抗體(ti)特(te)異性(xing)結合(he)抗原的原理(li)：抗體(ti)由(you)V區和(he)C區組(zu)成，其(qi)中的(de)V區的(de)互(hu)補決定區（complementarity determining region, CDR）可組(zu)成(cheng)抗原結合槽(cao)，抗原結合槽(cao)可以(yi)與(yu)相(xiang)應(ying)的(de)抗原表位以鎖-匙(chi)（key-lock)互(hu)補關系進(jin)行特異(yi)性(xing)識別(bie)與結合（如下圖(tu)）。因(yin)此不(bu)同(tong)V區的(de)抗體(ti)可識別(bie)並結合(he)不(bu)同(tong)的抗原。

特(te)異性(xing)的選(xuan)擇(ze)主(zhu)要(yao)需(xu)要(yao)考慮(lv)四個(ge)方(fang)面：蛋(dan)白特(te)異(yi)性(xing)、種屬特異性(xing)、實驗(yan)方法(fa)特異性(xing)、標(biao)記(ji)物(wu)的(de)特異性(xing)。

1、蛋(dan)白特(te)異(yi)性(xing)

針對(dui)需(xu)要(yao)檢(jian)測的蛋(dan)白查(zha)找抗體(ti)，幾個(ge)細(xi)節要(yao)區分(fen)：

a.重組蛋(dan)白如果不(bu)是(shi)全長表達，則(ze)需(xu)要(yao)註意抗體(ti)的(de)免(mian)疫原(yuan)區域(yu)是否在(zai)重組蛋(dan)白區域(yu)內。

b.內(nei)源(yuan)性(xing)蛋(dan)白最(zui)好能(neng)清楚(chu)其(qi)剪(jian)切與(yu)修(xiu)飾(shi)的方式(shi)，特(te)殊表型(xing)的蛋(dan)白需(xu)要(yao)進(jin)行序列(lie)比對(dui)，並結合(he)抗體(ti)免(mian)疫原(yuan)序列(lie)，查(zha)看(kan)交叉反應(ying)的(de)情況。

c.磷酸(suan)化(hua)蛋(dan)白檢(jian)測需(xu)要(yao)確定具(ju)體(ti)位點，不(bu)同(tong)位點的磷酸(suan)化(hua)意(yi)味(wei)著可能(neng)有(you)不(bu)同(tong)的機(ji)制(zhi)存在(zai)，不(bu)宜壹概(gai)而(er)論。

2、種屬特異性(xing)

同(tong)種蛋(dan)白不(bu)同(tong)物(wu)種，有(you)著或大(da)或小(xiao)的差(cha)異(yi)。

a.目(mu)前大(da)部(bu)分(fen)商品(pin)化(hua)抗體(ti)都(dou)是以人源(yuan)蛋(dan)白序(xu)列(lie)為模板重組蛋(dan)白或設(she)計多肽(tai)抗原的，根據蛋(dan)白的(de)同(tong)源(yuan)性(xing)的情況與(yu)其(qi)他種屬發生(sheng)交叉反應(ying)。需(xu)要(yao)參照說(shuo)明書(shu)註明的(de)可反(fan)應(ying)種屬信(xin)息。

b.壹(yi)些稀有(you)種屬很難(nan)找到(dao)抗體(ti)，可以(yi)通(tong)過蛋(dan)白的(de)序(xu)列(lie)比對(dui)，選(xuan)擇(ze)同(tong)源(yuan)序(xu)列(lie)免(mian)疫的(de)抗體(ti)，不(bu)過(guo)壹般(ban)這種情況生(sheng)產(chan)商不(bu)會受(shou)理(li)其(qi)關於質(zhi)量(liang)的申(shen)訴(su)，如果可以(yi)申(shen)請(qing)到(dao)免(mian)費(fei)的抗體(ti)樣(yang)品，則利於抗體(ti)選(xuan)擇(ze)。

3、實(shi)驗方(fang)法(fa)特異性(xing)

目(mu)前使(shi)用(yong)抗體(ti)的(de)實驗方(fang)法(fa)有(you)很多，不(bu)同(tong)的使用(yong)方(fang)法(fa)過程(cheng)中(zhong)，因(yin)為(wei)對(dui)蛋(dan)白樣(yang)品(pin)的處理方(fang)式(shi)不(bu)壹(yi)樣，蛋(dan)白的(de)含(han)量(liang)有(you)差(cha)異，對(dui)抗體(ti)的(de)識別(bie)表位和效(xiao)價(jia)要(yao)求(qiu)都是(shi)不(bu)壹(yi)樣的。

4、標(biao)記(ji)物(wu)的(de)特異性(xing)

壹(yi)般(ban)基(ji)於實(shi)驗操(cao)作的(de)實(shi)驗(yan)方(fang)法(fa)不(bu)會使用(yong)帶(dai)有(you)標(biao)記(ji)的壹抗，比如 WB、IHC 等，都(dou)是(shi)通過二(er)抗類(lei)的試劑標(biao)記(ji)達到(dao)結(jie)果呈現(xian)的(de)目(mu)的(de)。但是(shi)基(ji)於儀(yi)器(qi)分析(xi)的壹(yi)些實驗(yan)，可能(neng)就(jiu)會使用(yong)到(dao)直接(jie)標(biao)記(ji)的壹抗，比如流(liu)式實驗(yan)。那麽(me)需(xu)要(yao)了(le)解(jie)到(dao)自(zi)己將要(yao)使(shi)用(yong)的(de)儀(yi)器(qi)能(neng)檢測到(dao)的(de)熒光(guang)範(fan)圍，針對(dui)不(bu)通(tong)的參數(shu)要(yao)求(qiu)選(xuan)擇(ze)對(dui)應(ying)的(de)標(biao)記(ji)物(wu)。在(zai)免(mian)疫熒光(guang)雙(shuang)標(biao)實(shi)驗中，需(xu)要(yao)選(xuan)配(pei)不(bu)同(tong)的熒光(guang)標(biao)記(ji)物(wu)。