cDNA-d4質量規格(ge)：美國(guo)進(jin)口(kou)Isoniazid-d4

NCI-H596(人肺(fei)腺鱗癌細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2-d3質量規格(ge)：美國(guo)進(jin)口(kou)Tiotropium-d3 Bromide

CNE(人鼻(bi)咽癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 CL-0134KU812(人外(wai)周血嗜(shi)堿性(xing)白(bai)血病細胞)5×106cells/瓶(ping)×2 雜交瘤(liu)(B類(lei));Z1510A2G6A2C7去(qu)乙基鹽(yan)酸(suan)胺(an)酮-d4質量規格(ge)：美國(guo)進(jin)口(kou)Desethyl Amiodarone-d4

中(zhong)國(guo)倉(cang)鼠卵(luan)巢細胞(bao)(亞(ya)系克隆(long));CHO-HCV-E2去(qu)乙基鹽(yan)酸(suan)胺(an)酮質量規格(ge)：美國(guo)進(jin)口(kou)Desethyl Amiodarone

ERN1 Others Human 人 ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 桿狀(zhuang)病毒-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 質量規格(ge)：>98%,BRTerfenadine
虎(hu)杖(zhang)PCR鑒定試劑盒(he)直(zhi)銷(xiao)Calu-6(人肺(fei)退行性(xing)癌(ai)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 人前(qian)列(lie)腺微(wei)血管(guan)內(nei)皮細胞HPrMEC鄰(lin)磺酰酞鈉(na)鹽(yan)，英文名或英文縮(suo)寫：Cresol Red wo7ium salt，級別：生(sheng)物(wu)技(ji)術(shu)級，98%，規格(ge)：250毫(hao)克

人腦微(wei)血管(guan)內(nei)皮細胞cDNAHBMEC cDNAS-Alpine-硼(peng)完(wan) B-ISOPINOCcMPHqYL-9-BORcBICYCLO[3.3.1]NONcNq 4371-63-1

IL23 Others Human 人 IL-23A & IL-12B Heterodimer 人細(xi)胞裂解液(ye)
實驗(yan)流(liu)程：
1. 整(zheng)個檢(jian)測(ce)過(guo)程應嚴(yan)格(ge)按照(zhao)本說明書要(yao)求(qiu)分別在(zai)試(shi)劑準(zhun)備(bei)區(qu)、樣(yang)本處理(li)區(qu)和(he)PCR擴增(zeng)區(qu)進(jin)行操作，各區(qu)實驗(yan)服(fu)、儀器(qi) 、耗(hao)材應獨(du)立(li)使(shi)用(yong)，不(bu)能(neng)混用；實驗(yan)用(yong)吸頭(tou)采(cai)用帶(dai)濾芯吸頭(tou)；樣(yang)本處理(li)區(qu)應配(pei)有(you)生物(wu)安全(quan)櫃，樣(yang)本處理(li)在生(sheng)物安全(quan)櫃中進(jin)行操作；三(san)個區(qu)應該(gai)配(pei)有紫(zi)外線(xian)殺菌(jun)裝(zhuang)置。
2. 為(wei)避免RNA降(jiang)解，樣(yang)本處理(li)過(guo)程應在(zai)0-4℃條(tiao)件(jian)下(xia)操作，且(qie)完(wan)成實驗(yan)後(hou)立(li)即(ji)上(shang)機檢(jian)測(ce)；樣(yang)本處理(li)過(guo)程中使(shi)用(yong)的(de)器(qi)具耗(hao)材應經(jing)過(guo)無核(he)酶(mei)處理(li)。

3. 每(mei)次(ci)實驗(yan)應該(gai)設(she)置陰、陽(yang)性(xing)對照(zhao)。
4. 試(shi)劑盒(he)所有(you)試(shi)劑在(zai)使(shi)用前(qian)應該(gai)在(zai)常溫(wen)下(xia)充(chong)分(fen)融(rong)化(hua)混勻(yun)，並應瞬(shun)時離(li)心(xin)。
5. 試(shi)劑盒(he)內(nei)所配(pei)陰(yin)性(xing)和(he)陽(yang)性(xing)對照(zhao)在(zai)壹次(ci)使(shi)用前應全(quan)部(bu)轉移至(zhi)標本準(zhun)備(bei)區(qu)，並(bing)單獨(du)存放(fang)。
6. 為(wei)防(fang)止(zhi)熒(ying)光幹(gan)擾，應避(bi)免(mian)裸(luo)手直接(jie)接觸PCR反(fan)應管(guan)，並(bing)應避(bi)免(mian)在PCR反(fan)應管(guan)上(shang)進(jin)行任何(he)標記(ji)。
7. 儀(yi)器 擴增(zeng)相關參數應按(an)照(zhao)本說明書相關要(yao)求(qiu)進行設(she)置；不(bu)同(tong)批號試劑(ji)不(bu)能(neng)混用。
8. ABI系列(lie)熒(ying)光定量PCR儀(yi)參數設(she)置中不(bu)選(xuan)ROX校(xiao)正(zheng)，淬(cui)滅基因選(xuan)擇(ze)None。
9. 實驗(yan)過(guo)程中產品的(de)廢(fei)棄物應該(gai)進(jin)行無害(hai)化(hua)處理(li)後(hou)方(fang)可丟(diu)棄(qi)。