ELISA的(de)基礎(chu)是(shi)抗原(yuan)或(huo)抗體(ti)的(de)固相化及(ji)抗原(yuan)或(huo)抗體(ti)的(de)酶標(biao)記(ji)。結合(he)在固相載體表面的(de)抗原(yuan)或(huo)抗體(ti)仍保(bao)持其免疫學活(huo)性,酶(mei)標(biao)記(ji)的(de)抗原(yuan)或(huo)抗體(ti)既保(bao)留其(qi)免疫學活(huo)性,又(you)保(bao)留酶(mei)的(de)活(huo)性。
971年(nian)Engvall和(he)Perlmann發(fa)表了酶(mei)聯(lian)免疫吸附劑(ji)測(ce)定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用(yong)於(yu)IgG定量測(ce)定的(de)文章(zhang),使(shi)得(de)1966年開(kai)始用(yong)於(yu)抗原(yuan)定(ding)位的(de)酶標(biao)抗體(ti)技(ji)術發展成(cheng)液(ye)體標本中(zhong)微量物(wu)質(zhi)的(de)測(ce)定方(fang)法(fa)。

這(zhe)壹方(fang)法(fa)的(de)基本(ben)原理(li)是(shi):
①使(shi)抗原(yuan)或(huo)抗體(ti)結合(he)到(dao)某(mou)種固相載體表面,並(bing)保(bao)持其免疫活(huo)性。
②使(shi)抗原(yuan)或(huo)抗體(ti)與某(mou)種酶(mei)連接(jie)成(cheng)酶(mei)標抗原(yuan)或(huo)抗體(ti),這(zhe)種酶標(biao)抗原(yuan)或(huo)抗體(ti)既保(bao)留其(qi)免疫活(huo)性,又(you)保(bao)留酶(mei)的(de)活(huo)性。在測(ce)定時,把(ba)受(shou)檢(jian)標本(測(ce)定其(qi)中(zhong)的(de)抗體(ti)或(huo)抗原(yuan))和(he)酶標(biao)抗原(yuan)或(huo)抗體(ti)按(an)不(bu)同(tong)的(de)步驟與固相載體表面的(de)抗原(yuan)或(huo)抗體(ti)起(qi)反應(ying)。用洗(xi)滌的(de)方(fang)法(fa)使(shi)固相載體上形成(cheng)的(de)抗原(yuan)抗體(ti)復(fu)合(he)物(wu)與其(qi)他(ta)物(wu)質(zhi)分(fen)開(kai),最後結合(he)在固相載體上的(de)酶量與標(biao)本(ben)中(zhong)受(shou)檢(jian)物(wu)質(zhi)的(de)量成(cheng)壹(yi)定的(de)比(bi)例。加(jia)入(ru)酶(mei)反(fan)應(ying)的(de)底物(wu)後(hou),底(di)物(wu)被(bei)酶(mei)催(cui)化變(bian)為(wei)有(you)色(se)產物(wu),產物(wu)的(de)量與標(biao)本(ben)中(zhong)受(shou)檢(jian)物(wu)質(zhi)的(de)量直(zhi)接(jie)相關(guan),故可根(gen)據顏(yan)色(se)反(fan)應(ying)的(de)深淺(qian)刊(kan)物(wu)定(ding)性(xing)或(huo)定(ding)量分(fen)析(xi)。由(you)於(yu)酶的(de)催化頻(pin)率很高,故可地(di)放(fang)大反應(ying)效(xiao)果(guo),從而(er)使(shi)測(ce)定方(fang)法(fa)達(da)到(dao)很(hen)高的(de)敏感(gan)度(du)。