酶聯(lian)接(jie)免(mian)疫(yi)吸(xi)附劑(ji)測(ce)定(ding)(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)  是(shi)ELISA的(de)簡稱(cheng)。它是(shi)繼(ji)免(mian)疫(yi)熒(ying)光(guang)和放(fang)射免(mian)疫(yi)技術(shu)之(zhi)後(hou)發(fa)展(zhan)起來(lai)的(de)壹種免(mian)疫(yi)酶(mei)技術(shu)。ELISA是(shi)以(yi)免(mian)疫(yi)學(xue)反應(ying)為基(ji)礎(chu)，將抗(kang)原、抗(kang)體(ti)的(de)特異性反應(ying)與(yu)酶(mei)對底(di)物(wu)的(de)高效(xiao)催(cui)化(hua)作用(yong)相結合起來(lai)的(de)壹種敏(min)感(gan)性很高(gao)的(de)試驗(yan)技術(shu)。ELSIA試(shi)驗所(suo)用(yong)試(shi)劑(ji)器(qi)材(cai)：

壹(yi)、試(shi)劑(ji)：

1、　包被緩(huan)沖(chong)液(PH9.60.05M碳(tan)酸鹽(yan)緩(huan)沖(chong)液):

NaCO31.59克　NaHCO3　2.93克　　加(jia)蒸(zheng)餾水(shui)至1000ml

2、洗滌(di)緩(huan)沖(chong)液(PH7.4PBS)：0.15M　KH2PO40.2克　Na2HPO4·12H2O　2.9克　NaCl8.0克KCl0.2克Tween-200.05％0.5ml加(jia)蒸(zheng)餾水(shui)至1000ml

3、　稀(xi)釋液:牛(niu)血(xue)清(qing)白蛋(dan)白(BSA)0.1克　加(jia)洗滌(di)緩(huan)沖(chong)液至(zhi)100ml　或(huo)以(yi)羊(yang)血(xue)清(qing)、兔(tu)血清(qing)等血清(qing)與(yu)洗滌(di)液配成(cheng)5～10%使(shi)用。

4、終止液(2MH2SO4）：蒸(zheng)餾水(shui)178.3ml，逐滴加(jia)入濃(nong)硫(liu)酸(suan)(98%)21.7ml。

5、底(di)物(wu)緩(huan)沖(chong)液(PH5.0磷(lin)酸棗檸(ning)檬酸):0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml　0.1M檸(ning)檬酸(19.2克/L)24.3ml　加(jia)蒸(zheng)餾水(shui)50ml。

6、TMB(四(si)甲(jia)基(ji)聯(lian)苯(ben)胺)使用(yong)液:TMB(10mg/5ml無(wu)水(shui)乙(yi)醇(chun))0.5ml底物(wu)緩(huan)沖(chong)液(PH5.5)10ml0.75%H2O232μl

7、ABTS使(shi)用(yong)液:ABTS　0.5mg　底(di)物(wu)緩(huan)沖(chong)液(PH5.5)1ml　3%H2O2　2μl

8、抗(kang)原、抗(kang)體(ti)和(he)酶(mei)標(biao)記抗(kang)體(ti)。

9、正常(chang)人血清(qing)和陽(yang)性對照(zhao)血清(qing)。

二(er).　器(qi)材(cai):

1、聚(ju)苯(ben)乙(yi)烯(xi)塑(su)料板(簡(jian)稱(cheng)酶標(biao)板)40孔(kong)或96孔(kong)，ELISA檢測(ce)儀，50μl及100μl加(jia)樣器(qi)，塑(su)料滴頭(tou)，小毛巾(jin)，洗滌(di)瓶。

2、　小燒杯(bei)、玻(bo)璃(li)棒(bang)、試(shi)管、吸管和量筒等。

3、4℃冰箱，37℃孵育箱。