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        1. 產(chan)品(pin)展(zhan)示(shi)
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          科研(yan)抗(kang)體(ti)特異性(xing)選擇(ze)指(zhi)南
        2. 發布日(ri)期:2022-07-20      瀏(liu)覽(lan)次(ci)數(shu):1379
          • 抗(kang)體(ti)(antibody)免疫細胞(bao)分(fen)泌免(mian)疫(yi)物(wu)質(zhi),是(shi)哺(bu)乳(ru)動(dong)物(wu)適(shi)應(ying)性(xing)免(mian)疫(yi)系統(tong)對抗病(bing)原體的(de)核心(xin),它是(shi)在病(bing)原體刺激(ji)下由漿細胞(bao)(效應(ying)B細胞(bao))所分(fen)泌的(de)壹種免疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白,能夠(gou)識(shi)別(bie)並結(jie)合(he)特異的(de)病(bing)原體抗(kang)原,隨後通(tong)過(guo)介(jie)導中(zhong)和作用(yong)、調(tiao)理(li)作用(yong)、效應(ying)T細胞(bao)殺傷(shang)等(deng)來清(qing)除(chu)病(bing)原體。隨著抗體(ti)制備(bei)與(yu)改(gai)造技(ji)術的(de)飛(fei)速發展(zhan),抗體(ti)已經廣(guang)泛應(ying)用於(yu)生(sheng)命科學(xue)各個(ge)領域(yu),包括(kuo)科學(xue)研(yan)究、診斷(duan)、治(zhi)療(liao)等。

            特異性(xing)(specificity)的(de)本質(zhi)含(han)義是(shi)“Connected with one particular thing only"即只與(yu)唯yi的(de)特定(ding)事物(wu)相關(guan),具(ju)有專(zhuan)壹(yi)性(xing)。在免(mian)疫(yi)學(xue)上我們會說(shuo)“抗(kang)體(ti)具(ju)有特異性(xing)",指(zhi)的(de)就是(shi)抗體具(ju)有專(zhuan)壹(yi)性(xing),某(mou)壹(yi)特定(ding)的(de)抗體(ti)只能與(yu)唯yi 壹種抗原結合(he)。其實(shi)準(zhun)確來(lai)講(jiang)是(shi)壹類具(ju)有特定(ding)抗原表位(wei)的(de)抗原,因為(wei)某(mou)些(xie)不(bu)同的(de)抗原具有相同的(de)抗原表位(wei)(稱(cheng)為(wei)交(jiao)叉抗原),也可(ke)與(yu)同壹種抗體(ti)特異性(xing)結(jie)合(he)。

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                                                      雙(shuang)特異性(xing)抗(kang)體(ti)

            科研(yan)工作離不(bu)開(kai)抗(kang)體(ti),WB、IP、IHC、IF、ChIP和FC都需要(yao)用(yong)到抗體,這(zhe)幾(ji)種實(shi)驗(yan)方(fang)法中(zhong)的(de)抗體(ti)特異性(xing)選擇(ze)需要(yao)考慮的(de)要(yao)點了(le)解下(xia),特異性(xing)的(de)選擇(ze)主(zhu)要(yao)需要(yao)考慮四(si)個(ge)方(fang)面:蛋(dan)白特異性(xing)、種屬特異性(xing)、實(shi)驗(yan)方(fang)法特異性(xing)、標記物(wu)的(de)特異性(xing)。


            1.蛋(dan)白特異性(xing)

            針(zhen)對(dui)需要(yao)檢(jian)測的(de)蛋白查(zha)找抗體,幾(ji)個(ge)細節(jie)要(yao)區(qu)分(fen):

            a.重(zhong)組蛋(dan)白如果(guo)不(bu)是(shi)全長表達(da),則(ze)需要(yao)註(zhu)意(yi)抗(kang)體的(de)免疫(yi)原區域(yu)是(shi)否在重(zhong)組蛋(dan)白區域(yu)內。

            b.內(nei)源性(xing)蛋(dan)白好能清(qing)楚其剪切(qie)與(yu)修飾的(de)方(fang)式,特殊(shu)表型(xing)的(de)蛋白需要(yao)進(jin)行(xing)序列(lie)比(bi)對,並結(jie)合(he)抗體(ti)免疫原序列(lie),查(zha)看交(jiao)叉反(fan)應(ying)的(de)情(qing)況(kuang)。

            c.磷酸(suan)化(hua)蛋白檢(jian)測需要(yao)確定(ding)具(ju)體位(wei)點,不(bu)同位點的(de)磷酸(suan)化(hua)意味(wei)著(zhe)可(ke)能有不(bu)同的(de)機(ji)制存在,不(bu)宜(yi)壹(yi)概(gai)而論。


            2.種屬特異性(xing)

            同種蛋白不(bu)同物(wu)種,有著(zhe)或(huo)大或(huo)小的(de)差異。

            a.目前大部(bu)分(fen)商(shang)品(pin)化(hua)抗(kang)體都是(shi)以人源蛋(dan)白序列為(wei)模(mo)板重(zhong)組蛋(dan)白或設計多(duo)肽(tai)抗(kang)原的(de),根(gen)據(ju)蛋白的(de)同源性(xing)的(de)情(qing)況(kuang)與(yu)其他種屬發生(sheng)交(jiao)叉反(fan)應(ying)。需要(yao)參(can)照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)註明(ming)的(de)可反(fan)應(ying)種屬信(xin)息(xi)。

            b.壹些稀(xi)有種屬很難(nan)找到抗體,可(ke)以(yi)通(tong)過(guo)蛋(dan)白的(de)序列(lie)比(bi)對,選擇(ze)同源序(xu)列(lie)免疫的(de)抗體(ti),不(bu)過(guo)壹(yi)般這種情(qing)況(kuang)生(sheng)產(chan)商(shang)不(bu)會受(shou)理(li)其關(guan)於(yu)質(zhi)量(liang)的(de)申訴(su),如果(guo)可(ke)以申請到免費的(de)抗體(ti)樣品(pin),則(ze)利於(yu)抗(kang)體(ti)選擇(ze)。


            3.實(shi)驗(yan)方(fang)法特異性(xing)

            目前使用(yong)抗體的(de)實(shi)驗(yan)方(fang)法有很多(duo),不(bu)同的(de)使用(yong)方(fang)法過(guo)程(cheng)中(zhong),因為(wei)對(dui)蛋(dan)白樣品的(de)處理(li)方(fang)式不(bu)壹(yi)樣(yang),蛋(dan)白的(de)含(han)量有差(cha)異,對(dui)抗(kang)體的(de)識別(bie)表位(wei)和效價要(yao)求(qiu)都(dou)是(shi)不(bu)壹(yi)樣(yang)的(de)。


            4.標記物(wu)的(de)特異性(xing)

            壹(yi)般(ban)基於(yu)實(shi)驗(yan)操(cao)作的(de)實(shi)驗(yan)方(fang)法不(bu)會使用(yong)帶(dai)有標記的(de)壹抗(kang),比(bi)如 WB、IHC 等(deng),都是(shi)通(tong)過(guo)二抗類(lei)的(de)試(shi)劑標記達(da)到結果(guo)呈(cheng)現(xian)的(de)目的(de)。但是(shi)基於(yu)儀(yi)器(qi)分(fen)析的(de)壹些(xie)實(shi)驗(yan),可(ke)能就會使用(yong)到直(zhi)接標記的(de)壹抗(kang),比(bi)如流式實(shi)驗(yan)。那(na)麽(me)需要(yao)了(le)解到自己將(jiang)要(yao)使用(yong)的(de)儀(yi)器(qi)能檢(jian)測到的(de)熒光(guang)範(fan)圍(wei),針對(dui)不(bu)通(tong)的(de)參(can)數要(yao)求(qiu)選擇(ze)對(dui)應(ying)的(de)標記物(wu)。在免(mian)疫(yi)熒(ying)光(guang)雙(shuang)標實(shi)驗(yan)中(zhong),需要(yao)選配不(bu)同的(de)熒光(guang)標記物(wu)。









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