洗(xi)滌(di)雖(sui)不是(shi)壹(yi)個反(fan)應(ying)步(bu)驟(zhou),但卻(que)也決定著(zhe)實驗(yan)的成(cheng)敗。ELISA靠(kao)洗(xi)滌(di)來(lai)達到(dao)分(fen)離遊離的和結(jie)合的酶(mei)標(biao)記物的目的。通過(guo)洗(xi)滌(di)以(yi)清(qing)除(chu)殘留(liu)在板(ban)孔(kong)中(zhong)沒(mei)能與(yu)固相抗(kang)原(yuan)或(huo)抗(kang)體結(jie)合的物質(zhi),以及(ji)在反應(ying)過(guo)程中(zhong)非(fei)特異性地吸附於(yu)固相載(zai)體的幹(gan)擾物質。 壹(yi)、浸(jin)泡式(shi)
1.吸(xi)幹(gan)或(huo)甩(shuai)幹(gan)孔(kong)內(nei)反(fan)應(ying)液(ye);
2.用洗(xi)滌(di)液(ye)過(guo)洗(xi)壹(yi)遍(將(jiang)洗(xi)滌(di)液(ye)註滿(man)板孔後(hou),即甩(shuai)去(qu));
3.浸(jin)泡,即將(jiang)洗(xi)滌(di)液(ye)註滿(man)板孔,放置1-2分(fen)鐘(zhong),間(jian)歇(xie)搖(yao)動,浸(jin)泡時(shi)間(jian)不可(ke)隨意縮(suo)短(duan);
4.吸(xi)幹(gan)孔(kong)內(nei)液(ye)體。吸(xi)幹(gan)應(ying)*,可(ke)用水泵(beng)或真空泵(beng)抽(chou)吸(xi),也可(ke)甩(shuai)去(qu)液(ye)體後(hou)在清(qing)潔毛巾(jin)或吸(xi)水(shui)紙(zhi)上拍(pai)幹(gan);
5.重復(fu)操作c和(he)d,洗(xi)滌(di)3-4次(ci)(或(huo)按(an)說(shuo)明規(gui)定)。在間(jian)接(jie)法(fa)中如(ru)本(ben)底(di)較(jiao)高,可(ke)增(zeng)加洗(xi)滌(di)次(ci)數(shu)或延長浸(jin)泡時(shi)間(jian)。
二(er)、流(liu)水(shui)沖洗(xi)式(shi)
初用於(yu)小(xiao)珠載(zai)體的洗(xi)滌(di),洗(xi)滌(di)液(ye)僅(jin)為蒸(zheng)餾水甚至(zhi)可(ke)用自來水。洗(xi)滌(di)時(shi)附接(jie)壹(yi)特殊裝(zhuang)置,使小(xiao)珠在(zai)流(liu)水(shui)沖擊下(xia)不斷地(di)滾動淋洗(xi),持續沖洗(xi) 2分(fen)鐘(zhong)後(hou),吸(xi)幹(gan)液(ye)體,再(zai)用蒸(zheng)餾水浸(jin)泡2分(fen)鐘(zhong),吸(xi)幹(gan)即可(ke)。浸(jin)泡式(shi)猶(you)如盆浴(yu),流(liu)水(shui)沖洗(xi)式(shi)則(ze)好(hao)比(bi)淋浴(yu),其(qi)洗(xi)滌(di)效(xiao)果更(geng)為*,且(qie)也簡便(bian)、快速。已(yi)有(you)實驗(yan)表明,流(liu)水(shui)沖洗(xi)式(shi)同(tong)樣(yang)也適(shi)用(yong)於(yu)微(wei)量滴(di)定板的洗(xi)滌(di)。洗(xi)滌(di)時(shi)設(she)法(fa)加(jia)大(da)水流(liu)量或加(jia)大(da)水壓(ya),讓水(shui)流(liu)沖擊板(ban)孔表面,洗(xi)滌(di)效(xiao)果更(geng)佳(jia)。