用於ELISA測定的(de)標(biao)本最(zui)為常(chang)用的(de)是血清（漿），有時因(yin)為(wei)特定的(de)檢測目的(de)，也(ye)用到唾(tuo)液(ye)、腦(nao)脊(ji)液(ye)、尿(niao)液(ye)、糞便等標(biao)本(ben)。處理和(he)保存(cun)方(fang)面(mian)要(yao)考慮(lv)以下(xia)幾個(ge)方(fang)面(mian)：
1、要(yao)註意(yi)避免出現(xian)嚴重溶(rong)血。血紅蛋(dan)白(bai)中含(han)有(you)血紅素(su)基(ji)團(tuan)，其有(you)類(lei)似過(guo)氧化物(wu)的(de)活(huo)性(xing)，因此(ci)，在(zai)以HRP為(wei)標(biao)記(ji)酶(mei)的(de)ELISA測定中，如(ru)血清標(biao)本(ben)中血紅蛋(dan)白(bai)濃(nong)度(du)較高(gao)，則(ze)其就(jiu)很容(rong)易在(zai)溫育(yu)過程中吸(xi)附(fu)於(yu)固相，從而(er)與(yu)後(hou)面(mian)加入的(de)HRP底(di)物(wu)反(fan)應(ying)顯(xian)色(se)。
2、樣本(ben)的(de)采(cai)集及血清分(fen)離(li)中要(yao)註意(yi)盡量(liang)避免細菌汙(wu)染，壹則(ze)細(xi)菌的(de)生長，其所(suo)分(fen)泌的(de)壹(yi)些酶(mei)可(ke)能(neng)會(hui)對抗(kang)原(yuan)抗(kang)體(ti)等蛋(dan)白(bai)產(chan)生分解(jie)作(zuo)用；二則(ze)壹(yi)些細菌的(de)內(nei)源性(xing)酶如(ru)大(da)腸(chang)桿菌的(de)β-半(ban)乳糖苷酶(mei)本身(shen)會(hui)對用相應酶(mei)作標(biao)記(ji)的(de)測定方(fang)法(fa)產(chan)生非特異性(xing)幹擾(rao)。
3、血清標(biao)本(ben)如是以無(wu)菌操(cao)作(zuo)分離(li)，則(ze)可(ke)以在(zai)2～8℃下保存(cun)壹(yi)周，如為有菌操(cao)作(zuo)，則(ze)建(jian)議(yi)冰(bing)凍保存(cun)。樣本(ben)的(de)長(chang)時間(jian)保存(cun)，應(ying)在(zai)-70℃以下(xia)。
4、冰(bing)凍保存(cun)的(de)血清標(biao)本(ben)須註意(yi)避免因停(ting)電(dian)等(deng)造成(cheng)的(de)反(fan)復凍融(rong)。標本(ben)的(de)反(fan)復凍融(rong)所(suo)產(chan)生的(de)機械剪切(qie)力將對標本中的(de)蛋(dan)白(bai)等(deng)分子(zi)產生破壞作用，從而(er)引起(qi)假陰性(xing)結果。此(ci)外(wai)，凍融(rong)標本(ben)的(de)混(hun)勻亦(yi)應註意(yi)，不(bu)要(yao)進(jin)行劇(ju)烈(lie)振(zhen)蕩(dang)，反(fan)復顛倒(dao)混勻(yun)即可(ke)。
5、標(biao)本(ben)在(zai)保存(cun)中如(ru)出現(xian)細菌汙(wu)染所(suo)致(zhi)的(de)混(hun)濁或(huo)絮(xu)狀(zhuang)物(wu)時(shi)，應(ying)離(li)心(xin)沈澱(dian)後(hou)取上清檢測。