1.試(shi)劑(ji)因素
不(bu)同批(pi)次(ci)的ELISA試(shi)劑在制作過程中(zhong)很(hen)難(nan)保(bao)證質量(liang)*壹致(zhi)，即使(shi)是通(tong)過批批(pi)檢的(de)項(xiang)目(mu)其檢測(ce)結果也存(cun)在差(cha)異(yi)，因此必須(xu)選擇(ze)和訂(ding)購(gou)長批(pi)號的(de)試(shi)劑，並(bing)保(bao)證保(bao)存(cun)條件。嚴格(ge)執(zhi)行這(zhe)壹標(biao)準可以避免(mian)因試劑(ji)批(pi)號改變(bian)而(er)重(zhong)新(xin)建(jian)立(li)質控(kong)體系(xi)及重(zhong)新(xin)評(ping)估試(shi)劑(ji)的(de)復(fu)雜(za)過程，並且能夠(gou)保(bao)證結果的穩(wen)定性(xing)；對於(yu)效期(qi)短、使(shi)用率低的試劑(ji)，應(ying)當小(xiao)量(liang)分裝(zhuang)，每(mei)次使(shi)用則取分裝(zhuang)部(bu)分即可(ke)，避免(mian)反(fan)復(fu)凍融造(zao)成(cheng)試劑的失(shi)效(xiao)。

2.操(cao)作因素

ELISA操(cao)作(zuo)步(bu)驟復(fu)雜(za)，操作不(bu)當將引(yin)起較大(da)的(de)誤(wu)差。加樣、溫(wen)育、洗滌(di)、顯(xian)色(se)、比色(se)。

3.方(fang)法(fa)學的影(ying)響   
ELISA測定(ding)模(mo)式(shi)包(bao)括(kuo)以下(xia)幾(ji)種(zhong)：雙(shuang)抗(kang)體夾心(xin)法(fa)、間(jian)接法(fa)、雙(shuang)抗(kang)原(yuan)夾心(xin)法(fa)、IgM抗(kang)體捕捉法(fa)、競爭抑制法(fa)，其中(zhong)競(jing)爭抑制法(fa)(HBeAb,HBcAb等(deng)采(cai)用(yong))因受(shou)操作時差所引(yin)起的競(jing)爭等(deng)因素的(de)影(ying)響，結果重(zhong)復(fu)性(xing)較差(cha)，質量(liang)較難(nan)控制。

4.樣本(ben)因素
標(biao)本幹擾(rao)因素包(bao)括(kuo)內源性(xing)幹擾(rao)因素和外源性(xing)幹擾(rao)因素，前(qian)者(zhe)包括(kuo)類(lei)風(feng)濕因子(zi)、補體、異嗜(shi)性(xing)抗(kang)體、自身(shen)抗(kang)體、等(deng)，後(hou)者(zhe)包括(kuo)標(biao)本溶(rong)血、標(biao)本被細(xi)菌汙(wu)染、標(biao)本貯(zhu)存(cun)時(shi)間(jian)過長、標(biao)本凝(ning)固(gu)不(bu)全、冷(leng)凍標(biao)本的反復(fu)凍融等(deng)。

5.標(biao)本復(fu)查(zha)

ELISA手(shou)工檢測(ce)過程復(fu)雜(za)，影(ying)響因素較(jiao)多，即使(shi)室(shi)內質控(kong)在控(kong)，也可能因孔間(jian)差(cha)異(yi)而(er)造(zao)成(cheng)結果的差(cha)異，因此加大復(fu)查(zha)力度(du)是保(bao)證結果準確(que)性(xing)的可(ke)靠(kao)方(fang)法(fa)，比如(ru)對(dui)HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等(deng)項(xiang)目(mu)的可(ke)疑、弱(ruo)陽性(xing)標(biao)本及少見(jian)模(mo)式(shi)的(de)檢測(ce)結果進行(xing)復(fu)查(zha)。

6.灰(hui)區(qu)的(de)設(she)置
通(tong)常情況(kuang)下(xia)，ELISA定性(xing)實(shi)驗(yan)以“陽性(xing)”和“陰性(xing)”來報告結果，兩者(zhe)間(jian)有壹條分(fen)界(jie)線(xian)被稱(cheng)為(wei)“陽性(xing)判(pan)斷值”(cut-off value，CO值)，這(zhe)是定(ding)性(xing)免(mian)疫(yi)測定結果報告的依(yi)據。

7.常表(biao)示結果的常用方(fang)法(fa)

a.定性(xing)測定(ding)

b.半定(ding)量(liang)測定(ding) 結果壹般以滴度(du)表(biao)示。

c.定(ding)量(liang)測定(ding) 即用(yong)已(yi)知量(liang)的標(biao)準品作壹系(xi)列稀(xi)釋後進行(xing)ELISA測定，繪制標(biao)準曲線(xian)，結果以量(liang)或(huo)單位(wei)表(biao)示。在ELISA定(ding)量(liang)檢測(ce)中(zhong)每(mei)壹塊(kuai)反應(ying)板都必須(xu)繪制相應(ying)的標(biao)準曲線(xian)。